不溶性草酸氧化酶的部分纯化研究

以大麦麦麸为原料,对不溶性草酸氧化酶进行了部分纯化,比较了酶法与滴定法测定草酸的方法。结果表明,粗酶经酸热变性、淀粉酶水解、NaCl洗涤、去离子水洗涤4个步骤的纯化后,不溶性草酸氧化酶的纯化倍数为1.51;酶法与滴定法测定草酸无显著性差异。该技术有望用于草酸检测试剂盒的开发。     

农药对水稻体内草酸含量及草酸氧化酶活性的影响

为明确农药胁迫下水稻生理生化的变化,阐明农药诱导水稻感虫性的机制,比较研究了常用4种不同类型农药对水稻植株体内草酸含量和草酸氧化酶活性的影响.结果表明:农药处理后3～6d,水稻植株体内草酸含量显著下降,9d后不同农药处理之间草酸含量不同,三唑磷与60 mg/L吡虫啉处理组草酸含量低于对照,其余处理组均高于对照.草酸氧化酶活性农药处理后3d,120 mg/L三唑磷处理组水稻植株草酸氧化酶活性高于其他处理组,处理后6d,30 mg/L吡虫啉处理组草酸氧化酶活性最高.9d对照组与处理组均无显著差异,井冈霉素处理组水稻草酸氧化酶活性最低.草酸含量的下降和草酸氧化酶活性降低,表明农药主要影响水稻植株体内草酸合成代谢途径.     

特定电磁波对几种作物草酸氧化酶的影响

小麦、小黑麦、大麦等禾本科作物的种子经过特定电磁渡辐照(TDP)后,幼苗中的草酸氧化酶活性明显增加,经弱光强培养和TDP处理小麦也能显著提高其幼苗的草酸氧化酶活性,试验结果能为草酸氧化酶的制备工艺的改进提供参考.     

荔枝多酚氧化酶动力学研究

本文对白腊荔枝多酚氧化酶的底物进行了研究,确定该酶的最佳底物是３－甲基儿茶酚,用氧电极测出酶催化反应的最佳条件是ｐＨ值为７．３,温度为６２℃,测定反应活化能等于１３．２４ｋｊ·ｍｏ１－１,米氏常数为２．２０９×１０－２ｍｏ１·Ｌ－１,ｒｍａｘ＝２．３０６ｍｇ·Ｌ－１·ｍｉｎ－１对防止果蔬酶促褐变具有一定的指导意义。     

5种植物叶片不同采集时期草酸氧化酶的活性与性质

研究了红丝线、南板蓝、紫金牛、大叶落地生根和柳叶白前5种药用植物3个采集时期的草酸氧化酶活性及部分性质,为植物材料草酸氧化酶的评估与利用提供依据。结果表明：5种不同科属植物叶片中草酸氧化酶的活性都比较高,但在不同采集时期有明显的差异;在35—60℃范围内,5种材料的草酸氧化酶的活必均具有极强的热稳定性;红丝线、紫金牛和大叶落地生根中草酸氧化酶的活性均不受胃蛋白酶以及NaCl和CaCl2抑制,具有较好的应用潜力,而南板蓝和柳叶白前中草酸氧化酶的活性受NaCl、CaCl2及胃蛋白酶抑制。     

双低油菜农杆菌介导法导入草酸氧化酶基因研究

草酸氧化酶基因(OxO)可将草酸转化为CO2和H2O2,为研究草酸氧化酶基因对植物抗病的作用,本文通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导途径,将草酸氧化酶基因导入了双低油菜,经过诱导分化获得抗卡那霉素抗性的再生植株。经PCR检测得到了与阳性对照一致的470 bp的片段,初步表明OxO基因已整合进油菜基因组中。在诱导接种实验和对草酸的耐受性实验中,转基因油菜植株的抗性明显高于未转化油菜。     

超低频电磁波对小麦种子萌发和幼苗植株草酸氧化酶活性的影响

采用螺线管超低频电磁波处理,对超低频磁场下处理的小麦种子萌发率、幼苗形态、植株草酸氧化酶活性进行了测定。结果表明:6 mT磁感应强度处理后小麦种子的萌发率和幼苗植株草酸氧化酶活性明显提高,2 mT、4 mT磁感应强度处理后小麦幼苗的鲜重明显提高。试验结果将为草酸氧化酶提纯工艺的改善提供一定参考依据。     

