皱盖假芝乙醇提取物的LC-MS/MS分析及其体外抗肿瘤活性

[目的]假芝(Amauroderma rugosum)又名血芝,我国野生假芝资源丰富,了解野生假芝提取物的主要成分及其体外抗肿瘤活性,为真菌源抗肿瘤药物筛选提供理论依据.[方法]采用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)分析皱盖假芝乙醇提取物成分,3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检...     

粤北地区血芝袋料栽培技术初探

<正>血芝,又称皱盖假芝(Amauroderma rudis),为灵芝科假芝属真菌,出芝温度为20~30℃,为中高温恒温结实性大型药用菌,其幼嫩子实体损伤伤口处会分泌象血一样的液体,故称血芝。血芝在我国台湾被视为珍贵药材,在防癌、抗癌、抗衰老和提高免疫机能等方面有奇特效果,具有开发利用价值。由于野生血芝生长速度十分缓慢,产量极低,仅靠自然供给远远不能满足人们的需求。为此笔者从湖北引进血芝进行适栽试验,主要研究血芝     

野生灵芝分离鉴定、生物学特性及活性成分分析

为充分保护和开发利用灵芝这类珍稀野生药用菌资源,对采自陕西省安康市平利县山区的一株野生灵芝进行分离纯化,通过rDNA ITS序列分析技术明确其分类学地位,探讨该菌株的生物学特性和人工栽培子实体活性成分,为进一步开发利用该灵芝菌株提供科学依据。结果表明,该野生灵芝菌株为赤芝[Ganoderma lucidum(Curtis) P.Karst.];单因素试验确定其菌丝生长最适碳源为葡萄糖和蔗糖,最适氮源为酵母膏,最适无机盐为磷酸二氢钾,最适初始pH为7.0,适宜培养温度为26～28℃,正交优化得到最佳因子组合为葡萄糖15 g/L、蔗糖15 g/L、酵母膏5 g/L、磷酸二氢钾1 g/L、初始pH6.5;其人工栽培子实体多糖含量1.42%,三萜含量3.05%,蛋白质含量17.74%,这3种活性成分总含量高于对照菌株灵芝SW01和泰山灵芝,为一株活性成分含量较高的栽培品种。     

一株野生毛头鬼伞的分离鉴定及其生物学特性研究

对采自芦芽山的一株大型野生食用菌ZMM-3进行了分离鉴定,并对其生物学特性进行了研究。利用组织分离的方法获得该野生菌株,并且提取其基因组DNA,以其为模板扩增内转录间隔区(Internal transcribed space,ITS)片段并测序。根据ITS序列分析结果结合形态特征,将ZMM-3菌株鉴定为毛头鬼伞(Coprinus comatus)。通过对ZMM-3菌株生物学特性的研究发现,其最适生长温度为25℃,最适碳源为蔗糖,最适氮源为酵母粉,最适碳氮比为(10∶1)~(20∶1),最适pH值为7~8。采用棉籽壳、木屑、稻草、玉米芯、玉米秸秆等栽培料对该野生菌株进行了出菇栽培试验。结果表明,该菌株在稻草培养料上生长最快,在稻草和玉米秸秆上发满菌覆土即可出菇,其生物转化率分别为11.18%和22.28%,所以,玉米秸秆栽培料是ZMM-3菌株的最适栽培料。     

带叶兜兰菌根真菌分离和初步鉴定

了解带叶兜兰菌根真菌的群落组成,为优良菌株的筛选奠定基础,对采自广西乐业县的野生带叶兜兰进行了菌根真菌分离,通过根段直接培养法分离菌根真菌,以确定75%乙醇和10%NaClO的最适表面消毒时间,并应用形态学方法对分离的菌株进行了属的鉴定。研究结果显示,带叶兜兰菌根真菌最适表面消毒时间是75%乙醇8 min,10%NaClO 8 min。从带叶兜兰菌根中分离到的63株真菌,除8株菌株分类地位不能确定外,其余菌株归属于镰刀菌属(Fusarium)、轮层菌属(Daldinia,)、碳团菌属(Hypoxylon)、毛壳菌属(Chaetomiaceae)、胶膜菌属(Tulasnella)5属,其中镰刀菌属和轮层菌属为优势菌属。     

