红麻雄性不育系的选育和不育基因的ISSR分子标记

 红麻不育系的选育为红麻杂种优势的利用提供了新的途径。红麻雄性不育基因的分子标记，可用于优良不育系或保持系的选择。采用单株选择回交的方法进行不育系的选择，用BSA法进行ISSR引物的筛选。利用中国农业科学院麻类研究所红麻育种课题组在海南三亚发现的红麻不育株AT-1做母本分别与15-4，04K1做杂交，再用父本回交4次，选育出2个高度不育的不育系。用CTAB法提取红麻单株DNA，利用BSA法构建近等基因池—不育池和可育池，以近等基因池DNA为模板，进行ISSR引物的筛选，筛选出一条能在不育池和可育池间产生稳定差异带的ISSR引物U859。对不育系鉴定表明，不育系为质核互作型雄性不育，且不育性稳定。通过不育和可育单株对ISSR引物的鉴定表明，U859是与雄性不育基因连锁的ISSR分子标记。     

百日草细胞核雄性不育基因的RAPD标记研究

试验以百日草雄性不育两用系AB201中的不育株和可育株为供试材料,采用BSA法和RAPD技术,在64个随机引物中筛选与育性基因紧密连锁的分子标记,结果发现引物BE-05在DNA纯合可育池和杂合可育池中扩增出一条长约1 500 bp的特异谱带,在DNA不育基因池中未发现特异谱带,该标记在3个育性不同的DNA池之间表现稳定的差异。用建池的单株DNA进一步对这个引物进行RAPD分析,发现仍表现稳定的多态性,该标记与育性基因MS紧密连锁,命名为BE-051500。     

甘蓝型油菜细胞质雄性不育系9171A的选育

利用在891株行中发现的育性彻底质不育株与本行可育株授粉,将不育源保持下来,并通过自交、测交育成质不育两型系891AB(891AB的不育株无微粉,育性不受温度的影响)。再利用981AB的可育株作父本与具有可育胞质的5771R杂交,将质不育两型系891AB的不育基因导入可育胞质中,育成具有891AB不育基因的保质系9171B。利用9171B与891AB的不育株连续回交育成新质不育系9171A。新质不育系9171A育性彻底,育性不受温度影响。     

狼尾草属牧草资源的RAPD分析

利用RAPD分子标记技术对83份狼尾草属(Pennisetum)牧草资源(其中7株为“23A”不育系中的可育株)进行遗传多态性聚类分析。结果表明:①共筛选200个随机引物,其中10个引物对所有供试材料都能扩增出清晰的多态性条带,且重复性好;②83份材料可分为5类,其中7株23A不育系里的可育株与23A单独聚成一类,初步确定其为不育系23A的育性逆转株;③引物S1038(TCGCGGAACC)能扩增出“杂交狼尾草”的特异指纹图谱标记,为牧草品种杂交狼尾草的保护提供了分子鉴定基础。     

新型甘蓝型油菜核不育材料绵7AB-4-2农艺性状鉴定及分子检测

本实验对新型甘蓝型油菜核不育材料绵7AB-4-2与其姊妹系绵7AB-4—1进行农艺性状差异性及SSR引物上的多态性研究,并对绵7AB-4-2进行不育保持率及其与姊妹系绵7AB-4—1和其它不同来源不育材料进行测交和回交不育率进行研究,结果表明：绵7AB-4-2与其姊妹系7AB-4—1的农艺性状在0．05水平上差异不显著。绵7AB-4-2的可育株自交不育率可达60％以上,而姊妹系绵7AB-4—1的可育株自交不育率25％左右;与姊妹系绵7AB-4—1和其它9个不同来源的不育材料进行测交时,对同类型不育材料可保持不育率达90％以上,回交不育率在80％以上。绵7AB-4-2与姊妹系绵7AB-4-1在SSR引物a2、E10上存在条带上的差异。     

白菜型油菜细胞核雄性不育三系选育研究

在白菜型油菜细胞核雄性不育研究中,一般只能获得不育率50%的两型系.将两型系的相应保持株自交,自交子代100%可育的原两型系称杂合两型系;自交子代出现1/4不育株的原两型系称纯合两型系.用纯合两型系中的不育株,与杂合两型系内的可育株测交,可获得100%不育株的全不育系.全不育系与原父本回交,回交子代出现50%的可育株,所以把杂合两型系中的可育株称为临保系.用全不育系与恢复系测交,选育出强优势的杂种组合.     

