Bradyrhizobium japonicum工程菌株HN32中外源质粒pHN32增效作用的验证

将Bradyrhizobium japonicum HN32菌株中的外源质粒pHN32,通过三亲本杂交转入大肠杆菌HB101中,继而转入Bradyrizobium japonicum22—10中,得到一系列抗性杂交子HNF1,HNF3及HNF5,检测其中所含质粒,并以22—10,HNF5及HN32进行盆栽试验,pHN32的增效作用得到了证实。     

Bradyrhizobium japonicum基因工程菌株HN32中外源片段的来源检验

采用Southern转移,放射性同位素分子杂交等研究手段,对本课题组构建的一株高效固氮大豆根瘤菌HN32中的外源片段的来源进行了分析。研究结果证实:该外源片段确系来源于Sinorhizobium fredii B52菌株,并且在受体Bradyrhizobium japonicum 22—10菌株中本不存在。     

接种大豆根瘤菌(Sinorhizobium fredii)遗传工程菌株LMG101对大豆的增产效应

 笔者曾报道带外源肺炎克氏杆菌 (Klebsiellapneumoniae)nifA的大豆根瘤菌 (Sinorhizobium fredii)工程菌株LMG10 1在实验室条件下具有较高的结瘤固氮效率 ,用其接种大豆幼苗可以提高大豆生物量。本项工作通过 3年的田间小区试验 ,对工程菌S .frediiLMG10 1的田间施用效果进行了研究。试验表明 ,接种工程菌S .frediiLMG10 1能有效地提高大豆的结瘤固氮效率和大豆产量。接种工程菌S .frediiLMG10 1的大豆植株固氮酶活力分别比对照和接种出发菌植株高 3.1倍和 2 .1倍 ,与之相应工程菌占瘤率也较高 ,大豆田间产量分别比对照和接种出发菌提高 10 %和 5 %以上 ,统计差异显著 (P <0 .0 5 )。     

紫云英根瘤菌不同菌株间结瘤竞争能力的比较

通过竞争结瘤试验研究紫云英根瘤菌不同菌株间的竞争结瘤能力,以紫云英宁波大桥品系为宿主植物,7株分离自不同生境紫云英根部瘤体内的菌株与中慢生华癸根瘤菌7653R为研究对象,采用单独接种、与7653R菌株1∶1混合接种方式,在30 d时采样,统计根瘤数量、根瘤质量、不同菌株的占瘤率、定殖能力等。结果发现,紫云英根瘤菌2号菌株的竞争能力与7653R相当,其他菌株的竞争性都不同程度地弱于7653R,尤其是1号菌株的定殖能力最弱,仅是7653R占瘤率的9%。在同时含有2种根瘤菌的瘤体内,7653R和竞争菌株的数量比例相近。不同生境根瘤菌的竞争结瘤能力存在差异,试验同时获得了1株与经典菌株7653R竞争能力相当的紫云英根瘤菌菌株。     

大豆根瘤菌（Bradyrhizobium japonicum）在黑龙江省接种效果与接种有效性的研究

据1983-1985年在黑龙江省45个县（市）792个试验点,6种土壤和14个大豆品种的小区试验和大面积试验证明：大豆接种根瘤菌比不接种平均增产11.2%,每公顷增收大豆241.5公斤。5年（1983-1987）累计应用面积已达31.5万公顷。由于大豆接种根瘤菌增加了大豆的结瘤数和根瘤重、植株鲜重和干重、植株含氮量和根瘤固氮酶活性,从而提高大豆产量和籽实蛋白质含量。本文研究了大豆接种根瘤菌的有效性与土著根瘤菌生态分布（以大豆自然结瘤性状C值、接种回收率为指标）,大豆品种对根瘤菌的选择性,土壤化学因子（N. P. K. pH.有机质）的相关关系以及与化学肥料（磷酸二铵）、微量元素肥料（钼酸铵）,VA菌根真菌的联合增产效应。     

