鼻咽癌上皮细胞系CNE—2Z及其克隆株CNE—2Z—H5的细胞遗传学研究

目的：研究鼻咽癌上皮细胞系ＣＮＥ－２Ｚ及其克隆株ＣＮＥ－２Ｚ－Ｈ５的核型特征和标记染色体。方法：常规细胞培养和制片后进行染色体Ｇ显带，按人类细胞遗传学国际命名体制（ＩＳＣＮ）进行核型分析。结果：ＣＮＥ－２Ｚ的染色体数目在７４～９６之间，众数为８６～８７，ＣＮＥ－２Ｚ－Ｈ５的染色体数目在８３～９３之间，众数为８６～８８，两种细胞均有一系列结构复杂的标记染色体，其中１８条出现大部分被分析细胞中，其结构     

Staurosporine 对人低分化鼻咽癌细胞系细胞周期和 DNA 倍体含量影响的动态观察

目的：探讨蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴ）诱导ＣＮＥ－２Ｚ细胞凋亡时,对细胞周期的选择性和对ＤＮＡ含量及细胞周期的动态影响。方法：以ＰＫＣ催化区抑制剂ＳＴ作用于ＣＮＥ－２Ｚ细胞不同时间后,收集细胞进行ＰＩ染色和流式细胞仪检测。结果：ＳＴ以２×１０－６ｍｏｌ／Ｌ终浓度分别作用至３,６,１２,２４ｈ后,发现Ｇ２期百分比分别为３０．４３±７．１６、３０．８３±６．２５、４２．４３±３．９８和７１．８０±７．５５,均较对照组１２．０８±３．４９增高明显。比较差异有显著性（Ｐ＜０．０１）;而Ｇ１期在３,６,１２,２４ｈ分别为３４．７０±１．５６,３７．０３±６．４７,１６．６３±１．７７和１５．３０±５．４６,均较对照组６２．５６±６．５７明显降低,比较差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。亚二倍体峰百分比在１２、２４ｈ分别为３７．１０±７．２１和４３．７２±６．７３,均较对照组９．８１±１．７８显著增加（Ｐ＜０．０１）;而１２ｈ以前该峰增加不明显。结论：ＳＴ在终浓度为２×１０－６ｍｏｌ／Ｌ诱导ＣＮＥ－２Ｚ细胞至１２ｈ后即可出现明显的ＤＮＡ含量降低的凋亡细胞,对Ｇ２期细胞敏感而使之逐渐阻滞,且存在     

蛋白激酶C在鼻咽癌细胞生长中的作用

通过耗竭蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ），用ＰＫＣ抑制剂和激活剂等方法，观察ＰＫＣ在鼻咽癌细胞系ＣＮＥ－２Ｚ生长中的作用。发现：随ＴＰＡ浓度增大，细胞ＰＫＣ含量降低，生长指数也逐渐减少；作用于ＰＫＣ蛋白催化区的ＰＫＣ抑制剂Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴ）与作用于调节区的抑制剂Ｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ（ＳＳ）均抑制ＣＮＥ－２Ｚ细胞的生长，最低有效浓度分别为２×１０－７ｍｏｌ／Ｌ与１０－５ｍｏｌ／Ｌ，随浓度增大而作用增强；ＰＫＣ刺激剂ＯＡＧ（０．１～１００μｇ／ｍｌ）单独作用时对ＣＮＥ－２Ｚ的生长无明显影响，但４μｇ／ｍｌ可基本阻断ＳＴ或ＳＳ最低有效浓度的抑制效应。提示：ＰＫＣ在鼻咽癌细胞ＣＮＥ－２Ｚ生长中起重要作用，阻断ＰＫＣ的作用将为鼻咽癌的防治提供新的途径。     

蛋白激酶C抑制剂对吸烟大鼠脑血管内皮细胞细胞间粘附分子1表达的影响

目的探讨蛋白激酶C抑制剂对吸烟大鼠脑血管内皮细胞细胞间粘附分子1蛋白和mRNA表达的影响。方法无脑梗死大鼠18只,随机分为不吸烟组6只、吸烟组6只和吸烟蛋白激酶C抑制剂组6只。脑梗死大鼠48只,随机分为脑梗死组24只和蛋白激酶C抑制剂组24只,分别于梗死后2、6、12及24h干预,每个时间点6只。采用免疫组织化学法和原位杂交法分别测定细胞间粘附分子1蛋白和mRNA。结果吸烟大鼠脑血管内皮细胞细胞间粘附分子1蛋白和mRNA均有表达,吸烟蛋白激酶C抑制剂组脑血管内皮细胞细胞间粘附分子1蛋白和mRNA的表达明显低于吸烟组(P<0.05)。蛋白激酶C抑制剂组细胞间粘附分子1蛋白和mRNA的表达均低于对应时间点脑梗死组(P<0.05),且梗死后2h蛋白激酶C抑制剂组细胞间粘附分子1蛋白和mRNA的表达明显低于其他时间点组。结论蛋白激酶C抑制剂可阻断吸烟大鼠脑血管内皮细胞细胞间粘附分子1蛋白和mRNA表达,并且早期用药效果可能更好。     

