鸡包涵体肝炎肿瘤坏死因子消长规律的研究

自1975年从动物体内提取肿瘤坏死因子（TNF）以来，许多科学家从哺乳动物及禽类体内提取TNF并对其理化性质、生物学活性进行了不同程度的研究和探讨。而用鸡包涵体肝炎病毒诱生TNF与该病之间相关性及产生的消长规律的研究尚属空白。本研究应用鸡包涵体肝炎病毒（FAV-HA毒株）接种SPF雏鸡，在接种后的不同日龄采血，提取TNF，并对其免疫活性（对L₉₂₉细胞的杀伤率）进行了检测，从而进一步研究其产生TNF的消长规律及与该病毒的相关性。研究结果表明，鸡包涵体肝炎病毒经口腔感染SPF雏鸡可刺激机体产生TNF，在感染的不同日龄鸡的TNF活性出现一定的消长规律。这进一步说明鸡包涵体肝炎(IBH)与TNF的产生及其活性具有密切的相关性。     

鸡包涵体肝炎肿瘤坏死因子α的动态变化与病变相关性的研究

应用FAV-Hb株试验感染1日龄SPF雏鸡,感染后分别于第1、2、3、4、5、7、10、13、16、21、26、31、36、41、46、51、56d扑杀,采外周血和脾脏,通过微量细胞病变法经L929细胞测定其TNFα活性,并对肝脏、脾脏、胸腺、法氏囊和盲肠扁桃体做病理学检查.结果表明FAV-Hb感染后第3 d在外周血开始测出TNFα活性,以后逐渐上升,第4 d达到小的峰值,随后下降,第13 d基本消失,并持续到第16 d,从21 dTNFα活性又开始回升,第46 d时达到最高峰,以后缓慢下降.感染鸡脾脏TNFα活性的变化规律与外周血基本一致,感染后第2 d起在脾脏测出少量TNFα,第7 d出现小峰值,以后下降到基本消失,从第21 d起重新测出TNFα,并逐渐上升,在36 d到56 d持续在较高的水平.病理组织学观察证实,FAV-Hb感染后,除肝脏和淋巴组织的损伤性变化外,从第1 d到第56 d,感染雏鸡肝脏的窦壁细胞,脾脏、胸腺、法氏囊和盲肠扁桃体的网状细胞表现出不同程度的活化增生,其增生程度与外周血和脾脏TNFα活性基本一致.鸡包涵体肝炎肿瘤坏死因子α动态变化的研究表明,FAV-Hb感染后,雏鸡体内TNFα的消长规律与病变的发生发展有较明显的相关性.     

一株鸡包涵体肝炎病毒的分离鉴定

利用鸡包涵体肝炎自然病例的肝组织，通过ＳＰＦ鸡胚传代和鸡胚肾遥代细胞培养，分离到一株鸡包涵体肝炎病毒Ｈｂ株。该病毒株的复制可被５－溴尿嘧啶－２‘脱氧核苷抑制，对乙醚和氯仿有低抗力，说明Ｈｂ株的核酸型为ＤＮＡ，无脂质囊膜。     

鸡包涵体肝炎病毒CELOV 株的鉴定研究

采用鸡胚有限稀释法将鸡包涵体肝炎病毒（CELOV）纯化。将纯化的CELOV在SPF鸡胚上连续传10代,对各代次的毒种均进行毒价测定,并选择不同代次进行外源病毒、抗原性等方面的系统鉴定。结果表明,不同代次的病毒毒价稳定,病毒纯净、特异,无外源病毒感染。采用不同代次病毒鸡胚尿囊液制备3批琼脂扩散试验抗原敏感、特异,用原倍、2倍稀释的抗原可以与32倍稀释的阳性血清反应,出现清晰的沉淀线。抗原不与其它病原体的阳性血清反应。用CELOV制备的琼扩抗原可用于鸡包涵体肝炎病毒感染的血清学检测。     

实验性鸡包涵体肝炎病毒侵袭过程中免疫细胞的变化

用鸡腺病毒内蒙古毒株（ＦＡＶ－ＨＡ）对１日龄ＳＰＦ雏鸡进行人工感染,经ＨＥ染色发现,各淋巴器官的淋巴细胞严重流失,肝脏等器官中单核－巨噬细胞活化增生;经间接免疫荧光法病毒抗原定位,除法氏囊外,均呈不同程度的抗原阳性反应,单核－巨噬细胞阳性明显,用间接免疫荧光法计数,实验组Ｔ、Ｂ淋巴细胞均明显少于对照组。     

鸡肿瘤坏死因子的诱生及活性检测

通过对鸡静脉注射卡介苗 (BCG)和脂多糖 (L PS) ,应用 L92 9细胞检测鸡体外周血清、脾细胞和外周血白细胞肿瘤坏死因子 (TNF)活性 ,表明外周血清 TNF活性最高 ,其次是脾细胞 ,而外周血白细胞 TNF活性最低。本研究也表明在正常鸡的外周血液中有少量的 TNF     

