复方制剂抗鸡新城疫病毒作用的初步研究

本实验对以山茶叶、黄芪等组成的复方进行了抗病毒效果评价与药理作用研究及临床治疗试验.结果表明由山茶叶组成复方对NDV的灭活率和抑制率分别为59.19%、67.5%,抗病毒效果明显优于单方的山茶叶和药物对照黄连,对NDV 50%(IC50)抑制浓度为1∶610.5,提示有较强抗病毒作用.     

抗犬细小病毒复方制剂的研究

对山茶叶、轮叶党参、卵叶芍药、苦味西葫芦、狼毒大戟 5种中草药的提取物进行体外抗犬细小病毒 (CPV)筛选 ,并对以山茶叶、黄芪等组成的复方进行抗病毒效果评价与药理作用研究。结果表明 ,山茶叶抗CPV作用较强 ,其对CPV的抑制率为 55 2 4 % ;由山茶叶组成复方对CPV的抑制率为 63 0 4 % ,抗病毒效果明显优于单方的山茶叶和药物对照黄连 ;对CPV 50 %抑制浓度 (IC50 )为 1∶587 5 ,提示有较强抗病毒作用。由山茶叶、黄芪等组成的复方药物对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌有抑制作用 ,可明显增强机体免疫力。     

石香薷挥发油体外抗病毒作用研究

采用有机溶剂法提取了石香薷挥发油，采用体外细胞培养的方法研究石香薷挥发油对新城疫病毒(NDV)感染的拮抗作用，测定其对鸡胚成纤维细胞的最大无毒浓度(TDo)、半数细胞中毒浓度(TD50)、抑制50％细胞病变的药物浓度(IC50)、治疗指数(TI)及体外抗NDV效果。试验结果表明：石香薷挥发油的TDo、TD50、IC50、TI分别为1．56g／l、3.13g/l、0.20g/l、15．65，石香薷挥发油0．79g/l对NDV所致的CPE有明显的抑制作用，证明石香薷挥发油具有明显的抗NDV作用，提示石香薷挥发油可以作为一种新的抗NDV感染的药物。     

酸枣叶茶的加工技术

酸枣又名山枣、野枣、山酸枣，嫩叶中含蛋白质12％～16％，脂肪1．5％～3．5％，糖类62％～70％，维生素C380～650毫克／100克，还含有钙、磷、铁等矿物质，以及三萜烯酸、氯原酸、黄酮类化合物等丰富的药用成分。用酸枣叶加工的茶叶具有利尿、促进胆酸合成、消炎等多种保健功能。其加工技术要点是：     

蛋用型和肉用型雏鸡抗新城疫病毒母源抗体半衰期测定

分别于不同日龄采集海兰褐蛋用型雄性雏鸡和AA肉用型雏鸡血清，测定其对新城疫病毒(NDV)HI抗体水平．以此确定抗NDV母源抗体的衰减规律及半衰期。结果表明，雏鸡出壳后抗体水平持续升高，到4日龄左右达到最高峰．随后快速下降．三周后抗体几乎消失。蛋用型雏鸡血清中对NDV母源抗体的半衰期为2．19d左右。肉用型雏鸡血清中对NDV母源抗体的半衰期为3．10d左右。     

金银花叶对鸡免疫功能影响的研究

为了研究金银花叶对鸡免疫功能的影响,试验采用单因子方差分析进行试验设计、分组,以不同途径给予鸡金银花叶,测定不同阶段鸡体重、血清抗新城疫病毒(NDV)抗体效价、免疫器官重量及其指数,研究金银花叶对鸡免疫功能的影响。结果表明:与对照组相比,金银花叶能促进鸡抗NDV抗体的产生,且高效价抗体维持时间长;可使鸡增重明显;对脾脏发育影响不明显,对法氏囊发育有一定促进作用,对胸腺发育影响极显著。说明金银花叶对鸡免疫功能具有明显影响。     

新城疫病毒广西分离株F基因的克隆和序列分析

根据GenBank中登录的新城疫病毒(NDV)F基因序列设计了2对引物，对从广西分离的10株NDV毒株的F基因进行了分段扩增和序列测定，其基因序列全长均为1662bp，编码553个氨基酸，均有6个潜在的糖基化位点。将其F基因的核苷酸序列及推导的氨基酸序列与已发表的10株NDV参考株的F基因序列进行了比较。结果表明，核苷酸序列的同源性为82．6％～98．1％，氨基酸的同源性为87．7％～98．7％。这10株NDV广西分离株在裂解位点的氨基酸序列(^112R—R—Q—K／R—R—F^117)与NDV强毒株特征相符合。系统发育树、酶切位点分析和基因分型结果表明，10株NDV广西分离株中GX1／00、GX2／00、GX4／00、GX6／02、GX7／02、GX9／03、GX10／03和GX11／03为基因Ⅶd亚型，GX3／00和GX5／00为基因Ⅲ型。     

