猪、犬旋毛虫新生蚴免疫原性试验

将猪、犬旋毛虫新生蚴制备成免疫原,在小鼠体内进行免疫试验,免疫１周后攻击感染肌幼虫,３５日蝗检查肌幼虫的减虫率。结果表明,猪旋毛虫新生蚴的同源免疫和其对犬旋毛虫的交叉免疫减虫率分别为８３．１１％和７９．３９％,犬旋毛虫新生蚴的为８１．３７％和８０．６９％。结果揭示,旋毛虫新生蚴具有良好的免疫原性,同源免疫的减虫率比交叉免疫的高,猪旋毛虫新生蚴抗原对犬旋毛虫的交叉免疫与犬旋毛虫新生蚴抗原的同源免疫在减虫率上差异不显著。     

猪、犬旋毛虫交叉免疫原性的研究

通过在小鼠体内感染猪、犬旋毛虫肌幼虫50条，再用同源免疫和交叉免疫方法攻击感染旋毛虫肌幼虫200条，来检测其肌幼虫的减虫率。试验得到猪旋毛同源免疫的减虫率为87.47%，对犬旋毛虫的交叉免疫减虫率是86.47%，犬旋毛虫同源免疫的减虫率为83.70%，其对猪旋毛虫的交叉免疫是83.46%。试验表明：旋毛虫肌幼虫自然免疫具有较好的免疫保护作用，交叉免疫的保护率低于同源免疫。     

猪旋毛虫病免疫方法的研究

本试验比较了３日龄及７日龄旋毛虫成虫可溶性抗原的免疫原性，比较了不同佐剂对免疫效果的影响，观察了不同免疫途径对免疫效果的影响及疫苗的免疫持续期。结果表明，３日龄及７日龄成虫可溶性抗原免疫猪所诱导产生的免疫力接近，说明免疫原性基本一致。以白油—司班佐剂乳化抗原的免疫效果优于弗氏完全佐剂（ＦＣＡ）乳化抗原，其减虫率分别为８６．３乏％与７０．２２％２而且白油—司班佐剂苗的粘稠度适中，便于注射。免疫途径对免疫效果的影响，以成虫可溶性抗原经腹腔注射（ＩＰ）的免疫效果优于肌肉注射（ＩＭ）。疫苗保存于４℃６个月不影响其免疫效力。猪免疫接种成虫可溶性抗原疫苗后免疫持续期至少６个月。     

五种旋毛虫抗原对猪的免疫保护作用研究

本实验研究了旋毛虫肌幼虫可溶性粗抗原、排泄分泌抗原（ＥＳ）、表面抗原（ＳＡ）及成虫ＥＳ、ＳＡ５种抗原对猪的免疫保护作用。结果５种抗原对猪均具有一定程度的免疫原性，可诱导猪体产生对攻击感染的抵抗力（减虫率），其中肌幼虫粗抗原为５５．２０％；肌幼虫ＥＳ为４２．５６％，肌幼虫ＳＡ为７２．２１％；成虫ＥＳ为３２．９２％；成虫ＳＡ为４２．１７％。免疫５种抗原后用肌幼虫“Ｂ”抗原、新生幼虫可溶性抗原及成虫可溶性抗原进行ＥＬＩＳＡ检测，均可测出血清抗体应答反应，其中以相应抗原测出的抗体应答较强烈。免疫５种抗原后猪外周血液中Ｂ淋巴细胞减少，Ｔｈ及Ｔｓ增加，Ｔｈ／Ｔｓ比值降低，呈暂时的细胞免疫抑制现象。     

