大鸭梨叶片高频率不定梢再生诱导研究

以白梨 (PyrusbretschneideriRehd )鸭梨的芽变大鸭梨试管苗为试材 ,试管苗幼叶为外植体 ,研究了培养基的基本元素组成、外源激素及接种叶片的放置方向对叶片不定梢再生的影响。结果表明 ,培养基的基本元素组成是影响叶片能否获得再生不定梢成功的关键因素 ;外源激素直接影响叶片的不定梢再生频率 ;叶片的接种放置方向影响单位叶片的再生不定梢数。诱导大鸭梨叶片获得高频率不定梢再生的最佳培养基为基本培养基NN6 9附加激素TDZ和IBA。叶片远轴面接触培养基 ,平均单位叶片产生的不定梢数量最多。     

虎舌红叶片不定梢诱导研究

[目的]建立虎舌红的高频再生体系,为利用转基因技术改良其品质奠定基础。[方法]以虎舌红试管苗顶端叶片为试材进行组织培养和不定梢诱导试验。[结果]外植体在9种培养基上均能诱导出愈伤组织,4号培养基的不定芽再生率最高,为45．80％,植株生长健壮;其次是7号培养基,其不定芽再生率为39．76％。从整体上看,不定芽的再生率都不高,最高的也未超过50．00％。综合考虑愈伤组织诱导和不定芽再生,适合虎舌红叶片不定芽再生的培养基为：1／2 MS＋TDZ 2．0mg／L＋IAA0．2～0．4mg／L＋AgNO3 3．0～5．0mg／L。选健壮苗接种于1／2MS＋IBA 0．3mg／L＋NAA 0．5mg／L培养基上,20d后生根率可达90％,炼苗后再生植株的移栽成活率达80％以上。[结论]该研究成功建立了虎舌红叶片的离体再生体系。     

卡那霉素对梨叶片愈伤组织和不定梢诱导的影响

研究了卡那霉素(Km)对梨叶片愈伤组织和不定梢诱导的影响.结果表明,Km浓度为10 mg/L时,明显抑制“金华”和“金水”叶片愈伤组织的生长;Km浓度为20 mg/L时,2个品种叶片均无不定梢发生,且随着浓度的增加,死亡率逐渐增大;Km浓度达100 mg/L时,“金华”和“金水”叶片死亡率分别达100％、96.70％.对于“苍溪”品种而言,Km浓度为10 mg/L时,已完全抑制了“苍溪”叶片不定梢的再生;当Km浓度增加到60 mg/L时,“苍溪”叶片全部白化死亡.     

八月红梨叶片不定芽诱导研究

采用正交试验设计研究了基本培养基、BA和 IAA 3个因素及其组合对八月红梨 (Pyrus communisL .)叶片不定芽再生的影响。结果表明 ,基本培养基的种类对叶片不定芽的诱导起主要作用 ,诱导叶片再生的最优组合是 NN6 9+BA 5 .0 m g/L +IAA 0 .5 mg/L ;用同质量浓度葡萄糖代替蔗糖 ,对叶片再生频率的影响不显著 ,用白砂糖代替蔗糖 ,显著降低了叶片再生频率 ;Ag NO3质量浓度在 0 .1～ 1.5 mg/L时 ,对叶片再生有促进作用 ,培养基中附加 Ag NO30 .5 mg/L ,可显著提高叶片再生频率     

梨成熟胚子叶不定梢诱导

获得了白梨中鸭梨和砂梨中晚三吉梨成熟胚子叶的再生不定梢。２个品种达到最高不定梢再生率的培养基都是１／４ ＭＳ大量元素,附加生长调节剂５ｍｇ．Ｌ＾－１ＢＡ和０．５ｍｇ．Ｌ＾－１ＮＡＡ,再生率分别达到９３．３％和１００％。     

