黑荆树不同外植体愈伤组织诱导与芽分化的研究

为建立高效的黑荆树快速繁殖体系,以黑荆树叶片、茎段和下胚轴为外植体,在添加不同植物生长调节剂的MS培养基上进行了愈伤组织的诱导和不定芽的分化研究。结果表明:综合最高诱导率结果和愈伤组织的生长状况,外植体的愈伤组织诱导能力顺序为叶片(44.83%)下胚轴(36.35%)茎段(30.05%);愈伤组织诱导最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.005 mg/L TDZ+1.0 mg/L IBA。叶片和下胚轴所诱导的愈伤组织均可分化出不定芽,但芽诱导率差异达极显著水平;不定芽分化最佳培养基为MS+0.01 mg/L TDZ+0.2 mg/L IBA,叶片愈伤组织的芽分化率最高可达32.60%。     

野葛愈伤组织诱导与不定芽分化

采用MS为基本培养基，附加NAA、6-BA和IAA3种激素．诱导野葛不同外植体愈伤组织形成；再将愈伤组织接种在不同浓度6-BA的MS培养基上．分别在光照和黑暗条件下进行不定芽的诱导。结果表明．野葛幼叶、茎段和顶芽在适宜激素的诱导下均能形成愈伤组织，但不同激素组合其愈伤组织诱导率不同。幼叶愈伤组织诱导的最适培养基为MS NAA1．0mg／L 6-BA1．0mg/L．其诱导率为75％．茎段愈伤组织诱导的最适培养基为MS NAA1．0mg／L 6-BA3．0mg／L IAA0．2mg/L，其诱导率为70％。不同外植体形成的愈伤组织其不定芽的分化诱导率不同．茎段愈伤组织在不同浓度6-BA下均能诱导出不定芽；光照有利于芽的分化．在光培养条件下，茎段愈伤组织不定芽平均诱导率为66．7％。     

黑荆树愈伤组织和细胞悬浮培养试验

进行了黑荆树愈伤组织和细胞悬浮培养的试验,测定了2,4-D不同浓度和细胞起始密度对细胞增殖的影响.结果表明:多种来源的外植体都具有形成愈伤组织的能力,而来源于下胚轴的愈伤组织经再分化培养能产生胚状体.悬浮细胞在附加2,4-D0.2～0.5mg/L的培养液中培养,以及高的细胞起始密度均有利于细胞的生长和增殖,其游离细胞经平板培养可形成新的细胞团.     

植物生长调节剂对黑果枸杞愈伤组织诱导、增殖及分化的影响

为建立黑果枸杞高频再生体系及进行细胞突变体筛选、遗传转化奠定基础,以黑果枸杞叶片、茎段和腋芽为外植体,以MS为基本培养基,附加不同浓度的植物生长调节剂进行愈伤组织的诱导、增殖及不定芽分化研究。结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D 2.0mg/L+6-BA 0.5mg/L;在愈伤组织的继代培养过程中,高浓度的2,4-D有利于愈伤组织的诱导,但对愈伤组织的生长有一定的抑制作用,最佳培养基为MS+2,4-D 1.0mg/L+6-BA 0.5mg/L;在愈伤组织的再分化过程中,6-BA对再生芽的分化效果最好,出芽率高,且多诱导出丛芽,最佳培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.10mg/L。试验表明:黑果枸杞叶片、茎段和腋芽均可诱导愈伤组织,茎段诱导率最高;筛选出了茎段愈伤组织诱导、增殖及再生芽分化的适宜培养基,为其细胞工程育种及规模化生产提供支撑。     

火草叶片愈伤组织诱导及其分化研究

以火草叶片为外植体,研究了愈伤组织诱导与分化的方法。结果表明,火草无菌叶片在WPM+0.6 mg·L^-16-BA+0.45 mg·L^-1NAA+30 g·L^-1蔗糖的培养基中,能诱导出直径0.5 cm、结构致密、质地硬的绿色愈伤组织,愈伤组织在WPM+0.75 mg·L^-16-BA+0.15 mg·L^-1NAA+30 g·L^-1蔗糖的培养基中培养30 d分化出芽,平均每个分化的愈伤组织长出5.78个芽,芽苗转入1/2DKW+1.0 mg·L^-1 IBA+0.1mg·L^-1 NAA+30 g·L^-1蔗糖的培养基中培养30 d后,发育出5—13条不定根,且带有根毛的发达根系。     