皱盖假芝乙醇提取物LC-MS/ MS分析及体外抗肿瘤活性

【目的】假芝（Amauroderma rugosum）又名血芝,我国野生假芝资源丰富,了解野生假芝提取物的主要成分及其体外抗肿瘤活性,为真菌源抗肿瘤药物筛选提供理论依据。【方法】采用液质连用（LC-MS/ MS）分析假芝醇提取物成分,3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）法检测假芝不同溶剂萃取物对人结肠癌细胞HCT-116和人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用。【结果】皱盖假芝初生菌丝经PDA分离,长势良好,可栽培特性强;液-质联用色谱检测表明,皱盖假芝子实体的乙醇提取物在正离子模式下有11个主要化合物,在负离子模式下有19个化合物。假芝提取物能有效抑制HepG2和HCT-116的增殖,其中石油醚提取物对HepG2半抑制浓度IC50为69.85 μg/mL,正丁醇提取物对HCT-116半抑制浓度IC50为136.2 μg/mL。【结论】皱盖假芝乙醇提取物中主要成分为脂肪酸。假芝不同溶剂萃取物对人结肠癌细胞HCT-116和人肝癌细胞HepG2增殖具有抑制作用。     

1株云南楚雄野生香菇菌株的分离鉴定及袋料栽培方法研究

以云南楚雄地区的1株野生香菇为研究对象,开展了菌种的分离与鉴定,测定了不同温度、pH 、碳源、氮源、无机盐对菌株菌丝体生长情况的影响;同时以杂木屑、玉米芯等农废资源为主要基质,进行了野生香菇菌株的袋料驯化栽培。结果表明：结合形态和ITS分子鉴定,菌株鉴定为香菇属真菌;生物学特性实验发现该野生香菇菌丝体生长最适温度为30 ℃,最适pH值为6.0,最佳碳源、氮源分别为玉米粉、蛋白胨,最适无机盐为氯化钙与硫酸镁;以60.0%杂木屑添加30.0%玉米芯组成的袋料基质栽培效果最好,生物转化率达到了41.49%。     

一株野生平菇的鉴定及营养生长条件研究

利用ITS方法和进化树构建对1株自分离的野生侧耳属真菌进行了分析鉴定,通过单因素试验研究了影响该真菌菌丝生长的环境和营养条件.结果表明:经鉴定,该侧耳属真菌为平菇,宁强平菇菌株与其他平菇菌株亲缘关系远,自分离和选育的镇巴平菇和宁强平菇亲缘关系较远.该平菇菌丝生长的最佳碳源为蔗糖,最佳氮源为蛋白胨,生长的最佳pH在6.0～6.5,最适温度25℃,最佳碳氮比10:1.     

2株耐高温野生柱状田头菇的鉴定及系统发育地位研究

为了鉴定2株从四川省成都市法国梧桐树干上采集到的耐高温野生大型真菌,为其开发利用与驯化栽培奠定基础。在形态学特征观察的同时提取了子实体基因组总DNA,并对其模板进行ITS序列的扩增、测序及系统发育地位分析,并将形态学特征和系统发育地位结合来鉴定其准确分类。结果表明:从形态学上可初步鉴定2个菌株均为伞菌目(Agaricales)球盖菇科(Strophariaceae)田头菇属(Agrocybe)大型真菌;系统发育地位研究进一步确定2株野生大型真菌为柱状田头菇。结合形态学和分子生物学的方法能准确对柱状田头菇进行分类和鉴定,能显著提高大型野生真菌鉴定的准确率。     

盘龙参内生真菌多样性及其拮抗作用研究

为研究盘龙参内生真菌的多样性,并筛选具有抑菌活性的内生真菌。通过组织分离法分离重庆合川野生盘龙参内生真菌,利用ITS序列分析进行其多样性研究,并选用3种重要农作物病原菌进行平板对峙试验,最后对拮抗效果较好的菌株进行鉴定。结果表明:从盘龙参的根、茎、叶和花序中共分离出内生真菌48株,从中挑选出17株代表菌株,经ITS序列分析其分属于10个属,其中假埃希氏菌属真菌Pseudallescheria minutispora对番茄灰霉病菌有较好的拮抗作用,抑菌带达7.1 mm。本研究为盘龙参内生真菌的开发利用提供了基础资料,首次在国内详细描述了P. minutispora的形态学特征,为P. minutispora的分类鉴定提供依据。