共查询到20条相似文献,搜索用时 31 毫秒
1.
2.
【目的】建立一种能够实际应用于猪瘟兔化弱毒疫苗中猪瘟病毒含量检测的荧光定量PCR方法。【方法】根据GenBank中登录号为AF091507的猪瘟病毒(CSFV)兔化弱毒株的全长基因组序列,在其5′非编码区设计2对特异性引物(标准品引物、定量引物)和1条探针(qPCR-P),通过标准品引物进行RT-PCR扩增及T7 RNA聚合酶体外转录构建标准品RNA。对荧光定量PCR方法的各项条件进行优化,建立猪瘟兔化弱毒荧光定量PCR检测方法,并采用该法对成品猪瘟兔化弱毒疫苗中的病毒含量进行检测。【结果】成功构建了体外转录的标准品RNA,建立了检测猪瘟兔化弱毒的荧光定量PCR方法。该方法检测灵敏度可达10拷贝/μL,比RT-nPCR方法的灵敏度高出1个数量级;该法对标准品RNA检测的线性范围为1.0×108~1.0×102拷贝/μL。对1.0×108,1.0×106,1.0×103拷贝/μL 3种稀释度的标准品RNA进行重复性试验,批内变异系数分别为0.54%,0.52%和0.39%;批间变异系数分别为1.47%,1.85%和1.01%,具有良好的可重复性。应用该方法对不同厂家猪瘟兔化弱毒疫苗中的病毒含量进行测定,可知同一厂家脾淋苗中的病毒含量比细胞苗高出1~2个数量级,而不同厂家同一类型疫苗中病毒含量也有差异,其中脾淋苗差异不大,而细胞苗间的差异较大,最高可达27.2倍。【结论】建立的猪瘟兔化弱毒荧光定量PCR方法,具有敏感性高、特异性强、重复性好的特点,为实际工作中对猪瘟兔化弱毒疫苗的质量监控提供了重要的技术支撑。 相似文献
3.
4.
5.
免疫增强剂对猪瘟疫苗细胞免疫的影响 总被引:3,自引:1,他引:2
《山西农业科学》2015,(7):881-884
为了查明免疫增强剂是否能够提高猪瘟疫苗的细胞免疫效果,采用猪用转移因子、黄芪多糖注射液和猪瘟疫苗专用稀释液直接稀释猪瘟兔化高效细胞弱毒苗的方法进行了猪瘟疫苗免疫试验,并比较免疫后不同时间段内猪血清中的白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,综合评价3种不同猪瘟疫苗稀释液对猪瘟疫苗细胞免疫效果的影响。结果表明,猪用转移因子和黄芪多糖能不同程度地提高IFN-γ和TNF-α细胞因子的含量,降低IL-4细胞因子的含量,且猪用转移因子作用较强。因此,转移因子和黄芪多糖均可以提高猪瘟疫苗的细胞免疫效果,且猪用转移因子有较强增强细胞免疫的作用。 相似文献
6.
猪瘟兔化弱毒疫苗——半个世纪的回顾 总被引:19,自引:2,他引:19
猪瘟是一种严重危害养猪业的毁灭性传染病。20世纪50年代中国首创了举世闻名的猪瘟兔化弱毒疫苗(即C株),随后创制了不同的疫苗制造工艺,如细胞培养苗、乳兔组织苗和牛体反应组织苗等。C株是一株非常安全的弱毒疫苗,对各种年龄和品种的猪都没有副作用,并且有良好的免疫效力,它能同时诱导体液免疫和细胞免疫应答,对不同基因型的猪瘟病毒株均能提供有效的免疫保护。免疫母猪通过母乳可对仔猪提供被动免疫保护,但过高水平的母源抗体会影响仔猪对C株疫苗的主动免疫应答。目前已经完成了包括C株及其亲本株在内的几十株猪瘟病毒的全基因组序列测定和注释,建立了猪瘟病毒的反向遗传操作系统,初步解析了猪瘟病毒主要基因的结构与功能,并构建了不同的反向遗传操作标记疫苗,赋予了C株疫苗新的生命和内涵。C株疫苗可以用于猪瘟的控制和根除,借助于C株疫苗密集接种和综合控制措施,有关国家有效地控制了猪瘟,甚至消灭了猪瘟。尽管如此,要在全球范围内根除猪瘟,今后依然有漫长的路要走,这可能有赖于对C株进行进一步改造和利用。 相似文献
7.
