LN_2保存处理后苦槠种子的膜透性

研究了苦槠种子和离体胚在超低温保存过程中含水量、冷冻方式、解冻方式 ,以及离体胚冰冻保护剂对电导率的影响 .结果表明 :含水量是超低温保存成功的关键 ,适度脱水可大幅度降低苦槠种子和离体胚超低温保存过程中的质膜伤害 ;随着含水量的降低 ,其电导率的变化呈先降后升 ,15 %含水量的电解质外渗率最低 ;而在冰冻保护剂作用下 ,离体胚保存最佳含水量为 10 % ,其质膜所受的伤害比较轻 ,电解质外渗量较小 ,膜修复能力强     

液氮保存对苦槠离体胚内源SOD和α-淀粉酶活性的影响

测定不同含水量、冷解冻方式处理的苦槠离体胚内源SOD和α-淀粉酶活性,研究其超低温保存效果.结果表明:不同处理苦槠离体胚的SOD和α-淀粉酶活性差异显著,含水量水平是影响其液氮保存的关键因素,而冷解冻方式也是一重要因素.12%含水量和缓冻快解法处理,苦槠离体胚的超低温保存效果最好,SOD和α-淀粉酶活性最高,分别达212.77 U/h和4.764 mg/m in.     

超低温保存对苦槠种子和离体胚脱氢酶活性的影响

将苦槠种子、离体胚及离体胚防冻剂处理后用液氮(LN2)进行超低温保存,测定种胚内三苯基甲月s质量浓度,研究其超低温保存效果。结果表明:苦槠离体胚防冻剂处理的三苯基甲月s质量浓度最高,脱氢酶活性最大,其次是离体胚,最小的是种子。3种保存材料的保存效果均受含水量水平显著影响,而当离体胚含水量小于10%时,冷解冻方式对LN2保存效果不明显。对种子而言,12%-15%含水量是适宜的保存含水量,采用缓冻快解,三苯基甲月s质量浓度高,分别是24.93、27.43μg.mL-1;对离体胚而言,10%-15%的含水量是适宜的,但12%含水量水平保存效果最好。添加防冻剂处理后,15%-20%含水量离体胚的三苯基甲月s质量浓度最高,分别达36.98、31.58μg.mL-1;防冻剂在LN2保存过程中起到了明显的保护作用,用10%二甲亚砜处理效果最好。     

闽粤栲种子和离体胚超低温保存效果研究

通过对闽粤栲种子和离体胚超低温（－１９６℃）保存后发芽率、电导率和脱氢酶活性的分析,对其长期保存的可行性进行研究。结果表明：含水量是影响闽粤规律性中子离体胚超低温保存的重要因素,超低温保存应进行适度脱水。当无防冻剂预处理,１５％ＭＣ＋ＭＦ－ＱＴ组合中,种子发芽率最高,膜伤害最小。与种子相比,用离体胚作为超低温保存材料效果要好,其超低温保存后脱氢酶活性基本上能够维持超低温保存前的水平,最佳组合为１５％ＭＣ＋ＭＦ－ＳＴ,若能够辅以防冻剂预处理,则超低温保存效果更佳,最佳组合为１５％ＭＣ＋ＱＦ－ＱＴ＋１５％二甲亚砜＋１０％蔗糖＋１０％聚乙二醇。     

LN2处理板栗种子和离体胚保存的效果分析

通过对板栗种子超低温保存前后种子发芽率和脱水耐性,以及其离体胚的脯氨酸含量和丙二醛含量的测定分析,来研究板栗种子的超低温保存技术,结果表明：含水量水平是影响板栗种子发芽率以及超低温保存效果的重要因素,超低温保存时板栗种子和离体胚应进行适度脱水,超低温保存宜采用20％～25％含水量范围;采取适当脱水方式和含水量水平,能够较好地保持板栗种子的发芽率。适当的超低温保存因素的组合有利于板栗种子活力的维持、离体胚脯氨酸的诱导和减少丙二醛含量的积累。     