黑荆树愈伤组织培养及其原花色素的分析

以黑荆树叶片为外植体,在MS培养基中添加不同质量浓度的细胞分裂素6-苄氨基嘌呤(6-BA)和细胞生长素2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D),诱导培养出愈伤组织,采用香草醛-硫酸法和Folin-Ciocalteu法测定了不同条件处理下愈伤组织中原花色素和总多酚的含量,并用电喷雾质谱(二级质谱)法对愈伤组织中原花色素组成进行定性分析。研究结果表明:添加0.25 mg/L 6-BA和2.0 mg/L 2,4-D的培养基中,黑荆树愈伤组织诱导率及生长状况较佳,且含总多酚和原花色素分别为20.19和11.10 mg/g,明显高于其他处理,适合进行增殖培养;黑荆树愈伤组织主要由单体原花色素及低聚原花色素组成,其中以单体和二聚体居多,还有微量三聚体。     

中华猕猴桃愈伤组织的诱导与分化

以中华猕猴桃的叶片为外植体,对猕猴桃愈伤组织的诱导与分化进行了初步研究。结果表明,诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+0.5 mg.L-12,4-D+0.5 mg.L-1ZT培养基,2,4-D是诱导愈伤组织较适合的生长素;将在MS+1.0 mg.L-1ZT培养基上培养2周后的愈伤组织,转接到MS+1.0 mg.L-1ZT+0.2 mg.L-1IBA培养基上,其不定芽的分化能力最强;将在无生长调节物质的MS培养基上培养2周后的愈伤组织,转接到1/2 MS+0.5 mg.L-1IBA培养基上,其生根效果最好。     

无患子愈伤组织诱导与分化培养技术研究

为解决无患子组织培养中的难题,对愈伤组织诱导最佳外植体与基本培养基类型先进行筛选,再通过正交试验设计,筛选愈伤组织诱导植物生长调节剂、生长及分化培养最佳抗褐化剂和植物生长调节剂种类与浓度水平。结果显示：(1)1 a生嫩茎段是无患子愈伤组织诱导最佳外植体;(2)培养基中添加20.0 mg/L抗坏血酸和10.0 mg/L半胱氨酸能有效抑制愈伤组织褐化现象的发生;(3)以改良MS作为基本培养基,外加6-苄基腺嘌呤(6-BA)0.6 mg/L+糠基腺嘌呤(KT)0.15 mg/L+2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)3.0 mg/L植物生长调节剂浓度组合,愈伤组织诱导率最高,结构致密;(4)愈伤组织团在改良MS外加6-BA 3.0 mg/L+萘乙酸(NAA)0.4 mg/L+吲哚丁酸(IBA)0.25 mg/L植物生长调节剂浓度组合下,不定芽诱导率最高,芽苗健壮。     

菊花胚性愈伤组织诱导及分化研究

以12个菊花品种为试材,采用三步培养法研究了胚性愈伤组织诱导、分化的特点。结果表明：胚性愈伤组织共有4种类型,其中黄绿色致密颗粒状胚性愈伤组织最好;‘玉人面’、‘铺地金’、‘紫妍’、‘杭白菊’间接体细胞胚发生的效果较好。     

枣树愈伤组织培养时不定芽的分化

以枣树色白、结构紧密的愈伤组织为材料,对其不定芽的分化情况进行了研究．结果表明,用ＭＳ（ＮＯ－３／２）作基本培养基,并附加ＫＴ４．０００ｍｇ／Ｌ,ＺＴ１．７５０ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ０．０１５ｍｇ／Ｌ可以获得比较好的不定芽分化效果,鸡蛋枣和无核小枣不定芽再生频率分别达到３０％,２２％,其它品种再生频率低于１５％,不定芽在ＭＳ（ＮＯ－３／２）＋ＮＡＡ０．０１５ｍｇ／Ｌ＋ＺＴ１．７５０ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ４．０００ｍｇ／Ｌ＋ＡｇＮＯ３２．０００ｍｇ／Ｌ的培养基上能获得最高的增殖系数．     

广藿香愈伤组织的诱导和增殖

以广藿香的幼叶、茎段为外植体,接种于附加不同浓度的2,4-D、NAA、6-BA、KT、TDZ及其组合的MS固体培养基上进行愈伤组织的诱导,结果表明:单独使用5种激素在一定范围内均能诱导出愈伤组织;最佳组合培养基为MS+6-BA 1.0 mg.L-1+2,4-D 0.1 mg.L-1。进一步研究发现,茎段和叶片诱导的愈伤组织的生长曲线都呈“S”型,且生长周期均为18 d。     