银白杨叶片不定芽再生影响因素的研究

该文以银白杨无菌试管苗叶片为外植体 ,进行了不同培养基及不同因子对银白杨叶片不定芽诱导的研究 ,建立了叶片不定芽再生植株体系 ,为今后的遗传工程改良奠定了基础 .结果表明 :银白杨叶片不定芽诱导的最适培养基是MS附加 6 BA和NAA(5∶1) (即MS +6 BA 0 5mg L +NAA 0 1mg L +蔗糖 2 5 % +琼脂 0 5 5 % ,pH 5 8) ,不定芽再生率达 95 %以上 ;当 6 BA NAA <5时 ,叶片不定芽再生率和再生系数均降低 ,当 5≤ 6 BA NAA≤ 30时 ,随着比值的增大 ,不定芽再生率明显下降 ,不定芽再生系数也减少 ;叶片不定芽再生能力强的最佳取材位置是自试管苗顶端向下伸展叶的第 1～ 3片叶 ;生根试管植株叶片的不定芽再生能力强于无根试管植株 ;叶片不定芽诱导的最佳光照时间为每天 14h .     

明水梨叶片不定芽再生体系的建立

以‘明水’梨(Akemizu)叶片为外植体,研究了不同基本培养基,不同浓度噻重氮苯基脲(TDZ)和吲哚丁酸(IBA)的组合,不同暗培养时间以及不同浓度的硝酸银(AgNO3)对梨叶片不定芽再生的影响。试验结果表明,在NN69+TDZ 1.5mg/L+IBA0.2 mg/L+AgNO31.0 mg/L中暗培养25 d后,叶片不定芽再生率最高,达到71.8%。     

抗生素对梨离体叶片不定芽再生的影响

以沙梨‘金花’和西洋梨‘丰产’两个品种的无菌苗幼叶为试材,研究了卡那霉素、头孢霉素和羧苄青霉素对梨离体叶片不定芽再生的影响。用新梢顶端1～3节新展开的叫‘片制备外植体,分别接种在NN69 BA5mg／L NAA0．3mg／L CH300mg／L的培养墓上,附加不同浓度的抗生素,黑暗处理20d,结果表明：500mg／L的浓度下,头孢霉素完全抑制供试品种叶片的再生;400mg／L的浓度下,羧苄青霉素完全抑制供试品种叶片的再生。丰产和金花对卡那霉素均敏感,5mg／L就极显著的抑制不定芽再生;10mg／L时不定芽不能正常生长,白化死亡,同浓度下供试品种不能分化不定根。     

悬铃木叶片不定芽再生

以普通果球和少果球悬铃木为供试材料,建立了叶片不定芽再生体系。结果表明:种子苗于附加IBA0.01 mg/L、ZT 0.10 mg/L及6BA 0.10 mg/L的WPM基础培养基上扩繁,叶片小而多,叶色深绿;取扩繁苗倒1~5叶片外植体,于附加不同浓度6BA、IBA及KT的WPM培养基上,普通果球和少果球悬铃木最高不定芽再生频率分别达59.5%和100.0%,每个外植体长芽数分别近5个和2个。再生所需最佳激素组合因品种而异,普通果球和少果球悬铃木分别为IBA 0.2 mg/L、6BA 2.0 mg/L及KT 0.5 mg/L和IBA 0.5 mg/L、6BA 2.0 mg/L及KT 0.5 mg/L;不定芽及芽点在WPM 0.01 mg/L IBA 0.10 mg/L ZT 0.10 mg/L 6BA伸长培养基上迅速伸长,且株体健壮;在WPM 0.2 mg/L IBA 0.5%活性炭生根培养基上,根系和上部发育较好。     

若光梨叶片诱导不定芽的研究

以NN69为基本培养基,附加TDZ 1.0 mg/L、IBA0.15 mg/L、AgNO30.1 mg/L,处理若光梨叶片,暗培养21 d,再于光照条件下培养30 d,获得不定芽和再生植株,再生频率为63.2%.     