锥栗种子离体胚超低温保存脱氢酶活性研究

运用超低温 (- 1 96℃ )保存手段 ,通过对锥栗种子离体胚超低温保存后脱氢酶活性的方差分析和 Q检验法多重比较分析 ,对其长期保存的可行性进行研究 ,结果表明 :含水量是影响锥栗种子离体胚超低温保存的重要因素 ,超低温保存应进行适度脱水 .无防冻剂预处理 ,2 0 %含水量 ,缓冻缓解方式条件下 ,离体胚脱氢酶活性最高     

樟树成熟种子超低温保存研究

[目的]研究樟树成熟种子保存的最佳方法。[方法]利用正交试验对樟树种子进行超低温保存,探讨樟树成熟种子保存的最佳方法。[结果]樟树种子超低温保存过程中种子最佳含水量为26%;在樟树种子超低温保存过程中,15%二甲基亚砜是最好的冷冻保护剂之一;最利于樟树种子超低温保存的解冻方式是慢冻和慢解冻。[结论]该研究为研究樟树种子低温保存提供理论依据。     

刺槐种子超低温保存研究

[目的]为实现刺槐种质资源超低温保存提供理论和实践依据。[方法]研究了刺槐种子的含水量、不同化冻方式及不同程度的机械撞击对超低温保存后刺槐种子的发芽率、电导率和脱氢酶活性的影响。[结果]当刺槐种子的含水量从7.1%增加到9.1%,发芽率和TTCH含量明显降低,而电导率上升。这说明在保持种子活力的前提下,低含水量有利于刺槐种子的超低温保存。对于超低温保存后的刺槐种子,40℃温水化冻比慢速室温解冻更为适宜。机械撞击对处于超低温保存下的刺槐种子有一定的影响,故应尽量避免剧烈震动。[结论]含水量对超低温保存后刺槐种子的发芽率影响显著。40℃温水化冻5min的化冻方式对超低温保存后刺槐种子的活力影响较小,种子发芽率较高。     

银杏种质离体保存的研究：Ⅱ.银杏胚超低温保存

为了开辟银杏种质保存新途径，以中南林学院经济林研究室选育的湖南梅核１号变异类型为材料，对银杏种胚超低温保存进行了研究。结果表明：银杏胚对脱水不太敏感，但胚含水量（胚中水的质量与胚干物质质量的百分比）低于１２％时，试管苗生长发育异常简单无菌风干燥脱水后的胚，液氮保存后恢复生长时，仅观察到子叶有限伸长，胚根生长，胚轴处产生大量白色的愈伤组织，无菌风干燥后的胚再经高浓度冰冻保护剂处理，超低温保存后再接种     

超低温保存对玉蝉花种子生理生化特性的影响

以玉蝉花种子为试材,将种子自然含水量9.8%分别降至7.2%、5.0%、3.6%、1.9%,液氮保存超24 h后,采用自来水和室温两种方法化冻,测定种子电导率、发芽率、过氧化物酶活性等活力指标,探讨超低温保存对玉蝉花种子生理生化特性的影响及其超低温保存的可行性。结果表明:玉蝉花种子进行超低温保存是可行的,含水量和化冻方式是影响玉蝉花种子超低温保存效果的重要因素,超低温保存可以适度脱水,选择含水量3.6%的种子保存后有较高的发芽率;超低温保存后采用自来水化冻,玉蝉花种子的发芽率、可溶性蛋白质量分数、POD酶活性优于室温化冻,并且细胞膜结构及透性受损伤小。     

