柑橘果实壳梭孢腐烂病的鉴定

 柑橘果实腐烂病引起伦晚脐橙果皮褐化、坚硬、缩水,严重影响果实商品价值。2017年对湖北宜昌采集的伦晚脐橙病果进行了组织分离、柯赫氏法则验证和病原菌鉴定,明确病原菌为小新壳梭孢Neofusicoccum parvum,该病菌也可侵染柑橘叶片、枝干和果实,引起腐烂。这是关于小新壳梭孢N. parvum侵染柑橘果实的首次报道。     

葡萄座腔菌侵染柑橘果实的报道

 柑橘生长中后期、运输和贮藏期间由真菌危害造成的烂果现象十分普遍。2016年对采集自江西赣州果园的柑橘病果进行了组织分离、柯赫氏法则验证和病原菌鉴定,明确病原菌为葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)。进一步发现该病菌可以侵染苹果枝干和果实,引起腐烂。这是首次关于B. dothidea侵染柑橘果实的报道。     

用阴沟肠杆菌(Enterbacter cloacae)对桃软腐病进行生物防治

用阴沟肠杆菌(菌株D—31)能推迟在人为伤口上接有挑软腐病菌(Rhizopus stolonifer)的发育始期和减缓腐烂进程。接种5天后,在70％的果实上软腐病菌的侵染完全被抑制。阴沟肠杆菌的防病效果与病原菌和桔抗菌本身的相对浓度有关。果实坚硬度影响软腐病菌的侵染,但不影响阴沟肠杆菌的防病效果。     

贵州省黄果树旅游区柑橘叶斑病病原菌的鉴定与分析

柑橘叶斑病是黄果树旅游区柑橘重要产区和母本园区的重要病害,自2017年起对其进行了柑橘病害调查及病原菌鉴定,并从病害样品中分离、纯化了多个菌株,进行了菌落形态、子实体、产孢细胞、分生孢子和子囊孢子等形态的观察及分子生物学的鉴定。依据柯赫氏法则,在室内或自然条件下,研究了代表性菌株ZHGS-2017-010对柑橘叶片和果实的致病性。依据18S核糖体RNA基因(SSU)、核糖体内转录间隔区(r DNA-ITS1-5.8S-ITS2)、28S核糖体rRNA基因(LSU)、延伸因子-1α(EF-1α)和β-微管蛋白(β-tub),采用PAUP软件及最大简约法,进行了多基因系统发育树分析。结果表明,子实体为黑色,不规则球形。产孢细胞为圆柱形,淡蓝色或透明,大小为(42.5±5.3)μm×(4.4±1.0)μm。分生孢子,无色或淡蓝色、光滑、无隔膜,呈梭形或纺锤形,大小为(26.5±2.4)μm×(6.5±0.8)μm。基于SSU、ITS、LSU、EF1-α、TUB的系统发育树研究表明,代表性菌株ZHGS-2017-010与参考菌株Botryosphaeria dothidea CBS110302和CMW 800菌株在系统发育树上聚为一支,其自举支持率为91%,表明引起该地区柑橘病害的病原为葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)。致病性试验表明,代表性菌株ZHGS-2017-010可导致柑橘产生叶斑和果实腐烂。     

福建省柑橘褐斑病菌的分离、鉴定和系统进化分析

为明确在福建省南平市的橘柚和三明市的温州蜜橘上发现的疑似柑橘褐斑病的病原菌种类,采用组织分离法获得纯化菌株,通过回接法验证菌株的致病性,利用形态学特征对病原菌进行初步鉴定,并采用最大似然法以多聚半乳糖醛酸酶基因endoPG为靶标对本研究以及国内外已报道的链格孢菌株构建系统发育树,分析其遗传多样性。结果表明,从病组织中共分离获得26株纯培养菌株,经形态学鉴定均为链格孢菌Alternaria spp.。利用分生孢子液接种橘柚离体嫩叶发现,有22株菌株能侵染橘柚叶片并产生与田间相似的褐斑病症状,确认该病害为链格孢引起的柑橘褐斑病。系统发育树分析结果显示,分离所得的26株菌株均聚在已报道的4个柑橘链格孢进化分支Clade1～Clade4中,其中21株菌株聚在国内特有的分支Clade4中,有3株菌株和1株菌株分别聚在国内外兼有的分支Clade3和Clade1中,1株菌株聚在国外特有的分支Clade2中,表明在福建省采集的这些柑橘褐斑病菌均为链格孢菌,且遗传多样性较丰富。     

