卵黄免疫球蛋白提取和纯化方法

卵黄免疫球蛋白是一种产量高、成本低、易于生产、应用广泛的多克隆抗体。在生产中卵黄抗体的提纯方法不一,提取和纯化的工艺直接影响卵黄抗体的质量。本文对多种卵黄抗体提取和纯化方法进行综述,并比较了各方法的优缺点,为其在生产中的应用提供理论指导。     

油茶粕中茶皂素的提取及纯化研究

油茶(Camellia oleifera)是我国南方丘陵地区的一种重要油料植物。我国是世界上油茶籽产量最高、分布最广、品种最多的国家。年产油茶籽约54．98万吨，油茶籽副产品——油茶饼粕的年平均产量约为39．71万吨。经检测分析。油茶饼粕中富含蛋白质、脂肪、淀粉、茶皂素、粗纤维和灰分等。茶籽蛋白质含有17种氨基酸成分．其中7种是人体必需的氨基酸。因此，     

神经生长因子的提取,纯化及鉴定

经凝胶过滤层析－离子交换层析－凝胶过滤层析分离方法将蛇毒中的神经生长因子提取并纯化。得到的神经生长因子经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳测得其分子量为１７０００，由２３１个氨基酸组成。在２２０．６ｎｍ处有１个特征吸收峰。最低活性单位为１０ｎｇ／ｍＬ。     

东方蜜蜂DNA提取纯化和检测

以云南东方蜜蜂作为材料,用两种方法提取不同发育时期、不同部位、不同性别的蜜蜂的ＤＮＡ,并进行纯化和检测。为将来开展蜜蜂分子遗传学、分子进化等研究打下一定基础。     

苦参碱的提取纯化工艺研究

为了优化苦参碱的提取工艺,以浸膏收率、苦参碱含量为评价指标,选择用水量、提取时间及提取次数为考察因素,利用L9（3^4）正交试验法优选出水煎煮法提取苦参碱的最佳工艺条件为用8倍量水提取3次,每次提取2h。采用乙醇沉淀及三氯甲烷萃取相结合的方法对苦参粗提物进行纯化,浓缩药液浓度为1．0g生药／mL时进行醇沉,醇沉后调节药液的pH值至9～11用三氯甲烷萃取3次。优选出的提取工艺稳定、可行,可用于苦参碱的工业化提取。     

蛋黄中抗嗜水气单胞菌IgY的提取和纯化

通过对蛋黄中抗嗜水气单胞菌IgY的提取,分别进行了两种粗提方法(水稀释法、Pectin法)和纯化方法(硫酸铵法、PEG6000法)的比较。结果显示,当蛋黄液经pH5.0蒸馏水10倍稀释粗提后,上清液中脂肪和IgY残余率分别为32.69%和68.34%,效果较好。采用12%(w/v)PEG6000、33%(v/v)饱和硫酸铵纯化IgY,其免疫活性残余率分别为63.5%和64.1%。SDS-PAGE显示,水稀释法和Pectin法提取的上清液中杂蛋白减少,硫酸铵和PEG6000纯化后的上清液中几乎无其他杂带。研究表明,水稀释法和Pectin法提取IgY具有简便、高效和无污染的特点,硫酸铵和PEG6000适合纯化IgY。     

苦参碱的提取纯化工艺研究

为了优化苦参碱的提取工艺,以浸膏收率、苦参总碱含量为评价指标,选择用水量、提取时间及提取次数为考察因素,利用L9（3^4）正交试验法优选出水煎煮法提取苦参总碱的最佳工艺条件为用8倍量水提取3次,每次提取2h,并采用乙醇沉淀及三氯甲烷萃取相结合的方法对苦参粗提物进行纯化,浓缩药液浓度为每毫升1．0g生药时进行醇沉,醇沉后调节药液的pH值至9-11用三氯甲烷萃取3次。优选出的提取工艺稳定、合理、可行。     

玉米芯色素成分的提取纯化研究

随着我国养殖业的不断发展壮大,畜牧业消耗的粮食也日益增多,为了减少食用粮食用量、降低饲料成本,蛋白质含量比较高的玉米芯可用来替代部分粮食饲料。为了提取玉米芯色素并对提取方法进行验证,采用称取干燥后粉碎的紫色玉米芯粉末25 g,乙醇浓度50%,料液比1:20（体积比计算）,依据不同萃取方法,不同萃取时间、萃取温度等进行对比研究,从而选出最佳提取方法。结果表明,采用微波法进行提取并利用XAD-4树脂在一定条件下进行纯化,能够获得较高纯度和浓度的玉米芯色素。     

人绒毛膜促性腺激素(HCG)对杂交黄牛、水牛受胎率的影响

近年来,广西象州县的多个牛人工授精品改点的受胎率,黄牛为33%～51%,水牛为35%～55%,母牛的受胎率仍有较大的提升空间。该试验利用HCG能够促进母牛卵泡发育和排卵这一特性,在母牛发情时肌肉注射HCG后进行输精,并观察其对母牛受胎率的影响,以及是否能够提高牛人工授精的效果。试验结果表明,使用HCG能够明显提高牛人工授精的受胎率,同时也提高了工作效率。     

天然牛磺酸提取及分离纯化研究

牛磺酸作为营养强化剂已在食品中,尤其是婴幼儿食品、保健品中得到广泛的应用.综述了天然牛磺酸提取及分离纯化方法研究的最新进展,以期为牛磺酸的深入研究提供参考.     