Kan对四倍体刺槐愈伤组织及不定芽诱导的研究

以四倍体刺槐茎段为材料,接种于附加不同浓度卡那霉素(Kanamycin)的CNB培养基(含有一定浓度NAA、BA的MS培养基)上,当浓度达到50mg/L时,愈伤组织明显膨大、疏松,不定芽的诱导和生长几乎完全受到抑制,为筛选致死浓度;培养基中的激素种类和浓度对四倍体刺槐不定芽的诱导有明显影响,以CNB培养基培养10d后,转入附加50mg/L卡那霉素的DN培养基(含有一定浓度NAA、BA、ZT、2,4-D的MS培养基)上,通过两步诱导法,既提高了芽分化率(为94%),又达到了筛选的目的,此法为本研究的最佳方案。     

优系欧李茎叶愈伤组织诱导与植株再生

以欧李春季萌发的幼茎、叶片为外植体诱导愈伤组织的产生,结果表明:叶片愈伤组织培养以改良MS为基本培养基,附加NAA 1.0 mg/L IBA 0.5 mg/L BA 0.2 mg/L效果较好;茎段愈伤组织培养以改良MS附加2,4-D0.5 mg/L NAA 0.3 mg/L BA 0.15 mg/L诱导愈伤组织效果好;愈伤组织再诱导不定芽以1/3 MS附加BA2.0 mg/L IBA 0.01 mg/L培养基效果佳。     

龙脑樟愈伤组织诱导及增殖研究

以龙脑樟的茎段作为外植体,进行腋芽的诱导获得无菌苗,继而腋芽小叶被用于愈伤组织的诱导并进行增殖培养。结果表明外植体适宜的灭菌方法为：0.1%升汞灭菌10 min,污染率为21.6%;腋芽小叶愈伤组织诱导最佳培养基配方为：MS＋BA 4.0 mg/L＋NAA 0.1 mg/L,诱导率可达72.7%,较佳增殖培养基组合为：MS＋BA 5.0 mg/L＋NAA 0.5 mg/L。     

枣叶片愈伤组织的诱导和器官分化

在改良 B_5培养基上,枣叶片愈伤组织的形成主要受细胞分裂素 BA 的影响,浓度在100mg/1时,培养20天诱导率达100%,生长素 IBA 只起调节愈伤组织生长状态的作用;愈伤组织的器官分化受 IBA 和 BA 浓度的影响很大,其分化类型取决于 IBA/BA 的浓度比值。     

长白落叶松愈伤组织及不定芽的诱导

以长白落叶松成熟合子胚为研究对象,从外植体消毒方式及愈伤组织与不定芽诱导的适宜培养基、激素组合和配比的选取等方面着手,进行长白落叶松愈伤组织及不定芽诱导的研究。结果表明:先用4%NaClO消毒去皮种子15 min后,再用0.5%NaClO消毒胚2 min为长白落叶松成熟合子胚的最佳消毒方法;BM为愈伤组织诱导的最适培养基;当BM+2.0 mg·L^-1 TDZ时,愈伤组织诱导率最高,为89%;BM+1.5 mg·L^-1 TDZ时,不定芽诱导率最高,为80.0%。     

‘凤丹’子叶愈伤组织诱导及分化研究

研究了层积时间对‘凤丹’胚萌发的影响,并探讨了基本培养基、植物激素等因素对子叶愈伤组织的诱导及不定芽分化的影响。结果表明:40d层积时间对胚萌发的效果最好,MS+Ca2++2mg/L2,4-D+30g/L蔗糖是胚诱导愈伤组织的最佳培养基,诱导率85%;MS+Ca2++1.5mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+20g/L蔗糖是诱导不定芽发生的最佳培养基;不定芽高约1.5cm转入生根培养基,生根率可达80.7%。     

毛白杨叶片愈伤组织的诱导、芽的分化及不定根的再生

以毛白杨叶片为外植体进行组织培养研究。结果表明:培养基MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 1.0 mg/L有利于愈伤组织的诱导;培养基MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.5 mg/L诱导愈伤组织并且有大量不定芽发生;培养基MS ZT 0.1 mg/L NAA 0.3 mg/L可使叶片生根率达100%。