鸡新城疫地方强毒SC01株HN基因片段的克隆与分析

用设计的1对特异性引物，对一株从成都地区分离的鸡源性NDV强毒SC01株的HN基因的526bp片段进行克隆与分析。分析结果表明，SC01株HN基因与相比较的12株鸡源性毒株的HN基因的核苷酸同源性为81．4％-94．6％，核苷酸所推导的氨基酸同源性为88．0％～94．8％。对SC01株和CH185、F02、GD／1／98／goose、YG97、JS／3／98／goose、JS／5／01／goose、JS／2／98／goose等毒株的HN基因进行聚类分析，证明它们属同一亚群，SC01株属于NDV基因Ⅶ型毒株，证明了基因Ⅶ型NDV毒株在四川地区存在。     

转化型人参皂甙的生物活性:体外实验研究

将人参总皂甙经化学转化成转化型人参皂甙后分离得8个组分，在体外细胞上进行了转化型人参皂甙8个组分对CEF细胞毒性、生长活性、诱导肿瘤细胞凋亡、诱导单克隆抗体生成以及抗IBDV、AIV（H9）、NDV、MDV病毒的活性研究。结果发现，转化型人参皂甙各组分的细胞毒性作用在23．26～39．53mg／L之间；对鸡胚成纤维细胞（CEF）的生长和活性呈促进作用的工作浓度在10～20mg／L之间；转化型人参皂甙8号组分12．5mg／L诱导48h后，肝癌细胞7402株有60％的细胞凋亡，大鼠脑胶质瘤细胞C6株有35％的细胞凋亡；3、4、7号组分12．5mg／L和6．25mg／L对单克隆抗体6E6株杂交瘤细胞和单克隆抗体10B11株杂交瘤细胞的单抗生成具有明显促进作用，其HI效价为2^6～7与对照组的2^5相比有明显差异，IFA效价为10^4～5与对照组的10^2相比有极显著差异；4、7、8号组分15mg／L阻斯IBDV、AIV（H9）、NDV感染CEF细胞的作用都达到了51．1％以上，抑制IBDV、AIV（H9）、NDV在CEF上增殖的作用都在30％以上；6、7号组分12．5mg／L在阻断感染、抑制增殖、直接杀灭3种方式的抗MDV—RB1B强毒株在SPF鸡CEF细胞上的空斑减数率都达了到ACV抗MDV空斑减数率的80％，其中4、6号组分对MDV—RBIB株的直接杀灭作用与ACV的杀灭作用相等。表明人参总皂甙经化学处理转变成转化型人参皂甙，可明显改变其生物学活性。     

杀毒霸对禽流感病毒、新城疫病毒的杀灭作用

采用悬浮杀灭试验，以鸡胚鸡染法，研究杀毒霸在1：3000、1：4500、1：6000、1：7500的系列浓度下，与禽流感病毒、新城疫病毒分别作用5、10分钟，对AIV、NDV的杀灭作用。1：3000、1：4500、1：600、1：7500的杀毒霸与AIV作用5分钟，其杀灭率为；100％、100％、99．99％、99．97％；1：3000、1：4500、1：6000、1：7500的杀毒霸与NDV作用5分钟，其杀灭率为：100％、99．99％、99．995％、9．9％；以上浓度的杀毒霸与AIV作用10分钟，其杀灭率为：100％、99．99％、99．98％、99．994％、99．997％。     

苦荬菜研究进展

苦荬菜(Ixeris polycephala Cass)具有很高的饲用和药用价值,国内外学者对其进行了大量研究。为了合理利用、研究和开发苦荬菜资源,本文综述了近些年关于苦荬菜分类、生物学特性、农艺学特性、细胞学、药用价值等方面的研究进展。     