鸡包涵体肝炎鸡胚肝细胞包涵体特性的研究

应用鸡包涵体肝炎病毒 FAV- Hb株试验感染 SPF鸡胚 ,通过透射电镜对感染鸡胚肝脏的观察 ,表明 FAV- Hb株可引起鸡胚肝细胞内形成三种类型的包涵体 ,即非病毒性中等电子密度包涵体 ,病毒性包涵体和非病毒性高电子密度包涵体 ,各型包涵体均可见于胞核或胞浆内 ,但胞核是包涵体首先形成的部位 ,核内包涵体通过核膜进入胞浆。各型包涵体在其形成过程中有较密切的关系。     

鸡包涵体肝炎病毒山西株的分离与鉴定

为了确诊山西某鸡场疑似鸡包涵体肝炎的的病例,本研究进行了鸡包涵体肝炎病毒的分离鉴定。将病死鸡肝脏研磨,经卵黄囊途径接种6日龄SPF鸡胚,成功获得1株病毒;并经过鸡胚病变特征、RT-PCR、基因测序、BLAST分析及动物回归试验等,成功分离出1株鸡包涵体肝炎病毒。进一步证明该病例是鸡包涵体肝炎病毒感染所致。     

人工感染鸡包涵体肝炎病毒的鸡胚病理学观察

用３２只１１日龄ＳＰＦ鸡胚，分别接种禽腺病毒（ＡＡＶ）２、３、４、５、８型种毒和野毒ａ、ｂ株悬液０．２ｍｌ／只。对接种后２４小时以后死亡的胚和１８日龄时扑杀的全部鸡胚进行大体病理变化、病理组织学变化和超微结构病理变化观察。试验结果表明，试验各组的鸡胚均发育不良，表现为胚体瘦小，羽毛减少；ＡＡＶ－２、３、４、５、８型和野毒ａ、ｂ株均能对鸡胚致病，主要病变均为坏死肝炎，在肝细胞核内和胞浆中形成嗜碱性或     

肿瘤坏死因子的体外诱生及检测

试验以ＢＣＧ和ＬＰＳ为诱导物,在体外培养条件下刺激小鼠腹腔巨噬细胞诱生ＴＮＦ,培养上清对Ｌ９２９细胞具有细胞毒作用。结果显示,ＰＥＣ具有良好的体外诱生ＴＮＦ的能力,产生了并分泌ＴＮＦ的最佳条件是ＬＰＳ浓度为１μｇ／ｍＬ,培养时间为８ｈ;改良的结晶紫染色测定ＴＮＦ活性的方法具有简便,快速,易于重复等优点。     

禽网状内皮组织增生病病毒感染性引起的鸡群免疫抑制

1999年8月，江苏省泰安州市某AA肉用型鸡父母代种鸡群呈现生长缓慢，鸡新城疫疫苗免疫注射后HI效价不高及多发性腹膜炎，心包炎等免疫抑制性症状，55日龄时，随机从4只患鸡采集血浆样品接种鸡胚成纤维细胞，7d后在间接荧光抗体反应中均对网状内皮增生病病毒（REV）的单克隆抗体11A25呈强阳性反应，结果表明，该鸡各的免疫抑制状态主要由REV的早期感染及其持续发现毒血症所引起。     

鸡包涵体肝炎的病原检测及病理学观察

2007年和2008年山东某鸡场相继暴发某疫病,为了确定病原和了解患病鸡死亡原因,分别对患病鸡进行了PCR检测、动物回归试验,并同时进行了病理学观察。结果表明,光镜下肝脏严重变性、坏死,肝细胞核内形成嗜酸性或嗜碱性核内包涵体的特征性病变。电镜下也观察到大量呈典型的晶格状排列的禽腺病毒粒子。说明鸡包涵体肝炎过程中,肝脏和肾脏的严重损伤所引起的代谢紊乱,可能是患鸡死亡的直接或间接原因。     

SPF鸡营养需要分析及参考营养标准的研究

本文分析了SPF鸡特殊的生活环境、生理机能和饲料处理方法,研究了制定SPF鸡营养需要量标准应考虑的核心因素,在此基础上提出了SPF鸡不同阶段的参考饲养标准。结果认为,SPF鸡的能量需要较普通鸡稍低,其它营养成分的需要量应主要考虑补足饲料灭菌过程中的损失量。     

鸡贫血病毒感染鸡细胞凋亡研究

用TUNEL法检测了1 日龄SPF雏鸡感染鸡贫血病毒(CAV)后胸腺和骨髓细胞的凋亡情况。结果,接种CAV 后6、10、20 d,骨髓细胞的凋亡率分别达51% 、52% 、57% ;接种后6 d,胸腺细胞凋亡率为53% ,比对照鸡胸腺和骨髓细胞的凋亡率明显升高( P< 0.01)。用流式细胞仪对胸腺细胞悬液所作的细胞凋亡分析结果与TUNEL法检测结果一致。     

