黄瓜10个基因型材料外植体内源激素水平及比例对其离体再生的影响

以10个不同基因型黄瓜(CucumissativusL.)子叶节外植体为材料,研究外植体内源激素水平、诱导分化阶段不同外源激素及配比对外植体分化率、不定芽数量和形态的影响,揭示影响不同基因型黄瓜离体再生活力的关键激素因素,并进一步优化黄瓜再生体系。结果表明:MS培养基不添加植物生长调节剂时,10个材料的分化率差异显著,内源CTK水平与分化率呈显著正相关,相关系数分别为0.4544(培养0 d)和0.6110(培养14 d)。MS培养基添加外源1.5 mg·L-1 6-BA后,不同基因型的分化率从5.95%～20.45%提高到了42.39%～80.43%。不定芽形态观察发现:外植体再生过程形成了两种不同类型的不定芽:Ⅰ型芽为正常芽,叶片舒展,茎秆明显;Ⅱ型芽为畸形芽,有叶片形态,但无明显的茎秆结构。不同基因型材料分化形成Ⅰ型和Ⅱ型不定芽的比例差异显著,Ⅰ型/Ⅱ型不定芽比值高的基因型最终再生苗率显著高于比值低的基因型。相关性分析显示不同材料中产生Ⅰ型/Ⅱ型外植体比例与其IAA/ABA比值的相关性最高(R2=0.4214),Ⅰ型/Ⅱ型不定芽比值与再生苗率呈显著正相关(R2=0.5623)。对...     

色素万寿菊叶片再生体系的建立及优化

以色素万寿菊叶片为外植体,探讨了不同的植物生长调节剂组合、AgNO3、凝胶剂及不同的继代培养基对叶片器官发生的影响。结果表明：6-BA 3.0 mg · L-1 + IAA 3.0 mg · L-1 + 蔗糖30.0 g · L-1 + 植物凝胶6.0 g · L-1的MS培养基适宜不定芽的分化,不定芽分化率达97.5%,将分化13 d的叶片外植体转接到组织培养瓶中,30 d后56.7%的不定芽可发育成高约5 cm的植株,再生植株在MS培养基上生根率为100%,移栽成活率达100%。     

悬铃木下胚轴及叶片再生不定芽的影响因素分析

 以悬铃木的下胚轴和离体叶片为材料, 研究了基因型、植物生长调节剂、光照条件、外植体部位等因素对其不定芽分化的影响。结果表明: 1) 6-BA与IBA的浓度比对下胚轴不定芽的分化影响较大,以6-BA ∶IBA小于20 ∶1较为合适; 而叶片的不定芽再生受基因型的影响显著, 在4种供试材料中, PH2的再生能力最强, 但0.1～1.0 mg·L^-1 TDZ不利于其不定芽再生。2) 黑暗培养对下胚轴的不定芽分化有一定的促进作用, 但不利于叶片的不定芽再生, 50～100 lx的弱光有利于叶片的不定芽分化。3) 不同部位的下胚轴切段及叶片的再生能力差异显著, 其中靠近子叶的下胚轴切段和试管苗顶端的2枚叶片再生能力较强。此外, 刻伤叶片的再生效果明显优于叶片切块, 说明悬铃木的叶片与下胚轴的离体培养存在明显的生物全息现象。     

大岩桐高频再生体系建立的两种途径

采用大岩桐(Sinningia speciosa) 的叶片、叶柄和根外植体, 经过两种途径建立大岩桐的高效离体再生体系。第1种途径是: 外植体先形成愈伤组织, 愈伤组织分化出不定芽, 再生成不定根, 进而形成再生苗; 第2种途径是: 外植体先形成少量愈伤组织和根, 再产生不定芽, 进而形成再生苗。第1种途径所采用的培养基MS +BA 2.0 mg·L - 1 +NAA 0.2 mg·L - 1 +蔗糖30 g·L - 1 , 芽诱导率达到99.04% , 根诱导率达到98.81% , 每块外植体分化的不定芽数达5.53个; 第2种途径中以MS +NAA 1.0 mg·L - 1 +蔗糖30 g·L - 1为最佳培养基, 芽诱导率达到90.38% , 根诱导率达到100% , 每块外植体分化的不定芽数达2.44个。在3种外植体中以叶片的再生频率最高。经过连续的组织培养, 在大岩桐的再生苗中得到了一些表型变异植株, 包括叶片形态的改变, 植株叶序的改变以及花的改变。其中以叶序和花的改变最有价值,可以为叶序调控机理和成花及花变异机理研究提供良好材料。     

