应用反向间接血凝试验和酶免疫试验法检测绒山羊血清中的HBsAg

应用反向间接血凝试验和酶免疫试验法检测绒山羊血清中的ＨＢｓＡｇ丁壮，刘万臣，宣华，万敏（吉林长春解放军农牧大学兽医学院，１３００６２）有关动物血清中类人乙肝标志物的研究报道日益增多，就目前的国内外报道来看，已有１６种以上的动物体内发现有类人乙肝病毒的...     

家禽血清,卵黄和牛乳清中HBV标志物与人HBV—DNA的关系

应用反向间接血凝试验（ＲＰＨＡ）、酶免疫测定（ＥＩＡ）和聚合酶链反应（ＰＣＲ）测定了家禽血清、卵黄和牛乳清中ＨＢＶ标志物及人ＨＢＶ－ＤＮＡ。经ＲＰＨＡ测定发现，ＨＢｓＡｇ阳性率分别为４８／２０５（鸡血清），９／３１（鸭血清），３１／１０７（鸡卵黄）和５／３５（牛乳清）；在ＥＩＡ测定中，ＨＢｓＡｇ的阳性率和滴度均低于ＲＰＨＡ法，而且还发现其他ＨＢＶ标志物（ＨＢｓＡｂ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｅＡｂ和ＨＢｃＡｂ）阳性的样品。对其中阳性样品应用ＰＣＲ测定ＨＢＶ－ＤＮＡ，结果全部阴性。此外，在ＲＰＨＡ测定中，经热处理的样品中５６．９９％由阳性转阴性；ＲＰＨＡ－ＨＩ测定中，人的阳性对照组明显地被抑制，而畜禽的阳性样品几乎均不能被抑制。根据上述结果，提示存在于家禽血清等样品中的ＨＢＶ标志物可能是由非特异性因素和／或其他交叉抗原所引起，而与人ＨＢＶ无关。     

东北地区黄牛不同组织中HBsAg.HBeAg分布情况调查

用ＥＬＩＳＡ方法检测４３头东北黄牛血清，肝脏和肌肉中乙型肝炎的ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ结果表明，同一动物不同组织中两种抗原分布不同，ＨＢｓＡｇ阳性：肝脏２７．９％，肌肉９．３％，血清２．３％；ＨＢｅＡｇ阳性：肝脏１１．６％而肌肉和血清均为阴性。实验结果说明：在检测动物乙型肝炎时，应测试两种指标，在动物与人类乙型肝炎相关性研究中，动物肝脏应当引起人们的高度警觉。     

用ELISA和PCB对猪、牛血清中HBV抗原、抗体及DNA的检测

用三个厂家生产的乙型肝炎（ＨＢ）ＥＬＩＳＡ试剂盒及聚合酶链反应（ＰＣＲ）对牛、猪和羊血清分别进行了乙型肝炎病毒抗原（ＨＢＶ－Ａｇ）、抗体（Ａｎｔｉ－ＨＢＶ－Ａｂ）及ＤＮＡ的检测。ＥＬＩＳＡ共检出阳性牛血清１３份（１３／１３６），其中ＨＢ＿ｓＡｇ阳性８份，ＨＢ＿ｅＡｇ阳性５份；阳性猪血清４份（４／３６），其中有ＨＢ＿ｓＡｇ阳性３份，ＨＢｅＡｇ阳性１份。全部阳性血清和部分阴性血清共１２０份经用ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ均为阴性，未扩增出特异性ＤＮＡ片段。此结果初步表明，无论家畜血清中有无ＨＢＶ－Ａｇ，均无感染性ＨＢＶ粒子存在，因此没有足够的证据担心家畜会在ＨＢＶ的传播上对人类构成威胁。     

用ELISA和PCR对猪,牛血清中HBV抗原,抗体及DNA的检测

用三个家生产的乙型肝炎（ＨＢ）ＥＬＩＳＡ试剂盒及聚合酶反应（ＰＣＲ）对牛、猪和羊血清分别进行了乙型肝炎病毒抗原（ＨＢＶ－Ａｇ）、抗体（Ａｎｔｉ－ＨＢＶ－Ａｂ）及ＤＮＡ的检测。ＥＬＩＳＡ共检出阳性牛血清１３份（１３／１３６），其中ＨＢ４Ａｇ阳性８份，ＨＢｅＡｇ阳性５份；阳性猪血清４份（４／３６），其中有ＨＢｅＡｇ阳性３份，ＨＢｅＡｇ阳性１份。全部阳性血清和部分阴性血清共１２０份经用ＰＣＲ检测ＨＢＶＤ     