大豆根瘤菌（Bradyrhizobium japonicum）在黑龙江省接种效果与接种有效性的研究

据1983-1985年在黑龙江省45个县（市）792个试验点，6种土壤和14个大豆品种的小区试验和大面积试验证明：大豆接种根瘤菌比不接种平均增产11.2%，每公顷增收大豆241.5公斤。5年（1983-1987）累计应用面积已达31.5万公顷。由于大豆接种根瘤菌增加了大豆的结瘤数和根瘤重、植株鲜重和干重、植株含氮量和根瘤固氮酶活性，从而提高大豆产量和籽实蛋白质含量。本文研究了大豆接种根瘤菌的有效性与土著根瘤菌生态分布（以大豆自然结瘤性状C值、接种回收率为指标），大豆品种对根瘤菌的选择性，土壤化学因子（N. P. K. pH.有机质）的相关关系以及与化学肥料（磷酸二铵）、微量元素肥料（钼酸铵），VA菌根真菌的联合增产效应。     

导入额外拷贝nifA基因对费氏中华根瘤菌HN0 1NL根圈定殖与竞争结瘤的影响

本文研究了导入额外拷贝的肺炎克氏杆菌 (Klebsiellapneumoniae)nifA基因对受体费氏中华根瘤菌 (Sinorhizobiumfredii)HN0 1在大豆根圈的定殖和竞争结瘤的影响。将HN0 1分别与带有标记基因luxAB的参照菌株HN0 1L和带有nifA基因和标记基因luxAB的重组菌株HN0 1NL按照 1∶1等量比例接种于大豆黑龙 3 3种子表面 ,在灭菌土和非灭菌土中研究其定殖动态。每一供试菌株在根圈中的比例依次于播种后第 3天、第 7天、第 1 0天、第 1 2天、第 1 4天、第 1 6天、第 2 1天和第 3 6天进行测定 ,占瘤率在播种后第 4 0天进行比较测定。盆栽实验结果表明 :导入了额外拷贝nifA基因的重组菌HN0 1NL与受体菌HN0 1和参照菌HN0 1L相比较 ,在灭菌土和非灭菌土中均表现出显著增强的大豆根圈适应性和竞争能力     

根瘤菌对紫花苜蓿接种效果的研究

将中国农业大学菌种库(CCBAU)提供的10株苜蓿根瘤菌分别接种在奔马、金皇后、金太阳3个品种的紫花苜蓿上,经初筛和盆栽复筛,结果表明:R193菌株与奔马苜蓿品种匹配效果最佳,且固氮效果较好,单株含氮量比对照增加55.08%,总含氮量比对照高105%,经PCR测定,其占瘤率约为50%。     

慢生型大豆根瘤菌(Bradyrhizobium japonicum)USDA110菌株3-羟丁酸脱氢酶基因(bdhA)的克隆、序列及特性

 通过功能互补试验 ,从慢生型大豆根瘤菌USDA110菌株基因文库中筛选到能互补广宿主根瘤菌NGR2 34的bdhA突变体菌株NGRPA2和苜蓿根瘤菌的bdhA突变体菌株Rm1110 7、使之恢复Hbu+ 表型的克隆 ;经酶活测定和Southern杂交证明该克隆含有bdhA基因。测定了bdhA基因全序列 ,并在GenBank登记 (登记号为 :AY0 775 81)。该基因由 789个碱基对组成 ,编码分子量为 2 7.5 9ku、含 2 6 2个氨基酸残基的 3 羟基丁酸脱氢酶。在该基因的开放阅读框内插入interposonΩKm ,并通过同源重组构建了BradyrhizobiumjaponicumbdhA突变体 (bdhA ::ΩKm)。植株试验未显示bdhA基因的突变对结瘤、固氮有明显影响。     

棉种残酸率对种子发芽及田间出苗率的影响

以中棉35号种子为材料,研究了不同残酸率棉种在轻、中、重度盐碱土壤中发芽出苗的影响,结果表明残酸率在0.15%～0.43%时并不影响田间出苗率,随着残酸率的增加有利于田间出苗.     

