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1.
目的:研究蛋白激酶C(PKC),蛋白激酶A(PKA),酪氨酸蛋白激酶(TPK)在血小板聚集激活中的作用。方法:本实验是在阿斯匹林阻断花生四烯酸代谢,Apyrase去除ADP情况下,利用32P-NaH2PO4标记猪血小板,然后以PMA、凝血酶、PGF1、腺苷等处理。以血小板聚集仪测定血小板聚集;SDS-PAGE分离血小板蛋白;并进行放射自显影;碱处理电泳凝胶检测酪氨酸蛋白激酶(TPK)底物;TLC进行磷酸氨基酸分离。结果:(1)随着PMA激活PKC,血小板发生聚集;(2)35μmol/LPGF1或1mmol/Ldb-cAMP不能抑制50nmol/LPMA诱导的血小板聚集,腺苷却能抑制PMA诱导的血小板聚集(EC50=0.1mmol/L).(3)db-cAMP、腺苷都不能抑制100nmol/LPMA诱导的40kD蛋白磷酸化,PKA激活不能抑制PMA激活的PKC。(4)在PMA、凝血酶激活的血小板中,PKC、TPK都发生激活,40kD底物既是PKC的底物又是TPK的底物。结论:PKC和TPK在血小板聚集中起着重要的调节作用。 相似文献
2.
用差速离心法分离猪血小板膜,在适当条件下,用[ γ-32 P) ATP与其保温,观察32P掺入磷脂情况。结果表明:(1)无外源性磷脂酰肌醇-4-磷酸(PIP)时,32P主要掺入PIP;补充外源性PIP后,32P也可掺入磷脂酰肌醇- 4, 5-二磷酸( PIP2) 9( 2)腺苷及类似物 5’-氧- 5’-脱氧腺苷对32 P掺入这两种磷脂均有强烈的抑制作用;(3)这种抑制作用呈剂量—效应关系(IC50分别为80μmol/L和70μmol/ L),并与ATP里竞争性。提示腺苷及类似物5’-氯-5’-脱氧腺苷这种抑制作用可能与其抑制血小板聚集作用有关。 相似文献
3.
建立健康鸵鸟(Struthiocamelus)的血清全套生化参数,采用日本岛津CL 7200型全自动生化分析仪,对30只1~6月龄健康鸵鸟38项血清生化参数进行测定.结果如下:(1)血清蛋白参数/g·L-1:TP31.82,ALB15.41,GLO16.18(ALB/GLO0.95),Apo A10.12,Apo B0.14(Apo A1/Apo B0.80);(2)血清酶参数/u·L-1:ALT14.3,AST456.8(ALT/AST0.38),GGT3.4,LDH1603.1,CK3936.8,CK MB1430.8,AMY3415.1,AKP571.7,HBDH373.3;(3)血清糖、蛋白质、脂类及其代谢产物参数/mmol·L-1:GLU9.41,TRI1.97,BUN0.94,LDL2.19,HDL1.54,CHO3.58(HDL/CHO0.41);CRE12.65μmol·L-1(BUN/CRE0.063),UA505.24μmol·L-1,TBA37.1μmol·L-1,TBIL5.32μmol·L-1,DBIL3.21μmol·L-1,IBIL2.08μmol·L-1,TTT4.12u;(? 相似文献
4.
目的:动脉粥样硬化(As)是心脑血管病的主要病理基础。近年的研究表明,氧化修饰的低密度脂蛋白(OX-LDL)是LDL致As的重要因素。因此,寻找和筛选有效的抑制LDL氧化修饰的抗氧化剂是当前防治As的热点。丹酚酸B(Salvianolicacid,Sa1B)是从丹参中提取出的水溶性单体,具抗氧化性。本文采用无细胞氧化修饰系统(Cu2+)对LDL进行氧化修饰,研究Sa1B对血浆LDL氧化修饰的影响。方法:超速离心分离健康成人新鲜血中LDL,分别与终浓度为0、1、5、10、15μmol/LSa1B温育,然后加入Cu2+(终浓度3μmol/L)氧化修饰,于37Co共同温育2、4、6、8、12h。在每个时间点测定LDL中TBARS生成量、LDL中VitE含量变化和荧光物质扫描。选择已知抗氧化剂VitE、VitC浓度均为5μmol/L,与Sa1B(5μmol/L)重复上述实验操作。结果:Sa1B可使LDL中TBARS和荧光物质生成量明显减少,VitE含量消失明显减缓,三项指标均与Sa1B呈良好的效量关系。比较Sa1B、VitE和VitC的抗氧化修饰的能力,当终浓度为5μmol/L时,三者抑制氧化修饰的强度依次为:Sa 相似文献
5.
