吉林省动物东毕吸虫病(Ornithobilnarziasis)的病理形态学研究——Ⅰ.牛东毕吸虫病的病理形态学研究

本文对自然感染的东毕吸虫病牛进行了病理形态学研究。研究结果表明,本病主要是在肝静脉和肠系膜静脉中检出成虫,经鉴定主要为土耳其斯坦东毕吸虫(Ornithobinariaturkestanica)。在肝静脉血管内皮和肝、脾、肠壁、淋巴结等器官内形成虫体结节,形成的虫体结节以肝门静脉和肠系膜静脉为最明显。小血管内形成多发性血栓。     

用原位灌流法分离大鼠肝细胞

肝细胞的分离技术是开展离体肝细胞培养及研究的前提 ,细胞的分离效果直接影响离体细胞的成活率、细胞纯度以及细胞分裂增殖的能力 以往多采用机械分离法和肝组织酶解分离法分离哺乳动物肝细胞[1,2 ] ,但这 2种方法均存在细胞破损较严重、肝细胞中混杂大量红细胞等缺点 ,对肝细胞的成活率及细胞纯度产生较大影响 本试验采用肝脏原位灌流法分离大鼠肝细胞 ,获得了较为理想的分离效果 1　材料与方法试验动物采用 30日龄ＳＤ大鼠 ,购自中山医科大学实验动物中心 培养基为ＲＰＭＩ 1640 (ＧＩＢＣＯ公司 ) ,胶原酶为Ｓｉｇ ｍａ产品 ,小牛血…     

用间接血凝法诊断绵羊东毕吸虫病的研究

用间接血凝法对绵羊东毕吸虫病的诊断作了试验及其研究。在试验中采用戊二醛固定绵羊红血球,对影响血凝效果的诸因素作了测定。作者认为在 pH6.8条件下,用每 ml 含20μg 蛋白质浓度的雄虫粗抗原致敏1:20000鞣酸处理的红血球获得的试验效果最佳。被检血清在1:160以上的稀释度凝集时,定为阳性。用间接血凝法对近百只寄生有东毕吸虫的绵羊和数十只寄生有其它蠕虫的绵羊作了试验观察。该方法对东毕吸虫病绵羊的检出率为91.11%。由肝片吸虫,前后盘吸虫病绵羊引起的假阳性率为8.6%。寄生有消化道线虫的绵羊均为阴性。该试验结果表明,间接血凝法诊断绵羊东毕吸虫病有较高的敏感性,较好的特异性和重复性。用间接血凝法和粪孵法分别对20只患有东毕吸虫病的绵羊作了诊断试验。其结果,间接血凝法对东毕吸虫病绵羊的检出率比粪检法高20%。     

雄性地中海蟋蟀(Gryllus bimaculatus)成虫期保幼激素Ⅲ的生物合成及其调节 Ⅰ 成虫期保幼激素Ⅲ的离体生物合成

室内饲养地中海蟋蟀(Gryllus bimaculatus De Gccr)雄性成虫,解剖出侧体(CA)离休培养、测定其保幼激素Ⅲ(JH)的生物合成率。未交配和交配两组处理结果表明:成虫羽化后2天JH Ⅲ的生物合成率均达到最高峰,但交配组雄虫的生物合成率约是未交配组的2倍;羽化2天后,未交配雄成虫JH Ⅲ的生物合成率平稳下降,而交配过的雄成虫有一段时间JHⅢ生物合成率有起伏。成虫羽化后的4天内血淋巴中JHⅢ的滴定度与CA离体培养的JHⅢ的生物合成率相近。心侧体-咽侧体(CC-CA)-复合体与分离的脑一起培养,_羽化后2天JHⅢ生物合成率下降24％。8天下降45％;完整的脑-CC-CA-复合体培养,羽化后2天和8天,均下降95％。     

牧草害虫捕食性天敌毛婪步甲的研究

[目的]研究牧草害虫捕食性天敌毛婪步甲的生物学特性。[方法]2008年4月初至10月底采集毛婪步甲进行生物学饲养试验,然后进行捕食行为的观察,并测试农药对毛婪步甲的毒杀作用。[结果]毛婪步甲在贵州1年发生1代,以成虫在土壤内过冬。主要以成虫捕食猎物为主,1头成虫24h最大捕食黏虫量6.36头。农药对毛婪步甲前10d毒杀效果明显,后期主要是驱避作用。[结论]该研究可为保护毛婪步甲、防治牧草害虫提供理论依据。     