动物类人乙型肝炎的调查

作者采用人的乙型肝炎ＥＬＩＳＡ诊断试剂盒检测动物的乙型肝炎。结果ＨＢｓＡｇ检测黄牛血清４３份，阳性率为２．３％（１／４３）；肝浸液４３份，阳性率为２７．９％（１２／４３）；肌浸液４３份，阳性率为９．３％（３／４３）；鸡血清７２份，阳性率为１２．５％（９／７２）；牛奶３７份，阳性率为１０．８％．ＨＢｅＡｇ检测黄牛血清４３份，阳性率为２．８％（２／７２）。其结果表明黄牛，鸡，奶牛均感染类人乙型肝炎病毒     

青海藏羊,马鹿血清中HBsAg的检测

采用人乙型肝炎ＥＬＩＳＡ试剂盒，检测青海地区藏羊及马鹿血清中乙型肝炎表面抗原。结果：藏羊血清中ＨＢｓＡｇ阳性率为１０％，马鹿血清中未查出。     

黄曲霉毒素B1和乙型肝炎病毒在鸭肝炎,肝癌发生,发展过程中的意义

以ＤＨＢＶ－ＤＮＡ斑点杂交检测鸭血清中病毒，分别给予一定量的ＡＦＢ１，定期剖杀观察肝脏变化及肝癌发生，并在饲料中加硒观察了ＡＦＢ１诱癌的预防效应，实验结果ＤＨＢＶ阳性实验组的肝脏病变重于ＤＨＢＶ阴性实验组：ＤＨＢＶ阴性加ＡＦＢ１组病变重于ＤＨＢＶ阳性对照组，ＤＨＢＶ阴性加ＡＦＢ１线病变重于ＤＨＢＶ阴性对照组，而ＤＨＢＶ阳性高毒组与ＤＨＢＶ阳性高毒加硒组之间，以及ＤＨＢＶ阴性高毒组与ＤＨＢＶ阴性高毒     

夹心ELISA和斑点杂交试验检测鸭血清中鸭乙型肝炎病毒的比较

用单克隆抗体夹心ＥＬＩＳＡ和斑点杂交试验分别对４６例鸭血清样品中的鸭乙型肝炎病毒表面抗原（ＤＨＢｓＡｇ）和鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）ＤＮＡ进行平行检测，并根据夹心ＥＬＩＳＡ测定的Ｐ／Ｎ值和斑点杂交试验的反应斑点进行薄层扫描所测定的峰面积值，比较了１９例带毒鸭血清中ＤＨＢｓＡｇ和ＤＨＢＶＤＮＡ的相对含量。结果表明，两种试验的结果判定具有高度一致性。ＤＨＢｓＡｇ与ＤＨＢＶＤＮＡ在带毒鸭血清中呈并存关系，但其含量相关不显著（Ｐ＞０．０５）。     

黄曲霉毒素B_1和乙型肝炎病毒在鸭肝炎、肝癌发生、发展过程中的意义

以ＤＨＢＶ－ＤＮＡ斑点杂交检测鸭血清中病毒。分别给予一定量的ＡＦＢ１，定期剖杀观察肝脏变化及肝癌发生。并在饲料中加硒观察对ＡＦＢ１诱癌的预防效应。实验结果ＤＨＢＶ阳性实验组的肝脏病变重于ＤＨＢＶ阴性实验组；ＤＨＢＶ阴性加ＡＦＢ１组病变重于ＤＨＢＶ阳性对照组；ＤＨＢＶ阴性加ＡＦＢ１组病变重于ＤＨＢＶ阴性对照组。而ＤＨＢＶ阳性高毒组与ＤＨＢＶ阳性高毒加硒组之间，以及ＤＨＢＶ阴性高毒组与ＤＨＢＶ阴性高毒加硒组之间无明显差异。提示硒在本实验中无明显预防效应。     

动物园饲养动物血清HBsAg水平调查

动物园饲养动物血清ＨＢｓＡｇ水平调查郑先春，张天学，吴明清，陈琼，匡凤梧，邓芸，吴登虎，李庆美（重庆市动物园重庆６３００５０）家畜、家禽感染类乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）已有报道［１，２］。为了进一步了解野生鸟类、兽类的感染情况，我们于１９９３年４月至１９...     