目的:观察亚硒酸钠和维甲酸联合作用对HL-60细胞生长、分化的影响,探讨两者的联合效应和作用机制。方法:以人早幼粒白血病细胞(HL-60)为实验对象,设立对照、5.8μmol/L亚硒酸钠、0.01μmol/L、0.1μmol/L和1μmol/L维甲酸(RA)以及5.8μmol/L亚硒酸钠和0.1μmol/LRA两者联合6个实验组,分别在加药处理后1~5d,每日收获细胞,利用台盼蓝排除法确定活细胞数并进行统计学处理,以观察加药后对HL-60细胞生长的影响;收获的细胞做细胞涂片,用Wright-Giemsa染色液染色,观察硒和RA对细胞形态分化的作用。与此同时,利用硝基四唑蓝(NBT)还原实验,观察药物对HL-60细胞功能分化的影响。结果:5.8μmol/L亚硒酸钠和0.1μmol/LRA联合可显著抑制HL-60细胞生长,且对细胞的毒性并无增加,强于两者的单独作用。两者联合可明显诱导该细胞向粒系细胞分化,处理5d后有72%的细胞分化成熟,联合对细胞的分化作用与1μmol/LRA(10倍)的效果基本相同。而单用0.1μmol/L维甲酸只有39%的细胞分化成熟。NBT还原实验表现出类似结果。文中讨论了硒与RA联合作 相似文献
6.
蛋白激酶C在鼻咽癌细胞生长中的作用 总被引:8,自引:2,他引:8
通过耗竭蛋白激酶C(PKC),用PKC抑制剂和激活剂等方法,观察PKC在鼻咽癌细胞系CNE-2Z生长中的作用。发现:随TPA浓度增大,细胞PKC含量降低,生长指数也逐渐减少;作用于PKC蛋白催化区的PKC抑制剂Staurosporine(ST)与作用于调节区的抑制剂Sphingosine(SS)均抑制CNE-2Z细胞的生长,最低有效浓度分别为2×10-7mol/L与10-5mol/L,随浓度增大而作用增强;PKC刺激剂OAG(0.1~100μg/ml)单独作用时对CNE-2Z的生长无明显影响,但4μg/ml可基本阻断ST或SS最低有效浓度的抑制效应。提示:PKC在鼻咽癌细胞CNE-2Z生长中起重要作用,阻断PKC的作用将为鼻咽癌的防治提供新的途径。 相似文献
7.
目的:Genistein具有很强的抗肿瘤活性,对生物膜的氧化损伤也具有保护作用。8-羟基鸟嘌呤是一种反映DNA氧化损伤程度的既灵敏又稳定的指标,又是一种与肿瘤的发生发展有关的生物标记物。本文旨在研究Genistein对鸟嘌呤氧化损伤形成8-羟基鸟嘌呤的过程的影响,探讨其抗肿瘤与抗氧化之间的联系。方法:对照组:鸟嘌呤+DMSO+H2O2+Fe2+;加药组:鸟嘌呤+药物(Genostein或槲皮素,DMSO为溶剂)+H2O2+Fe2+。每一组n=4,各管总体积均为1mL,鸟嘌呤、Fe2+、H2O2Genistein及槲皮素终浓度分别为2mmol/L、25mol/L、4.5μmol/L、60μmol/L、60μmol/L,DMSO终浓度在Genistein药效实验中均为141mmol/L(0.1%)。以CGC/MS分析各样品中8-羟基鸟嘌呤含量。其差异采用成组设计的两样本均数比较的t检验。结果:在槲皮素药效实验中,加药组与对照组中8-羟基鸟嘌呤含量的差别在统计学上没有显著性意义(P>0.05)。而在Genistein药效实验中,加药组的8-羟基鸟嘌呤含量低于对照组(P<0.01)。结论:Genistein可能通过 相似文献
8.
