应用正交试验优化猪细小病毒N株在IBRS-2细胞转瓶培养

利用正交试验对猪细小病毒(PPV)N株在IBRS-2细胞转瓶培养中的培养条件进行优化,为PPV N株弱毒疫苗的大量培养工艺提供参考.设细胞培养液pH值(7.0、7.2和7.4)、接毒时间(0、24和48 h)、接毒剂量(0.10％、1.00％和10.00％)、收毒时间(48、72和96 h)等因子和水平.结果表明,PPV N株转瓶培养的最佳培养条件组合为细胞培养液pH值7.2,采用同步接毒,接毒剂量为0.10％,收毒时间为接毒后96 h.其中收毒时间是影响PPV N株毒价的最主要因素.     

应用正交试验优化猪细小病毒N株在IBRS-2细胞转瓶培养

利用正交试验对猪细小病毒(PPV)N株在IBRS-2细胞转瓶培养中的培养条件进行优化,为PPV N株弱毒疫苗的大量培养工艺提供参考。设细胞培养液pH值(7.0、7.2和7.4)、接毒时间(0、24和48 h)、接毒剂量(0.10%、1.00%和10.00%)、收毒时间(48、72和96 h)等因子和水平。结果表明,PPV N株转瓶培养的最佳培养条件组合为细胞培养液pH值7.2,采用同步接毒,接毒剂量为0.10%,收毒时间为接毒后96 h。其中收毒时间是影响PPV N株毒价的最主要因素。     

应用正交试验优化猪细小病毒N株在IBRS-2细胞转瓶培养（英文）

利用正交试验对猪细小病毒(PPV)N株在IBRS-2细胞转瓶培养中的培养条件进行优化,为PPV N株弱毒疫苗的大量培养工艺提供参考。设细胞培养液p H值(7.0、7.2和7.4)、接毒时间(0、24和48 h)、接毒剂量(0.10%、1.00%和10.00%)、收毒时间(48、72和96 h)等因子和水平。结果表明,PPV N株转瓶培养的最佳培养条件组合为细胞培养液p H值7.2,采用同步接毒,接毒剂量为0.10%,收毒时间为接毒后96 h。其中收毒时间是影响PPV N株毒价的最主要因素。     

猪圆环病毒Ⅱ型和巨噬细胞对体外培养仔猪淋巴细胞白介素-6和白介素-10及其受体表达的影响

选取5头猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)血清抗体阴性的普通断奶仔猪,无菌取其脾脏制成单细胞悬液后,分设淋巴细胞(L组)、淋巴细胞+PCV2(L+V组)、淋巴细胞+巨噬细胞(L+M组)和淋巴细胞+巨噬细胞+PCV2(L+M+V组)4组进行体外培养。分别在培养后0 h、6 h、12 h和24 h收获淋巴细胞及其上清液。用ELISA检测上清液中猪淋巴细胞白介素-6(IL-6)和白介素-10(IL-10)的含量,用RT-PCR检测淋巴细胞中IL-6、IL-6R、IL-10和IL-10RmRNA的表达。结果显示:与L组相比,L+V组中IL-6的含量在攻毒后24 h显著升高(P0.05);PCV2在攻毒后12 h对IL-6RmRNA的表达呈显著抑制(P0.05);PCV2在攻毒后6 h显著促进IL-10的表达(P0.05)。上述结果表明,PCV2能促进淋巴细胞中IL-6和IL-10的表达;而巨噬细胞能抑制PCV2对淋巴细胞中IL-6表达的上调作用,同时协同PCV2促进淋巴细胞中IL-10及其受体持续性高表达,导致持续的免疫抑制,在PCV2的致病过程中扮演重要角色。     

实验性鸡马立克氏病免疫病理学研究 Ⅲ:中枢免疫器官病理形态学观察

本试验对健康接种京毒—1号MD强毒鸡和免疫后接种MD强毒鸡的中枢免疫器官进行了病理组织学动态观察;并对健康攻毒后30～40天雏鸡的法氏囊进行了组化染色和超微结构的观察。结果表明:实验性鸡马立克氏病时中枢免疫器官的病理组织学变化主要表现为淋巴滤泡或小叶的萎缩、淋巴细胞大量变性、坏死和网状细胞活化增生,法氏囊中还可见到大量腺腔和囊腔的出现及间质中大量带有T淋巴细胞标志的淋巴样细胞的浸润。法氏囊滤泡超徽结构的变化,主要是淋巴细胞的退行性变化,     

