德国镜鲤和选育镜鲤及其杂交的同工酶电泳比较研究

本采用电泳方法对德国镜鲤，选育镜鲤及杂交种的肝组织Pod、Mdh、Est三种同工酶进行分析，三种鲤的Pod同工酶谱只有一种表型，Mdh酶谱中选育镜鲤在MDH－2出现杂交。Est酶谱中选育镜鲤Est-6有基因多态现象，德国镜鲤Est-1和Est-5有多态现象，两个亲本在生化遗传上比较接近。     

荷包红鲤与德国镜鲤四种同工酶电泳比较研究

采用聚丙炮酰胺凝胶园盘电泳法分析了荷包红鲤和德国镜鲤的心脏、肝脏、肌肉和眼睛等组织中的过氧化物酶（POD）、酯酶（EST）、苹果酸脱氢酶（MDH）、乳酸脱氢酶（LDH）等四种同工酶的谱带。结果表明：荷包红鲤POD在肌肉中不显带，在心、肝、眼中显3－4条带；EST在心、肌、眼中均显2条主带，尚可见1－3条痕量带，在肝中多1条主带，MDH在心、肝、肌、眼组织中显示1－5条带，各组织不同；LDH在心、肌、眼中均显1条带在肝脏显4条带。德国镜鲤POD在肌肉中不显带，在心、肝、眼组织中显3－5条带；EST在心、肌、眼组织中均显2条主带，1－2条痕量带；MDH在心、肝、肌、眼组织中显1－3条带；LDH在心、肌、眼组织中均显1条带，而在肝脏显示1条弥漫性宽带。可见荷包红鲤和德国镜鲤POD、EST、MDH和LDH等同工酶在不同组织中均在程度不同的组织特异性。在这两种鱼的同一组织中，四种同工酶的酶带既有一定的差异，又有很大的相近性。而在同一种鱼的不同个体中，同工酶电泳带无明显不同。     

德国镜鲤、散鳞镜鲤及松浦镜鲤的含肉率及肌肉营养成份的分析

为了比较评价松浦镜鲤、散鳞镜鲤和德国镜鲤的营养价值，我们对上述三种鲤鱼的含肉率及肌肉营养成分进行了分析。测定结果表明，含肉率：松浦镜鲤为62．81％，散鳞镜鲤为64．29％，德国镜鲤为55．71％。松浦镜鲤含肉率比德国镜鲤高7．1％，但低于散鳞镜鲤，界于双亲之间。松浦镜鲤肌肉的蛋白质、脂肪含量都高于亲本，而水分含量低于亲本。     

农业部公布水产养殖新品种

农业部最近公布了适宜在我国推广的一批水产优良养殖品种。这些品种有：１．荷包红鲤、兴国红鲤、彭泽鲤、建鲤、松浦银鲫、荷包红鲤抗寒品种、德国镜鲤选育系等为适宜推广的水产优良新品种（品系）。２．丰鲤、荷包鲤、三杂交鲤、杂育银鲫、福寿鱼、奥尼鱼、岳鲤、鞭容鲤等品种具有杂交优势，但只适宜在人工能够完全控制的池塘、网箱和养殖工厂中使用，禁止在河流、湖泊和水库等天然水域中放养。３．尼罗罗非鱼、奥利亚罗非鱼、露斯塔野鲮、革胡子鲶、大口黑鲈、散鳞镜鲤、虹鳟、道纳尔逊氏虹鳟、太平洋牡蛎等为适宜在水产养殖生产中推广的…     

高寒鲤、荷包红鲤、松浦鲤和德国镜鲤同工酶分析

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对高寒鲤Cyprinus carpio、荷包红鲤Cyprinus carpio wuyuanensis、松浦鲤Cyprinus carpio Songpu和德国镜鲤眼(E)、心(H)、肾(K)、肝胰脏(L),和肌肉(M)组织中超氧物歧化酶(SOD)、乙醇脱氢酶(ADH)、α-淀粉酶(α-AMY)、过氧化物酶(POD)、苹果酸酶(ME)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、酯酶(EST),和山梨醇脱氢酶(SDH)等9种同工酶进行了电泳分析。结果表明:4种鲤同工酶谱具有明显的组织特异性,其中肝胰脏和肾脏表达最为显著。4个鲤群体9种同工酶共记录了17个基因座位,多态座位比例P平均为27.865%,平均预期杂合度He’介于0.1329~0.1451之间。Shannon’s多样性指数显示,4个群体的遗传变异由高到低依次为:荷包红鲤>高寒鲤>松浦鲤>德国镜鲤。4种鲤具有较丰富的遗传多样性,较高的遗传变异水平,对种质资源的研究开发及利用有重要意义。     

