柴辛注射液中细辛含量测定法的改进

以甲基丁香酚为标记物,采用气相色谱法对柴辛注射液中细辛含量测定法进行了改进。通过色谱柱筛选、提取方法比较等,对新建方法进行了优化,并对新建方法的专属性、回收率、重复性、线性及范围、耐用性进行了方法学验证。验证结果表明,新建方法准确可靠,适用于柴辛注射液的质量控制。     

HPLC-PDA方法检测柴辛注射液中非法添加的克林霉素

建立柴辛注射液中非法添加克林霉素的HPLC-PDA检查方法。采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱,流动相为磷酸二氢钾溶液(6.8 mg/mL,用25%氢氧化钾调节pH值为7.5)与乙腈的梯度洗脱,采用二极管阵列检测器,采集波长范围为210～400 nm,分辨率为1.2 nm,记录210 nm波长处的色谱图。结果显示,在该色谱条件下,柴辛注射液制剂空白及溶剂空白对克林霉素的测定无干扰,峰纯度检查及光谱相似度检查均符合要求;克林霉素检出限为2 g/L,平均添加回收率为99.1%。该方法准确性高、操作简单,可用于柴辛注射液中非法添加克林霉素的检测。     

高效液相色谱法测定柴辛注射液中有效组分含量的研究

为同时测定柴辛注射液中有效组分甲基丁香酚、细辛脂素的含量,建立了以核壳型分离填料为色谱柱,乙腈和水为流动相,检测器波长为287 nm,流量为1.0 mL/min的高效液相色谱方法。结果显示,在0.15～150μg/mL的质量浓度范围内,甲基丁香酚的线性曲线为Y=7243X-258,R²=0.9999,检测限为0.025μg/mL,平均回收率为97.47%～100.53%,RSD为0.92%～2.17%;细辛脂素的线性曲线为Y=18853X-676,R²=0.9999,检测限为0.012μg/mL,平均回收率为88.47%～92.23%,RSD为1.48%～3.55%。该方法操作简单,准确度、重复性、精密度好,可适用于柴辛注射液的质量控制。     

维生素C注射液无菌检查方法验证试验

按照《中国兽药典》二0—0年版一部附录中“无菌检查法”要求,采用薄膜过滤法和有关处理方法对兽用维生素C注射液的无菌检查方法进行了验证。试验结果表明．试验方法完全可以用于兽用维生素C注射液无菌检查。     

兽药“火毒咳喘王”治疗猪喘气病试验报告

猪喘气病是猪的一种慢性呼吸道病 ,病原为猪肺炎支原体 ,主要特征为咳嗽、气喘。此病一年四季都可发生 ,给养猪业造成重大损失。“炎毒咳喘王”注射液由广西北斗星动物保健品公司生产 ,其研制过程中曾对治疗猪喘气病进行观察 ,有良好的效果。为了验证该药对猪喘气病的治疗效果 ,我们使用“炎毒咳喘王”注射液和硫酸卡那霉素注射液进行了对比治疗试验 ,现将试验情况报告如下。1　材料与方法1 .1　试验药物　“炎毒咳喘王”注射液 :广西北斗星动物保健品公司生产 ,规格为 5ｍｌ× 1 6支 ,生产批号为 2 0 0 1 0 30 8。硫酸卡那霉素注射液 :上海…     

“炎毒咳喘王”治疗猪喘气病试验效果观察

猪喘气病是猪的一种慢性呼吸道病，病原为猪肺炎支原体，主要特征为咳嗽、气喘。此病一年四季都可发生，给养猪业造成重大损失。“炎毒咳喘王”注射液对治疗猪喘气病进行观察，有良好的效果。为了验证该药对猪喘气病的治疗效果，我们使用“炎毒咳喘王”注射液和硫酸卡那霉素注射液进行了对比治疗试验，现将试验情况报告如下。１材料与方法１．１试验药物“炎毒咳喘王”注射液：广西北斗星动物保健品公司生产，规格为５mL×１６支，生产批号为２００１０３０８。硫酸卡那霉素注射液：上海某兽药厂生产，规格为１０mL×５支，生产批号为２０…     