蛋白激酶C抑制剂Staurosporine对血小板聚集,蛋白磷酸化和？…

目的：进一步研究蛋白激酶Ｃ抑制剂Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ在血小板聚集，肌动蛋白聚合中的作用，方法：以＾３２Ｐ－Ｎ２ＨＰＯ４标记血小板；以血小板集仪测定血小板聚集，以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分离蛋白质，进行放射自显影，以Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ－１００抽提法沉淀骨架蛋白，结果：（１）１μｍｏｌ／ＬＳｔａｕｏｐｓｏｒｉｎｅ完全抑制０．５Ｕ／ｍｌ凝血酶成１０μｍｏｌ／ＬＰＭＡ诱导的血小板聚集，大部分抑制２０μｍｏｌ／     

蛋白激酶C抑制剂Staurosporine对血小板聚集、蛋白磷酸化和肌动蛋白聚合的影响

目的：进一步研究蛋白激酶C抑制剂Staurosporine在血小板聚集、蛋白磷酸化、肌动蛋白聚合中的作用。方法：以32P－Na2HPO4标记血小板；以血小板聚集仪测定血小板聚集；以SDS－PAGE分离蛋白质，进行放射自显影；以TritonX－100抽提法沉淀骨架蛋白。结果：（1）1μmol／LStaurosporine完全抑制0．5U／ml凝血酶或10μmol／LPMA诱导的血小板聚集，大部分抑制20μmol／LA23187诱导的血小板聚集。（2）1μmol／LStaurosporine几乎完全抑制0．5U／ml凝血酶、或10μmol／LPMA、或20μmol／LA23187诱导的血小板40kD和20kD蛋白磷酸化。（3）1μmol／LStaurosporine完全抑制0．5U／ml凝血酶或10μmol／LPMA诱导的血小板肌动蛋白聚合。结论：Staurosporine抑制蛋白激酶C的活性．从而抑制血小板的聚集和肌动蛋白聚合；蛋白激酶C在血小板聚集和肌动蛋白聚合中起着重要调控作用。     

人低分化鼻咽癌上皮细胞系(CNE-2Z)细胞周期的研究

本文用标记有丝分裂百分数法（ＰＬＭ）和连续标记法首次测定了人低分化鼻咽癌上皮细胞系细胞周期各时相的时间。 ＰＬＭ法结果为 ＴＣ１８．５ｈ，ＴＳ１０ｈ， ＴＧ１６．７７ｈ， ＴＧ２１ｈ， ＴＭ０．７３ｈ；连续标记法结果为ＴＣ１７．１３ｈ，ＴＳ９．３６ ｈ， ＴＧ１６．０９ ｈ， ＴＧ２１ｈ， ＴＭ０．６８ｈ。平均有丝分裂指数为 ２．７４％。表明两种方法测定结果相近，细胞生长良好，为鼻咽癌细胞生物学特性的研究和临床治疗提供了基础数据。     

透明质酸对CNE—2Z癌细胞裸鼠移植瘤ZEGF及flk—1表达的影响

目的：研究透明质酸（ＨＡ）对ＣＮＥ－２Ｚ裸鼠移植瘤血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）和其受体（ｆｌｋ－１）表达的影响。方法：将ＣＮＺ－２Ｚ癌细胞接种到裸鼠皮下,并于原位注射透明质酸（ＨＡ）（每次３００μｇ,共１８００μｇ）,每周测瘤直径,５周后处死动物并称瘤重。取移植瘤作冰冻切片,并进行ＶＥＧＦ及ｆｌｋ－１免疫组化染色。结果：癌细胞胞浆内ＶＥＧＦ阳性,癌细胞坏死区阳性,癌间质和癌浸润周边处毛细血管内     

视黄酸诱导HL-60细胞分化后胞浆及核中蛋白激酶C活性和底物的改变

本文观察视黄酸诱导HL-60细胞分化后胞浆及核中蛋白激酶C活性和底物的变化。视黄酸诱导分化后,胞浆中蛋白激酶C活性升高,而核中则降低;胞浆中蛋白激酶C的底物减少,而核中蛋白激酶C底物的种类没有改变,但21kD的蛋白激酶C底物的磷酸化明显减弱。进一步分析表明,21kD蛋白是0.75mol/L高氯酸可溶蛋白。结果提示胞浆和核中蛋白激酶C及其底物的变化,可能与视黄酸对HL-60细胞的诱导分化作用有关。     