利用cDNA-AFLP技术分析白菜核雄性不育两用系的表达差异

 利用cDNA AFLP技术 ,对白菜核雄性不育两用系可育株群和不育株群分析显示 :花蕾之间基因表达存在差异 ;莲座期叶片之间、开花期叶片之间和花茎之间基因表达无差异 ;叶片、花茎和花蕾之间基因表达存在差异。对开花期的小蕾、中蕾和大蕾分析显示 :10对引物中 ,1对在可育株中蕾和大蕾中扩增出 1条特异带 ,另 1对扩增出 1条在可育株中蕾中表达丰度高于不育株中蕾的条带 ,其余 8对未发现差异条带。对上述表达丰度有差异的基因进行Northern验证 ,结果与之一致 ,表明cDNA AFLP技术可以用于植物雄性不育基因表达差异的研究。     

茄子雄性不育株和可育株的胞质DNA和核DNA差异分析

以茄子(Solanum melongenaL)雄性不育株“正兴1号”(S)和可育株(F)的总DNA为模板,对60个随机引物进行了筛选,找到5个其RAPD(Random amplified polymorphic DNA,RAPD)扩增产物在茄子雄性不育系和对照材料间存在稳定差异的引物．将该5个引物同时扩增总DNA、核DNA和线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)．以总DNA为模板时得到多态性片段9个,以核DNA为模板时得到5个,以mtDNA为模板时得到9个．以总DNA为模板时得到的9个扩增片段中,有5个在总DNA和mtDNA中同时出现,而在核中没有出现,即认为来自mtDNA,这5个片段中,有4个来自可育株,1个来自不育株,说明不育株和可育株在mtDNA上存在差异;有4个片段同时出现在以总DNA和核DNA为模板的扩增中,但在以mtDNA为模板的扩增中却没有出现,认为是来自核DNA,这4个片段中,有3个来自不育株,一个来自可育株,说明可育株和不育株在核DNA上也存在差异．结果初步表明：新发现的茄子雄性不育可能是核质相互作用所引起．     

白菜核雄性不育两用系花蕾的mRNA差别显示及其cDNA差异片段分析

用mRNA差别显示技术对白菜核雄性不育两用系中不育株群与可育株群花蕾总RNA进行了比较分析.在6种反转录模板和20种差异随机引物共120种组合的选择扩增中共回收了18个cDNA差异片段,对其中6个cDNA差异片段进行Northern验证,获得了一个白菜核雄性不育两用系可育株群并在花蕾中特异表达的阳性差异片段,简称为B0302-4.Northern验证结果表明它在不育株中的表达受到了明显的抑制,其长度为463 bp.经GenBank BLAST查询,它与拟南芥第一条染色体上编码细胞色素P450的基因CYP86C4核苷酸序列有84.3%的同源性.     