铺散诸葛菜的组织培养及植株再生

 以铺散诸葛菜的叶柄及叶片为外植体, 研究了不同的再生方式。在6-BA 和NAA 配合使用的MS 培养基上, 叶柄和叶片外植体有高的成芽率, 具有强的器官再生能力。在2,4-D 与6-BA、NAA 结合的培养基上, 叶柄和叶片有较高的愈伤组织诱导率, 在含6-BA 的培养基上也易于分化。叶柄、叶片再生的芽和经愈伤组织分化而得来的芽快速繁殖后, 在生根培养基上形成完整植株。研究表明铺散诸葛菜具有极强的器官分化能力。     

“新郁”葡萄离体再生体系的建立

以"新郁"葡萄组培苗为试材,采用离体再生方法,探究了IBA+6-BA及IBA+TDZ2种激素组合的8个浓度配比对"新郁"葡萄离体叶片、叶柄和茎段的愈伤组织诱导及再生的影响。此外,通过比较红光、白光、蓝光、暗培养转红光、暗培养转白光、暗培养转蓝光6种光照条件下愈伤组织的诱导效率及分化潜力,确定了最适宜"新郁"葡萄离体组织培养的光照条件。结果表明:"新郁"葡萄离体再生体系在以叶片为外植体时不定芽再生效率最高;在最适宜的外源激素组合IBA 0.2mg/mL+6-BA 2.0mg/mL诱导下,不定芽再生率可达34.9%。6种光照条件中,以暗培养3周后转红光培养不定芽再生效果最佳,再生率、平均再生芽数、愈伤组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和干物质含量均高于其它光质。     

甜瓜高效不定芽再生体系的建立

对8个基因型甜瓜再生能力进行研究,筛选出再生能力较强的基因型,并以其为材料对外植体类型,不定芽诱导、伸长和不定根诱导3个阶段植物生长调节剂的类型与质量浓度进行优化筛选,旨在建立甜瓜高效的不定芽再生体系。结果表明,不同基因型间再生能力存在差异,2个厚皮甜瓜基因型B8、P110和1个薄皮甜瓜基因型IVF05再生能力较强,其中B8再生效果最好;以B8材料为基础建立再生体系,发现不定芽诱导能力最高的外植体为子叶近胚轴端,不定芽诱导阶段最适的培养基为MS+1.0 mg·L^-16-BA+1.0 mg·L^-1ABA,不定芽诱导率96.7%;不定芽伸长和不定根诱导最适的培养基分别为MS+0.1 mg·L^-16-BA和1/2 MS+0.5 mg·L^-1IBA,获得的再生苗生根率达93.3%。     

韭菜组织培养高频植株再生体系的研究

 通过对韭菜组织培养过程中激素配比、外植体、基因型、苗龄及生根条件的研究, 建立了一次性诱导成芽的高频植株再生体系。适于愈伤组织和不定芽分化的最佳培养基为MS + NAA 1 mg/ L+ BA mg / L, 在此分化培养基上91-1、91-8、保定红根、寿光马蔺韭和兰州小韭根尖培养的芽分化频率分别为78. 7%、83. 7%、81. 9%、76. 7 %和73. 3 %, 平均出芽数分别为40. 1 、46. 7 、36. 3 、35. 4 和44. 5 个,苗龄为7~ 10 d 的根尖最适于组织培养。随苗龄增加, 芽的分化频率呈下降趋势。无任何激素的MS0 培养基最适于不定芽的生根, 生根率达100%, 平均根数14. 5 条。卡那霉素( Km) 对植株再生有很强的抑制作用, 在Km 为20 mg/ L 时就完全抑制愈伤组织和不定芽的发生; 羧苄青霉素( Carb) 和噻孢霉素( Cef) 也抑制韭菜根尖培养的植株再生, Cef 的抑制作用更加显著, Carb 500 mg/ L 或Cef 300 mg/ L 完全抑制不定芽的再生; Timentin 对愈伤组织和芽的分化影响不大, 抑制性主要表现在出芽数随浓度升高而降低。当Timentin 浓度为500 mg/ L 时, 平均出芽数仍可达到23. 8 个, 为对照的49. 4% 。     