甜柿上西早生不定芽再生的研究

采用正交试验方法研究了不同培养基、激素种类及其浓度对上西早生柿叶片不定芽再生的影响。结果表明,氮含量减半的MS [MS (1/2N)]培养基最好,其次是1/2 MS,MS效果最差;ZT (zeatin) 浓度为4.0 mgL-1时不定芽再生率明显高于2.0 mgL-1,在1.0mgL-1ZT中培养的叶片再生率最低;0 mgL-1 IAA (indole acetic acid) 的效果好于1.0 mgL-1和2.0 mgL-1 IAA;正交试验影响因子分析结果显示,ZT的作用最大,其次是培养基和IAA;组合MS(1/2)、4.0mgL-1ZT和1.0mgL-1IAA中不定芽再生率达86%,平均不定芽数为2.2。     

不同基因型矮牵牛高频再生体系建立的研究

为建立不同矮牵牛品种的高频再生体系,以10个矮牵牛品种为材料,研究了不同基因型、不同生长调节剂配比、不同接种方式、叶片不同部位和不同外植体对不定芽再生的影响。研究结果表明:基因型是影响不定芽再生的重要因素之一,从10个品种中筛选获得了5个品种的高频再生体系;6-BA和NAA及其配比极显著影响矮牵牛不定芽再生率和平均不定芽再生数量,其中0.2 mg.L-1NAA极显著的促进了矮牵牛不定芽再生,其次是0.1 mg.L-1NAA,而高浓度NAA抑制不定芽再生;不同品种适宜的分化培养基不同,筛选获得了不同品种适宜的分化培养基;不同接种方式对不同品种不定芽再生影响不同,其中不同接种方式对黄金紫罗兰的不定芽再生有极显著影响,对黄金肉红、珊瑚红则没有影响;叶片不同部位极显著影响黄金紫罗兰星条不定芽的再生,对其它品种没有影响;叶片外植体是矮牵牛不定芽再生的最佳外植体。     

梨防治抽条保护性材料筛选研究

以‘早酥’和‘黄冠’为试材,选择9种保护性材料,研究不同保护性材料对梨1 a生枝条失水、抽条和发芽的影响,筛选出防止梨树抽条效果好的保护性材料。结果显示:(1)不同保护性材料均能降低梨1 a生枝条失水量。‘早酥’石硫合剂、液态地膜、N-羟甲基丙烯酰胺和黄腐酸处理失水量分别低于对照23.55%、12.36%、11.55%和9.30%。‘黄冠’液态地膜、石硫合剂、N-羟甲基丙烯酰胺、羧甲基纤维素、腐殖酸钠、黄腐酸和腐殖酸铜处理失水量分别较对照低17.62%和17.47%、16.36%、14.94%、14.27%、12.28%和12.09%。(2)不同保护性材料均能降低抽条指数。‘早酥’石硫合剂、液态地膜、N-羟甲基丙烯酰胺和腐殖酸铜处理抽条指数分别比对照低30.42%、26.08%、21.73%和21.73%。‘黄冠’液态地膜、石硫合剂、羧甲基纤维素、N-羟甲基丙烯酰胺和腐殖酸钠处理抽条指数分别比对照低39.28%、35.71%、28.58%、28.57%和21.43%。(3)N-羟甲基丙烯酰胺对‘早酥’和‘黄冠’1 a生枝条发芽率与对照相比分别降低46.3%和26.8%。其他处理与对照发...     

皇家夏天葡萄离体叶片再生体系的建立

叶片再生效率的高低直接影响目的基因转化的成功率,为建立稳定、高效的葡萄离体叶片不定芽再生体系,以优良无核葡萄品种皇家夏天为试材,取试管苗顶端1￣3叶位幼嫩叶片,研究了基本培养基成分、生长调节物质的种类和浓度、碳源等因素对叶片不定芽再生的影响。结果表明:供试WPM、1/2MS、B5和NN694种基本培养基,均可诱导其叶片再生不定芽,差异不显著;碳源以添加10￣20g/L的葡萄糖或食用白砂糖较好;培养基中附加3.0mg/L的6-BA与0.05mg/L的IAA配比利于出芽和成苗,应用TDZ虽出芽较多,但芽丛多畸形、出苗困难,不宜使用。     