菊苣EST-SSR分子标记开发及通用性分析

为了开发菊苣（Cichorium intybus）简单重复序列（Simple sequence repeat,SSR）分子标记,采用菊苣表达序列标签（Expressed sequence tags,EST）序列设计EST-SSR引物,并验证引物的有效性和通用性。结果表明：菊苣EST序列中共搜索到648个SSR位点,146种重复基序,SSR出现频率为1.61%;三核苷酸重复类型最多（46.45%）,TC/GA基序出现频率最高（14.35%）;152对EST-SSR引物在菊苣中的有效扩增率和多态率分别为78.29%和57.24%。其中37对引物在31份莴苣亚族（Lactucinae Less.）材料中的扩增转移率为86.05%,遗传多样性分析显示不同种间存在明显的遗传分化,聚类结果与材料的地理来源有较高相关性。综上所述,基于菊苣EST序列开发的SSR引物可用于菊苣及其近缘属种遗传多样性分析及种间鉴定,为菊苣族（Lactuceae Cass.）种质资源评价、系统进化研究及分子标记辅助育种奠定了重要基础。     

蚯蚓提取液对兔巴氏杆菌病的治疗效果

为探明蚯蚓提取液对兔巴氏杆菌病的治疗效果,采用蚯蚓提取原液对兔巴氏杆菌进行了体内外试验研究。结果表明,通过体外抑菌试验,蚯蚓提取液对巴氏杆菌的抑菌效果明显,最小抑菌浓度为5倍稀释原液,而原液的抑菌率可达100%;体内试验研究显示,6 mL剂量组对兔巴氏杆菌病的治愈率为100%。     

Activation of Mouse Oocytes Following Intracytoplasmic Injection of Chicken Sperm Extract

The cytosolic factor from the sperm of a wide variety of species has been reported to induce [Ca²⁺]i increase and/or activation in oocytes. Although many species have been studied, there is no data available on the chicken sperm factor responsible for activation of oocytes. This study was aimed to verify the activation of mouse oocyte by intracytoplasmic injection of chicken sperm extract (CSE). Survival rate of oocytes without rupture or lytic degeneration following injection was greater than 80% regardless of the presence or absence of CSE. Among the intact oocytes, activation rates following injection were 27.5% (11 of 40) in the sham operation group. Injection of CSE resulted in significantly higher activation rates in the 1/10 dilution group (57.8%, 26 of 45) compared with the sham operation group (p = 0.0045). Calculated amount of injected sperm extract of 1/10 dilution of CSE was equivalent of 12 chicken sperm. When the 1/10 diluted mouse sperm extract (MSE) was injected, survival rate of injected oocytes and activation rate of the survived oocytes was 82% (41 of 50) and 78% (32 of 41), respectively. Activation rate of MSE‐injected oocytes was a little but significantly higher than that of CSE‐injected oocytes (p < 0.037). In conclusion, it suggests that CSE can activate the mouse oocyte and that oocyte activating sperm factor(s) may be common between avian and mammal.     

嗜线虫致病杆菌HB310菌株对家蚕的毒力及安全性评价

嗜线虫致病杆菌(Xenorhabdus nematophila)HB310菌株与小卷蛾斯氏线(Steinernema carpocapsae)互助共生,对多种寄生害虫具有杀灭作用。为了探讨该共生菌在蚕区大田农作物害虫防治上应用的可行性,研究了嗜线虫致病杆菌HB310菌液和蛋白毒素粗提物对家蚕的生物学安全性。结果表明:HB310菌液对家蚕的急性毒力很低,即使在处理后120h,仍然不能测定其LC50;家蚕对HB310菌液和蛋白毒素粗提物均表现出一定的拒食性,5龄幼虫对2.24×106CFU/mL HB310原菌液和0.57mg/mL杀虫蛋白粗提物的48h拒食率分别达到24.90%和23.05%;HB310菌液及蛋白毒素粗提物对家蚕各龄幼虫体重均有明显的抑制作用,并且随龄期而增大;从蚁蚕开始一直饲喂含HB310原菌液人工饲料的幼虫各龄历期均明显延长,存活率显著下降,到4龄全部死亡;幼虫取食含HB310原菌液人工饲料72h后改饲喂正常饲料,1龄和2龄的历期明显长于对照,但以后各龄历期、化蛹率、羽化率、蛹重和茧层量等各项生物学和经济性状指标均与对照无显著差异;1.12×104CFU/mL HB310菌液和0.11mg/mL蛋白毒素粗提物对家蚕的生长发育无显著影响。综合分析认为,HB310菌株对家蚕低毒性。     