苏北南部沿海几种蟹类蛋白和同工酶的比较研究

本文对苏北南部沿海中华绒螯蟹（Ｅｒｉｏｃｈｅｉｒｓｉｎｅｎｓｉｓ）、天津厚蟹（Ｈｅｌｉｃｅｔｒｉｄｅｎｓｔｉｅｎｔｓｉｎｅｎｓｉｓ）、红螯相手蟹（Ｓｅｓａｒｍａｈａｅｍａｔｏｃｈｅｉｒ）和日本大眼蟹（Ｍａｃｒｏｐｈｔｈａｌｍｕｓｊａｐｏｎｉｃｕｓ）四种常见蟹的眼、肝、肌和卵组织以及中华绒螯蟹和天津厚蟹蟹苗的蛋白和ＬＤＨ、ＡＮＥＡ同工酶进行了比较研究。结果表明,四种蟹的蛋白和同工酶具明显的物种特异性和组织特异性;两种蟹苗的蛋白和同工酶酶谱在谱带数量、迁移率及酶活性上都存在差异。     

中华鳖同工酶研究

采用垂直淀粉胶电泳对中华鳖脑、眼、心、肌、肝、肾和卵巢七种组织中的六种同工酶系统（ＬＤＨ、ＡＤＨ、ＩＤＨ、ＭＥ、Ｇ６ＰＤＨ、ＥＳＴ）进行研究，构建了中华鳖同工酶酶谱，并利用草鱼ＬＤＨ－Ｂ４抗体对中华鳖ＬＤＨ酶谱进行了免疫化学分析，确定了中华鳖ＬＤＨ同工酶酶谱和亚基组成，揭示了鱼类ＬＤＨ与爬行类ＬＤＨ在进化上的保守性     

RAPD技术在鱼类杂种优势研究中的应用↑（*）

从４０个引物中筛选了２７个引物,对兴国红鲤、德国镜鲤和苏联镜鲤进行随机扩增多态ＤＮＡ分析,共得到１９９条带,其中１５５条带（占７７９％）具多态性。计算得出这３个群体内的相似系数分别为：兴国红鲤０．７２２,德国镜鲤０．８２７,苏联镜鲤０．７８７,表明群体内的遗传变异较大;群体间的遗传距离为：兴国红鲤与德国镜鲤０．０９２,兴国红鲤与苏联镜鲤０．１０５,德国镜鲤与苏联镜鲤０．０７７,表明群体间的亲缘关系相近。兴国红鲤与苏联镜鲤遗传距离最大,推断这２个品种间的杂种优势较强,与育种实践一致。     

两种不同地方种群尼罗罗非鱼遗传差异和分子遗传标记↑（*）

用ＡｐａⅠ，Ｂｃ１Ⅰ，Ｂｇ１Ⅱ，ＤｒａⅠ，ＥｃｏＲⅠ，ＥｃｏＲＶ，ＨｉｎｄⅢ，ＫｐｎⅠ，ＰｓｔⅠ，ＰｖｕⅡ，ＳａｃⅠ，ＸｂａⅠ，ＸｈｏⅠ等１３种限制性核酸内切酶对来自尼罗河上游和下游的两种不同地方种群尼罗罗非鱼的线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）进行酶切分析，得到这两种罗非鱼的ｍｔＤＮＡ分子大小为：上游尼罗为１６９０９±９０ｂｐ，下游尼罗为１６９１２±１００ｂｐ。研究中还发现我国养殖的这两种不同地方种群尼罗罗非鱼，每一群体内个体间均存在ｍｔＤＮＡ酶切片段长度多态现象，而且群体间在ｍｔＤＮＡ水平上具有一定差异，依此构建了这两种不同地方种群尼罗罗非鱼ｍｔＤＮＡ限制性内切酶酶切图谱，建立了识别它们的分子遗传标记。     

农业部公布水产养殖新品种

农业部前不久公布了适宜在我国推广养殖的一批水产优良品种 ,这些品种有 :1 荷包红鲤、兴国红鲤、彭泽鲫、建鲤、松蒲银鲫、荷包红鲤抗寒品种、德国镜鲤选育系等为适宜推广的水产优良新品种 (品系 )。2 丰鲤、荷元鲤、三杂交鲤、杂育银鲫、福寿鱼、奥尼鱼、岳鲤、鞭容鲤等品种具有杂交优势 ,但只适宜在人工能够完全控制的池塘、网箱和养殖工厂中养殖 ,禁止在河流、湖泊和水库等天然水域中放养。3 尼罗罗非鱼、奥利亚罗非鱼、露斯塔野鲮、革胡子鲶、大口黑鲈、短盖巨脂鲤、散鳞镜鲤、虹鳟、道纳尔逊虹鳟、太平洋牡蛎、夏威夷扇贝等为适宜在…     