猪旋毛虫病疫苗后海穴免疫研究

本项目对猪旋毛虫病成虫可溶性抗原疫苗经后海穴免疫注射的效果进行了研究。大鼠经口感染旋毛虫肌幼虫后３或７ｄ剖杀，收集成虫。经超声粉碎、高速离心制备成虫可溶性抗原。将抗原与等体积ＦＣＡ乳化，按０．２５ｍｇ／头及０．５０ｍｇ／头的抗原量分别进行后海穴注射（ＡＰ）及腹腔注射（ＩＰ），免疫猪只，使之经受旋毛虫的实验室攻击感染及自然感染。结果表明，３日龄及７日龄成虫可溶性抗原的免疫原性基本一致。采用后海穴注射疫苗具有减少抗原用量、增强免疫效果的作用。免疫后猪血清抗体滴度增加，呈暂时的细胞免疫抑制现象。后海穴注射疫苗猪群保护率达１００％，增加一倍抗原量经腹腔注射的猪群保护率为７５．２６％。     

不同佐剂免疫原对猪施毛虫病的免疫保护作用比较研究

采用７日龄旋毛虫成虫可溶性抗原与弗氏完全佐剂，白油－司班佐剂，ＩＳＡ２０６佐剂和蜂胶佐剂乳化制备免疫原，对试验猪腹腔注射免疫３次，每次间隔７ｄ，每头猪的免疫剂量为０．５ｍｇ。最后一次免疫后７ｄ攻击感染旋毛虫肌虫２００条／ｋｇ体重。于感染后第３５ｄ和第１２０ｄ剖杀试验猪，用消化法检查计算每克肌肉的荷虫数。     

不同佐剂免疫原对猪旋毛虫病的免疫保护作用比较研究

采用７ 日龄旋毛虫成虫可溶性抗原与弗氏完全佐剂（ＦＣＡ） 、白油司班佐剂、ＩＳＡ２０６佐剂和蜂胶佐剂乳化制备免疫原，对试验猪腹腔注射免疫３ 次，每次间隔７ｄ ，每头猪的免疫剂量为０５ｍｇ。最后一次免疫后７ｄ 攻击感染旋毛虫肌幼虫２００ 条／ｋｇ 体重。于感染后第３５ｄ 和第１２０ｄ 剖杀试验猪，用消化法检查计算每克肌肉的荷虫数。结果４ 种佐剂免疫猪肌幼虫的减虫率分别为９６１２ ％ 、８７９７ ％ 、８９８４ ％ 和９５１５ ％ ，其中以ＦＣＡ 和蜂胶佐剂免疫组的保护作用最好。表明４ 种佐剂均具有免疫增强作用，而蜂胶佐剂在乳化程序、注射、价格及免疫增强作用等方面都优于其它佐剂，更具有开发应用前景。     

猪旋毛虫病疫苗的区域试验

在河南省某县一个猪旋毛虫病高发流行区进行了旋毛虫成虫可溶性抗原疫苗及灭活新生细虫疫苗的区域试验。免疫前用镜检法抽检某自然村商品猪２１头，查出有虫猪４头，感染率达１９．０５％。成虫可溶性抗原疫苗每头腹腔注射免疫０．５ｍｇ，间隔１０天作２次免疫；新生幼虫疫苗每头猪腹腔注射１０万条，同样间隔１０天作２次免疫。两种疫苗分别免疫猪８６及４４头。免疫后４－７个月内剖杀抽检免疫效果。共抽检未免疫自然感染对照猪４     

日本血吸虫谷胱甘肽S—转移酶小鼠免疫试验

用谷胱甘肽琼脂糖亲和层析柱纯化中国大陆株日本血吸虫成虫谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴ）。把纯化的ＧＳＴ结合福氏佐剂免疫了二批ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，获得了２９．５８～３２．７１％的减虫率和５２．９４～６８．１３％，粪便减卵率，ＥＬＩＳＡ试验表明免疫小鼠产生了体液免疫应答，免疫印迹试验（Ｗｅｓｔｒｎ Ｂｌｏｔｔｉｎｇ）显示日本血吸虫水溶性成虫抗原和ＧＳＴ抗原的２８、２８ｋＤ蛋白被免疫小鼠血清所识别。     