杉木种子超干燥和超低温贮藏研究Ⅰ.种子质量贮藏效果

采用热恒温干燥法，研究不同脱水干燥温度对杉木种子质量的影响，通过超干燥处理后的种子贮藏1年、超低温保存、防冻剂预处理超低温保存不同含水量的杉木种子，分析其发芽率和种子活力，研究杉木种子贮藏后的质量变化．结果表明：50℃是杉木种子脱水的适宜温度，种子发芽率和活力指数最高；3％～5％的含水量是杉木种子超干燥保存的最适含水量，贮藏1年与常规低温贮藏效果没有显著差异．超低温保存表明，9％含水量的种子贮藏效果要比超干燥处理后贮藏好，可用于杉木种子的中长期保存．防冻剂超低温保存受防冻剂种类和浓度影响显著．尤其是二甲亚砜的浓度．冷冻方式和解冻方式的影响作用则被防冻剂削弱．     

人工老化过程红松种胚细胞物质外渗和超微结构变化

在温度４０℃、湿度１００％条件下对生活力为８７％和９２％的两批红松种子分别老化１、２、４ｄ,测定种胚２４ｈ浸出液的电导率、可溶性糖和氮基酸含量,并观察胚根细胞超微结构的变化。结果表明,高活力种子抗逆性强,老化１、２ｄ后生活力变化不大,种胚细胞物质外渗量减少,电导率与种子活力呈正相关。老化过程中,线粒体首先出现伤害,随着种子劣变的加深,氨基酸大量外渗、溶酶体破裂、细胞全面降解。     

超低温保存对玉蝉花种子生理生化特性的影响1）

以玉蝉花种子为试材,将种子自然含水量9．8％分别降至7．2％、5．0％、3．6％、1．9％,液氮保存超24 h后,采用自来水和室温两种方法化冻,测定种子电导率、发芽率、过氧化物酶活性等活力指标,探讨超低温保存对玉蝉花种子生理生化特性的影响及其超低温保存的可行性。结果表明：玉蝉花种子进行超低温保存是可行的,含水量和化冻方式是影响玉蝉花种子超低温保存效果的重要因素,超低温保存可以适度脱水,选择含水量3．6％的种子保存后有较高的发芽率;超低温保存后采用自来水化冻,玉蝉花种子的发芽率、可溶性蛋白质量分数、POD酶活性优于室温化冻,并且细胞膜结构及透性受损伤小。     

杉木种子超干燥和超低温贮藏研究 I.种子质量贮藏效果

采用热恒温干燥法,研究不同脱水干燥温度对杉木种子质量的影响,通过超干燥处理后的种子贮藏1年、超低温保存、防冻剂预处理超低温保存不同含水量的杉木种子,分析其发芽率和种子活力,研究杉木种子贮藏后的质量变化.结果表明:50℃是杉木种子脱水的适宜温度,种子发芽率和活力指数最高;3%~5%的含水量是杉木种子超干燥保存的最适含水量,贮藏1年与常规低温贮藏效果没有显著差异.超低温保存表明,9%含水量的种子贮藏效果要比超干燥处理后贮藏好,可用于杉木种子的中长期保存.防冻剂超低温保存受防冻剂种类和浓度影响显著,尤其是二甲亚砜的浓度,冷冻方式和解冻方式的影响作用则被防冻剂削弱.     

超干处理和人工老化对金钱松种子生理生化特性的影响

以金钱松种子为材料,采用超干燥和人工加速老化的方法处理种子,定期测定其发芽率、活力指数、电导率及其他指标,研究种子劣变的生理生化特性。结果表明：采用室温硅胶干燥法将金钱松种子含水量降至4.2%不会影响种子的发芽率和活力,但降至3.3%时,种子发芽率和活力指数均明显下降,种子发生损伤;人工老化过程中,含水量4.2%～6.4%的种子电导率增加幅度最小,O2.-含量明显低于其他含水量的种子,与其他含水量种子间的差异达到极显著水平;含水量4.2%～7.5%的种子MDA含量明显低于未经过超干处理的种子,差异达到显著水平;吸胀萌发前,含水量较高的种子抗氧化酶活性较高,且在人工老化过程中的变化幅度较大。     

