昆明市马铃薯茎尖分生组织培养脱毒植株技术规程

马铃薯病毒病是导致马铃薯退化的直接原因,通过马铃薯茎尖分生组织培养,可获得脱毒植株,从而达到脱除马铃薯病毒,恢复马铃薯原有优良性状的目的。作者结合多年的工作实践,对马铃薯茎尖脱毒技术要点作出系统的归纳。     

脱毒苗及脱病毒技术

病毒病害严重影响着大多数植物的生长发育,制约着农林生产,甚至给农林生产带来灾害.特别是通过嫁接、扦插、根繁等常规无性繁殖的植物,如桃、李、杏、杨、柳、香蕉、草莓、大蒜、康乃馨等,由于病毒是通过维管束传导的,因此利用有维管束的营养体繁殖,就会把病毒传递下去,并且逐代积累,病毒浓度越来越高,危害越来越严重.     

用RAPD再探核果类果树间亲缘关系

应用随机扩增多态性技术，对核果类果树（桃，杏，李，樱桃等）间的亲缘关系进行了研究。结果表明，杏与李间有着较大的遗传差异，具有不同的发育过程，中国樱桃和桃是由李分化形成的，杏与甜樱桃间有一定亲缘关系。     

大蒜病毒病原的鉴定及组培脱毒研究

系统鉴定的结果表明,为害大蒜的病毒有GLV,GMV和TMV。GMV引起大蒜花叶及条纹花叶,而GLV在大蒜上表现潜隐症状。GLV的紫外吸收峰最低在245.2nm,最高在275.7nm,其A260/280为1.36。GLV和GMV粒子大小分别为548～700×13nm和750～773×13nm。德国GLV抗血清仅与GLV有阳性反应。采用0.10～0.25mm生长点能完全脱除病毒,而用0.30～0.70mm有部分脱毒效果。     

大蒜病毒原的鉴定及组培脱毒研究

系统鉴定的结果表明，为害大蒜的病毒有GLV，GMV和TMV.GMV引起大蒜花叶及条纹花叶，而LV在大蒜上表现潜隐症状。GLV的紫外吸收峰最低在245.2nm，最高在275.7nm，其A260／280为1.36。GLV和GMV粒子大小分别为548－700×13nm和750－773×13nm。德国GLV抗血清仅与GLV有阳性反应，采用0.10-0.25mm生长点能完全脱除病毒，而用0.30-0.70mm有部分脱毒效果。     

草莓脱毒技术的研究及应用进展

草莓是蔷薇科草莓属多年生草本植物,因其在种苗繁育上长期采用营养繁殖致使病毒不断累积而导致草莓产量降低、品质变劣等退化现象,且一旦感染病毒便会代代相传.因此,培育和应用脱毒苗是改善草莓品质、提高产量的有效途径.最早进行草莓离体培育研究的是日本的下村等(1960),他们的研究表明,热处理茎尖分生组织和组培相结合的方法,排除草莓病毒效果好.70年代国外对此项技术的研究更加趋于完善.我国此项研究始于80年代,北京市林业果树研究所1985年建立国内第一个草莓脱毒试管苗生产基地.其间草莓的各种器官、组织和细胞的培养研究迅速发展起来.同时,北京农林科学院、中国农业科学院等开展利用草莓茎尖分生组织培养、花药培养、热处理等法进行草莓脱毒研究,直到90年代我国才开始先后有几家单位建立起产业化草莓脱毒研究及生产技术体系.本文从以下几方面综述草莓脱毒技术的研究及应用进展.     

用RAPD再探核果类果树间亲缘关系

应用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲａｎｄｏｍａｍｐｌｉｆｉｅｄｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡ,ＲＡＰＤ）技术,对核果类果树（桃、杏、李、樱桃等）间的亲缘关系进行了研究。结果表明,杏与李间有着较大的遗传差异,具有不同的发育过程,中国樱桃和桃是由李分化形成的,杏与甜樱桃间有一定亲缘关系。     