家兔RAPD分析反应体系的优化 总被引:3,自引:0,他引:3
《山东农业科学》1999,(5):15-17
以家兔的基因组DNA 为模板,研究影响家兔RAPD 扩增的因素。实验结果表明,Taq酶、随机引物和Mg2 + 浓度及模板DNA 的纯度对RAPD 扩增影响较大。本实验建立了适于家兔RAPD 分析的反应体系:反应体积为20μl,其中含有1 ×扩增缓冲液,2 .0m mol/L MgCl2 ,0 .1m mol/LdNTP,0-2μmol/L 随机引物,1 .5UTaq 酶,90ng 模板DNA 相似文献
9.
蛋白激酶C抑制剂对CNE—2Z细胞周期的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:蛋白激酶C(PKC)抑制剂诱导CNE-2Z细胞凋亡时细胞周期的观察。方法:PKC催化区抑制剂Staurospoine(ST)和调节区抑制剂Sphingosine(SS),终浓度分别为1×10^-6mol/L和4×10^-5mol/L,诱导CNE-2Z细胞24h,用流式细胞仪(RCM)分析。结果:诱导组细胞周期与对照组比较,ST使细胞G1和S期明显减少及G2期明显增加,(P〈0.01),SS使 相似文献
10.
催化光度法测定痕量α-萘酚 总被引:1,自引:0,他引:1
研究了α-萘酚对碘催化硫酸铈与亚砷酸氧化还原反应的抑制作用及其动力学条件。在此基础上建立了催化动力学光度法测定α-萘酚的新方法。研究结果表明,在0.36mol/L H2SO4,0.001mol/LCe(SO4)2,0.00125mol/LAs2O3,0.025g/LNaCl和0.01mg/LI-溶液中测定α-萘酚,其线性范围为0.20~2.3mg/L,表观摩尔吸光系数为2.50×104L·mol(-1)·cm(-1),灵敏度Sandell为5.77μg/cm2。 相似文献
11.
目的:观察亚硒酸钠和维甲酸联合作用对HL-60细胞DNA与蛋白质合成和细胞周期的影响,探讨两者的联合效应和作用机制。方法:以人早幼粒白血病细胞(HL-60)为实验对象,设立对照、5.8μmol/L亚硒酸钠和0.1μmol/L维甲酸(RA)以及两者联合四个实验组,分别在加药处理后1~4d收获细胞。利用3H-脱氧胸苷(3H-TdR)和3H-亮氨酸(3H-Leu)参入实验以及流式细胞仪式进行分析。结果:5.8μmol/L亚硒酸钠和0.1μmol/LRA联合可显著抑制HL-60细胞的DNA和蛋白质等生物大分子的合成,联合作用强于两者单独作用。流式细胞仪分析的细胞周期结果表明:单独硒组的HL-60细胞在G2+M期和S期有一定的阻滞;维甲酸的作用主要是阻滞G1期向S期移行,使G1期细胞蓄积,但该剂量单独作用较小;联合组主要表现在G1阻滞作用要大于单独RA组的作用,而对细胞的毒性作用并未增加。结论:生物大分子的合成和细胞周期分析方面的实验初步阐明了亚硒酸钠和维甲酸抑制HL-60细胞增殖和诱导分化以及联合效应强于各自的单独应用机制。硒与维甲酸的联合具有潜在的临床应用价值。 相似文献
12.
