犬贾第虫包囊的分离与鉴定

从吉林省某犬繁育中心自然感染的比格犬中分离到一株贾第虫,经鉴定其为贾第虫属蓝氏贾第虫种犬贾第虫亚种,本研究提供了一套简便可行的犬贾第虫包囊的分离的分离纯化方法,将有利于对该病的进一步研究.     

犬贾第虫病毒(长春株)全基因组序列分析

根据已报道的人源蓝氏贾第虫病毒序列设计了互相重叠的6对特异性引物，以犬贾第虫（长春株）纯培养滋养体总核酸为模板进行RT—PCR。PCR产物连接到pMD18-T载体进行测序，通过BLAST在GenBank进行同源性搜索，并用DNAMAN分子生物学软件进行分析。结果测得我国犬贾第虫病毒（长春株）基因组全长为6276bp（DQ238861），编码1个有887个氨基酸残基的衣壳蛋白和1056个氨基酸残基的融合蛋白，这2个阅读框被-1核糖体移码框分开，重叠处有220nt。基因组中G＋C占49．62％。其序列与国外报道的人源蓝氏贾第虫病毒（L13218）序列同源性为94．62％，编码的氨基酸同源性为93．50％；与国内人源蓝氏贾第虫病毒（AF525216）序列同源性为98．88％，编码的氨基酸同源性为98．30％。     

犬贾第虫病及其防治

犬贾第虫病是由犬贾第虫(Giarida canis)寄生于犬的肠道而引起的一种寄生性原虫病。该病呈世界性分布,在欧美许多国家曾多次暴发流行,但在我国极少报道。     

犬贾第虫病病例报告

犬贾第虫在犬的感染率较高,但国内临床确诊较少。笔者记录了2004年11月份2只西伯利亚雪橇犬经检查确诊为贾第虫感染,后经治疗痊愈的病例,并对犬贾第虫病的诊断、治疗进行了讨论。     

犬贾第虫病

犬贾第虫病李秉鸿区兽医研究所５３０００１贾第虫病（Ｇａｎｉｎｅｓｉａｒｄｉａｓｉｓ）是由寄生于肠内的蓝氏贾第鞭毛虫（Ｇｉａｒｄｉａｌａｍｂｌｉａ）引起的以腹泻为主要症状的一种寄生虫病，该病呈世界性分布，在欧美的许多国家曾多次发生暴发流行，在我国流行地...     

犬贾第虫病的诊疗体会

犬贾第虫病是由犬贾第虫寄生于肠道引起的一种人犬共患寄生虫病,各品种犬均易感染,严重威胁犬的健康,对管理人员的健康也构成一定的威胁。贾第虫病呈世界性分布,我国犬感染此病的比例较高,2000年3月在吉林省调查犬寄生虫感染情况时发现犬贾第虫感染率高达25．20％。大多数成年犬感染贾第虫后症状不明显,但幼犬症状较为明显,若不及时治疗,会影响幼犬的生长发育,甚至引起死亡。     

犬源贾第虫β-贾第素基因的克隆及序列分析

为了鉴定犬源贾第虫佛山分离株的基因型,根据GenBank中登录的贾第虫β-贾第素(bg)基因序列(X85958),设计2对引物GF1/GR、GF2/GR,采用套式PCR方法从贾第虫基因组DNA中扩增出目的片段;将扩增产物纯化并连接到质粒载体pMD18-T,克隆转入感受态细胞JM109,挑选阳性克隆测序,然后进行序列分析。结果显示,犬源贾第虫bg序列长为384 bp,与预期目的片段一致;分子进化树表明该犬源贾第虫分离株为蓝氏贾第虫D型。该基因型在我国为首次报道,为贾第虫的分子鉴定以及分子遗传学研究奠定了基础。     

犬贾第虫包囊排出规律的研究

对自然感染贾第虫的比格犬进行粪检调查 ,结果表明犬贾第虫包囊排出呈间歇性 ,其间歇期为 7～ 8d ,排囊后 1 2～ 1 4d达到排囊高峰期 ,峰期持续 2～ 3d,排囊持续时间为 2 5～ 2 7d。用 2只幼犬进行免疫抑制接种犬贾第虫 ,接种后第 7天出现排包囊 ,排囊后 6～ 7d达到排囊高峰期 ,峰期持续 4～ 5d。受染动物出现腹泻 ,体重减轻     