日本血吸虫谷胱甘肽S－转移酶小鼠免疫试验

用谷胱甘肽琼脂糖亲和层析柱纯化中国大陆株日本血吸虫成虫谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴ）。把纯化的ＧＳＴ结合福氏性剂免疫了二批达ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，获得了２９．５８～３２．７１％的减虫率和５２．９４～６８．１３％的粪便减卵率。ＥＬＩＳＡ试验表明免疫小鼠产生了体液免疫应答，免疫印迹试验（ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔｔｉｎｇ）显示日本血吸虫水溶性成虫抗原和ＧＳＴ抗原的２６、２８ｋＤ蛋白被免疫小鼠血清所识别。     

毛形线虫各隔离种保姆细胞形成时间的研究

通过对 4个毛形线虫隔离种保姆细胞形成时间的研究 ,发现分离自中国猪的旋毛形线虫和波兰猪旋毛形线虫 (Trichinella spiralis)在小鼠膈肌中出现保姆细胞的时间比较早 ,分别于感染第 16天和 18天出现 ,第 36天和 38天所有幼虫都已形成保姆细胞 ,而分离自犬的毛形线虫和熊的本地毛形线虫 (Trichinella nativa)出现保姆细胞的时间较晚 ,于感染第 2 0天和 2 2天出现 ,第 32天完全形成。结果表明 ,中国猪旋毛形线虫与波兰猪旋毛形线虫 ,犬毛形线虫与本地毛形线虫分别是同一旋毛虫隔离种     

Immunity in swine inoculated with larvae or extracts of a pig isolate and a sylvatic isolate of Trichinella spiralis

Inoculation of swine with a sylvatic isolate of Trichinella spiralis, designated T s nativa, resulted in low numbers of muscle larvae, compared with muscle larvae accumulation in swine inoculated with a pig type of T s spiralis. Despite low infectivity of T s nativa for swine, primary inoculation resulted in high levels of immunity against challenge infection with T s spiralis. This immunity was expressed in accelerated expulsion of challenge adults from the intestine and reduced numbers of muscle larvae. Pigs inoculated with T s nativa developed cellular and humoral responses similar to those in pigs inoculated with T s spiralis. However, in immunoblots, sera from pigs inoculated with T s nativa recognized additional proteins in muscle larvae excretory-secretory (ES) products, compared with sera from pigs inoculated with T s spiralis. Active immunization of pigs with ES products from T s nativa resulted in numerically higher, but not significantly different levels of immunity, compared with pigs immunized with ES from T s spiralis. The highest levels of immunity were obtained in pigs immunized with a T s spiralis newborn larval extract. The combination of ES products and newborn larval extract did not result in additive levels of immunity. These results indicate that the major immune effector response to Trichinella sp in pigs is against the newborn larvae, regardless of the genetic type of Trichinella sp.     

PAPS免疫微球快速诊断猪旋毛虫病的研究

应用新型的聚醛化聚苯乙烯（ＰＡＰＳ）载体微球与最佳的旋毛虫抗原共价交联制备成特异性强、敏感性高、重复性好的快速诊断试剂,应用于猪旋毛虫病的生前诊断。我们对旋毛虫各个发育期的虫体和分泌排泄抗原进行了分析研究,并以同一蛋白质浓度（０．６ｍｇ／ｍＬ）的成虫,新生幼虫、肌幼虫、成虫ＥＳ、肌幼虫ＥＳ、肌幼虫Ａ峰、肌幼虫Ｂ峰等七种抗原分别与ＰＡＰＳ载体微球共价交联制成各种快诊试剂,然后进行效果比较试验,其结果     