实验性鸡马立克氏病免疫病理学研究 Ⅴ:免疫器官中T淋巴细胞的动态变化

本研究对健康和免疫后接种京毒—1号MD强毒鸡中枢免疫器官中ANAE~+T淋巴细胞和淋巴细胞总数的动态变化进行了观察。结果表明:健康攻毒组免疫器官中的淋巴细胞总数在攻毒后明显减少。T淋巴细胞在攻毒后15天以前保持在较高的水平,之后明显下降;免疫攻毒组免疫器官中淋巴细胞总数减少发生的晚而轻微,而ANAE~+T淋巴细胞在攻毒后则持续性高于健康对照组。     

新城疫F48E9病毒体外诱导的鸡T淋巴细胞程序性死亡

 应用流式细胞仪及DNA琼脂糖凝胶电泳技术研究了我国鸡新城疫标准强毒F48E9株体外诱导鸡T淋巴细胞的程序性死亡现象。同时,对其灭活毒以及从该毒株提取的囊膜蛋白诱导鸡T淋巴细胞的程序性死亡现象进行了观察,并以健康SPF鸡胚尿囊液作为对照。结果发现,F48E9株及其灭活毒体外均可诱导鸡T淋巴细胞发生程序性死亡,而从病毒中提取的囊膜蛋白及SPF鸡胚尿囊液无此特性。新城疫F48E9株体外诱导鸡T淋巴细胞程序性死亡这一现象初步表明,新城疫强毒F48E9株感染鸡T淋巴细胞数量的减少和功能的降低以及由此所致的感染鸡免疫功能的降低可能和病毒诱导鸡T淋巴细胞发生程序性死亡有关。     

实验性鸡马立克氏病免疫病理学研究 Ⅱ:外周血液ANAE~+T淋巴细胞的动态观察

本研究对京毒—1号马立克氏病(MD)强毒接种鸡外周血液中的ANAE~+淋巴细胞及其亚群进行了动态观察。结果表明,感染鸡外周血液的ANAE~+T淋巴细胞总数持续性增高,但这主要是ANAE~+细颗粒型T淋巴细胞亚群显著增加的结果,而代表辅助性T淋巴细胞的ANAE粗颗粒淋巴细胞则处于较低的水平。同时代表B淋巴细胞的ANAE~-淋巴细胞的变化一直未达到有统计学意的义的水平。从而提示,一方面马立克氏病的免疫方式主要是细胞免疫;另一方面鸡马立克氏病时外周血液淋巴细胞的增殖具有多重含义。     

猪流行性腹泻病毒SHpd/2012株侵染Vero细胞特性分析

为了探究PEDV(猪流行性腹泻病毒)流行毒株SHpd/2012侵染细胞的特性,研究采用IFA(间接免疫荧光)及绘制病毒一步生长曲线等方法,对感染PEDVSHpd/2012株后的Vero细胞(非洲绿猴肾细胞)病变过程进行研究。结果发现,CPE(细胞病变)主要表现为细胞肿胀、变圆、皱缩、聚集成合胞体甚至从培养瓶壁大量脱落。IFA结果显示,接毒后12h病毒开始增殖,在接毒后36h时感染细胞数量最多,其后病毒增殖速度逐步下降,60h时趋于平稳。病毒一步生长曲线结果显示,SHpd/2012株感染细胞后24~60h的毒价一直处于较高水平,60h后开始下降。此外,本研究成功克隆并真核表达了PEDV S蛋白,为研究PEDV与受体蛋白的互作及病毒的致病机制奠定基础。     

干扰素对猪伪狂犬病毒增殖的影响

为了探讨干扰素(IFN)的抗病毒机制,构建pcDNA3.1-IFNα、pcDNA3.1-IFNβ、pcDNA3.1-IFNγ3个重组表达载体,分别转染PK15细胞,并以pcDNA3.1空载体作为对照(NC),24 h后以感染复数(MOI)为1接种猪伪狂犬病毒(PRV)HNJY株,然后分别在接毒后24、36、48 h收细...     