西藏尼木山羊自然感染东毕吸虫沉积虫卵分布与病理情况调查

【目的】研究西藏尼木县自然感染东毕吸虫山羊,虫卵在脏器中的分布与病理变化情况。【方法】解剖自然放牧的东毕吸虫阳性山羊,采集脏器(十二指肠、小肠上段、小肠中段、小肠下段、盲肠、结肠、直肠)显微镜下虫卵计数并观察病理变化。【结果】山羊自然感染东毕吸虫数量为1435±231.5,在脏器中,小肠中段的EPG最高,其次为盲肠和十二指肠,东毕吸虫虫卵在各脏器中的分布百分比是:十二指肠(3.50%)、小肠上段(12.57%)、小肠中段(56.41%)、小肠下段(0.52%)、盲肠(18.83%)、结肠(0.00%)、直肠(0.01%)、肝脏(8.16%)、脾脏(0.00%),小肠中段沉积的虫卵数与其他各组织相比差异极显著(P0.01)。小肠部分沉积虫卵数(73.00%)明显高于大肠部分的虫卵沉积数(18.84%),差异极显著(P0.01)。病理组织切片观察,发现小肠中段有大量虫卵肉芽结节,小肠粘膜发生炎症和轻度坏死。【结论】山羊感染东毕吸虫后不同的脏器沉积虫卵的密度和数量不同,虫卵计数与病理切片观察结果相关。     

毛葡萄茎尖的离体培养与植株再生

为了建立毛葡萄茎尖离体培养及植株再生体系,给野生毛葡萄种质资源的超低温保存和无毒苗木培育提供参考,以花溪4和农院-11毛葡萄组培苗的茎尖为材料,研究植物生长调节剂及浓度配比对毛葡萄茎尖离体培养与植株再生的影响.结果表明:毛葡萄茎尖离体培养与增殖培养的适宜培养基为MS+ BA 1.5 mg/L+ IBA 0.02 mg/L,离体培养成活率达93.8％以上,增殖率和增殖系数分别为88.6％和5.8;茎尖生根培养的适宜培养基为1/2MS +IBA 0.05～0.15 mg/L +IAA0.2 mg/L,生根成苗率为100％,建立了毛葡萄茎尖组织培养和植株再生的技术体系.     

葡萄根癌生防菌株E26生防效果的离体检测方法研究

 【目的】筛选葡萄离体茎段和叶片的最适表面消毒条件、离体培养基和接种方法，建立生防菌株E26防治葡萄根癌病效果的离体检测方法。【方法】通过比较6种表面消毒方法，4种培养基和2种接种方法，建立最优的E26生防效果离体检测方法；并通过与温室、大田生防效果的比较以及瘤组织切片观察、冠瘿碱纸电泳检测验证该离体检测方法的准确性。【结果】 在1/2 B5培养基的基础上改良出适合于葡萄离体茎段培养用的MSC 1/2B5培养基；筛选出葡萄离体茎段的最佳消毒条件和接种方法，建立了检测E26生防效果的离体茎段接种法。该方法的检测结果与葡萄活体植株的检测结果基本一致，能够快速准确地反映E26的防效；并且，瘤组织切片观察和冠瘿碱纸电泳检测结果证实了该离体检测方法的可靠性。叶圆片法检测时，根癌瘤只能在葡萄叶圆片的叶脉处形成，瘤组织较小，难以准确反映E26的生防效果。【结论】本研究建立的离体茎段检测E26的生防效果是一种比较理想的离体检测E26生防效果的方法。     

青阳参花粉活力测定方法比较

[目的]提高青阳参的坐果率。[方法]用解剖针小心将花粉块取下,并在解剖镜下将花粉块的膜剥开使其花粉粒散开置于载玻片上,用碘-碘化钾染色法(I2-KI)、氯化三苯四氮唑(TTC)染色法、醋酸洋红染色法和荧光素二醋酸酯(FDA)法对花粉生活力进行测定;花粉离体萌发法以整个花粉块为单位进行离体培养。[结果]:碘-碘化钾染色法(I2-KI)、氯化三苯四氮唑(TTC)染色法、醋酸洋红染色法、荧光素二醋酸酯(FDA)法的染色率均低于30.0%,而花粉离体萌发法测定的萌发率高达97.6%。[结论]花粉离体萌发法能对青阳参的花粉生活力进行有效的测定。     

