用猪瘟弱毒单抗ELISA对规模化猪场猪瘟抗体水平的监测

利用猪瘟弱毒单抗ELISA对规模化猪场仔猪和各阶段母猪进行了抗体水平的监测,分析了解其免疫状况,结果：60日龄仔猪二免前仅53.3%抗体合格;空杯期4头剂猪瘟苗免疫的母猪之后各阶段抽查免疫合格水平较高,为97.2%,建议仔猪二免时间前移。     

规模化猪场猪瘟抗体水平监测的应用

猪瘟抗体水平的高低直接反映了猪群免疫接种效果,同时反映出猪群免疫系统的健康程度以及饲养管理情况,是猪群抵抗猪瘟病毒入侵的关键因子.而目前猪瘟危害又严重制约着规模化猪场的发展,因此猪瘟抗体水平监测在规模化猪场的应用具有重要意义.本试验对一规模猪场的不同类别群体进行两次猪瘟免疫,并对其抗体水平进行了检测,计算出了阳性率、保护率、离散度和平均值,并对其进行对比和分析.猪群强化免疫的效果远远高于初次免疫的效果,阳性率、保护率和平均值都可大大提高.离散度下降,有效提高了猪瘟疫苗免疫接种的质量.认为有计划开展猪瘟抗体水平检测、制定合理、有效的免疫程序和净化猪群是规模猪场综合防治猪瘟的重要手段.     

猪瘟抗体监测及免疫效果分析

 对 9个规模化养猪场 15 18份血清进行了猪瘟免疫抗体检测。 7日龄、2 0日龄和 4 0日龄仔猪无免疫保护力 (血凝抗体效价低于 1∶16 ,下同 )的比例分别为 0、4 .8%和 19.7% ;而抗体效价≥ 1∶12 8的比例分别为 87.8%、74 .6 %和 35 .2 %。乳前免疫后 2 0、30、4 0、5 0和 6 0日龄无免疫保护力仔猪的比例分别为 18.4 %、8.4 %、9.8%、10 .0 %和 15 .4 % ,而抗体效价≥ 1∶8的比例分别由 4 0日龄的 4 1.4 %降至 5 0日龄的 15 .0 %和 6 0日龄的 3.8%。所测 398份 2 5日龄仔猪母源抗体效价均≥1 16 ,但抗体效价≥ 1 12 8的比例由 2 0日龄的 92 .8%降至 2 5日龄的 6 2 .5 %。提示猪群中存在不同比例的免疫不合格和低抗体水平的猪 ,可能是猪场发生猪瘟的主要原因     

2011—2013年广西地区猪瘟抗体监测及免疫效果分析

为了解广西地区猪瘟的免疫抗体水平,采用正向间接血凝试验对采集自2011—2013年广西14个地市不同规模猪场的20 271份血清样品进行了猪瘟抗体检测。结果表明,广西各地的猪瘟抗体水平存在一定差异,抗体合格率为64.4%~97.5%,平均合格率为84.9%,大型规模场和中小规模场的猪瘟抗体合格率较稳定,且保持在较高水平,分别为96.0%和87.5%;农村散养户和屠宰场/市场的抗体合格率相对较低,分别为82.7%和70.5%。     

泰州地区规模化猪场猪瘟抗体水平的血清学调查

用ELISA方法对泰州地区18个规模化猪场送检的334份血清进行抗体检测,从送检的样本来看,猪瘟抗体平均保护率为79.3％,但有的猪场猪瘟抗体保护水平仅在50％以下,这样的免疫效果远远不能达到完全防控猪瘟的目的,进一步分析了猪场猪群猪瘟免疫水平低下的主要原因.     

猪蓝耳病和猪瘟疫苗免疫后抗体检测分析

[目的]仔猪在14日龄接种蓝耳病毒疫苗,25日龄接种猪瘟疫苗,检测接种蓝耳病疫苗和猪瘟疫苗后的免疫合格率。[方法]采用猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒检测抗体表达量。[结果]猪蓝耳病疫苗免疫3 d后,6.7%免疫个体为抗体阳性,免疫7 d后,26.7%免疫个体为抗体阳性,免疫14 d后,85%免疫个体为抗体阳性,免疫后30 d 100%免疫个体为抗体阳性;猪瘟疫苗免疫3 d后,13%免疫个体为抗体阳性,免疫7 d后,40%免疫个体为抗体阳性,免疫14 d后,58.3%免疫个体为抗体阳性,免疫30 d后,83.3%免疫个体为抗体阳性。[结论]仔猪在蓝耳病疫苗免疫3 d后抗体效价最低,30 d后免疫效果很好,接种猪瘟疫苗3 d后抗体效价最低,仔猪不足以抵抗病毒侵袭,虽然蓝耳病疫苗和猪瘟疫苗接种后30 d,抗体水平都达到了农业部规定的70%的标准,但是猪瘟疫苗免疫效果不能达到100%理想效果。     