棉种残酸率对种子发芽及田间出苗率的影响

以中棉35号种子为材料,研究了不同残酸率棉种在轻、中、重度盐碱土壤中发芽出苗的影响,结果表明残酸率在0.15%~0.43%时并不影响田间出苗率,随着残酸率的增加有利于田间出苗。     

牛瘤胃液稀释率的研究

瘤胃液稀释率会影响微生物蛋白质的产量、消化率、采食量,也会改变发酵类型。本试验采用3头成年瘤胃瘘管牛,喂以三种不同的日粮,以聚乙烯二醇(PEG)所测定的稀释率,饲喂苜蓿干草者为0.1321/hr,饲喂50％干草+50％精料者为0.10362/hr,饲喂玉米青贮者为0.12917/hr。瘤胃液在瘤胃中停留时间与稀释率成反比。瘤胃液容积,母牛比阉牛要小,瘤胃液外流率也以喂干草者为高.     

高整精米率优良食味水稻品种银晶软占的选育

银晶软占是采用经典成熟的水稻杂交育种技术培育而成的具有高整精米率和优良食味的优质高效水稻新品种,2006年通过广东省农作物品种审定.该品种在广东省区试和生产应用中表现出整精米率高、食味优良、高产稳产、国标优质、抗逆性强、适应性广等特点,其中以整精米率高尤为突出.     

快生型大豆根瘤菌G+Cmol%测定及与其它根瘤菌之间的DNA同源性

用热变性温度法测定了快生型大豆根瘤菌DNA中G+Cmol%，结果表明其G+Cmol%为58.4-65.6，菌株间差为7%，提示了不同种的存在。以液相复性速率法测定了快生型大豆根瘤菌与其它根瘤菌种之间的DNA同源水平，测定证明它们之间的同源水平很低。快生型大豆根瘤菌与慢生型大豆根瘤菌三个DNA同源组间的同源率分别为15%，10%和25%，表明其亲缘关系很远。同源水平的测定为进一步研究奠定了基础。     

快生型大豆根瘤菌G+Cmol%测定及与其它根瘤菌之间的DNA同源性

用热变性温度法测定了快生型大豆根瘤菌DNA中G+Cmol%,结果表明其C+Cmol%为58.4-65.6,菌株间差为7%,提示了不同种的存在。以液相复性速率法测定了快生型大豆根瘤菌与其它根瘤菌种之间的DNA同源水平,测定证明它们之间的同源水平很低。快生型大豆根瘤菌与慢生型大豆根瘤菌三个DNA同源组间的同源率分别力15,10和25%,表明其亲缘关系很远。同源水平的测定为进一步研究奠定了基础。     

24％螺虫乙酯SC对苹果瘤蚜的田间药效及持效期研究

[目的]了解24％螺虫乙酯SC对苹果瘤蚜的防治效果,为合理使用螺虫乙酯防控苹果瘤蚜提供理论依据.[方法]以3年生红富士果树为试材,研究24％螺虫乙酯悬浮剂对苹果瘤蚜的防效、用药剂量、持效期以及对苹果的安全性.[结果]24％螺虫乙酯悬浮剂5 000倍稀释液对苹果瘤蚜有较好的速效性和持效性,持效期达20d以上,药后15-21 d的防效达98％以上,显著高于2.5％溴氰菊酯乳油500倍稀释液和10％吡虫啉WP2 000倍稀释液的控制作用.[结论]24％螺虫己酯悬浮剂在苹果瘤蚜等蚜虫防治上具有较高的推广应用价值.     

奶牛瘤胃内容物液相稀释率及外流速度的测定

选择3头体况良好、体重550kg左右并安装永久性瘤胃瘘管的荷斯坦奶牛进行试验。采用一次性灌注液相标记物Co-EDTA法测定奶牛瘤胃液相稀释率及外流速度,测定结果表明:奶牛瘤胃液相稀释率为15.01±0.56(%/h),瘤胃液相外流速度为7.9±0.75(L/h)。