对脑心肌炎病毒的最新认识

近年来，在北美和欧洲大陆的一些国家流行和出现了一种引起猪繁殖障碍和呼吸道疾病的新猪病，即猪蓝耳病（BED），引起了这些国家农业行政部门和猪病学者的重视和关注，并随即对该病进行了较为系统的研究。在对BED研究的同时，带动和促进了脑心肌炎病毒（EMCV）的研究，其中几个实验室的研究结果使人们对EMCV有了新的认识。虽然研究还不尽完善且有些结果尚待证实，但对EMCV更清晰的认识正在形成。本文旨在介绍这些新的认识IEMCv与猪自危隐碍据Dea等（1991）报道，自1989年以来，加拿大魁北克的许多猪场各种年龄的母猪接连发生严重…     

脑心肌炎病毒研究进展

脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditis virus,EMCV)是一种传播广泛、侵犯多系统的病毒性传染因子。可自然感染啮齿动物、非人灵长类动物和猪。猪自然感染EMCV可造成突然死亡和实质器官的广泛病理损伤,母猪感染还可造成繁殖障碍。     

不同消毒剂对PRV、PPV和TGEV的灭活效果试验

为了确定癸甲溴铵-碘溶液消毒剂和癸甲溴铵消毒剂对猪主要疫病病原如猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病病毒(PRV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的灭活效果,通过细胞观察法,用不同浓度的癸甲溴铵-碘溶液消毒剂和癸甲溴铵消毒剂对PRV、PPV和TGEV进行灭活来观察其灭活效果。结果表明,癸甲溴铵-碘溶液和癸甲溴铵溶液对细胞的最大无毒剂量分别为1∶80和1∶10。1∶320的癸甲溴铵-碘溶液消毒剂,1∶80的癸甲溴铵消毒剂与相应浓度的中和剂的反应产物已无毒副作用。癸甲溴铵-碘溶液消毒剂1∶800稀释时可使PRV TCID₅₀降低5个滴度,TGEV TCID₅₀降低4个滴度;癸甲溴铵消毒剂稀释到1∶400时,可使PRV和TGEV的TCID₅₀均降低约3个滴度。两种消毒剂对PPV的灭活效果均不理想。     

猪源脑心肌炎病毒GXLC株对小鼠的致病性试验

为研究猪源脑心肌炎病毒(EMCV)GXLC株对小鼠的致病性,将其接种4周龄健康BALB/c小鼠,观察临床症状,检查病理变化,测定心重/体重比值,检测心脏、脑、脾脏组织及血清中病毒含量,检测心脏、脑、脾脏组织中细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA表达水平及血清中IL-1β、TNF-α蛋白含量。结果显示,感染小鼠出现明显的临床症状,感染后第4天开始死亡,第5~7天死亡达到高峰;心脏、脑出现典型的大体病理变化和组织病理学变化,心重/体重比值显著升高、组织病理学炎症分值显著增加;感染后第1天即可在心脏、脑、脾脏及血清中检测到大量病毒,直至第14天仍能检测到病毒;血清中IL-1β、TNF-α蛋白含量显著升高,心脏、脑、脾脏组织中IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA表达水平显著上调,而且细胞因子表达的高峰期与出现明显临床症状、严重病理损害及死亡高峰期密切相关。结果表明,猪源EMCV GXLC株对小鼠具有高度致病性,IL-1β、TNF-α、IL-6等促炎细胞因子在EMCV对小鼠的致病机制中发挥重要作用。     

脑心肌炎病毒单克隆抗体的制备与鉴定

为了制备脑心肌炎病毒(EMCV)的单克隆抗体,并对其进行鉴定。应用杂交瘤细胞技术,将灭活EMCV免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,HAT选择培养、间接ELISA法筛选和多次克隆化,筛选出稳定分泌抗猪EMCV的杂交瘤细胞株,并对其分泌的单克隆抗体进行了亚型、效价、特异性和细胞株染色体核型的分析。结果获得了1株能分泌抗EMCV单克隆抗体的细胞株,命名为EMCV Y1G9,其分泌的抗体亚型为Ig G2b类;腹水效价可达3.2×104;细胞株的染色体核型分析结果是染色体众数为92±2,单抗的特异性也较好。制备出了具有良好特异性和敏感性的抗EMCV的Mc Ab,为建立EMCV的特异性检测方法及该病的防制奠定了基础。     