蜜薯茎尖脱毒快繁体系优化与脱毒效果的研究

针对蜜薯病毒病严重的问题,对蜜薯进行茎尖脱毒,研究不同消毒剂与消毒时间对蜜薯外植体消毒效果和脱毒率的影响。通过RT-PCR技术检测蜜薯苗所带病毒种类;针对检测出的病毒进行茎尖脱毒处理,研究不同消毒剂与消毒时间对蜜薯外植体消毒效果的影响;通过正交试验研究6-BA、NAA、GA₃和IAA激素浓度配比对茎尖诱导及根诱导的影响,以此优化蜜薯快繁体系;最后,用RT-PCR检测茎尖脱毒效果。结果表明：蜜薯病毒初检发现,蜜薯中主要携带SPVG、SPFMV和SPCSV 3种病毒,其中SPVG带毒率最高;茎尖诱导适宜的外植体消毒方式为：70%酒精清洗45 s,再用0.1%升汞溶液浸泡7～8 min;茎尖诱导适宜的培养基选择为：MS+1.0 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 GA₃,生根诱导最适宜培养基为1/2 MS+0.1 mg·L^-1 NAA+0.1 mg·L^-1 IAA。经茎尖脱毒后SPFMV脱除效果最好,脱毒率为100%,SPVG次之,SPCSV脱除效果最差,仅降低了约3.33%。     

葡萄病毒病与脱毒技术

危害葡萄常见的病毒病有40种以上，中国已鉴定明确的有4种。笔者综述了有关葡萄扇叶病、葡萄卷叶病、葡萄栓皮病和葡萄茎痘病的症状以及葡萄的脱毒技术。     

脱毒甘薯四级种薯（苗）生产程序及繁育供种体系探讨

甘薯是我国的主要粮食和经济作物,病毒病危害十分严重,茎尖分生组织培养培育脱毒甘薯是防治病毒病的有效途径。根据河南省脱毒甘薯种薯繁育和生产应用的实践,提出了甘薯脱毒试管苗、原原种、原种、良种四级生产程序和脱毒种薯(苗)分级的质量标准,同时介绍了脱毒甘薯的繁育供种体系及各级种薯(苗)的生产规模和数量。     

百合病毒脱毒及检测技术研究进展

阐述百合病毒的种类和危害,系统地介绍热处理、茎尖培养、珠芽培养、热处理结合茎尖培养、病毒抑制剂结合茎尖培养等5种脱毒方法,以及利用指示植物、电镜技术、酶联免疫和分子生物学技术检测百合主要病毒的方法。     

不同热处理对甘蔗蔗茎脱毒效果的影响

为确定甘蔗脱毒的最佳方式,以期为甘蔗脱毒健康种苗的生产提供一条切实可行的途径,将甘蔗蔗茎分别置于不同温度的恒温水浴中进行不同时间的恒温热处理。结果表明:不同热处理对蔗茎处理7 d后,低于52℃的各处理萌芽率均在90%以上,52℃处理30 min以内萌芽率均为60%以上,其余处理蔗茎萌芽率低于30%;当热处理温度高于55℃、58℃和61℃时可以分别获得脱去宿根矮化病(RSD)、花叶病毒(Sc MV)和黄叶病毒(Sc YLV)的腋芽,但是蔗茎萌芽率低于20%;而在52℃恒温热处理30 min后经过38℃恒温气候箱中培养1周后,蔗芽生长点均未检测出以上3种病原微生物。以此最佳条件,研究了心叶诱导愈伤组织培养、腋芽培养、温水处理种植和恒温热处理结合腋芽分生组织培养4种脱毒方式的脱毒效果,发现心叶诱导愈伤组织培养和恒温热处理结合腋芽分生组织培养脱毒效果最佳,但是继代培养过程中发现,经诱导愈伤组织培养产生的无性系后代中变异个体较多。因此,恒温热处理结合腋芽分生组织培养为甘蔗的最有效的脱毒途径,可以培养出脱毒健康种苗。     

甘薯茎尖脱毒技术及其应用

本文阐述了甘薯病毒病种类、茎尖脱毒技术、检测方法及脱毒苗的田间表现,并对甘薯脱毒种苗生产中存在的问题及应采取的措施进行了讨论。     

甘薯脱毒繁育技术

甘薯病毒病是影响甘薯产量和品质的重要因素，病毒病在田间的发生较为普遍，病毒病为害损失一般在20％以上。根据病毒传播途径。利用病毒在植物体内分布不均匀、茎尖分生组织不带毒或带毒少的原理，采用甘薯茎尖分生组织培养无病毒薯苗，对提高甘薯产量和品质具有显著效果。推广甘薯脱毒技术成为粮食增产、农民增收的重要措施。