苦楝提取物对捻转血矛线虫卵和幼虫活性的影响

为初步探讨苦楝对捻转血矛线虫的作用,本试验通过观察苦楝提取物对虫卵和幼虫活性及形态变化的影响,评估其对捻转血矛线虫的驱虫活性,以期为家畜捻转血矛线虫病的防控及植物驱虫药物的研发奠定基础。试验对苦楝水提取物和乙醇提取物设置5个浓度（25、12.5、6.25、3.125、1.562 mg/mL）进行虫卵孵化试验和幼虫活性试验,对不同浓度药物处理的虫卵及幼虫进行计数,并观察药物作用后虫卵和幼虫的孵化状态及形态变化。结果显示,正常孵育的虫卵和幼虫活力良好,苦楝提取物作用48 h后,虫卵呈未孵化、半孵化状态,发育至桑葚期、蝌蚪期及幼虫期死亡,并且各浓度苦楝水提物和醇提物对虫卵均具有抑制作用,其中苦楝皮醇提物对虫卵孵化的抑制效果最佳,在浓度25 mg/mL时,对虫卵孵化的抑制率高达98.2%,在12.5 mg/mL时,苦楝子醇提物对虫卵的抑制率极显著高于苦楝皮醇提取物（P<0.01）。苦楝子提取物对感染性三期幼虫的致死效果较差,在50 mg/mL时对幼虫有较高致死率（82.6%）。苦楝皮水提取物在浓度为50 mg/mL时对幼虫的致死效果尤为突出,幼虫死亡率为97.0%,死亡的幼虫呈"直线型"或"弓型"。经方差分析,在12.5~50 mg/mL浓度范围内,相同浓度苦楝水提取物之间的致死率存在显著或极显著差异（P<0.05;P<0.01）,同浓度苦楝醇提取物对幼虫的致死率存在极显著性差异（P<0.01）。综上所述,苦楝提取物对体外的捻转血矛线虫卵和感染性三期幼虫的活性均有抑制作用,其中25 mg/mL苦楝皮醇提物对虫卵孵化的抑制效果最佳,50 mg/mL苦楝皮水提物对感染性三期幼虫的致死作用最好。     

In vitro acaricidal effect of plant extract of neem seed oil (Azadirachta indica) on egg, immature, and adult stages of Hyalomma anatolicum excavatum (Ixodoidea: Ixodidae)

Effects of the plant extract of neem seed (Azadirachta indica) on eggs, immature, and adult stages of Hyalomma anatolicum excavatum was studied at concentrations of 1.6, 3.2, 6.4, and 12.8%. The extract was found to have a significant effect on the hatching rate of eggs. It significantly increased the hatching rate during the first 7 days post-treatment (DPT) giving incompletely developed and dead larvae; however, it cause hatching failure at DPT 15. Neem Azal F induced a significant increased in mortality rates of newly hatched larvae, unfed larvae, and unfed adults reaching 100% on 15th, 3rd, and 15th DPT, respectively. The mortality rates increased with the extract concentrations. Although, it had no significant effect on the moulting rates of fed nymphs, it caused malformation or deformities in 4% of adults moulted. It was concluded that the concentration of Neem Azal F which may be used for commercial control of this tick species were 1.6 and 3.2%.     

应用猪囊虫匀浆抗原间接血凝试验检测猪囊虫病抗体的研究

从囊虫匀浆浸提液中分离出一种抗原性与特异循环抗原相同的成分,以这种抗原成分通过间接血凝试验检测病、健猪的血清抗体,结果病猪抗体阳性率为93.2％(96/103),健猪阴性(?)合率为100％。     

狼毒浸提液对3种牧草种子萌发和幼苗生长的影响

采用培养皿滤纸法研究狼毒浸提液对紫花苜蓿、披碱草和冰草的化感作用,分析狼毒浸提液对3种牧草种子萌发和幼苗生长的作用规律和作用强度,以期为退化草原的恢复提供理论依据。结果表明:1)5种浓度梯度狼毒浸提液处理对紫花苜蓿种子发芽率均具有抑制作用,125g·L^-1处理下种子发芽率较对照相比减少33.56%;对披碱草和冰草种子具有“低促高抑”现象,25g·L^-1处理下披碱草种子发芽率较对照增加19.76%,冰草增加45.91%。2)狼毒浸提液对紫花苜蓿幼苗苗高呈现低浓度(≤50g·L^-1)促进生长,高浓度(≥75g·L^-1)抑制生长,对披碱草幼苗苗高呈现低浓度(≤25g·L^-1)促进生长,高浓度(≥50g·L^-1)抑制生长。狼毒浸提液对冰草幼苗根长具有抑制作用,较对照相比减少78.21%。狼毒浸提液处理下3种牧草种子萌发和幼苗生长均受到抑制作用,且随着狼毒浸提液浓度的增加,抑制作用逐渐增强。