简单、快速地测定猪瘟病毒的含量是猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV)生产工艺中难以解决的技术之一。本试验通过应用猪瘟抗原/血清ELISA试剂盒(IDEXX HerdCheck Co.),对已知滴度的24份HCLV半成品细胞苗和21份成品疫苗进行抗原含量测定,结果24份HCLV半成品细胞苗95.83%与兔体定型热反应结果相符,检测敏感性可达20头份/瓶(或病毒拷贝数109个/瓶)。但该方法无法区分猪瘟病毒抗原与牛流行性腹泻病毒抗原。试验结果证明,IDEXX猪瘟抗原/血清ELISA试剂盒能够稳定、快速、简单地用于HCLV细胞苗的半成品与成品的病毒含量测定,为疫苗生产的质量控制提供了一种可靠和稳定的方法。 相似文献
8.
正通过近几年对朝阳地区部分养猪场和散户的猪群疫病流行病学调查发现,病死猪中因猪瘟引起直接死亡或猪瘟感染并发其他疫病引起间接死亡的病例占总死亡数的21%左右,对本地区的养猪业造成非常大经济损失。朝阳地区目前使用的猪瘟疫苗有猪瘟兔化弱毒脾淋苗、猪瘟兔化弱毒组织苗、猪瘟ST传代细胞源苗等,其中ST苗应用最多,该疫苗有良好的安全性,应用于猪体免疫非常安全,并且疫苗的免疫效果高出原有的牛睾丸源代细胞苗近20倍。实验室免 相似文献
9.
猪瘟病是由猪瘟病毒引起的,药物对猪瘟病毒效果不明显,特别是西药更没作用。所以对猪瘟病应以预防为主,治疗为辅。预防此病可用猪瘟兔化弱毒冻干疫苗,按瓶签说明加生理盐水稀释,皮下注射或肌肉注射,大小 相似文献
10.
1、防疫接种用的疫苗,不要用热水稀释。按防治传染病的要求,饮水免疫应该选用凉开水稀释疫苗。因为疫苗微生物,喜冷怕热。热能破坏微生物活性,使疫苗失效。所以不论滴眼、饮水都应使用凉开水。 相似文献
11.
12.
1 防疫不当 1.1 不按程序防疫.需要严加控制的传染病主要有猪瘟、猪丹毒、猪肺疫,常用的疫苗是猪瘟疫苗、猪瘟-猪丹毒-猪肺疫三联弱毒冻干苗. 相似文献
13.
14.
1生长肥育猪的免疫程序1.11日龄猪瘟弱毒苗超免,仔猪生后在未采食初乳前,先注射一头份猪瘟弱毒苗,隔1 ̄2h后再让仔猪吃初乳,这适用于常发猪瘟的猪场。1.27 ̄15日龄气喘病苗。1.310日龄传染性萎缩性鼻炎疫苗,肌注或皮下注射。1.410 ̄15日龄仔猪水肿苗。1.520日龄肌注猪瘟苗。1.625 ̄30日龄肌注伪狂犬病弱毒苗。1.730日龄肌注传染性萎缩性鼻炎疫苗。1.835 ̄40日龄仔猪副伤寒菌苗,口服或肌注(在疫区首免后,隔3 ̄4周再二免)1.960日龄猪瘟、肺疫、丹毒辣三联苗,2倍量肌注。2后备公、母猪的免疫程序2.1配种前1个月肌注细小病毒疫苗。2.2配种前20 ̄… 相似文献
15.
大剂量猪瘟弱毒疫苗对猪瘟的治疗试验 总被引:2,自引:0,他引:2
猪瘟是由猪瘟病毒引起猪的一种高度接触性传染性疾病 ,对养猪业危害极大。猪瘟弱毒疫苗的研制成功使猪瘟得到了有效控制。但由于疫苗的保存、运输和使用方法不当 ,免疫程序不合理等因素的影响 ,猪瘟还时有发生 ,特别是慢性猪瘟。非典型猪瘟的出现则加大了治疗的困难。自 2 0世纪 5 0年代有人报道使用大剂量猪瘟弱毒疫苗对猪瘟治疗以来 ,很多工作者在这方面做了大量工作 ,但究竟用多大剂量 ,怎样注射效果较好 ,目前尚无定论。为此 ,我们特进行此项试验。1 材料与方法1.1 材料猪瘟弱毒疫苗 ,郑州生物药品厂生产。试验猪来自学校动物医院收治… 相似文献
16.