黑龙江地区某猪场抗体监测及免疫效果初步分析

为了解黑龙江地区某猪场疫苗的免疫效果,对黑龙江某猪场80份血清样品进行猪伪狂犬、猪瘟、猪蓝耳病抗体实验室检测。结果显示:伪狂犬gE抗体在6胎母猪50%,其他阶段抗体全部阴性。仔猪猪瘟抗体阳性率比较高,均为100%阳性。后备母猪、产过一胎到两胎的母猪,13周和16周仔猪蓝耳病抗体阳性率均较高,为100%。文章结合实际情况,提出了淘汰免疫缺陷种猪、准确注射、加强疫苗运输及保存冷链建设、购买优质疫苗、加强疫苗接种与免疫监测的有机结合等建议,以期为规模化猪场在选择疫苗及制定免疫程序时提供参考。     

不同年龄仔猪猪瘟抗体水平及免疫效果研究

为规模化猪场制定合理完善的猪瘟疫苗免疫程序,对不同年龄的猪群猪瘟抗体进行监测并分析非常有必要。试验以某规模化猪场的不同日龄仔猪为研究对象,对未免疫苗仔猪分4个阶段进行抗体检测,同时对不同胎龄的仔猪进行抗体检测。结果表明：随着仔猪日龄的增长,仔猪的猪瘟母源抗体逐渐降低;1胎龄仔猪的猪瘟免疫抗体合格率相对其他胎龄的要低;最终确定该规模化猪场仔猪的最佳首免时间为20～30日龄。     

规模化猪场猪瘟免疫抗体检测研究

现如今,我国仍然采用百分之百高密度免疫作为防控猪瘟的主要手段,但是在实践的过程中,猪瘟免疫的情况也会时有发生。所以说,深入探究猪瘟免疫抗体的现状,对防控该类疾病有着重大的意义。基于此,选取了某市里面不同大小的养猪场里面各类猪群作为实验原料,对猪瘟抗体水平进行了检测统计,然后对现在防治猪瘟的实际效果进行了调查。     

田东县中小猪场猪瘟免疫抗体水平监测

[目的]了解田东县中小猪场不同猪群的猪瘟免疫状况,为田东县防控猪瘟提供科学依据.[方法]试验选择田东县10个乡镇10个猪场,采集免疫21 d后的经产母猪、仔猪、生长育肥猪血清样本,应用阻断ELISA方法对采集血清样品进行猪瘟免疫抗体检测,比较相同疫苗不同胎次母猪群、相同疫苗不同免疫次数仔猪群、使用4种不同病毒含量(A组750RID、B组7500RID、C组20000RID、D组30000RID)猪瘟细胞苗的生长育肥猪群抗体水平.[结果]经产母猪群抗体阳性率为83.61％,总离散度为45.97％,7胎及7胎以上母猪群猪瘟免疫抗体阳性率最低,为58.33％.仔猪的一免免疫抗体阳性率为52.17％,低于国家规定标准(≥70％);二免免疫抗体阳性率为81.82％,显著高于国家规定标准,比一免抗体阳性率提高了29.65百分点.4种不同病毒含量猪瘟细胞苗免疫生长育肥猪在末次免疫21 d后,均产生较好的免疫效果,但不同病毒含量猪瘟疫苗之间存在一定差异.[结论]经产母猪群抗体离散度较大,仔猪一次免疫后抗体水平低于保护值,不同病毒含量猪瘟疫苗免疫效果存在一定差异.研究结果为进一步提高猪瘟免疫水平提供了依据.     

仔猪抗E2抗体水平的调查研究

【目的】寻找一种更具针对性、更为可靠的仔猪猪瘟抗体水平检测方法。【方法】分别采用间接ELISA、间接血凝试验（IHA）,对广西某猪场的90份已超免的不同阶段仔猪血清进行抗猪瘟E2抗体和猪瘟全抗体水平监测。【结果】在间接ELISA试验中,阳性样品数为86份,占总样品比例的95．56％;间接血凝试验结果效价在1：16以上（含1：16）的血清样品为88份,占总样品比例的97．78％,两者差异不显著。【结论】仔猪血清中确实存在具有保护性的抗E2抗体,以间接ELISA检测抗E2抗体来监测猪瘟免疫水平是可行的,这为猪瘟免疫水平的监测提供了一种新方法,也为制定免疫程序提供了科学依据。     