白菜细胞核雄性不育两用系的性状比较分析

用比较分析的方法，对白菜核雄性不育两用系中不育株与可育株的植株性状、育性、花器结构和花粉扫描电镜形态等进行观察研究，结果表明：白菜核雄性不育两用系中不育株花粉败育彻底，不育株与可育株呈1：1分离，是一种稳定可靠的核雄性不育两用系；对不育株与可育株花蕾总蛋白进行了SDS-PAGE凝胶电泳，发现不育株与可育株都有各自的一条特异蛋白条带，分别命名为A-1和B-1，两者的表达量都比较高。     

光温敏雄性不育玉米9417雄穗幼穗期叶片叶绿体蛋白质差异分析

为了研究玉米"两用系"9417雄穗不育的分子机制,以玉米光温敏雄性不育系9417的不育和可育2种状态的植株为材料,利用SDS-PAGE、质谱和生物信息学等技术,对其幼穗分化敏感期叶片中叶绿体差异表达蛋白质组进行分离和鉴定。电泳图谱显示,光温敏雄性不育、可育株在雄穗分化发育敏感时期叶绿体表达蛋白至少存在4条显著的差异条带,其中No.1、No.2是可育株中存在而不育株缺失的条带;No.3、No.4是不育株存在可育株中缺失的条带。质谱分析共鉴定出4种蛋白质:①AOL_s00004g466、②luc7-like protein 3-like、③putative T3SS effector EspN2-2、④ABC transporter ATP-binding protein。可育株中No.1为假定蛋白,No.2蛋白的U1-snRNP成分在RNA的加工和修饰中起介导自身与帽结合蛋白相结合的作用;不育株中No.3蛋白具T3SS效应,No.4蛋白在膜上ATP结合区域具单向转运底物的作用。叶绿体出现差异蛋白质,可能与雄性败育、不育有关。     

杂交水稻寻杂29种子蛋白质组分的研究

 本研究用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析寻杂29单粒种子中清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白的亚基组成.SDS-PAGE表明,没有巯基乙醇(ME)时,谷蛋白以二硫键连接亚基呈高分子量形式存在.寻杂29和常规品种云-1比较,谷蛋白在溶解性,结构方面存在差异.寻杂29与其三系亲本,以及云-1比较,它们的种子盐溶蛋白在多肽组成和含量上存在明显差异.水稻种子盐溶蛋白的差异可考虑作为种子纯度判断的指标.     

芝麻隐性核不育系0176A不育株与可育株酯酶同工酶研究

以芝麻隐性核不育系0176A为材料,采用超薄层聚丙烯酰胺等电聚焦电泳法研究分析0176A酯酶同工酶(EST)谱带数量和活性强弱与其育性的关系。结果表明:在蕾期的叶片和花药中,0176A不育株与可育株EST的谱带数量和活性强弱均有一定的差异,即不育株叶片、幼蕾和开放花花药中EST条带数多于相应的可育株,在PI 5.18时可育株比不育株酶活性强。利用EST这种表达上的差异性,可为快速鉴别出芝麻不育株和伪杂种提供参考依据。     

萍乡显性核不育水稻不育株与可育株同工酶比较分析

对萍乡显性核不育水稻纯合不育株、杂合不育株和隐性可育株幼穗发育期的叶片、幼穗和花药中3种同工酶表达进行了比较分析，结果表明：叶片中，不育株（纯合与杂合）与可育株的酯酶（EST）、过氧化物酶（POD）、细胞色素氧化酶（COD）的同工酶酶谱未见差异，且在幼穗发育的不同时期也基本相同；幼穗中，不育株（纯合与杂合）与可育株的EST、POD、COD的同工酶酶谱在雌雄蕊形成期存在差异，与可育株的同工酶酶谱相比，不育株除在谱带的显色速度、颜色和带宽上存在差异外，在谱带数及其分布未见差异；在单核期花药中，不育株（纯合与杂合）比可育株多1条EST、少2条POD和2条COD同工酶带，在三核期也呈上述特征。表明水稻显性核不育基因在叶片中不表达、幼穗中部分表达和花药中充分表达，水稻显性核不育基因表达具有组织的时空和特异性。花药发育过程中基因表达程序的扰乱是引起花粉败育的最主要的原因。     