草酸胁迫对拟南芥抗氧化酶和苯丙氨酸解氨酶的影响

以6周龄拟南芥生态型Columbia-4为材料,在0(CK)、5、10、15、20、25、30、35 mmol.L-1草酸(OA)胁迫48 h后,测定过氧化氢酶(CAT)、超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性及丙二醛(MDA)的含量,以探讨OA胁迫对模式植物拟南芥活性氧代谢及PAL活性的影响.结果表明:相比于CK,PAL活性极显著地升高;SOD活性也受到诱导,在20 mmol.L-1OA胁迫下,SOD活性最高;CAT和POD的活性与CK相比,受到抑制,在20 mmol.L-1OA胁迫下,二者被抑制的程度最高,并且POD活性较CAT活性被抑制的程度更大;MDA含量与OA浓度呈良好的线性关系(y=0.0279x+1.6567,R2=0.9222***),表明OA浓度越高,对拟南芥细胞的伤害越大.可见,OA有可能通过抑制CAT和POD的活性,导致H2O2等活性氧自由基的累积和膜脂过氧化作用,最终引起对拟南芥叶片的毒害.     

胆固醇氧化酶快速鉴定方法研究

[目的]建立胆固醇氧化酶的快速鉴定方法。[方法]采用初筛和复筛试验,从21种不同来源的样品中筛选出9株高酶活胆固醇氧化酶菌株,采用定性平板检测法、过氧化氢法、羟醛反应法、薄层层析法等定性检测胆固醇氧化酶的活性。[结果]从21种样品中共筛选出48株胆固醇氧化酶菌株,用定性平板检测法从中筛选出9株高酶活菌株（2-6、15-3、3-3、16-5、3-4、4-3、4-6、JM109和10192）,其中4．6酶活最高;过氧化氢法共鉴定出6株高酶活菌株,与定性平板法检测结果一致;薄层层析法可定性检测出胆固醇氧化的唯一产物胆甾4-烯-3-酮。[结论]定性平板检测法和薄层层析法可快速、有效的鉴定出高酶活胆固醇氧化酶菌株。     

乳酸菌双层包埋技术及包埋菌生物活性的研究

采用双层包埋方法,以牛奶蛋白为内层包埋剂,κ卡拉胶和刺槐豆胶为外层包埋剂,对嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌进行双层包埋.考察双层包埋乳酸菌与未包埋乳酸菌在pH=2.1的胃酸环境、60℃/60 min高温长时环境及室温存放一年等条件中的生物活性;同时将包埋乳酸菌应用于酸奶产品中,测定在酸奶储架期间包埋乳酸菌的存活率.结果表明,双层包埋乳酸菌在上述试验条件中比未包埋乳酸菌保持更高的存活率,显示出用这种双层材料包埋的乳酸菌具有稳定的生物活性,耐久存,耐胃酸,耐60℃高温,适于在酸奶中应用.     

紫花苜蓿MsOXO基因的克隆及表达分析

草酸氧化酶(OXO)在包括核盘菌在内的多种病原体的防御和植物改良中有重大作用。以紫花苜蓿为材料,克隆得到紫花苜蓿草酸氧化酶基因MsOXO。利用烟草瞬时表达进行亚细胞定位,结果显示,MsOXO定位在细胞壁上。qRT-PCR结果显示,MsOXO在紫花苜蓿的根、茎、叶中均有表达,但在根茎中表达量较低,这可能是根颈和茎基部更易被病菌侵染的原因。外源草酸50 μmol·L^-1处理根或100 μmol·L^-1处理茎及外源水杨酸100 μmol·L^-1处理根均可以诱导MsOXO基因的上调表达。     

草酸生产的实验方法研究

草酸在化学工业中应用广泛，其生产方法有多种。介绍用淀粉为原料，以硝酸为氧化剂的氧化法生产草酸的实验方法。利用正交试验法找出较好的生产工艺条件，达到提高草酸产率的目的。     

烤烟叶片多酚氧化酶和抗坏血酸氧化酶活性影响因素研究

研究了一些理化因素对烤烟叶片多酚氧化酶和抗坏血酸氧化酶活性的影响．结果表明，2种酶均较耐高温，但抗坏血酸氧化酶热稳定性好于多酚氧化酶．多酚氧化酶作用最适pH值为6，抗坏血酸氧化酶为5．Cu^2 能增强多酚氧化酶活性，减弱抗坏血酸氧化酶活性．EDTA，NaHSO3，H3BO3，柠檬酸既是多酚氧化酶的良好抑制剂，又是抗坏血酸氧化酶的激活剂．     

巨(魾)细胞色素氧化酶基因多态性及系统进化研究

采用PCR技术克隆得到12尾巨(魾)(Bagarius yarrelli)的细胞色素氧化酶Ⅰ(COⅠ)、细胞色素氧化酶Ⅱ(COⅡ)和细胞色素氧化酶Ⅲ(COⅢ)的基因序列.结果显示:巨(魾)CO Ⅰ基因序列全长1 551 bp,12个个体共出现9个单倍型,13个突变位点;COⅡ基因序列全长691 bp,12个个体共出现5个单倍型,5个突变位点;COⅢ基因序列全长784 bp,12个个体出现7个单倍型,8个突变位点.通过最小进化法Minimum Evolution (ME)构建系统发育树分析显示,巨(魾)与14种鱿科鱼在序列上有一定的同源性,并且CO Ⅰ、COⅡ和COⅢ都与中华纹胸姚(Glyptothorax sinense)、福建纹胸鱿(Glyptothorax fukiensis)、三线纹胸鱿(Glyptothorax trilineatus)和长丝黑鱿(Gagata dolichonema)在同一个分支,表明巨(魾)与纹胸鱿属和黑跳属有较近的亲缘关系.     