犬贾第虫包囊排出规律的研究

对自然感染贾第虫的比格犬进行粪检调查,结果表明犬贾第虫包囊排出呈间歇性,其间歇期为７～８ｄ,排囊后１２～１４ｄ达到排囊高峰期,峰期持续２～３ｄ,排囊持续时间为２５～２７ｄ。用２只幼犬进行免疫抑制接种犬贾第虫,接种后第７ｄ出现排包囊,排囊后６～７ｄ达到排囊高峰期,高峰期持续４～５ｄ。受染动物出现腹泻,体重减轻。     

硝唑尼特治疗犬贾第虫病的研究

选择试验犬8只,将其随机分为4个小组,每组2只.连续6 d对8只试验犬分剐进行粪检,确定无贾第虫感染后,用体外纯培养的犬贾第虫滋养体接种试验犬,然后每天采集试验犬新鲜粪便40 g,用硫酸锌漂浮法进行粪检,当检测犬贾第虫感染呈阳性时,分别用1、2、4 mg/kg体质量剂量的硝唑尼特时1、2、3组试验犬进行灌服治疗,第4组试验犬不用药作为对照.用药后,每天以同样的方法检测贾第虫包囊,并计数.结果表明,以2、4 mg/kg体质量给药的试验犬1 d后粪检结果转为阴性,以1 mg/kg体质量给药的试验犬4 d后粪检结果转为阴性.结果表明以2、4 mg/kg体质量剂量的硝唑尼特对犬贾第虫痛有很好的疗效.     

一株犬种布鲁氏菌的分离与鉴定

对从一只流产贵宾犬全血中分离到的一株布鲁氏菌进行了形态结构、培养特性、生化特性研究以及凝集试验鉴定和多种属聚合酶链式反应(AMOS-PCR)鉴定.结果表明,分离菌为革兰氏阴性菌,在胰际琼脂培养基生长并呈典型的粗糙型布鲁氏菌菌落,菌落能被结晶紫溶液染成紫色.分离菌在琉瑾和复红培养基上生长,不产生H2S,与粗糙型布鲁氏菌阳性血清凝集,与光滑型布鲁氏菌阳性血清无凝集.用AMOS-PCR方法对分离菌进行鉴定,该分离菌具有犬种布鲁氏菌特有条带.鉴定结果表明分离菌符合犬种布鲁氏菌特性,将其命名为B.canis GB1.     

Characterization of epididymal and testicular histologic lesions and use of immunohistochemistry and PCR on formalin-fixed tissues to detect Brucella canis in male dogs

In male dogs, Brucella canis frequently causes epididymitis, ultimately resulting in testicular atrophy and infertility. Although B. canis predominantly affects the epididymis, the misleading term “orchitis” is still commonly used by clinicians. Of additional concern, diagnosis in dogs remains challenging because of variable sensitivity and specificity of serologic assays and fluctuations in bacteremia levels in infected dogs, reducing the sensitivity of blood culture. We describe here the histologic lesions in the scrotal contents of 8 dogs suspected of being infected with B. canis and clinically diagnosed with orchitis. We explored the possibility of using immunohistochemistry (IHC) and real-time PCR (rtPCR) in formalin-fixed, paraffin-embedded (FFPE) tissues to detect the presence of B. canis. Epididymitis of variable chronicity was identified in all 8 dogs, with only 3 also exhibiting orchitis. Using rtPCR, the presence of B. canis was identified in 4 of 8 dogs, with 3 of these 4 dogs also positive by IHC. These results suggest that rtPCR and IHC are promising techniques that can be used in FFPE tissues to detect B. canis when other detection techniques are unavailable. Additionally, accurate recognition of epididymitis rather than orchitis in suspect cases could aid in accurate diagnosis.     