草鱼细菌性败血症乳酸脱氢同工酶的研究

本试验采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳．研究了正常草鱼和患细菌性败血症草鱼的肝脏、肾脏、心脏、鳃及血清的乳酸脱氢酶（LDH）同工酶。研究结果表明．患病草鱼和正常草鱼的LDH同工酶带有明显差异．其酶谱变化具有组织、器官的特异性。LDH同工酶可以作为草鱼患细菌性败血症的生理、病理指标。     

酯酶和乳酸脱氢酶在人工雌核发育鲢近交F1不同组织中的表达

采用聚丙烯酰胺水平平板电泳法研究了人工雌核发育鲢近交F1Ⅰ系、Ⅱ系、野生鲢、养殖鲢和雄鲤的肝、肾、心、眼和肌肉5种组织的酯酶(EST)和乳酸脱氢酶(LDH)。比较发现:(1)雌核发育鲢近交F1Ⅰ系、Ⅱ系和野生鲢的同工酶谱基本一致,雄鲤明显区别于鲢;(2)从酯酶图谱可发现,雌核发育近交鲢F1Ⅱ系的群体内有多态现象,肝、肾、肌肉的多态位点比例分别为0·6000、0·3333、0·5000,遗传杂合度分别为0·7485、0·6622、0·1139;(3)肝脏的乳酸脱氢酶中出现C带,且C带表现出多态性;(4)没有发现能区别鲢各群体的遗传标记。     

松浦镜鲤与长丰鲢食用鱼混养试验

2012年5-10月,在面积为0.19hm2的试验池1中放养体质量160g的松浦镜鲤（Cyprinus carpio Songpu）117,700尾·hm^-2,混养体质量160g的长丰鲢（Hypophthalmichthys molitrix）春片、乌子头和鳙（Aristichthys no-bilis）夏花鱼种。在面积为0.19hm2的试验池2中放养体质量149.5g的松浦镜鲤3,450尾·hm^-2,只混养鲢和鳙夏花,采用常规饲养方法。2012年10月2日,试验池1平均每hm2产鱼21,025.5kg,其中松浦镜鲤平均全长34.3cm,体质量1425g,产量18,294.0kg;长丰鲢春片平均体质量674g,平均产量1,816.5kg,长丰鲢夏花平均全长18.6cm,体质量112.4g,平均产量592.5kg;鳙夏花平均全长达12.1cm,体质量39.9g,平均产量322.5kg。试验池2平均每hm2产鱼3,069.0kg,其中松浦镜鲤平均全长35.0cm,体质量1225g,平均产量2,766.0kg;鲢夏花平均全长达11.3cm,体质量24.9g,平均产量130.5kg;鳙夏花平均全长达11.1cm,体质量35.1g,平均产量172.5kg。试验表明,高密度养殖的松浦镜鲤产量显著高于密度低时,长丰鲢夏花的出池体质量是普通鲢的4.5倍,特殊生长率（6.27%·d^-1）是普通鲢（3.5%·d^-1）的1.79倍。文中还讨论了松浦镜鲤养殖池的水质和技术特点。     

显微介导河蟹总DNA导入镜鲤的检测与分析

利用显微介导远缘杂交技术将河蟹总DNA直接导入镜鲤受精卵内,再利用AFLP分子标记技术检测显微介导河蟹基因镜鲤的外源DNA。在30对AFLP引物中,有3对引物扩增出供体基因片段,即在显微介导河蟹基因镜鲤中均有和河蟹基因相同而对照镜鲤没有的条带。对6尾阳性显微介导河蟹基因镜鲤的扩增产物进行回收、克隆和测序验证。结果表明:阳性显微介导河蟹基因在镜鲤中均含有供体基因目的片段。本研究在分子和基因水平上验证了河蟹总DNA可通过显微介导方式整合到镜鲤基因组中,为显微介导外源总DNA转化技术的应用提供新的思路。     

鲤野生和养殖群体遗传多样性分析中的微卫星(SSLP)分析

采用7个微卫星标记,研究了鲤(Cyprinus carpio)、高寒鲤和荷包红鲤抗寒品系(Cyprinus carpio var.wananensis)三个群体的遗传变异。结果显示,鲤野生群体、高寒鲤、荷包红鲤抗寒品系的平均杂合度分别为0.276、0.147、0.0952,平均无偏倚杂合度期望值为0.431、0.355、0.305。鲤野生群体的杂合度明显高于其他两个养殖品种,说明其较其他两个养殖品种的遗传多样性丰富。     