兔狲血液蛋白质和酶的电泳分析

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对２只兔狲的４种血液蛋白质表型和３种血液同工酶酶谱进行研究。结果发现：①被检兔狲的血红蛋白（ＨＢ），白蛋白（ＡＬＢ）和后白蛋白（Ｐａ）分别呈单一的ＨＢＡＢ，ＡＬＢＡＡ和ＰａＡＡ型，运铁蛋白（ＴＦ）有ＴＦＡＢ和ＴＦＢＢ两种表型；②血清碱性磷酸酶（ＡＬＰ）由ＡＬＰＡ，ＡＬＰＢ，ＡＬＰＣ和ＡＬＰＤ四种同工酶组成；③血清酯酶（ＥＳ）由ＥＳＩ和ＥＳＩＶ两种同工酶共７条区带组成；④血清乳酸脱氢酶（Ｓ－ＬＤＨ）由ＬＤＨ１，ＬＤＨ２，ＬＤＨ３，ＬＤＨ４和ＬＤＨ５五种同工酶组成，红细胞内只有前四种ＬＤＨ同工酶。     

响尾蛇毒对体液和细胞免疫的效应

给ＢＡＬＢ／ｃ鼠注射南美响尾蛇毒液后１ｈ，接种人血清白蛋白（ＨＳＡ）或鸡卵白蛋白（ＯＶＡ），或者作２，４－二硝基氟苯（ＤＮＦＢ）皮肤涂捕敏感试验，发现响尾蛇毒液导致抗ＯＶＡ和抗ＨＳＡ的抗体ＩｇＧ水平显著降低。对响尾蛇毒素（毒液中一种主要的神经毒成分）的酸性无毒亚单位Ａ（ＣＡ）或碱性磷脂酶Ａ２（ＣＢ）进行研究表明，完整的响尾蛇毒素分子能导致抗ＯＶＡ和抗ＨＳＡ的抗体ＩｇＧ水平显著降低，但ＣＡ葆ＣＢ均不     

法氏囊病毒感染对肉鸡内分泌机能的影响

用鸡传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）弱毒疫苗免疫和强毒感染艾维菌鸡，采用放射免疫分析法（ＲＩＡ）测定血浆甲状腺素（Ｔ３，Ｔ４）、促肾上腺皮质素（ＡＣＴＨ）和皮质酮（Ｆ）来研究ＩＢＤＶ感染对肉鸡内分泌机能的影响。结果表明：ＩＢＤＶ弱毒疫苗免疫使肉鸡产生高效价抗体，血浆ＡＣＴＨ含量升高；ＩＢＤＭ强毒感染导致肉鸡血浆Ｔ２、Ｆ急剧升高，法氏囊肿大，血清中也出现ＩＢＤＶ抗体，但效价显著低下；而ＩＢＤＶ强毒感染曾     

鸭乙型肝炎病毒的致病性及致癌性研究

以５Ｂ８株抗ＤＨＢｓＡｇ特异性单克隆抗体作为包被抗体和酶标抗体，首次建立了检测血清中ＤＨＢｓＡｇ的单抗夹心ＥＬＩＳＡ，对纯化ＤＨＢｓＡｇ的最小检出量为１０ｎｇ／ｍｌ，对雏鸭肝炎病毒、鸭瘟病毒等９种禽类常见的病毒病抗原及人乙肝病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）均不发生反应，且能被多克隆的兔抗ＤＨＢｓＩｇＧ及５Ｂ８株单抗本身所阻断。应用本试验方法调查江苏省部分地区麻鸭ＤＨＢＶ的感染率分别为：高邮２４．５％、常     

流行性出血热病毒气溶胶感染乳鼠的免疫病理学研究

采用免疫组化ＢＡ法，对流行性出血热病毒（ＥＨＦＶ）气溶胶感染乳鼠脏器组织中的病毒动态分布进行了观察，并对其抗体消长进行了测定。结果表明：①ＢＡ法为病理诊断ＥＨＦＶ感染提供了一种准确的手段；②ＥＨＦＶ可通过气溶胶途径感染乳小鼠，乳小鼠感染ＥＨＦＶ的ＬＤ５０值可作为环境浓度的参考值；③ＥＨＦＶ气溶胶途径感染乳鼠后，４ｈ即可在心、肺，１ｄ在嗅球部检出，并可在其组织细胞中增殖，经血循、嗅神经、单核巨噬细胞系统等多途径扩散，造成多组织脏器的泛发性感染。感染后１２～１４ｄ，病毒检出率和病毒量均达峰值。动物自身免疫系统对ＥＨＦＶ有一定的清除能力；④感染乳鼠脑、肺、肾等脏器组织的病变与人类感染ＥＨＦＶ的病变有一定的相似性，提示可作为人ＥＨＦＶ的模型动物；⑤抗原检出率高于抗体检出率，ＥＬＩＳＡ法检出率高于ＩＦＡ法检出率。     