实验性鸡法氏囊病的病毒在体内分布及其消长规律研究

本实验用免疫酶组化法分析雏鸡接种ＩＢＤＶ后，病毒在体内分布和病理变化，接种后６，１２，２４，４８，７２，９６，１２０，１４４，１６８，１９２，２１６，２４０小时扑杀，每次扑杀５只。对照组雏鸡与实验组同步扑杀，每次扑杀３只。结果表明：雏鸡感染ＩＢＤＶ后，要从其法氏囊，胸腺，脾脏，盲肠扁桃体，哈德氏腺，肝脏，肾脏，腺胃，小肠，盲肠和肺脏等器官检出ＩＢＤＶ。     

禽网状内皮组织增殖病的组织病理学和超微结构的动态变化

一日龄雏鸡腹腔接种禽网状内皮组织增殖病病毒(REV),观察感染后不同时期肝、脾、心、脑、胸腺、腔上囊、腺胃、十二指肠、盲肠、胰腺和性腺等器官组织的肉眼,组织学和超微结构的变化。根据组织病理学和超微结构检查表明:禽网状内皮组织增殖病(RE)的典型病变是实质细胞坏死和网状细胞增生。本病的靶器官主要是肝脏,其次是心、脾、腺胃、腔上囊、胰腺和性腺等。本病增生的网状细胞,通过光镜和电镜观察,能区别于鸡马立克氏病和淋巴性白血病。此外REV可导致雏鸡发生生长抑制和腔上囊萎缩,因此对病畜的增重和其它禽病的免疲预防具有较大的影响。     

鸡传染性法氏囊病的组织病理学及超微结构变化的研究

本研究采用40日龄自然感染传染性法氏囊病病鸡20只,进行了组织病理学和超微结构检查。组织病理学变化包括法氏囊、脾和胸腺的淋巴细胞坏死,坏死部位有异嗜性白细胞浸润以及巨噬细胞和网状细胞增生、滤泡之间水肿、肾病及病毒性脑脊髓炎等。超微结构变化的特征是淋巴样组织坏死,表现为电子密度增加,核的染色质边移。网状细胞和巨噬细胞出现很多约55nm的呈结晶状排列、周围无囊膜的病毒颗粒,有些自噬空泡中也含有病毒颗粒。肾远曲小管的微绒毛丧失或数目减少,核浓缩或溶解,靠近肾小管管腔的细胞浆中有很多自噬空泡。     

荔枝贮藏保鲜技术的研究

作者根据多年荔枝保鲜中小批量试验的结果,总结出荔枝保鲜的新方法。在低温、高湿、气调的贮藏环境下,不用药物防腐可使荔枝保鲜40天,商品率达97.23%。并从解剖果皮形态结构入手,应用显微技术探明荔枝果皮结构特殊,果皮龟裂片突起部位有长管细胞与海绵层中的输导组织连接,与皮孔相通,而该部位极易失水褐变。所以一般果实褐变始于果皮突起部分。     

葡聚六糖诱导后黄瓜幼苗细胞内Ca2+水平变化的细胞化学研究

采用改进的焦锑酸钙细胞化学方法 ,探讨了葡聚六糖诱导后Ca2 在黄瓜幼苗细胞中超微结构定位变化动态。结果表明 ,在正常情况下 ,黄瓜幼苗的细胞壁和细胞间隙存在大量Ca2 。葡聚六糖诱导后2h,细胞壁和细胞间隙Ca2 沉淀物明显减少 ;诱导后4h ,细胞壁和细胞间隙只偶尔能看到有少量Ca2 沉淀物 ,细胞质中Ca2 沉淀物增多 ;诱导后7h ,Ca2 又重新流回细胞壁和细胞间隙     

Development of a human adaptive immune system in cord blood cell-transplanted mice

Because ethical restrictions limit in vivo studies of the human hemato-lymphoid system, substitute human to small animal xenotransplantation models have been employed. Existing models, however, sustain only limited development and maintenance of human lymphoid cells and rarely produce immune responses. Here we show that intrahepatic injection of CD34+ human cord blood cells into conditioned newborn Rag2-/-gammac-/- mice leads to de novo development of B, T, and dendritic cells; formation of structured primary and secondary lymphoid organs; and production of functional immune responses. This provides a valuable model to study development and function of the human adaptive immune system in vivo.     