脑心肌炎病毒灭活疫苗佐剂的筛选及其效力评价

采用ISA201、ISA15A、GEL、CP940和1313佐剂分别与脑心肌炎病毒(EMCV)灭活抗原混合,配制成5种疫苗,采用BALB/c小鼠进行免疫保护试验。结果显示,5种佐剂疫苗对小鼠无明显不良反应,均能够诱导机体产生抗EMCV特异性ELISA抗体、中和抗体和淋巴细胞增殖反应,其中ISA15A、ISA201和GEL佐剂组抗体水平和淋巴细胞增殖转化刺激指数都显著高于抗原对照组(P0.01),而且,ISA15A佐剂组免疫应答反应高于ISA201和GEL佐剂组(P0.05)。采用EMCV强毒攻击,ISA15A、ISA201和GEL佐剂组免疫保护率均达90%,表明用ISA15A、ISA201和GEL这3种佐剂配制的EMCV灭活疫苗具有较高的免疫疫保护效力,为该病灭活疫苗研制奠定基础。     

10种消毒剂对非洲猪瘟病毒的灭活效果

为探究常见消毒剂对非洲猪瘟病毒(ASFV)的灭活效果,本试验于体外检测了10种市售消毒剂对生长在猪肺泡巨噬细胞中ASFV的灭活效果。进而用3种消毒剂对曾经暴发非洲猪瘟(ASF)的废弃猪场进行环境消毒,并用荧光定量PCR方法验证其可靠性。结果显示,在各消毒剂对细胞的安全浓度下,次氯酸不具有灭活ASFV的作用;过硫酸氢钾复合物作1∶200稀释后,作用0.5 h能完全灭活ASFV;二氯异氰脲酸钠粉和苯扎溴铵稀释800倍后,能在0.5 h内有效灭活ASFV;其他消毒剂在其安全稀释度的浓度下,0.5 h内能完全灭活ASFV。本试验可为养殖场防控ASFV的感染提供消毒剂筛选的参考依据。     

脑心肌炎病毒及其蛋白结构和功能研究进展

脑心肌炎病毒(EMCV)是一种重要的人畜共患病病原,高危感染动物是猪,自然宿主是啮齿动物,人也可以感染这种病毒。也有研究报道,病毒可分解为前体蛋白P1、P2、P 3和L蛋白,最终切割成11个蛋白终产物,其中VP1蛋白存在主要抗原表位,具有良好的中和作用。目前尚不能阐明病毒感染后的发病机制,宿主感染病毒的影响因素等。因此,对病毒特性进行的研究有助于对该病的预防及控制,对病毒基因组及它所编码蛋白的结构与功能的研究对新型疫苗及动物机体的抗感染免疫机制的研究有重要的生物学作用。论文综述了脑心肌炎病毒基因组结构及其编码蛋白的结构和功能。     

脑心肌炎疫苗研究进展

脑心肌炎主要是由脑心肌炎病毒引起的一种急性传染病,危及多种动物和人,对人类生命健康和经济发展造成了较大的危害。国外对于该病已经有了有效的疫苗,对于该病毒的研究也主要集中在病毒的致病机制方面。国内还没有研制出安全有效的疫苗,而须采用进口疫苗,致使免疫猪的代价太大,因而难以推广。随着以疫苗免疫为主的防控措施逐渐受到关注,基因工程疫苗成为脑心肌炎疫苗研究的热点。论文就脑心肌炎疫苗的应用现状和新型疫苗的研发情况进行综述。     

用动物模型检验消毒剂对对虾白斑综合征病毒的灭活效果

以克氏原螯虾为动物模型，检验消毒剂对虾白斑综合征病毒（WSSV）的灭活效果。将病毒液分别与不同浓度的消毒剂37℃作用2h，再感染螯虾，结果显示，40μg/ml和60μg/ml的特种双链季铵盐络合碘能有效灭活病毒，显著降低接种螯虾的死亡率，80μg/ml的该药能完全灭活病毒。相同浓度的该药与二溴海因，溴氯海因，有机氯类相比，所接种螯虾的平均死亡时间前者较后者长0．9－1．2d，显示了较好的消毒效果。     

脑心肌炎病毒先导蛋白结构与功能研究进展

脑心肌炎病毒(EMCV)可感染人和多种动物,其基因组先导蛋白编码区是比较保守的区域之一,含有两种高度保守的功能域,即锌指基序和酸性结构域。研究表明,先导蛋白基因组具有一定的容纳外源基因片段的能力,同时先导蛋白与病毒复制、干扰素产生以及细胞凋亡等均有关系。论文综述了EMCV先导蛋白结构与功能的研究进展。     

猪源脑心肌炎病毒单克隆抗体研制与免疫学特性测定

利用纯化灭活的猪源脑心肌炎病毒(EMCV)免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤细胞技术,研制获得4株能稳定分泌抗EMCV抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1D1、2A2、2B6和4E2。经ELISA测定,细胞培养上清中抗体效价分别为1∶1 600,1∶6 400,1∶6 400和1∶3 200,小鼠腹水抗体效价分别为1∶1.63×106,1∶3.28×106,1∶1.13×106和1∶5.63×105。1D1和2A2单抗亚类为IgG1,2B6和4E2单抗亚类为IgG2b,轻链均为κ型。Western blot结果表明,1D1、2A2和4E2能特异性识别病毒的VP1蛋白,2B6能特异性识别病毒的VP2蛋白。间接免疫荧光试验证明,4株单抗具有良好的特异性,均能识别EMCV。本研究获得的4株特异性单抗,将为EMCV诊断方法的建立和病毒蛋白功能的研究奠定基础。     