Experimental Infection of Mycoplasma ovipneumoniae in SPF Chicken Embryos

In order to evaluate the SPF chicken embryos as a candidate of the experimental model of Mycoplasma ovipneumoniae (Mo) infection,the 7-day-old SPF chicken embryos were infected with different concentrations of Mo(10⁸,10⁹ and 10¹⁰ ccu/mL) by injection of vitelline fluid and allantoic cavity.The mortality and Mo detection rate (PCR detection and isolation) of infected chicken embryos were employed to evaluate the optimal inoculation route,dose and sampling site.Three different isolates of Mo were submitted to injection of chicken embryos for pathogenicity comparison.The results showed that the optimal inoculation route and dose were vitelline fluid injection with 0.2 mL (10⁹ ccu/mL) Mo per embryo and the sampling site for detection was also vitelline fluid.Three Mo isolates revealed good infectivity and lethality to the chicken embryo.The chicken embryos mortality caused by FL3 strain (45%) and MoGH3-3 (40%) were both higher than that by A3 strain (25%),but with no significance (P>0.05).The detection rate of Mo from the chicken embryos in FL3 group (100%) was higher than that of MoGH3-3 strain(85%) and that of A3 strain (90%),but with no significance(P>0.05).This experiment preliminarily proved that the SPF chicken embryos could be infected and partially killed by Mo,and the virulence of different strains of Mo to the chicken embryos was different.The results provided the data for further establishment of the chicken embryo infection model of Mo,which would benefit the research on Mo pathogenicity and vaccine development.     

鸡包涵体肝炎病毒（IBHV）对雏鸡淋巴细胞和红细胞免疫功能的影响

为探讨鸡包涵体肝炎病毒（ Ｉ Ｂ Ｈ Ｖ）引起免疫抑制的机理,给 １ 周龄雏鸡经口感染鸡Ⅷ型腺病毒,观察了感染后不同时间血液淋巴细胞转化率、 Ｒ Ｂ Ｃ Ｃ３ｂ 受体花环率和 Ｒ Ｂ Ｃ Ｉ Ｃ 花环率的动态变化。结果表明,淋巴细胞转化率和 Ｒ Ｂ Ｃ Ｃ３ ｂ 受体花环率于感染后 ３ ｄ 开始下降,至 ９ ｄ 降至最低,显著低于对照组（ Ｐ ＜ ００１）; Ｒ Ｂ Ｃ Ｉ Ｃ 花环率于感染后 ５ ｄ 开始升高,至 １１ ｄ 达最高,显著高于对照组（ Ｐ ＜ ００１）。证实 Ｉ Ｂ Ｈ Ｖ 能够引起淋巴细胞和红细胞免疫功能降低。     

Comparative Impact of Live Chicken Infectious Anaemia Virus Vaccine versus Natural Exposure in Meat Chicken Breeders on Immunity to Infectivity by CIA and Inclusion Body Hepatitis Viruses in Their Offspring

The immunology and histopathology and the distribution of viral antigen in infections with chicken infectious anaemia virus (CIAV) and inclusion body hepatitis virus (IBHV) were compared in the broiler offspring of CIAV-vaccinated meat chicken breeders versus those in the offspring of breeders naturally exposed to field CIAV. No significant difference in the humoral antibody level specific for CIAV was observed between 5 and 33 weeks of age in the two breeder groups (p>0.05). The maternal humoral immunity to CIAV in the day-old offspring of the groups did not differ significantly (p>0.05). The humoral immunity to CIAV at 40 days of age indicated an absence of clinical signs of CIAV in the broiler offspring of both groups of breeders and this was associated with mean serum thymulin levels in offspring of both groups not differing significantly at 1 or 40 days of age. Histopathological and immunofluorescence observations did not differ significantly in the offspring of either group by CIAV or IBHV.     

Ge-132诱导鸡体产生外源性IFN的研究

以Ｇｅ－１３２为诱生剂诱生鸡体产生外源性干扰素。将鸡胚成纤维细胞－水泡性口炎病毒作为鸡干扰素（ＩＦＮ）的检测系统,对不同种细胞、不同的细胞浓度、不同的ＩＦＮ诱生剂等诸因素对ＩＦＮ产生的影响进行了比较。试验结果表明：（１）在Ｇｅ－１３２、鸡新城疫病毒（ＮＤＶ－Ｆ）、植物血凝素（ＰＨＡ）、聚肌胞（ｐｌｙ Ｉ：Ｃ）四种诱生剂中,诱生能力差异极显著（Ｐ〈０．０１）,且以Ｇｅ－１３２诱生ＩＦＮ的能力为最强,