浅谈定向质谱法验证蛋白质生物标记物

特异性生物标记物的发现有益于疾病的早期诊断,促进靶向治疗的发展,并提供精确的治疗反应监控方法。血浆中候选生物标记物的验证过程中的一个主要问题是血浆中蛋白质浓度的动态范围非常广。本文回顾了当前能够在所预期的血浆浓度范围内(如ng/ml浓度水平)量化候选生物标记物的定向蛋白质组学策略。另外,提供了基于定向质谱法,可对大部分候选生物标记蛋白进行快速验证的技术流程。这些公开数据库中的技术对生物标记的验证研究中的处理量具有极大影响潜力。     

普鲁卡因青霉素注射液质量标准复核

目的:根据中国兽药典委员会的要求,对普鲁卡因青霉素注射液的技术指标及方法进行复核。方法:参照《中国兽药典》二〇一〇年版一部附录方法,对性状、鉴别、水分、抽针试验、颗粒细度、无菌及含量测定项目进行了验证试验。结果:根据验证结果对相应的内容进行了修订及完善。结论:本复核为普鲁卡因青霉素注射液质量标准的完善和提高提供了科学依据。     

兽药"炎毒咳喘王”治疗猪喘气病试验报告

猪喘气病是猪的一种慢性呼吸道病,病原为猪肺炎支原体,主要特征为咳嗽、气喘.此病一年四季都可发生,给养猪业造成重大损失."炎毒咳喘王”注射液由广西北斗星动物保健品公司生产,其研制过程中曾对治疗猪喘气病进行观察,有良好的效果.为了验证该药对猪喘气病的治疗效果,我们使用"炎毒咳喘王”注射液和硫酸卡那霉素注射液进行了对比治疗试验,现将试验情况报告如下.     

利用DNA标记物进行肉类追踪：在肉牛行业中的应用

消费者对牛肉安全的关注，要求有一种保障牛肉安全的可追踪性，一种利用DNA标记的方法被推荐用于牛肉鉴定，以西班牙肉牛Ternerade Navarra作为对象。为了验证这种方法，本研究评价了标记物的应用数量和个体鉴定中的牛群结构指标。为了实际应用，还讨论了根据标记物数量和发生错误的可能性决定的采样水平。     

Detection of Mycobacterium avium subsp paratuberculosis in formalin-fixed paraffin-embedded intestinal tissue by IS900 polymerase chain reaction

OBJECTIVES: To evaluate and compare methods for DNA extraction from formalin-fixed, paraffin-embedded tissues and methods for detection of Mycobacterium avium subsp paratuberculosis by IS900 PCR for confirmation of Johne's disease in ruminants. DESIGN: A laboratory study. PROCEDURE: Three methods of DNA extraction of differing complexity and two PCR protocols using different pairs of IS900 primers were compared. Sensitivity and specificity were assessed using samples from ruminants with and without histological evidence of Johne's disease. RESULTS: The simplest method of DNA extraction, which involved two cycles of boiling and freezing followed by centrifugation, gave more consistent results than two methods that required solvent extraction of paraffin, proteinase digestion and DNA purification. The sensitivity of detection of M avium subsp paratuberculosis in paraffin blocks stored for 1 to 6 years from 34 cases of Johne's disease in sheep, cattle and goats was 88% for a 229 bp IS900 PCR assay and 71% for a 413 bp assay, using the detection of acid-fast bacilli by Ziehl Neelsen staining of histological sections from the same blocks as the gold standard test. PCR results correlated with the abundance of acid-fast organisms in the tissues. No false positive reactions were detected. CONCLUSION: PCR for identification of M avium subsp paratuberculosis in formalin-fixed, paraffin-embedded intestinal tissues from ruminants is a rapid and useful method. A simple method of sample preparation is effective. Amplification of short fragments of IS900 is more effective than amplification of longer fragments.     