草酸钾与硫酸亚铁对西瓜炭疽病抗性诱导的研究

用草酸钾和硫酸亚铁的8种组合方式进行西瓜对炭疽病的抗性诱导试验,结果证明用草酸钾和硫酸亚铁分别诱导和联合诱导所获得的抗性效应明显不同。其中,首次用草酸钾诱导间隔4天后再用硫酸亚铁进行第2次诱导,所获得的诱导效应最高。同时试验得出了诱导抗病性的3个参数:诱导处理15天效应达到最大值;诱导抗性的持续期在25天左右;2次诱导之间的间隔期以4天左右为宜。     

山竹果皮多酚氧化酶酶学特性及抑制效应的研究

多酚氧化酶是酶促反应的关键酶,研究了山竹果皮中多酚氧化酶的活性及不同抑制剂的抑制效果。结果表明:山竹果皮多酚氧化酶的最适pH为5.5,最适温度为30℃,底物浓度与酶活性成正相关;抗坏血酸、亚硫酸氢钠、四硼酸钠、柠檬酸等对该酶表现出不同的抑制作用,抑制作用大小为抗坏血酸>亚硫酸氢钠>四硼酸钠>柠檬酸,抗坏血酸的浓度越高,对酶的抑制效果越明显。     

青稞及其加工制品的核酸提取方法的研究

【目的】从青稞及其制品中提取高质量的基因组DNA。【方法】选择改良的CTAB法、Tiangen核酸提取法和Qiagen核酸提取法,对所提取的核酸分别选用紫外分光光度计法、琼脂糖凝胶电泳法和实时荧光PCR法对各种方法提取的核酸进行质量评估。【结果】从实验的青稞及青稞制品中都可以提取到高质量的DNA,为后续青稞的真伪鉴别、溯源分析以及基因组检测奠定基础。【结论】青稞种子、糌粑粉、青稞谷物棒、青稞糕点、糌粑饼干、藏舒茶更适合用Tiangen核酸提取法,青稞精华片和青稞酵素则更适合用CTAB改良法+纯化法。     

华北落叶松抗坏血酸氧化酶年变化规律初探

该文对华北落叶松 (Larixprincipis rupprechtiiMagr)成年林木及苗木不同器官、不同时期的抗坏血酸氧化酶活性变化情况进行了初步探讨 .结果表明 :≤ 2mm根中抗坏血酸氧化酶活力最高 ;体内抗坏血酸氧化酶活力在生长季节较高 ;林木梢头、叶、1年生枝及苗叶等生长部位抗坏血酸氧化酶活力也较高 .抗坏因酸氧化酶与华北落叶松的生长关系较为密切 ,而与其抗逆性无关     

坛紫菜藻红蛋白分离纯化研究

[目的]建立一种新型、高效、快速的藻红蛋白分离纯化方法,并对其分离机理进行探讨。[方法]以坛紫菜的藻红蛋白搅切法提取物为原料,首先通过100和500 kDa的超滤离心管对其进行超滤分离,再在Superose 12色谱柱上以不同种类和不同浓度的流动相对藻红蛋白粗提物进行等度洗脱,分析其分离机理,并优化分离条件。[结果]在0.05 mol/L NaCl等度洗脱的条件下,藻红蛋白在Superose12色谱柱上表现为典型的氢键吸附模式;在优化的条件下,通过超滤-Superose 12氢键吸附分离的方法,可以使坛紫菜藻红蛋白提取物纯度(A565/A280)达到7.98,总回收率52.9%。[结论]该研究结果表明藻红蛋白在Superose 12色谱柱上存在氢键吸附作用,同时,该研究所建立的超滤-Superose 12氢键吸附分离方法是一种新型、高效、快速的藻红蛋白分离纯化方法。     

西瓜番茄红素提取方法优化及含量分析

从西瓜中提取番茄红素，研究确定提取温度、时间、料液比、pH值等因素对提取效果的影响。结果表明，使用含2％二氯甲烷的正己烷浸提西瓜糊，在西瓜糊质量与溶剂体积比为0．33g/ml、浸提时间2h、pH5．5、浸提温度35℃条件下，能充分提取番茄红素，提取效果较好。