水貂Mustla Vison微量血DNA的提取与纯化

作者通过采取活体水貂少量血液 ( 5 0 μL) ,利用蛋白酶K消化 ,酚、氯仿法抽取DNA ,结果测量获得的数据和曲线表明 :用 5 0～ 5 0 0 μL冻存血可以获得具有一定纯度和数量的DNA ,完全可以满足RAPD分析的PCR反应所需     

鹿茸多肽提取分离纯化及药理作用研究进展

鹿茸多肽具有抗炎、抗氧化、增强免疫并能促进细胞分化、伤口愈合、抑制肿瘤细胞、促进神经系统、周围神经系统组织的再生等药理作用,是鹿茸中最有效的成分之一。文中对鹿茸多肽的提取,分离纯化及药理作用研究进展进行了综述,希望为鹿茸多肽的研究和开发提供参考。     

牛蒡苷元的提取及纯化

探索了一种从牛蒡子中提取、纯化牛蒡苷元的方法。将脱脂牛蒡子粗粉用含5%盐酸的50%乙醇溶液回流5 h,过滤后,药渣用50%乙醇溶液重复提取1 h,合并滤液后用5 mol/LNaOH溶液调节至中性,氯仿萃取2次,减压旋转蒸干后得牛蒡苷元粗品。粗品用硅胶柱层析纯化2次,获得类白色粉末,HPLC法进行分析。结果表明,牛蒡苷元样品保留时间与对照品保留时间一致,约为12.1 min,其相对百分含量为99.3%。牛蒡苷元总提取率为1.1%。该方法是一种有效的、简便的、能满足常规实验室设备要求的牛蒡苷元制备方法。     

不同剂量生殖激素对小鼠超排效果的影响

为了探讨孕马血清促性腺激素(PMSG)和人绒毛膜促性腺激素(HCG)对小鼠超数排卵的最佳组合剂量、最佳注射时间间隔,本试验以成熟实验小鼠为试验动物,分别采用不同剂量PMSG(5IU、7.5IU、10IU、12.5IU)与不同剂量HCG(5IU、7.5IU、10IU、12.5IU)组合注射小鼠进行排卵效果研究,并以44h、46h、48h、50h的间隔时间对小鼠进行超数排卵处理试验。结果表明,(10+10)IU剂量组合处理的见栓小鼠平均获卵数最高(10.3枚);在注射间隔为48h试验组中见栓小鼠平均获卵数最高(8.4枚)。提示本试验条件下,小鼠超排中PMSG与HCG组合剂量为10IU、注射时间间隔为48h时超排效果较好。     

屎肠球菌荚膜多糖的提取纯化及其多糖含量的测定

为提取纯化屎肠球菌（E.faecium）荚膜多糖（CPS）并测定其多糖含量,试验采用高压法破碎菌体,加入核糖核酸酶（25 μg/mL）、脱氧核糖核酸酶（0.5 mg/mL）、溶菌酶（0.25 mg/mL）及蛋白酶K （1.25 mg/mL）等去除核酸和蛋白质,得到荚膜多糖粗提物,经过30 ku和100 ku超滤离心管超滤浓缩和DEAE Sepharose Fast Flow层析柱层析后,得到纯化的屎肠球菌荚膜多糖,再利用苯酚-硫酸法测定其含量。结果表明,成功从屎肠球菌中提取纯化出荚膜多糖,其含量为75.21%,初步确定了屎肠球菌荚膜多糖的提取纯化方法,为今后相关疫苗的研制奠定了基础。     

Extraction,Purification and Determination of Capsular Polysaccharide in Enterococcus faecium

In order to extract and purify the capsular polysaccharide of Enterococcus faecium and measure contents of polysaccharide, high pressure crushing methods and enzyme decomposition methods (RNase A (25 μg/mL), DNase (0.5 mg/mL), lysozyme (0.25 mg/mL) and protease K (1.25 mg/mL)) were used to remove the nucleic acids and proteins to obtain crude capsular polysaccharide, and centrifugal ultrafiltration with 30 and 100 ku ultrafiltration centrifuge tubes and DEAE Sepharose Fast Flow column chromatography were also adopted to obtain the purified capsular polysaccharides of Enterococcus faecium. Then the content of polysaccharide was determined by the phenol-sulfuric acid method. The results showed the capsular polysaccharide content was 75.21%. The results revealed that capsular polysaccharide ofEnterococcus faecium was extracted successfully. The method of extracting capsular polysaccharide in Enterococcus faecium was established initially.     

绵羊胚胎成纤维细胞饲养层用于培养人诱导性多能干细胞的效果研究

试验在体外分离培养1月龄绵羊胚胎成纤维细胞（sheep embryonic fibroblast,SEF）,经丝裂霉素C处理后探讨其作为诱导性多能干细胞（induced pluripotent stem cells,iPSC）体外培养饲养层的可行性。试验以SNL饲养层细胞为对照,人iPSC（hiPSC）为培养对象,通过形态学观察、碱性磷酸酶（AP）染色、以及实时荧光定量PCR和免疫细胞化学对hiPSC标志基因mRNA和蛋白表达的检测,比较了SEF细胞和SNL细胞作为干细胞饲养层的效果。结果表明,在试验期内,与SNL饲养层体外培养的hiPSC相似,SEF饲养层体外培养的hiPSC在形态上呈集落样生长,增殖速度快;AP染色呈蓝紫色,能够维持未分化状态;能正常表达多能性标志基因。两种饲养层细胞培养的hiPSC多能性标志基因c-Myc、Klf4、OCT4和SOX2 mRNA的表达以及OCT4、SOX2、SSEA4和TRA-1-60蛋白的表达并无显著差异（P>0.05）。本研究结果初步表明SEF可作为体外培养iPSC的饲养层细胞,为进一步建立可表达促生长因子的基因修饰SEF细胞系奠定了基础。