梨的试管微嫁接技术研究

[目的]研究试管梨苗嫁接的影响因素及较适合的条件。[方法]以苹果梨、香水梨和山梨种胚培养的组培苗为试材,研究不同的消毒时间、嫁接方法及生长调节剂等因素对其生长的影响。[结果]种子消毒处理及鲜果取种组培苗的成活率均较高,达75．0％以上;以香水梨和苹果梨为接穗,无根山梨为砧木时的嫁接苗成活率有显著差异,其中以香水梨为接穗的成活率较高;以香水梨为接穗,山梨和香水梨为砧木时,带根的材料嫁接时的成活率都显著高于无根嫁接苗的成活率;此外,添加植物生长调节物质可以有效提高嫁接成活率,在培养基MS＋BA1．0mg／L＋IBA0．3mg／L中嫁接苗的成活率最高,达86．7％。[结论]该研究可为梨无性系砧木的扩繁推广和作为基砧应用提供了理论依据。     

印度橡胶榕离体培养及植株再生研究

[目的]为印度橡胶榕的工厂化育苗提供理论依据。[方法]以印度橡胶榕“黑金刚”茎尖为材料,以MS为基本培养基添加不同的激素组合进行组织培养,选择最佳的培养基配方。[结果]外植体初代诱导最佳培养基为：Ms＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．1mg／L,诱导率达69．7％;丛生芽增殖最佳培养基为：Ms＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．1mg／L,增殖系数达2．57;最佳生根培养基为：1／2MS＋NAA0．1mg／L＋IBA0．1mg／L,其生根率为100％。[结论]该研究成功建立了印度橡胶榕“黑金刚”的离体再生体系,为其规模化生产提供技术支撑。     

7个梨主栽品种生长季钙含量的动态变化

缺钙会引起许多果实生理性病害。为给梨树合理补钙提供理论依据,以7个梨主栽品种为试材,研究了其叶片、果实和新梢钙含量的动态变化规律。结果表明：随着梨的生长发育,参试品种的叶片和新梢钙含量均大体呈增加趋势,果实钙含量呈逐渐降低趋势（其中幼果期至果实成熟前期降速最快）,且同一品种幼嫩器官与成熟器官的钙含量差异均达到了显著水平,同一发育时期相同器官钙含量最大值与最小值的差异也达到了显著水平。钙含量最高的器官是叶片,其次是新梢,果实钙含量最低。不同梨品种的钙素营养水平存在差异,其中各器官发育末期的钙含量,均以鸭梨最高,黄冠和大南果较低。     

两个蓝莓品种离体叶片不定芽再生体系的建立

以Sunrise和Geo两个蓝莓品种试管苗叶片为外植体材料,以改良的WPM为基本培养基,研究了暗培养时间、叶片放置方式和不同浓度激素组合（ZT、IBA、TDZ）对2个蓝莓品种叶片不定芽再生的影响。结果表明：最适的暗培养时间为14d,近轴面放置效果最好,不同基因型不定芽再生能力不同,Sunrise品种在WPM＋4．0mg／L ZT＋0．3mg／L IBA＋1．0mg／L TDZ＋20g／L蔗糖＋6g／L琼脂培养基中生长最好,离体叶片不定芽再生频率达100％,再生不定芽数可达4．5个以上;Geo品种最适宜培养基为WPM＋4．0mg／LZT＋0．3mg／LIBA＋20g/L蔗糖＋6g／L琼脂,叶片不定芽再生频率达到100％。     

海石竹叶片的离体培养与植株再生

[目的]研究海石竹叶片的离体培养及植株再生。[方法]以MS为基本培养基,对海石竹叶片的尖端、中部和基部3个不同部位进行了愈伤组织诱导、丛生芽和根分化的研究。[结果]以叶片尖端作为外植体诱导愈伤组织效果最佳,叶片中部次之,叶片基部最差。MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.75 mg/L培养基诱导叶片尖端愈伤组织的效果最好,MS＋6-BA 4.0 mg/L＋NAA 0.25 mg/L培养基诱导叶片中部和基部的效果最好;MS＋6-BA 3.0 mg/L＋NAA 0.10 mg/L培养基诱导丛生芽的效果最佳;MS＋NAA 0.20 mg/L培养基诱导生根的效果最佳。[结论]建立了海石竹高效的离体培养及快速繁育体系,为其种苗的规模化、工厂化生产和其他后续的科学研究奠定了基础。