异育银鲫内参基因的筛选

内参基因在实时荧光定量PCR(qRT-PCR)中具有校准的作用,然而鲤疱疹病毒Ⅱ型感染异育银鲫内参基因目前仍未见研究报道。采用qRT-PCR技术检测不同处理条件下异育银鲫组织和尾鳍细胞GAPDH、EF-1α、18S rRNA和β-actin 4个候选内参基因在组织和尾鳍细胞的转录水平,利用软件geNorm、Norm Finder、Best Keeper和Delta Ct分析了其表达量的稳定性,以筛选出健康异育银鲫不同组织以及鲤疱疹病毒Ⅱ型感染的肾脏、脾脏和异育银鲫尾鳍细胞在不同时间均较稳定的内参基因。geNorm稳定值以及4个内参的表达量Ct值分析显示,健康异育银鲫脑、脾脏、肾脏、肌肉、鳃、肠、肝脏和心脏组织中β-actin和EF-1α都是比较稳定的内参基因;鲤疱疹病毒Ⅱ型感染肾脏和尾鳍细胞不同时间点,内参基因β-actin稳定性最佳;鲤疱疹病毒Ⅱ型感染脾脏不同时间点时,EF-1α稳定性最佳。分别以4个候选内参基因为内参分析PIN1基因在肾脏组织不同感染时间的相对表达量,结果进一步证实,PIN1基因在肾脏组织感染不同时间点以β-actin为内参时,其表达量呈下降趋势,与cDNA文库测序中的表达量分析结果一致,各时间点的表达量差异极显著(P<0.01)。本试验结果有利于研究异育银鲫在不同处理条件下基因的表达分析,可为获得精准的结果奠定理论基础。     

转生长激素基因鲤鱼的生长研究

本报导了生长激素基因对鲤鱼生长的影响。经池塘对照实验表明，转生长激素基因鲤鱼的快速生长效应比正常鲤鱼明显，而且由转生长激素基因阳性性成熟鲤鱼经人工催产繁殖的子一代群体中，仍表现出快速生长的特性。这一结果，为能获得一个转外源生长激素基因并具快速生长特性的遗传稳定的转基固鲤鱼核心群体提供了可靠的数据。     

南四湖鲢、鳙增殖放流后生长的跟踪监测

2012年6月-11月,对2012年4月在南四湖增殖放流的鲢、鳙生长状况进行了连续5次跟踪调查。结果表明：鲢体质量变化在50-400g范围内,为1-2龄;鳙体质量集中在50-350g,为1-2龄;增殖鲢生长（L,体长;W,体质量）与捕捞时间的关系方程为：L=12.633＋2.3391M＋0.0648M2,W=-89654＋61.933M＋2.3341M^2;鳙L=13.186＋1.004M＋0.2449M2,W=99.204-33.203M＋12.141M2。捕获南四湖鲢、鳙个体远未达到渐进体质量乃至拐点体质量,尚处于快速生长期,在增殖放流与捕获中应加强科学规范与管理。     

人工雌核发育鲢近交F2微卫星DNA变异分析

采用17对鲢微卫星引物,以野生鲢、养殖鲢、雄鲤作对照对人工雌核发育鲢近交F2及其亲本进行了微卫星分析。结果表明:人工雌核发育鲢近交F2、养殖鲢和野生鲢群体的平均等位基因数范围为2.1～4.0;平均观测杂合度范围为0.2762～0.9588;期望杂合度范围为0.2774～0.7360;遗传多样性指数范围为0.4500～1.2258,人工雌核鲢近交F2为0.4500,显著低于养殖鲢(1.0273)和野生鲢(1.2258),揭示人工雌核发育鲢近交F2遗传多样性水平较低,纯合度较高。从遗传距离来看,人工雌核发育鲢近交F2与对照群体之间的遗传距离都要大于野生鲢与养殖鲢群体之间遗传距离,表明人工雌核发育鲢近交F2发生了一定程度的遗传分化。     

应用RNAi技术构建的转基因鲤的检测分析

将构建携带H1启动子的肌肉生长抑制基因的真核表达载体,通过显微注射技术导入鲤受精卵核区附近,获得了一批具有RNAi表型的转基因鲤,PCR和分子杂交检测证实外源基因整合到受体鱼的基因组中,阳性率为32.78%;一龄鱼的生长实验表明,转基因鲤比普通鲤平均生长快0.99倍,其体高和体厚分别平均增长0.22和0.26倍,其中有31.82%的群体平均体厚是普通鲤的1.6倍。结果显示,该质粒表达的发夹环型dsRNA可以有效降解其转录产物,对阻抑肌细胞中同源基因的表达、鲤肌肉的再生能力增强起到了重要作用。这种抑制作用表现为鲤背部肌肉增厚、体质量增加,说明该基因经转录产生的双链RNA在鲤体内具有RNAi效应。RNAi技术为获得具有特殊功能的转基因鲤提供了新的手段。