不同浓度甲醛对几种禽用疫苗病毒灭活效果的研究

为了探究不同浓度甲醛对几种常用禽类疫苗病毒的灭活效果,分别使用浓度为0．1％、0．15％、0．2％、0．25％、0.3％甲醛溶液对鸡新城疫病毒（NDV LaSota株）、禽流感病毒（AIVH9亚型HL株）、减蛋综合征病毒（EDSV AV127株）3种病毒进行灭活试验,观察其灭活前后的效价变化。以便找到各种病毒用甲醛灭活的最佳浓度。结果：NDV在37℃条件下用浓度为0．1％、0．15％、0．2％、0．25％、0．3％甲醛溶液灭活16～18h效价分别下降了2、2、3、4、5个滴度;AIV分别下降了1、2、3、3、4个滴度;EDSV分别下降了1、1、2、2、3个滴度。其中3种病毒全部被灭活。以上结果表明：NDV在灭活时选用浓度为0．1％～0．15％的甲醛溶液为最佳：在灭活AIV时选用浓度为0．1％的甲醛溶液为最佳;灭活EDSV时选用甲醛溶液最佳浓度为0．1％～0．15％。     

脑心肌炎病毒检测方法研究进展

脑心肌炎由脑心肌炎病毒(EMCV)引起,主要导致猪脑炎、心肌炎及母猪的繁殖障碍,该病的发生与流行严重影响我国养猪业的发展。论文综述了各种EMCV检测方法及其优缺点,为更有效的EMCV检测方法的建立提供参考。     

犬瘟热病毒的静水压灭活

以250MPa的静水压力对犬瘟热病毒（CDV）处理30min之后，CDV被灭活，由其制成的灭活疫苗诱导犬产生中和抗体的能力明显优于传统的福尔马林灭活疫苗，免疫保护率达90％。电镜观察显示，经不同程度静水压力处理后的CDV粒子均发生变形，表面呈现凸起，但CDV H基因部分片段的RT－PCR扩增结果揭示，高达510MPa的静水压力作用30min也未能使其基因片段受到破坏。     

猪脑心肌炎的病原体和诊断

195 8年 ,在巴拿马首次诊断出猪脑心肌炎病毒 (en-cephalomyocarditis virus,EMCV)感染为猪的致死性疾病的病因〔1〕。随之 ,在比利时〔2〕、意大利〔3,4〕、美国〔5〕、加拿大〔6〕、日本 〔7〕、昆士兰 〔8〕、韩国 〔9〕等国家相继发生了猪脑心肌炎。以哺乳小猪心肌炎和高死亡率 ,以及母猪繁育障碍为主征 ,给养猪业造成了极大的损失。1　病原体猪脑心肌炎病毒 (EMCV)是引起猪脑心肌炎的病原体 ,它是一小的二十面体对称的单股正链 RNA病毒〔1 0〕 ,其大小为 18～ 30 nm,基因组长度为 7.8kb,属于小核糖核酸病毒科(Picornaviridae)心病…     

三种兽用消毒剂对伪狂犬病病毒的灭活效果研究

为了解兽用消毒剂对DNA病毒的灭活效果,本研究选择了猪伪狂犬病病毒为模式病毒开展消毒效果评估,指导消毒灭源工作。经对三种兽用消毒剂在不同浓度、不同作用时间和不同温度下对伪狂犬病病毒的杀灭效果进行实验室评价,结果显示,在20℃和37℃条件下,0.2%戊二醛癸甲溴铵溶液作用5 min, 0.05%的碘酸混合溶液作用10 min和有效氯为300 mg/L的二氯异氰尿酸钠溶液作用20 min,均可完全灭活伪狂犬病病毒;在4℃条件下,0.2%戊二醛癸甲溴铵溶液作用30 min,有效氯为300 mg/L的二氯异氰尿酸钠溶液作用40 min仍不能完全灭活伪狂犬病病毒。表明按生产厂家说明书推荐的病毒类和疫源地消毒浓度,在常温下和高温环境下,碘酸混合液、戊二醛癸甲溴铵溶液和二氯异氰尿酸钠均可有效地灭活伪狂犬病病毒,灭活率均在99.99%以上;而低温状态下,戊二醛癸甲溴铵溶液和二氯异氰尿酸钠溶液的灭活效果有所下降,应予以重视,必要时需提高作用浓度。