METFORMIN短期内对蛋鸡体AMPK活性的影响

选用日龄、体重及产蛋率相近的产蛋高峰期的新罗曼蛋鸡20只,按两两配对的原则,分为2个处理组,每个处理5个重复,每个重复2只鸡;其中实验组蛋鸡日粮中含有0．8％浓度的Metformin;配对组蛋鸡采食日粮除不合Metformin外,日粮成分与实验组相同,并按实验组前1d的采食量供给;正式实验期为5d。实验组与配对组相比,实验组蚤鸡肝脏中AMPK活性提高了24．82％（P〈0．3）,而卵巢中AMPK活性仅提高了10．13％（P〈0．6）;实验组蛋鸡肝脏中TG下降了13．61％（P〈0．1）;血清中VLDL—C含量下降了12．66％（P〈0．6）,同时在直径分别为2,1,0．5cm的卵泡中,卵黄胆固醇含量分别下降了9．18％（P〈0．01）,9．72％（P〈0．01）,17．04％（P〈0．05）。实验结果表明Metformin提高了蛋鸡体内AMPK的活性,并降低了蛋鸡体内脂质的合成及卵黄中胆固醇的含量。     

低分化鼻咽癌细胞系(CNE—2Z)及其21个单克隆株的癌细胞电泳分析

利用细胞电泳技术对低分化鼻咽癌细胞系(CNE-2Z)及其21个单克隆细胞株进行检测。CNE-2Z系平均细胞电泳率为1.43±0.35,21个单克隆平均细胞电泳率高低不一,从0.87±0.15到1.72±0.15,说明作为群体细胞系的CNE-2Z在细胞电泳方面具有明显异质性.同时,检测结果初步提供了21个单克隆株的纯度和转移能力的线索.     

脲酶抑制剂对尿素在土壤中分解速度的影响

选用酚类、醌类和盐类化学药剂以及农副产品下脚料等28种物质作为脲酶抑制剂进行室内比较试验,筛选出醌氢醌,1,4-对苯二酚、邻苯二酚、对苯醌、C-F-1、CuSO_4·5H_2O、烟碱、石灰氮、双氰胺和蓖麻叶等10种抑制率较高(平均达44.82%)的脲酶抑制剂。试验结果还表明,同一种抑制剂在 pH7.0～8.0条件下抑制率较高;抑制剂的抑制率随着尿素用量的增加而降低,而随着培养温度的升高而提高。     

日粮类型对绵羊小肠内代谢性蛋白质的影响

以成年萨福克绵羊为试验对象,分别安装瘤胃瘘管、十二指肠近端T型瘘管和回肠远端T型瘘管,饲喂由鸭茅干草和配合饲料组成的不同瘤胃内可降解有机物/瘤胃内可降解粗蛋白质(OMR/CPR)比例的日粮,研究小肠可代谢性饲料蛋白质(MP)的变化规律.结果表明随着OMR/CPR的提高,小肠内微生物氮的消化量显著降低,而过瘤胃饲料蛋白质氮显著增加;表观MP量随着OMR/CPR的增加呈先增加后减少的变化趋势,表观MP量占CP、DCP摄取量分别为42.2%～59.6%、63.6%～87.8%.     

外源性卵黄蛋白对鳗鲡GTH细胞和卵母细胞超微结构的影响

外源性卵黄蛋白与鲤鱼垂体（CPG）加绒毛膜促性腺激素（HCG）混合注射（试验组）对鳗鲡具有明显的催热作用，卵巢成热系数平均为56．17±11．74％，是对照组（CPG加HCG组）的2．87倍。试验组脑垂体促性腺激素细胞（GTH细胞）中除含有数量较多的小分泌颗粒外，球状分泌颗粒增加，内质网池扩大；卵母细胞直径为450．0微米，双层滤泡膜和放射带充分发育。对照组GTH细胞的球状分泌颗粒直径和内质网扩大均小于试验组；卵母细胞直径为270．0微米。而饲养在海水中75天，未经注射催情药物的雌鳗，脑垂体GTH细胞仅有小分泌颗粒，未见球状分泌颗粒，卵母细胞的放射带正在形成，胞内开始出现脂肪油球。试验结果表明，外源性卵黄蛋白与CPG加HCG混合注射有明显协同作用，对卵母细胞成热有显著促进作用。