旋毛虫各隔离种对小鼠的感染性研究

比较研究了黑龙江省猪、犬旋毛虫及国际标准虫种旋毛形线虫(Trichinella spiralis)和本地毛形线虫(Trichinella nativa)对小鼠的感染性异同。结果表明，四者对小鼠的感染力存在着显著差异，猪旋毛虫和旋毛形线虫在小鼠体内的繁殖力指数(RCI)分别为121.01±7.80和149.86±7.47；而犬旋毛虫和本地毛形线虫的RCI分别为60.98±5.05和55.15±4.69。由实验结果可认为黑龙江省的猪旋毛虫相当于旋毛形线虫，而犬旋毛虫相当于本地毛形线虫。     

用DNA限制性片段长度多态性鉴定旋毛虫各隔离种

以旋毛虫国际标准虫种：旋毛形线虫（Trichinella spirlais）和本地长形线虫(Trichinella nativa）作对照,应用DNA限制性片段长度多态性（PELP）技术对黑龙江省猪、犬旋毛虫进行虫种鉴定。结果显示：猪旋毛虫和旋毛形线虫酶切图谱相同;犬旋毛虫和本地毛形线虫酶谱一致。结果提示,黑龙江猪旋毛虫为旋毛形线虫,犬旋毛虫为本地毛形线虫。     

A Trichinella murrelli infection in a domestic dog in the United States

Trichinella murrelli infection was diagnosed in a naturally infected Beagle bitch from VA, USA, where encapsulated larvae were found in histological sections of several skeletal muscles. A laboratory reared dog fed infected muscles resulted in viable muscle larvae that were subsequently infective to Swiss-Webster mice. Multiplex PCR using larvae from the experimentally infected dog demonstrated two distinct bands migrating at 127 bp and 316 bp which together are diagnostic for T. murrelli; the isolate was assigned the ISS code: ISS1608 by the International Trichinella Reference Centre. This is the first report of T. murrelli infection in a companion animal.     

旋毛虫各隔离种雌虫生殖能力的实验研究

本试验对旋毛虫各隔离种雌虫体外产新生幼虫能力进行了研究。结果显示，猪旋毛虫和旋毛形线虫(Trichinella spiralis)雌虫体外培养24h平均产新生幼虫数分别为66.00±7.34和76.20±7.57，而犬旋毛虫和本地毛形线虫(Trichinella nativa)分别是28.80±4.30和22.00±3.22，前者在雌虫体外产幼虫能力上明显高于后者。研究结果表明，黑龙江猪旋毛虫相当于旋毛虫形线虫，犬旋毛虫相当于本地毛形线虫。     

旋毛虫肌幼虫期胞外囊泡对小鼠免疫保护作用

本试验通过差速超速离心法获得旋毛虫肌幼虫期胞外囊泡(Trichinella spiralis muscle larvae extracellular vesicles,Ts-ML-EVs),经透射电镜观察、纳米颗粒追踪分析、流式细胞术和Western blot鉴定。选择6～8周龄的健康雌性BALB/c小鼠,随机分为4组,每组8只。试验设计为PBS对照组(PBS组)、佐剂对照组(PBS+佐剂组)、旋毛虫肌幼虫期排泄分泌产物免疫组(Ts-ML-ES+佐剂组)以及旋毛虫肌幼虫期胞外囊泡免疫组(Ts-ML-EVs+佐剂组),分别取相应抗原与佐剂等体积混合采用多点皮下注射方式免疫小鼠。首免后第2,4周各加强免疫1次,剂量不变。三免后2周,每只小鼠灌胃300条旋毛虫肌幼虫,灌胃后6 d每组取2只剖杀,统计旋毛虫成虫减虫结果;攻虫35 d后所有小鼠全部处死,计算肌幼虫减虫率。每次免疫前、攻虫前以及处死前眼眶采血收集血清并保存,统一进行ELISA分析。结果显示：成功获得Ts-ML-EVs,随着免疫次数增加,小鼠血清中特异性IgG、IgG1、IgG2a、IgA和IgE抗体水平均显著上升,在三免后2周达到...