滇寻一号S繁殖技术及其相关性分析

 对温敏不育系滇寻一号S主要繁殖技术与产量作相关分析的结果表明:自交繁殖产量与抽穗期的温度呈正相关;与栽插密度(在100万苗/hm²以内)呈正相关;与氮肥施用量呈二项正态分布;提出在云南元谋的环境条件下繁殖以6月8日抽穗、密度100万苗/hm²,底肥450 kg/hm²碳酸氢铵,栽后 7 d施尿素150 kg/hm²为最好。     

“萍乡显性雄性核不育水稻”酯酶同功酶的研究初报

“萍乡显性雄性核不育水稻”是一种自然突变株,通过对可育株、不育株及珍A不育系的雄芯,雌芯及不同发育时期功能叶的酯酶同功酶进行一系列的比较研究,找出了酯酶同功酶各器官组织中的变化规律,发现了“萍乡核不育水稻”可育株与不育株的雄芯酯酶同功酶有明显的差异,还发现雌芯的酯酶同功酶尚无差异,功能叶未见差异。     

杂交油菜母本密度及可育株拔除技术对制种产量的影响

通过对优质丰产杂交油菜新品种黔油14号母本移栽密度及可育株拔除技术的研究,结果表明,处理A1B1(母本移栽密度7 500株/667m2、可育株采用挤浆识别拔除)制种产量最高(77.42 kg/667m2),处理A2B3(母本移栽密度5 625株/667m2、可育株采用看花识别拔除)制种产量最低(55.74 kg/667m2),极差为21.68 kg/667m2。可育株识别拔除技术间制种产量差异极明显,以挤浆识别拔除的处理(B1)平均产量最高(75.83 kg/667m2),分别较看花识别拔除处理(B3)和花蕾形态识别拔除处理(B2)增产33.95%和12.49%,均达极显著水平。     

水稻离体培养育性恢复突变的遗传学分析

通过自然突变、物理与化学方法处理和离体培养在珍珠粟〔８〕、水稻〔４〕、玉米〔７,９〕、小麦〔２〕等作物中诱发了育性恢复突变。范树国等和凌定厚等通过离体培养也获得了水稻育性恢复突变〔５,１０〕,但有关这些育性恢复突变体产生的原因、遗传特点、恢复能力以及如何在水稻育种生产中加以利用等问题则未见报道。通过组织培养的方法寻找新的恢复系,为杂交水稻生产提供新的恢源是这项研究的应用前景之一。１９９４年以来,笔者通过体细胞无性系变异获得了一些育性恢复突变材料并对其进行了恢保能力以及遗传行为的分析。１　材料与方…     

V型小麦细胞质雄性不育系育性恢复基因的SSR分子标记分析

用(V9112 89A/ /济南13/ 97美斯6 )三交F1代分离群体的极端不育株和极端可育株分别建立保持池和恢复池,利用1BS和1DS上的SSR引物对两池和亲本进行了多态性分析研究,发现1BS上的4个引物GWM11、GWM18、GWM2 6 4和GWM2 73在两亲本间有稳定差异,但1DS上没有找到有差异的引物。通过在分离群体上验证,发现这4个1BS上的引物与育性恢复基因间的交换值均大于5 0 %。推测,V型不育系不适于用三交F1代分离群体进行遗传距离分析。     

白菜型油菜细胞质雄性不育系58A的选育及利用方法研究

在白菜型油菜自交系S1815中发现2株半不育株,对半不育株自交,分离出可育株、不育株和微粉株,用可育株与不育株保持,子代表现不育,可育株自交不分离,后经连续5代回交保持,育成细胞质雄性不育系58A及保持系58B。经大量的回交筛选,在白菜型油菜376份种质资源中,筛选出7份恢复种质,它们主要分布在陕西和甘肃冬油菜品种资源中。通过组合测配,育成58A×143C参加陕西省区域试验及生产试验,平均产量1802.7 kg/hm2,比对照秦油4号平均产量1535.8 kg/hm2增产17.37%。2003年3月通过陕西省品种审定,定名白杂1号。