β-受体激动剂药物残留检测方法研究进展

β-受体激动剂可提高动物的瘦肉率并降低动物养殖成本，但β-受体激动剂通过食物链进入人体后会严重危害人体健康，因此世界多国都禁止在养殖业中非法添加β-受体激动剂，而一些非法分子为了利益在养殖环节使用β-受体激动剂，因此，有必要建立快速、准确、灵敏的分析方法用于检测β-受体激动剂。目前常见的检测方法有液相色谱串联质谱法、气相色谱串联质谱法、电化学法、表面增强拉曼散射光谱法、化学发光法、免疫分析法等，文章对上述方法在检测β-受体激动剂中的应用进行了简要介绍，同时分析了这些方法的优缺点，并对今后β-受体激动剂残留检测的新技术进行了展望。可以预见，未来的发展方向可能会是可用于现场检测的可靠性更高、特异性更强的免疫试纸条分析与具有前处理方法简单、高度自动化等优点的液相色谱串联质谱法。     

Comparison of selected diagnostic methods for identification of Cryptosporidium parvum and Cryptosporidium andersoni in routine examination of faeces

This study involved the comparison of suitability of different methods for routine diagnostics of Cryptosporidium spp. Two staining methods, one concentration-sedimentation method, seven concentration-floatation methods and one combined floatation-sedimentation method were compared. The methods were tested with two concentrations (1 x 10(5) and 1 x 10(6)/g) of C. parvum and C. andersoni. The methods were evaluated using light microscope, magnification 400x for concentration methods and 1000x for stained samples respectively. Specificity of both staining methods was 95-100%. Ziehl-Neelsen with P < 0.01 is more suitable for identification of C. andersoni and modified Milácek-Vítovec with P < 0.01 for identification of C. parvum. Concerning specificity and sensitivity, the floatation-concentration method by Sheather was found to provide the best results of all selected methods. The merthiolate iodine formaldehyde concentration (MIFC) method was the least specific one. The least suitable method concerning sensitivity and costs was the floatation method with caesium chloride (CsCl) with a specificity of 29%.     

黄芩注射液的制备工艺及质量标准的初步研究

目的:研制以黄芩和柴胡为主药的注射剂,并建立质量控制标准。方法:以传统的水提醇沉法制备该注射剂,采用薄层色谱法对黄芩甙进行鉴定,并用紫外分光光度法测定黄芩甙的含量。结果:采用水提醇沉法制备得到的该注射剂符合药典关于注射剂的各项检查。实验结果表明:黄芩苷含量在1.6μg/mL～8.0μg/mL与吸光度成良好的线性关系,相关系数0.9996,平均回收率99.4%,相对标准偏差为0.6%(n=5)。黄芩甙的薄层色谱鉴别,薄层色谱斑点清晰、空白无干扰,重现性好。结论:该制剂生产工艺简单,质量标准简单易行,产品质量容易控制。     

岷县当归产地鉴别与利用前景

由于地理环境影响,岷县当归与其他产地当归在主要成分及其含量上存在差异,道地药材岷县当归的鉴别方法有性状鉴别、组织鉴别、显微结构鉴别、指纹图谱鉴别和rRNA鉴别等。近年研究表明,当归有效成分在血液系统、免疫系统、神经系统等方面具有广泛药理作用,为其临床运用提供了依据。超临界CO2萃取当归有效成分克服了以往的提取法固有的弱点,从当归提取剩余物提取膳食纤维在理论和现实上的可能性为膳食纤维开辟了新的来源．     

Investigations on the efficacy of routinely used phenotypic methods compared to genotypic approaches for the identification of staphylococcal species isolated from companion animals in Irish veterinary hospitals

Background

Identification of Staphylococci to species level in veterinary microbiology is important to inform therapeutic intervention and management. We report on the efficacy of three routinely used commercial phenotypic methods for staphylococcal species identification, namely API Staph 32 (bioMérieux), RapID (Remel) and Staph-Zym (Rosco Diagnostica) compared to genotyping as a reference method to identify 52 staphylococcal clinical isolates (23 coagulase positive; 29 coagulase negative) from companion animals in Irish veterinary hospitals.