猪瘟病毒4种检测方法的比较

应用病毒分离鉴定、荧光抗体法、反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和夹心ELISA 4种方法,分别对23份猪瘟病料组织中的猪瘟病毒(CSFV)进行了检测,并比较4种检测方法的优缺点。结果显示,病毒分离鉴定法准确性较高,诊断比较容易,但存在试验步骤繁琐,所需时间长的缺点;荧光抗体检测法所需时间较短,但需要经验比较丰富人员来判定结果,且存在假阳性结果,特异性比较差;RT-PCR检测法具有快速、敏感等优点,特别是样品保存不理想时更有价值,利用套式PCR(nested-PCR)可以提高检测的特异性;夹心ELISA检测法具有快速、敏感等优点,但在样品保存不理想时会出现假阴性结果。     

广西地区猪瘟流行毒株E2基因的序列测定与分析

[目的]了解广西地区流行猪瘟病毒(CSFV)E2基因的变异规律与趋势,及其与疫苗毒株基因的差异性,为制定猪瘟防控措施提供科学依据.[方法]对广西地区流行CSFV毒株的E2基因进行克隆及序列测定,并与兔化弱毒(HCLV)、石门(Shimen)毒株的E2基因进行同源性比对分析,绘制遗传进化树.[结果]广西地区流行CSFV毒株与 HCLV株、Shimen株的核苷酸序列同源性为81.9％～83.3％和81.1％～82.4％,推导氨基酸序列同源性为89.3％～90.6％和87.9％～89.5％;不同广西地区流行毒株间的核苷酸序列及其推导氨基酸序列同源性分别为90.8％～99.5％和94.1％～99.5％,且均属于S2基因群的S2.1亚群,其中广西玉林株GXYL1、GXYL2、GXYL3、GXYL4、GXYL5均属于S2.1b子群,而广西贺州株GXHZ1、GXHZ2与广西北海株GXBH1、GXBH2株属于S2.1c子群.与HCLV株、Shimen株的E2基因编码氨基酸序列相比,9株广西地区流行CSFV毒株共有49处氨基酸发生变异,其中与抗原特性有关的变异有5处,分别为G713E、T724Y、E727H、I732S和S734R位点.[结论]广西地区流行CSFV毒株随时间推移的变异不明显,但其遗传变异总趋势朝着偏离疫苗株的方向发展.     

不同规模猪场种猪猪瘟抗体检测与猪瘟净化

采用HerdChek猪瘟抗体检测试剂盒检测福建省10个不同规模养猪场的种猪血清抗体,评价种猪群猪瘟免疫状况。结果表明:10个猪场种猪群猪瘟抗体平均合格率(抗体阻断率≥50%)为88.11%,猪瘟抗体平均不合格率(抗体阻断率50%)为11.89%。随后对猪瘟抗体不合格的种猪注射猪瘟活疫苗加强免疫,28d后再次检测猪瘟抗体,10个猪场种猪群猪瘟抗体平均合格率达到91.44%,比首次检测提高了3.33个百分点,结合2次猪瘟抗体检测结果,淘汰加强免疫后猪瘟抗体不合格的种猪;并初步探讨了以抗体检测为基础的猪瘟净化措施。     

广西猪瘟病毒E2基因克隆及序列分析

[目的]了解广西猪瘟病毒(CSFV)流行毒株的变异规律及其与疫苗株的基因差异,为正确选择猪瘟疫苗和防制广西猪瘟提供参考依据.[方法]以广西本地的阳性猪瘟病料为研究对象,应用RT-PCR扩增CSFV的E2基因,经克隆、测序后用DNASTAR软件对其序列进行比对分析,并绘制遗传进化树.[结果]从41份疑似猪瘟病料中共扩增出4个阳性样品的E2基因(1140 bp),经序列比对分析发现,扩增获得的4株CSFV毒株(GXGG1、GXLC1、GXLC2和GXNN1)与兔化弱毒株(HCLV)、Shimen强毒株的核苷酸同源性为82.1%~82.3%和82.9%~83.4%、其推导氨基酸同源性为88.4%~89.2%和88.9%~90.0%,4株毒株间的E2基因核苷酸及其推导氨基酸同源性分别为90.8%~99.6%和94.2%~99.5%,且均属于基因群Ⅱ;E2基因推导的氨基酸表明,E2蛋白空间结构及抗原结构的氨基酸位点693Cys、737Cys、792Cys、818Cys、828Cys、856Cys、833Pro、834Thr、837Arg均未发生变异,但其单抗识别位点G713E、N729D、K734R发生变异.[结论]近年来广西CSFV流行毒株的变异未出现较大差异.与HCLV株、Shimen强毒株亲缘关系较远,但与Paderborn株、GXWZ02株亲缘关系较近.     