超干处理与贮藏条件对一串红种子生活力与生理变化的影响

本试验采用硅胶干燥法对一串红种子进行超干处理，将含水量为8.9％的一串红种子含水量分别降低至4.5%、3.4%、3.0%、2.7%和2.2%；同时研究了不同贮藏条件对不同超干种子生活力与生理变化的影响。种子发芽率、活力指数、电导率和脱氢酶活性等试验结果表明：超干处理后含水量为3.4 ~ 4.5%的一串红种子，经过13个月的贮藏（低温和室温）后，其生理指标保持在较好的水平，种子活力较高。     

小麦苗在渗透胁迫下膜特性的变化及氯化钕的调控作用

小麦苗在不同浓度的聚乙二醇中处理２４小时，叶片相对含水量在聚乙二醇浓度为２０％时降至８８％，以Ｋ＾＋渗出率与相对电导率衡量的质膜透性显著升高，过氧化物酶活性在轻微胁迫时增加，随胁迫增强又下降，膜脂肪酸配比无变化，ＮｄＣｌ３可减少胁迫下ＲＷＣ的下降，抑制Ｋ＾＋与电解质的渗出，但不改变膜脂肪酸的配比，并发现ＮｄＣｌ３在短时间内即有降低叶片电解质外渗的效应。     

华北落叶松胚性组织超低温保存技术研究

  目的  超低温保存是植物优良种质长期保存的重要方法。本文为探究梯度预处理对超低温保存存活率的影响，以期有效保存华北落叶松胚性组织的发育潜能。  方法  本研究以华北落叶松胚性组织为材料，对超低温冷冻保存程序中预培养、冷冻处理方式、解冻方式和恢复培养等关键环节开展研究。预培养和冷冻保护共设计成4种处理，以不经过预培养和冷冻保护直接冷冻保存为对照，每个处理重复3次。  结果  结果表明:处理组合1、2、3之间虽无显著差异，但结合冷冻保护剂二甲基亚砜（ DMSO）对细胞具有一定毒害作用，高浓度的DMSO会影响后续胚性组织的恢复甚至造成细胞死亡，因此选出效果较好的超低温保存方法为: 0.2、0.4 mol/L山梨醇液体梯度预处理与0.4 mol/L山梨醇 + 5%DMSO为冷冻保护剂进行冷冻保护，最佳解冻方式为37 ℃水浴，解冻后的胚性愈伤组织细胞活性最高达78%；超低温保存后的胚性组织与正常增殖的胚性组织在外观及显微结构上无明显差异，且低温保存后的愈伤组织仍保持分化形成体细胞胚的能力。  结论  研究结果为华北落叶松乃至其他针叶树胚性组织的超低温保存提供了参考。      

黄帝陵古侧柏花粉生活力及其保存方法的研究

以黄帝陵千年古侧柏花粉为试验材料,用离体萌发法测定花粉的生活力,研究不同保存方法对花粉萌发率的影响,探讨花粉含水量、投入方式、化冻方式对超低温保存效果的影响。结果表明:古侧柏花粉在9%蔗糖+0.01%硼酸的培养基中离体培养4 d萌发率最高。90 d内,随着保存时间的延长,室温（20℃）保存的花粉迅速失活,低温（0℃、-20℃）保存的花粉萌发率呈逐渐下降趋势,超低温（-196℃）保存的花粉萌发率最高且保持效果最好,为古侧柏花粉长期保存的适宜方法。在超低温保存中,花粉以未经干燥、直接投入液氮、37℃恒温水浴化冻5 min保存效果最好;花粉含水量、投入方式、化冻方式之间交互效应显著。     

枇杷花粉干冻法超低温保存研究

采用花粉干冻法对枇杷花粉超低温保存进行了研究。将枇杷盛花期的花粉干燥后直接液氮超低温保存,取出后观察其萌发率。结果表明:花粉的含水量是决定枇杷花粉超低温保存成败的关键因素。脱水至30%左右的含水量能够保证超低温保存花粉的生活力;解冻温度及方式对超低温保存后花粉的生活力没有明显的影响。