兔病毒性出血症蜂胶佐剂组织灭活苗的免疫效果

用ＰＭＶＲＶＨＤ和ＶＲＶＨＤ分别免疫家兔，用Ｅ－玫瑰花环形成试验测定细胞免疫水平（Ｔｃ），用微量血凝抑制试验（ＨＩ）进行体液免疫水平测定。并于免疫后期（第１６５ｄ和第１８７ｄ），用ＲＶＨＤ强毒对不同家兔分别进行攻击试验。结果发现：ＰＭＶＲＶＨＤ组（Ａ组）家兔Ｅ－玫瑰花环形成率显著高于ＶＲＶＨＤ组（Ｂ组）（Ｐ＜０．０１）；Ａ组家兔血清ＨＩ值极显著地高于Ｂ组（Ｐ＜０．０１）。同时，试验组家兔的细胞免疫先于体液免疫出现。在第１８７ｄ的攻击试验中，Ａ组家兔全部健活，Ｂ组家兔死亡２只，其余５只则有不同程度的发热表现。结合细胞免疫和体液免疫的测定结果，认为ＰＭＶＲＶＨＤ对家兔的免疫效果比ＶＲＶＨＤ更好。     

鸭乙型肝炎病毒的致病性及致癌性研究──Ⅲ．单克隆抗体夹心ELISA检测血清中鸭乙型肝炎病毒表面抗原的研究

以５Ｂ８株抗ＤＨＢｓＡｇ特异性单克隆抗体作为包被抗体和酶标抗体，首次建立了检测血清中ＤＨＢｓＡｇ的单抗夹心ＥＬＩＳＡ．对纯化ＤＨＢｓＡｇ的最小检出量为１０ｎｇ／ｍｌ．对雏鸭肝炎病毒、鸭瘟病毒等９种禽类常见的病毒病抗原及人乙肝病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）均不发生反应，且能被多克隆的兔抗ＤＨＢｓＩｇＧ及５Ｂ８株单抗本身所阻断。应用本试验方法调查江苏省部分地区麻鸭ＤＨＢＶ的感染率分别为：高邮２４．５％、常州２１．７％、仪征４０．３％、启东５０．０％。１日龄雏鸭静脉接种ＤＨＢＶ后，经本法检测，结果ＤＨＢｓＡｇ阳性率从４０％上升到７９％，６个月后又下降至６９％。     

肉用鸡垂体—肾上腺轴与免疫功能关系的研究

以艾维茵肉鸡为试验动物，研究了垂体－肾上腺轴在传染性腔上囊病病毒（ＩＢＤＶ）强毒株攻击时对免疫系统的调节作用。结果表明，用ＩＢＤＶ强毒株攻击后，试验鸡垂体－肾上腺轴活动加强，血清促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）和皮质酮（Ｆ）上升，抗ＩＢＤＶ抗体、白细胞介素２（ＩＬ－２）和白细胞介素３（ＩＬ－３）上升，Ｔ淋巴细胞转化率下降。未经ＩＢＤ疫苗免疫的鸡由于免疫系统遭到ＩＢＤＶ破坏，在ＩＢＤＶ强毒株攻毒后，抗Ｉ     

从疑似猪瘟病料中检出牛病毒性腹泻病毒

根据牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）ＮＡＤＬ株和猪瘟病毒（ＨＣＶ）Ａｌｆｏｒｔ株的核苷酸序列，设计合成了１对ＢＶＤＶ引物和３对ＨＣＶ引物。以从吉林、长春、哲盟３个地区经临床及病理学诊断为猪瘟的病料中提取的ＲＮＡ为模板，采用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），分别以ＢＶＤＶ和ＨＣＶ引物进行扩增。结果，用ＢＶＤＶ引物从哲盟地区的疑似猪瘟病料中扩增出大小约４００ｂｐ的片段，而用３对ＨＣＶ引物在不同的条件下均未从该病料中扩增出相应大小的ＨＣＶ基因片段。此外，用ＨＣＶ的ＰＥ０／ＰＥ４引物从吉林、长春的病料中扩增出了ＨＣＶ的基因片段，但用ＢＶＤＶ引物从这两个地区的病料中均未扩增出ＢＶＤＶ的基因片段。从哲盟疑似猪瘟病料中扩增出的片段经克隆、序列测定及计算机分析证实，该片段的核苷酸序列和氨基酸序列与ＢＶＤＶ的同源性明显高于与ＨＣＶ的同源性。将哲盟病料接种于ＭＤＢＫ传代细胞，出现典型而规律的ＢＶＤＶ样细胞病变。由此证明，从哲盟疑似猪瘟病料中检测出的是ＢＶＤＶ而不是ＨＣＶ