广东省部分猪场猪流感抗体监测与分析

从广东省9个地级市采集42个规模猪场种公猪、肉猪和母猪血清共1 371份,用酶联免疫吸附试验和微量血球凝集抑制试验检测H1、H3、H9亚型猪流感抗体。结果表明:所监测猪场大部分猪群存在H1、H3、H9亚型猪流感抗体,H1、H3和H9亚型流感抗体阳性率分别在3.5%～44.0%、1.6%～20.0%和4.5%～15.6%之间,总阳性率分别为27.9%、6.1%和9.5%;另外,H1、H3和H9亚型猪流感抗体均以珠三角地区感染最为普遍;H1和H3抗体具有明显的季节性特点,秋冬季节的阳性率明显高于春夏季节。     

猪瘟和猪蓝耳病疫苗临床免疫效果评价

为了切实做好河南省猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征疫苗在临床上使用范围、安全性、有效性的调查及免疫效果的评估工作,更好地利用疫苗免疫技术预防猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征的发生和流行,在洛阳、新郑等20个市(县、区)、40个猪场进行了猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征疫苗的临床应用,并随机抽取了其中338份血清样品,用酶联免疫吸附试验检测其抗体效价。河南省猪瘟免疫抗体合格率平均为73.67%,而猪繁殖与呼吸综合征免疫抗体合格率平均为87.57%。不同厂家疫苗对猪免疫后抗体合格率不同,不同年龄段的猪免疫后抗体合格率不同,不同疫苗种类对猪免疫后抗体合格率不同,对猪免疫次数不同其抗体合格率也不同。以上情况可能与不同厂家疫苗质量不同有关。     

串珠镰刀菌素对仔猪血清中猪瘟抗体水平的影响

以三元杂仔猪为材料,研究了串珠镰刀菌素对仔猪猪瘟抗体水平的影响。结果表明,试验组在免疫后的第3、4、5、6周猪瘟抗体水平较对照显著降低(P0.01)。说明串珠镰刀菌素可降低猪体内血清中猪瘟抗体水平,抑制机体体液免疫的功能。     

2010～2013年广西规模化猪场伪狂犬病毒野毒株感染血清学调查

[目的]全面了解广西规模化猪场伪狂犬病毒(PRV)野毒株的流行情况,为指导猪场防控和净化伪狂犬病(PR)提供参考依据.[方法]2010～2013年采集广西地区300个规模化猪场的3950份猪血清样品,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行PRV抗体检测,并对不同地区、种类猪群的PRV感染情况进行分析.[结果]在2010～2013年抽检的300个规模猪场中有23.00％为PRV阳性猪场,3950份猪血清样本中有5.16％为阳性样本,且二者均呈逐年上升趋势.PRV阳性猪场率高于广西平均水平的5个地级市分别为北海(75.00％)、百色(42.86％)、崇左(35.71％)、南宁(25.17％)和柳州(25.00％),PRV样本阳性率高于广西平均水平的4个市分别是崇左(9.71％)、百色(9.09％)、南宁(6.50％)和钦州(6.12％).从不同地区来看,感染猪场以桂西和桂南地区较高,PRV阳性猪场率分别为30.00％和27.23％,PRV样本阳性率分别为5.21％和6.80％.种猪的PRV感染率(6.45％)明显高于肉猪(2.52％).[结论]广西猪群已普遍存在PRV野毒株感染,感染率逐年上升,且以种猪感染风险较高,实际生产中可采取实时野毒抗体监测、淘汰PRV阳性种猪、强化疫苗免疫等一系列综合措施进行防控.     

闽西南地区部分规模化猪场猪伪狂犬野毒感染的 血清流行病学调查

为了掌握闽西南地区规模化猪场猪伪狂犬野毒感染状况和流行趋势,应用ELISA方法对2012-2014年闽西南地区的859个规模化猪场22324份血清进行PR野毒感染血清学调查。调查结果显示被调查的猪场血清样品总阳性率为21.8%,场阳性率为57.0%;母猪、公猪、哺乳小猪、保育猪、育肥猪及后备猪的血清样品总阳性率分别为22.0%、23.7%、16.7%、15.6%、19.2%和27.2%,不同阶段的猪群PRVgE抗体阳性率差异显著(P0.01)。2012年-2014年猪场阳性率分别为46.7%、45.4%和57.0%,血清样品阳性率分别为20.5%、18.4%和25.4%;血清样品阳性率在30%以上的猪场比例逐年上升,分别为14.8%、19.9%和32.2%;不同地区猪场PR野毒感染情况不同。结果表明近年闽西南规模化猪场猪伪狂犬病野毒感染压力依然很大,猪伪狂犬病的控制与净化形势严峻。