‘富有’和‘次郎’甜柿叶片再生植株的研究

 比较了不同生长调节剂及其种类浓度和培养时间对‘富有’和‘次郎’两个甜柿(Diospyros kaki Thunb. ) 品种的叶片愈伤组织诱导和不定芽再生的影响。TDZ诱导叶片愈伤组织和不定芽再生的能力很强, 在含ZT 0.5 mg·L ^{- 1}的培养基中, 愈伤组织的形成率达96% , 愈伤组织不定芽分化率达80%以上,由0.5 mg·L ^{- 1} TDZ诱导形成的富有和次郎愈伤组织, 在含有ZT 0.5 mg·L ^{- 1}的1/2DKW培养基培养30 d,不定芽分化率均达96%以上, 平均芽数分别为7.8和5.4, 所得再生苗的生根率近75%。     

黄瓜再生体系的建立

以津研4号为试材,利用组织培养技术探讨黄瓜子叶离体培养技术,建立高频的黄瓜再生体系;以MS为基本培养基,附加不同浓度和不同种类的激素,探讨影响黄瓜离体组织培养的诸多因素。结果表明:以黄瓜5～6 d苗龄无菌苗子叶作外植体,愈伤组织生长旺盛,芽诱导率高;7～8 d的外植体则生长势弱,不利再生芽的分化。6-BA4.0 mg/L+IAA0.3 mg/L,芽分化频率较高,芽的分化率可达83%;待再生芽长至2～3 cm时移入生根培养基(1/2MS+0.3 mg/LNAA),生根率可达88%,30～50 d可得到完整再生植株。     

青花菜DH系带柄子叶高频再生体系的建立

以青花菜DH系3-6、3-7和3-9带柄子叶为外植体,研究其高频离体再生体系,比较了不同基因型、不同质量浓度植物生长调节剂、不同时期苗龄外植体及不同浓度AgNO3添加剂对不定芽再生频率的影响。结果筛选出3-6和3-7两个基因型：8 d苗龄外植体不定芽的再生频率分别为96.9%和97.8%（培养基：MS+0.02 mg·L-1 NAA+1.0 mg·L-1 6-BA+4 mg·L-1 AgNO3 +10 g·L-1琼脂+30 g·L-1蔗糖）,平均外植体的再生芽数分别为15、14个,生根培养诱导生根率均为100%（培养基：1/2MS+0.05 mg·L-1 NAA + 7 g·L-1琼脂+30 g·L-1蔗糖）,驯化移栽成活率均达100%。     

马缨杜鹃离体叶片高效再生不定芽及其组织细胞学研究

以马缨杜鹃（Rhododendron delavayi var. delavayi）试管苗叶片为材料，采用噻苯隆（TDZ）或玉米素（ZT）结合NAA诱导离体叶片再生植株，并对再生过程进行形态学和组织细胞学观察。结果表明，TDZ诱导马缨杜鹃离体叶片发生不定芽的作用强于ZT，WPM + TDZ 0.08 mg • L-1 + NAA 0.01 mg • L-1 是马缨杜鹃离体叶片再生不定芽的最佳培养基，芽的分化率和分化数量分别为83.33%和4.29个；其再生方式为器官直接发生，且属于多起源，再生过程依次经历细胞增殖、细胞脱分化、细胞再分化、不定芽原基形成与发育4个关键阶段。     

红肉苹果组织培养及转基因体系的建立与优化

于早春取红肉苹果植株上当年生茎段,建立其组织培养体系,并对其组织培养体系进行优化.结果表明:在添加0.2 mg/L IBA+-1.0 mg/L TDZ的MS培养基上红肉苹果叶盘不定芽诱导率最高,再生率为100％,平均每个叶盘再生9.57个不定芽;1 mg/L IBA+I mg/L BAP组合有利于植株扩繁,其扩繁率为8.27;添加0.6mg/L IBA的培养基上的生根率最高,为93.3％.转基因测试结果表明,农杆菌菌株EHA105适于红肉苹果的基因转化;农杆菌浸染后进行3d的共培养有利于转化效率的提高.     