17.
抗猪瘟高免卵黄抗体的制备 总被引:1,自引:0,他引:1
猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种急性、热性、高度接触性传染病。近年来,在养猪生产中尽管普遍对猪群用猪瘟兔化弱毒苗进行免疫接种,但免疫失败的现象时有发生,给养猪业造成了很大的经济损失。为了找到一个治疗猪瘟的经济有效方法,我们进行了抗猪瘟高免卵黄的制备。1材料与方法1·1试验动物186日龄罗曼商品蛋鸡,杜洛克仔猪均由郑州牧业工程高等专科学校微生物学教研室提供。1·2疫苗及毒株猪瘟兔化弱毒苗购自农业部郑州生物药品厂;石门系猪瘟强毒购自中国兽药监察所。1·3免疫方法1·3·1基础免疫对罗曼商品蛋鸡进行免疫,第一次每羽肌注猪瘟兔化… 相似文献
18.
(九)畜禽疫病防治50年代初期,研制出安全有效的牛瘟兔化、山羊化弱毒疫苗,猪瘟兔化、绵羊化弱毒疫苗,仅用6年的时间,就消灭了牛瘟、猪瘟。1976年,在联合国粮农组织和西欧经济共同体召开的会议上,一致认为中国的猪瘟兔化弱毒疫苗为控制和消灭欧洲的猪瘟起了重要作用。1968—1983年,研制成功的马传染性贫血病弱毒疫苗是国际兽医科学的创举。据1982年底统计,全国13个省、市、自治区已免疫注射200万匹马次,使这种毁灭性病毒病已基本得到控制。研制出的牛肺疫兔化弱毒菌苗和兔化绵羊化适应菌苗综合防治措施,… 相似文献
19.
孟国良 《郑州牧业工程高等专科学校学报》1996,(1)
传染病是畜牧业发展的重大制药因素之一.现在,大多数畜禽传染病都可用相应的常规疫苗作有效的预防,极大地减轻了这些疾病所造成的损失.常规疫苗有灭活苗和弱毒苗两大类,前者是采用加热、甲醛或β—丙内酯处理等理化方法将病原徽生物杀死制成,后者一般为筛选的自然弱毒株或通过组织培养传代使毒力降低的毒株.虽然常规疫苗在预防动物发生传染病方面有巨大的作用,但仍存在着许多难以克服的缺陷.如灭活苗有未能完全灭活或灭活不当造成疾病传播的可能,其免疫有效保护期短,需要较多的抗原进行反复免疫等;弱毒苗有可能表现残余致病力,引起不良副作用以及产生免疫抑制现象,由于其变异或与野毒株发生基因重组而使弱毒返强,亦有可能造成其他病原体污染的情况,况且靠传统致弱方式寻找疫苗用毒株往往事倍功半或劳而无功.再者,由于有些病原微生物所具有的特殊性质,给常规疫苗的开发带来了极大的困难.如:①由于某些病原体的遗传结构容易改变,从导致抗原变异,同一致病病原具有多种不同的血清型,这是现有一些疫苗无效的主要原因.②病毒的遗传物质感染后能插入到宿主细胞的染色体上.③某些病原体不能在体外大量增殖,无法制备常规疫苗.④病毒感染兔疫器官和细胞而引起免疫作用缺陷. 相似文献
20.
猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR快速鉴别检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
【目的】建立猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株的RT-PCR快速鉴别检测方法。【方法】根据Gen-Bank中36株猪瘟病毒(CSFV)强毒株和兔化弱毒疫苗株的基因序列,分别设计了针对CSFV强毒和兔化弱毒疫苗株的特异性引物,建立了一种能区分CSFV强毒和兔化弱毒疫苗株的RT-PCR检测方法。【结果】建立的RT-PCR检测方法可以从CSFV强毒株和兔化弱毒疫苗株中分别扩增出大小为187和492 bp的特异性片段,对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等猪源性病毒的检测结果均为阴性,说明该方法具有较好的特异性。对10份疑似猪瘟临床样品进行检测后发现,利用该方法可以从中分别检测出CSFV强毒和疫苗毒。【结论】建立了可鉴别检测CSFV强毒株和弱毒疫苗株的RT-PCR方法,为猪瘟的早期诊断及疫苗免疫猪和野毒感染猪的鉴别提供了技术参考。 相似文献