广东省猪十二指肠贾第虫感染现状和分子特征分析

【目的】 了解广东省不同地区猪源十二指肠贾第虫(Giardia duodenalis,简称贾第虫)的流行现状和分子特征,并评估其人兽共患风险。【方法】 从广东省10个地区采集新鲜猪粪样品,采用显微镜镜检,并应用巢式PCR对贾第虫谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase,gdh)基因进行扩增,根据扩增结果计算不同地区和生长阶段猪贾第虫的阳性率。对所有的PCR阳性产物进行测序,将获得的贾第虫gdh基因序列进行BLAST比对,确定贾第虫的基因型;运用Mega 7.0软件的最大似然法构建进化树。【结果】 贾第虫包囊呈椭圆形,囊壁较厚,大小为(10~14)μm ×(7~10)μm,具有明显纵向轴柱,细胞核分布于轴柱两侧。521份受检样品中共检测出94份PCR阳性样品,阳性率为18.04%(94/521),其中茂名和清远的阳性率较高,分别达40.00%(10/25)和35.06%(27/77);肇庆和韶关的阳性率较低,分别为3.90%(3/77)和8.57%(3/35);佛山、江门、阳江、河源、广州和惠州的阳性率分别为11.11%(2/18)、15.31%(15/98)、11.43%(4/35)、13.33%(4/30)、9.38%(3/32)和24.47%(23/94)。不同饲养阶段的猪群的阳性率调查发现,母猪的贾第虫阳性率(24.55%)显著高于断奶仔猪(13.30%)(P<0.05),与育肥猪的贾第虫阳性率(19.23%)差异不显著(P>0.05)。基于gdh基因序列的基因分型和系统进化分析共发现5种贾第虫亚集聚体,即集聚体AⅠ和集聚体E的4种不同亚型,包括集聚体E1、E2、E10和E13,其中61.70%(58/94)测序阳性样品属于集聚体AⅠ,38.30%(36/94)属于集聚体E的不同亚型。【结论】 广东猪源贾第虫的感染较普遍,不同地区和不同生长阶段的猪感染率存在一定差异。其中,人兽共患性集聚体AⅠ为优势亚集聚体,表明广东省猪源贾第虫存在人兽跨物种传播的风险,应重视该病可能引起的公共卫生问题。     

奶牛皮肤真菌的分离及鉴定

2007年春季,合肥市某奶牛场爆发皮肤真菌病。为了弄清本病的病原及常见腐生真菌的数量和种类．通过取奶牛患部病料10份和临床健康奶牛的样本40份,进行直接镜检、分离培养与鉴定和致病性试验,结果确诊为由犬小孢子菌引起的皮癣病,同时分离出腐生真菌6个属。本研究为奶牛皮肤菌病的临床诊断和治疗提供依据,并具有重要的公共卫生意义。     

广州地区犬场工作人员与一般人群犬埃立克体感染的比较研究

从比格犬埃立克体阳性血清中提取犬埃立克体IgG,用此IgG免疫鸡制备出抗抗体,用已建立的ELISA检测法对采集的人血清样本进行检测。143份随机采集的人血清4份呈阳性,阳性率2.78%;52份犬场工作人员血清6份呈阳性,阳性率11.54%。结果表明,广州地区犬场工作人员较一般人群犬埃立克体感染率高。     

犬种布鲁氏菌研究进展

犬种布鲁氏菌属于6个经典种布鲁氏菌之一,为天然粗糙型,毒力较弱。长期以来,由于犬种布鲁氏菌对人类致病性较低,其危害一直被忽视。自1966年在美国发现该菌以来,已传播至世界多地。近年来,随着养犬业的不断发展及宠物犬数量的增多,犬布鲁氏菌病发病率不断上升,在某些地区已成为流行性疫病,且对人类公共卫生安全的威胁也日益加重。目前,犬种布鲁氏菌感染导致的犬布鲁氏菌病尚无可靠的诊断方法及有效的疫苗。鉴于此,在查阅相关文献的基础上,笔者对犬种布鲁氏菌的病原学、流行病学、致病机理、检测方法、疫苗研究等方面的相关研究进展进行综述,以期为犬布鲁氏菌病的深入研究和防控提供参考。