刺槐属6种材料鲜花芳香成分分析

采用顶空固相微萃取和气相色谱—质谱联用(SPME–GC–MS)技术检测了多花刺槐(Robinia neo-mexicana var.luxurians),粘枝刺槐(R.viscosa),‘紫艳青山’、‘多彩青山’、L2F和L68F刺槐(R.pseudoacacia)鲜花芳香成分。结果表明:(1)6种刺槐鲜花共检测出53种芳香成分,主要有萜烯类、醇类、酯类、酮类、醛类、芳香烃类、烷烃类;在6种刺槐鲜花所释放的芳香成分中均含有萜烯类、醇类、酯类,且相对含量均为:萜烯类醇类酯类,萜烯类是最主要的芳香成分。(2)开红花的多花刺槐和粘枝刺槐鲜花芳香成分相对含量最多的萜烯类、醇类分别是(E)–4,8–二甲基–1,3,7–壬三烯、1–辛烯–3–醇,其余4种开白花的刺槐鲜花芳香成分相对含量最多的萜烯类、醇类分别是β–罗勒烯、芳樟醇。(3)根据芳香成分相对含量及种类的多少,将多花刺槐和‘多彩青山’刺槐的鲜花定为淡香型,粘枝刺槐,‘紫艳青山’、L2F和L68F刺槐定为浓香型。     

NaHSO_3对枇杷和毛叶枣叶片光合速率的促进作用

研究了不同浓度的NaHSO3及其与KCl和6-BA配合施用后对田间枇杷和毛叶枣离体叶片光合作用的影响。结果表明:低浓度(2～8mmol/L)的NaHSO3对光合速率有促进作用,作用效果长达6d;高浓度(16mmol/L)的NaHSO3对光合速率促进作用不明显。NaHSO3配合1mmol/LKCl和5mmol/L6-BA施用,对光合速率的促进效果更明显。     

菊花新品系叶片外植体不定芽再生体系的研究

以'东林4号'、'东林6号'、'东林9号'3个优良菊花品系叶片外植体为试材,探讨了基因型、叶龄、潮霉素浓度等因素对菊花叶片不定芽再生的影响.结果表明:基因型是影响不定芽再生的重要因素,不同品系叶片不定芽再生的激素配比存在明显差异;同一品系,上层幼嫩叶片分化率明显高于中下部.'东林9号'品系叶片不定芽分化率高达90%,'东林9号'叶片及不定芽在30 mg/L的潮霉素中表现为全部死亡.东林4号最适分化培养基为:MS+3 mg/L BA+0.1 mg/L 2,4-D;东林6号最适分化培养基为:MS+2 mg/L BA+1mg/L NAA;东林9号最适分化培养基为:MS+0.5mg/L BA+1.5 mg/L NAA.     

马蹄金组织培养与植株再生

以马蹄金无菌苗为试材,子叶为外植体,对马蹄金的组织培养进行系统的研究,讨论不同植物生长调节剂种类的组合及不同浓度的配比对愈伤诱导、分化的影响。结果表明:含不同植物生长调节剂的培养基对愈伤组织的诱导频率无显著差别,诱导率均达80%～100%,但愈伤的质地却有很大的不同,以5.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA和0.5mg/LIAA+1.5mg/L6 BA效果最好,其中0.5mg/LIAA+1.5mg/L6-BA可直接诱导出不定芽,诱导率高达82.61%;AgNO_3对愈伤组织的分化起着重要的作用,以0.1mg/LNAA+3.0mg/L6-BA+2.0mg/LAgNO_3分化的效果最好,分化频率高达76%;最佳的生根培养基为1/2MS+0.5mg/LIBA,生根率可达100%。     

寒富苹果叶片离体再生及四倍体诱导

为建立寒富苹果高效的离体再生体系和多倍体诱导体系,以试管苗叶片为外植体,研究了培养基中激素对寒富叶片再生芽的影响及适宜的四倍体诱导方法。结果表明,当培养基中BA质量浓度为0.5mg/L时,再生频率最高达35.7%;当培养基中BA质量浓度为2.5mg/L时,再生频率超过90%,平均再生芽数在4以上。在培养基中附加1.0mg/LTDZ,再生频率达100%,平均再生芽数达19.47。以附加15、30、60、120mg/L秋水仙素的液体再生培养基处理叶片5d,各个质量浓度处理均诱导出四倍体植株,诱变率在5.3%～22.2%之间;寒富苹果叶片在附加50mg/L秋水仙素固体再生培养基上处理5d亦获得了四倍体植株。研究结果表明寒富苹果叶片具有极强的不定芽再生能力,叶片再生过程中进行秋水仙素处理是获得其四倍体的一个有效途径。