经胼胝体穹窿间入路显露丘脑内侧区域的显微解剖学研究

目的研究经胼胝体穹窿间入路显露丘脑内侧区域的显微解剖,为临床应用提供依据。方法采用10具4%甲醛液固定、颅内动静脉乳胶灌注的成人尸头标本,模拟该入路。取自右额部发际内马蹄形切口,直径约5 cm的骨窗,逐步显露至丘脑内侧区域,显微镜下观察所显露的解剖结构。结果纵行切开胼胝体15 mm,在室间孔后上方分离透明隔间隙、穹窿体中间缝,沿两侧大脑内静脉之间可以显露丘脑内侧区。结论经胼胝体穹窿间入路经透明隔间隙进入,对周围结构损伤小,入路直接、安全,是显露丘脑内侧区域的较好入路。     

水稻离体叶抗稻瘟病鉴定方法研究

[目的]筛选一套较为完善的适宜于水稻稻瘟病抗性叶片离体鉴定的方法。[方法]从保绿剂对离体叶保绿效果的影响、保绿剂对孢子在离体叶上萌发率的影响、不同孢子接种方法对叶片发病的影响和孢子悬浮液浓度、温度对稻瘟病病原菌染叶片效果的影响几方面对水稻稻瘟病抗性叶片离体鉴定方法的影响因素进行了研究。[结果]以6-BA作为保绿剂,浓度在50-75mg／ml范围内保绿效果较好,叶片几乎全部保绿。接种方法以喷雾法与液滴法较好,孢子萌发率较高,分别达到了84．7％、86．5％,浸泡法不适合叶片离体鉴定。温度为28℃时,接种用孢子悬浮液的浓度1×10^5～2×10^5个／ml较为合适。叶片发病期间温度低于28℃,潜育期有所延长。[结论]得到了行之有效的水稻抗瘟性叶片离体鉴定方法。     

蜡蚧轮枝菌VL17菌株杀虫毒素对温室白粉虱乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶的影响

采用常规生化酶活力测定方法,对蜡蚧轮枝菌VL17菌株杀虫毒素的作用机制进行了研究,测定了它对温室白粉虱(Whitefly)成虫和若虫的离体乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶的影响。结果显示,该杀虫毒素对温室白粉虱成虫和若虫的离体乙酰胆碱酯酶活性均有极显著的抑制作用,毒素处理4h后对酶活性的抑制率分别高达90.8%和54.0%;该杀虫毒素对温室白粉虱成虫和若虫离体羧酸酯酶的抑制率极低,仅为1.9%和18.0%。因此,蜡蚧轮枝菌VL17菌株杀虫毒素对乙酰胆碱酯酶的强烈抑制作用可能是致死温室白粉虱的主要原因。     

玉米铁甲虫成虫消化系统观察

[目的]研究玉米铁甲虫成虫消化系统,为深入探索该虫消化生理、杀虫剂作用机理和研发新型药剂提供参考依据.[方法]基于体视镜和透射电镜,采用解剖法和组织切片法,研究玉米铁甲虫成虫消化系统结构.[结果]玉米铁甲虫成虫消化系统分为明显的前、中、后肠3部分.嗉囊和前胃较发达.中肠前端较粗,后端较细.马氏管共有6条.中肠组织由外向内可分为纵肌、环肌、肠壁细胞层、底膜和内膜;后肠中的直肠组织可分为纵肌、环肌和直肠垫细胞层.马氏管内可见8~14个管壁细胞的细胞核.[结论]玉米铁甲虫成虫消化系统结构的特异性可能是其对寄主植物和环境适应性的结果.     

兔血管搭桥术后移植静脉导水率的变化

为弄清血管搭桥术后移植静脉的导水率变化,采用显微外科手术方法,以兔面前静脉重建了颈总动脉试验。结果表明:搭桥术后3d,移植静脉离体血管导水率在40mmHg和60mmHg下均比对照组静脉相应跨壁压低,差异显著(P<0.05);搭桥术后6d,移植静脉离体血管导水率虽有所降低,但差异不显著(P>0.05);搭桥术后9d,移植静脉离体血管导水率在各跨壁压下均比对照组小,差异极显著(P<0.01)。随着搭桥术后时间的延长,各搭桥组移植静脉离体血管导水率逐渐降低。     