松罗铁兰的离体培养和快速繁殖技术研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以顶芽和侧芽为外植体研究了松罗铁兰的离体培养和快速繁殖技术。结果表明,在附加BA4.15μmol.L^-1和NAA1.61μmol.L^-1的MS培养基中可诱导外植外产生愈伤组织,将带有愈伤组织的外植体转移到MS+BA4.15-8.30μMOL.L^-1+NAA0.54-1.61αMOL.l^-1增减基中以后分化了大量的细芽。 相似文献
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以砷化物为污染源,研究砷对大豆种子萌发及生理活性物质的影响,结果表明:砷化镓(GaAs)和砷酸钠(Na_3AsO_3三价砷和Na_2HAsO_4五价砷)对大豆种子萌发的影响,在五价砷(GaAs和Na_2HAsO_4)1-5mg/L,三价砷0.1-1mg/L对大豆萌发有促进作用,随着浓度提高,发芽率有所下降;五价砷50mg/L和三价砷10mg/L显著受抑制;五价砷500mg/L和三价砷100mg/L种子萌发完全受抑制,砷化镓与五价砷相类同,砷对异柠檬酸裂解酶(ICL)和超氧物岐化酶(SOD)活性的影响与发芽能力呈正相关,三价砷对ICL和SOD的致钝作用大于五价砷2.5倍,五价砷Na_2HAsO_4大于GaAs。 相似文献
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目的:研究四种人工半合成槲皮素水溶性衍生物,即乙氧基槲皮素、槲皮素磷酸酯(B)、槲皮素单硫酸酯和槲皮素二硫酸酯对凝血酶诱导兔血小板聚集的影响。方法:用比浊法检测血小板聚集。结果:乙氧基槲皮素对血小板聚集无影响;槲皮素磷酸酯(B)、槲皮素单硫酸酯和槲皮素二硫酸酯对血小板聚集有抑制作用,IC50分别为80μmol/L、95μmol/L和185μmol/L。结论:槲皮素磷酸酯(B)、槲皮素单硫酸酯和槲皮素二硫酸酯具有抗血小板活性。 相似文献
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本研究了在混合表面活性剂SDBS和聚乙二醇辛基苯基醚(OP)共存下,meso-四(3-溴-4-羟基-5-甲氧基苯)卟啉T(BHMOP)P与钯的湿色反应,并以该反应为基础建立了高灵敏度的痕量钯的光度分析法。钯与该显色剂形成1:2的配合物,其表观摩尔吸吸光系数在422nm处为1.27×10^5L·mol^-1·cm^-1。钯量在0.0-12μg/25ml范围内服从比尔定律,本法用于合成样品中钯的测定 相似文献
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研究了在硫酸环境中8-羟基喹啉对碘催化亚砷酸与硫酸铈氧化还原反应的抑制作用及其动力学条件。据此建立了动力学的直接光度法测定痕量8-羟基喹啉的新方法。结果表明,在0225mol/LH2SO4,000125mol/LAs2O3,0001mol/LCe(SO4)2,001mg/LI,05g/LNaCl环境中测定8-羟基喹啉,其线性范围为0020~027mg/L,表观摩尔吸光系数为27×105L·mol1·cm1,Sandel灵敏度为0538μg/cm2。用本法对药物硫酸羟基喹啉钾中的8-羟基喹啉含量的测定,结果满意。 相似文献
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对于生长在Al2(SO4)3100μmol/L氮素营养液中的两个玉米品种(SC704和VA35)的根系和叶片的NADH-硝酸还原酶(EC1.6.6.1)和NAD(P)H-硝酸还原酶(EC1.6.6.2)活性测定的结果表明:铝的存在阻碍了玉米根系和叶片的生长,降低了营养液的pH值和叶片的NADH-及NAD(p)H-硝酸还原酶活性(酶活性降低的程度SC804低于VA35),增加了根系的NADH-和NA 相似文献
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根据环核苷酸理化性质及乳的特点,采用酶法从乳汁中提取环核苷酸。研究表明,该方法条件温和、工艺合理、操作方便。经放射免疫测定提取浓缩液浓度为cAMP20μmol·L-1,cGMP0.2μmol·L-1. 相似文献