Results

Genotyping of a 412 bp fragment of the staphylococcal tuf gene and coagulase testing were carried out on all 52 veterinary samples along with 7 reference strains. In addition, genotyping of the staphylococcal rpoB gene, as well as PCR-RFLP of the pta gene, were performed to definitively identify members of the Staphylococcus intermedius group (SIG). The API Staph 32 correctly identified all S. aureus isolates (11/11), 83% (10/12) of the SIG species, and 66% (19/29) of the coagulase negative species. RapID and Staph-Zym correctly identified 61% (14/23) and 0% (0/23) respectively of the coagulase-positives, and 10% (3/29) and 3% (1/29) respectively of the coagulase-negative species.

Conclusions

Commercially available phenotypic species identification tests are inadequate for the correct identification of both coagulase negative and coagulase positive staphylococcal species from companion animals. Genotyping using the tuf gene sequence is superior to phenotyping for identification of staphylococcal species of animal origin. However, use of PCR-RFLP of pta gene or rpoB sequencing is recommended as a confirmatory method for discriminating between SIG isolates.     

饱和水溶液法制备莫能菌素-β-环糊精包合物的研究

为研究莫能菌素包合物的制备工艺,以β-环糊精为包合材料,采用饱和水溶液法制备莫能菌素β-环糊精包合物。用红外光谱法（IR）对包合物进行物相鉴定。以包合率为指标,运用正交设计法,确定最佳处方和工艺条件。IR结果表明,药物与环糊精形成了包合物。当投料比为3：1,包合温度为40℃,搅拌时间1.5 h时,该制备工艺最佳,包合率为57.54%。该制备工艺可行,扩大了莫能菌素的应用,为莫能菌素的剂型改进奠定了基础。     

鹦鹉性别鉴定方法的研究进展

鹦鹉是雌雄单态的鸟类之一,从外观上难以直接对它们的性别做出判断。鹦鹉以其靓丽的羽毛以及能够模仿人类语言等特点,被大多数人欣赏和爱护,因而经常被人们作为宠物饲养。鹦鹉性别鉴定,尤其是幼鸟时期的性别鉴定意义重大,是开展鹦鹉育种、濒危鹦鹉物种保护工作以及进化研究的基础。总结了目前鹦鹉性别鉴定的常用技术与方法,在立足于雌雄鸟类自身激素分泌不同的基础之上,为鹦鹉性别鉴定方法提出了新的构想,旨在为鹦鹉性别鉴定以及育种工作提供新的思路。     

3株非典型羊源布鲁菌的基因分型研究

[目的]探讨采用基因分型方法对非典型布鲁菌鉴定的实用性,为非典型菌株的鉴别提供参考。[方法]采用常规鉴定方法和VITEK 2.0全自动细菌鉴定分析系统对菌株进行初步鉴定,利用AMOS-PCR进行种型鉴定,应用多位点可变数目串联重复序列分析方法(MLVA)确定菌株的基因型。[结果]常规鉴定结果显示试验菌株为疑似布鲁菌;VITEK 2.0全自动细菌鉴定系统显示3株试验菌株均为布鲁菌;AMOS-PCR扩增表明试验菌株均为羊种菌,MLVA聚类分析表明试验菌株与羊种2型布鲁菌紧密地聚为一类,属东地中海基因型,并在Panel 2B中发现了新的基因型(4-4-3-7-5),命名为CN2B-45。[结论]MLVA基因分型方法对非典型布鲁菌具有极高的分辨力,是非典型布鲁菌分型鉴别的最佳策略。