改进原位循环灌流法分离小鼠肝细胞研究

【目的】建立小鼠肝细胞分离原位循环灌流方法,为肝脏细胞蛋白质组研究提供技术技持。【方法】参考Seglen胶原酶两步原位灌流法,对其进行改进,建立原位循环灌流分离小鼠肝细胞方法,对小鼠肝脏进行原位循环灌流,离体消化肝脏组织,差速离心获得纯化小鼠肝细胞;台盼蓝拒染试验检测肝细胞活性,常规血球计数法计算肝细胞得率;利用显微形态观察、HE、PAS及免疫细胞化学等检测方法鉴定所获得的肝细胞纯度;用含体积分数20%FBS的RPMI-1640细胞营养液对原代小鼠肝细胞进行培养。【结果】建立了原位循环灌流分离小鼠肝细胞的方法,采用该方法可从每只小鼠肝脏中成功分选到细胞活性大于90%、纯度在95%以上的(4.2×107)～(6.5×107)个肝细胞。原代分离的小鼠肝细胞培养4h后,大多数细胞可贴壁,12h后贴壁完全,细胞呈伸张状态,该原代肝细胞可持续培养7d以上,且细胞形态状况良好。【结论】成功建立了小鼠肝脏原位循环灌流试验体系,获得了纯度和活性均较高的小鼠肝细胞,分选所得的小鼠肝细胞完全满足构建肝细胞蛋白质组表达谱试验的需要。     

大豆黄酮对绵羊肝脏氮代谢及其有关激素水平的影响

在 4头门静脉、肝静脉和肠系膜静脉上安装血管导管的绵羊上研究了大豆黄酮 (Da ,2mg·kg-1,肠系膜静脉给药 ,每天两次 ,连续 5d)对肝脏氮代谢及有关激素水平的影响。结果表明 ,在Da的影响下 ,绵羊肝脏血液中尿素氮水平明显下降 ,肝静脉和门静脉中尿素氮的浓度处理期较对照期分别下降 13 93% (P <0 0 5 )和 13 6 2 % (P <0 0 5 ) ;门静脉血中GH的浓度较对照期提高了 39 31% (P <0 0 5 ) ,而在肝静脉血中GH的浓度也有所提高 ;肝静脉中IGF 1水平与对照期相比提高了 18 71% (P <0 0 1) ,且门静脉中IGF 1也维持在一个较高的水平上 ;而Da对绵羊肝脏血中胰岛素的水平则无显著性影响。提示Da可通过增强对绵羊肝脏氮的潴留 ,提高门静脉GH水平和肝脏IGF 1的合成与分泌 ,从而促进机体的生长代谢     

中华沙鳅肝胰脏结构的初步研究

应用解剖学、组织学和透射电镜技术对中华沙鳅肝胰脏解剖结构、显微结构、亚显微结构进行了研究.结果表明:肝脏外形不规则,分左右两叶,右叶小,左叶大,左叶又分为两叶;中央静脉显著,肝细胞索明显,肝细胞呈圆形或卵圆形,粗面内质网、线粒体非常丰富;枯否氏细胞广泛存在于肝血窦中,形状不规则,功能活跃;胰腺散布于肝和肠系膜中,分为外分泌部和内分泌部;胆囊很大,囊壁由1～2层扁平上皮细胞组成.     

盐胁迫对毛杜鹃花粉萌发的影响

采用花粉离体萌发的方法,研究了NaC1胁迫对毛杜鹃花粉萌发的影响.结果表明,低浓度的NaCl(2mmol/L)对毛杜鹃花粉萌发有促进作用,高浓度NaCl(＞5 mmol/L)抑制毛杜鹃花粉萌发,且抑制程度随培养基中NaCl浓度的增大而加强.     

川芎对蟾蜍离体心脏的影响及其作用机制的研究

[目的]观察不同浓度川芎溶液对蟾蜍心肌收缩力和心率的影响。[方法]采用斯氏离体蛙心灌流方法,分别用0.01、0.02和0.05 g/ml川芎溶液对离体蟾蜍心脏进行灌流;先灌注阿托品,再灌注0.04 g/ml川芎溶液,考察川芎溶液对蟾蜍离体心脏心肌收缩力和心率的影响。[结果]灌注不同浓度的川芎溶液,蟾蜍心脏收缩力下降程度不同,其中0.01 g/ml川芎溶液灌注下的心脏收缩力与正常任氏液灌注下的心脏收缩力在统计学意义上差异不显著,0.02和0.05 g/ml川芎溶液灌注下的蟾蜍心脏收缩力与正常任氏液灌注下的心脏收缩力在差异显著（P〈0.01）;而当先注入阿托品再注入0.04 g/ml川芎溶液,蟾蜍心脏收缩力不再下降。[结论]川芎溶液能降低离体蟾蜍心脏的收缩力,其作用机制可能与细胞表面的M型受体有关。     

砂地柏精油对枸杞木虱成虫离体Na-K-ATP酶活力的影响

为探索砂地柏精油杀虫机理,分别测定砂地柏精油对枸杞木虱成虫离体Na-K-ATP酶活力的影响。结果表明,砂地柏精油对枸杞木虱成虫离体Na-K-ATP酶具有明显的抑制作用,随着砂地柏精油浓度的增加,抑制作用增加,最高浓度处对应的酶抑制率达到37.87%。