不同日龄鸡呼吸道黏膜中IgA分泌细胞的分布规律

目的 了解鸡呼吸道黏膜不同时期的免疫状态。方法 选择海兰白鸡鸡胚(18、20 日龄)及不同日龄(1、4、7、14、21、35和56 日龄)雏鸡的鼻、喉、气管和肺脏样品,利用免疫组织化学方法研究IgA⁺分泌细胞的出现、定位分布及数量变化过程。结果 呼吸道各个器官黏膜中胚胎时期均没有IgA⁺细胞出现,鼻和肺脏中1日龄时出现,喉黏膜中4日龄时出现,而气管黏膜中7日龄时才出现。随着日龄增长,各器官呼吸道黏膜中IgA⁺细胞数量均逐渐增加。鼻黏膜以及肺脏初级支气管和次级支气管交叉处4日龄时较早地形成淋巴聚集物,喉黏膜中7日龄时形成,气管黏膜中35日龄时形成。在这些淋巴聚集物中IgA⁺细胞均主要分布于淋巴聚集物的外周。35日龄时,在鼻、喉和气管黏膜固有层以及上皮内均存在较多的IgA⁺细胞,从而能够更有效和直接地分泌SIgA,执行黏膜免疫功能。56日龄时,4种器官的呼吸道黏膜中IgA⁺细胞的数量达到峰值,并在黏膜底部形成生发中心,具有了黏膜相关性淋巴组织的典型特征,从而更有效地执行黏膜免疫功能。结论 鸡呼吸道黏膜中IgA⁺细胞的分布和数量均呈现日龄相关性变化,并且在35日龄时,鼻、喉、气管和肺脏中IgA⁺细胞数量和分布部位均达到一定规模,能够为呼吸道黏膜提供免疫保护。     

疑似鸭新型病毒性传染病在山东的流行情况初步调查及病理学观察

自2010年8月份以来,一种疑似鸭新型病毒病在山东迅速流行,给山东养鸭业造成了巨大损失。为了解本病在山东的流行状况,对临床典型病例临诊症状及剖检病变进行了详细研究,并对其组织器官进行病理组织学观察。结果表明:山东商品蛋鸭、肉种鸭和商品肉鸭均有发病,许多区域的鸭群发病率达100%;流行广、传播快、发病急、发病率高、药物治疗无效、病程长(2～3周)及死淘率(6%～10%)不是很高是该病流行病学的基本特征;临诊主要表现发热、拉稀、采食迅速减少、产蛋严重下降及神经症状;回肠中部黏膜卵圆形肿胀、脾脏灶状坏死、卵泡及输卵管萎缩、肝变性肿胀或出血及心内外膜出血为其主要剖检病变;病理组织学变化主要表现消化道急性卡他性炎症及局部淋巴组织显著增生,心、肝、肾、胰腺变性坏死或出血,脾脏、法氏囊淋巴组织坏死,以及轻度病毒性脑炎。     

Pyrimidine starvation induced by adenosine in fibroblasts and lymphoid cells: role of adenosine deaminase

In the presence of 10(-4) to 10(-5) molar adenosine, established cell lines of fibroblastic or lymphoid origin die of pyrimidine starvation. Less than lethal concentrations inhibit cell growth. Over a broad concentration range, the effects of adenosine are prevented by providing a suitable pyrimidine source. We suggest that the recently described immune deficiency disease associated with absence of adenosine deaminase may be the result of pyrimidine starvation induced by adenosine nucleotides in cells of the lymphoid system.