北京地区桃黑斑病新症状的发现与诊断

2019年-2020年在北京地区桃园病害调研普查时发现一种桃树病害的新发症状-新叶坏死,主要症状表现为当年新生枝条顶端新叶和生长点腐烂坏死。为明确这种新叶坏死症状是否由病原菌侵染引起,从北京平谷2个乡镇3个桃园采集35份病梢样品,经病样组织分离和菌株纯化,选取12个代表性菌株进行形态学鉴定、系统进化分析以及致病性测定。结果显示,通过形态学鉴定和多基因(ITS,Alt a1,gpd)系统发育分析,以上分离株均鉴定为链格孢Alternaria alternata;3株代表性菌株的致病性测定验证了A.alternata是引起新叶坏死症状的病原菌,并且该病原菌也能导致桃枝条和果实发病,产生黑斑病症状。这是首次报道A.alternata除了引起桃果实黑斑症状之外,还可以引起桃树新叶坏死症状,结果进一步丰富了链格孢侵染桃树的症状多样性,为链格孢引起的病害的整体防控提供了理论基础。     

柑橘内生燕麦镰刀菌Gds-1对柑橘青霉病的防治研究

柑橘青霉病是柑橘果实采后危害最大的病害。为得到一株可有效应用于柑橘青霉病防治的柑橘内生真菌菌株,进行了柑橘果实内生菌分离、离体与活体试验筛选、菌株形态学与多基因位点分子系统发育鉴定、菌株活体应用效果与作用特点以及菌株代谢产物稳定性与应用防效试验。结果表明:筛选所得的柑橘内生真菌Gds-1在离体与活体条件下均对柑橘青霉菌有较好的抑制效果;经多基因位点联合系统发育分析,将Gds-1鉴定为燕麦镰刀菌Fusarium avenaceum;提前48 h施用Gds-1菌体,对柑橘青霉病的预防效果最好 (防治效果为90.67%);Gds-1菌丝不会损害健康柑橘果实表皮,但可以在柑橘果实表皮伤口和被柑橘青霉菌感染的组织部位发挥作用,从而抑制柑橘青霉菌;当温度在 ?80~100 ℃和pH=5~10时,Gds-1无菌发酵液对柑橘青霉菌的拮抗作用高效稳定;单独施用Gds-1无菌发酵滤液28 d和56 d时,对柑橘青霉病的防效与100 μg/mL的抑霉唑相当,显著高于清水对照。本研究首次报道了生防镰刀菌F. avenaceum Gds-1对柑橘青霉病的防治作用,为柑橘果实采后生物源防腐剂的选择提供了新来源,为镰刀菌生物防治机理研究提供了新思路。     

引起乙烯褪绿蜜橘果实腐烂的主要致病真菌分离及鉴定

为明确贮藏过程中乙烯褪绿蜜橘果实腐烂的主要致病真菌,以重庆市北碚产区无核蜜橘为研究材料,利用乙烯利对其果实进行褪绿处理,观察贮藏期间褪绿蜜橘果实的发病症状,确定病害种类,统计发病率;并从发病果实中分离主要致病真菌,采用形态学特征观察和ITS序列分子生物学分析对其进行鉴定。结果表明,乙烯褪绿加剧贮藏蜜橘果实病害的发生。从发病果实中共分离出5株主要致病真菌菌株,分别编号为A、B、C、D、E;结合形态学特征和5株致病真菌的ITS序列分析结果,A、B菌株均被鉴定为胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides,但这2株菌株具有不同的菌落形态及致病特性;C菌株被鉴定为焦腐病菌Lasiodiplodia theobromae;D菌株被鉴定为交链格孢菌Alternaria alternata;E菌株被鉴定为棘孢曲霉Aspergillus aculeatus。A、B菌株引起的果实腐烂占乙烯褪绿蜜橘总腐烂果实的81.96%,是引起贮藏过程中乙烯褪绿蜜橘果实腐烂的主要致病真菌,其次为C菌株,D、E菌株为次要致病真菌。     

桃树根霉腐烂病的研究和防治

1979年和1980年,作者在卢迪亚纳考察果实产后病害时发现,桃果在贮藏和运输期间因根霉菌种为害损失达60％以上。根霉菌(Rhizopus)的不同种已知是各种果实和蔬菜上的产后病原菌。匐枝根霉(R.stolonifer)的流行引起桃树毁灭,很多国家已经报道,然而在印度还未对桃的根霉腐烂病进行研究。病害在果实表面表现为水浸状斑点,很快整个果实被产生黑色孢子囊的菌丝生长物     

猕猴桃采后病害鉴定和侵染规律研究

 猕猴桃果实在0℃贮藏4周后开始出现腐烂,贮藏19周,腐烂率高达50%以上。腐烂部位几乎都在果蒂和花端两点以外的果身上,极少数是蒂腐和花端腐烂。病原菌有7种,其中Botrytis cinerea,Penicillium sp.和Phomopsis sp.3种为优势菌。病原菌主要通过采收运输时造成的机械伤口侵染,未发现在果实过熟衰老前直接侵染。     

引起向日葵盘腐和瘦果花皮的根霉种类及其生物学特性

根霉(Rhizopus spp.)引起的盘腐病是向日葵生产中的毁灭性病害.近年甘肃酒泉的食用向日葵制种田和生产田,向日葵根霉盘腐和瘦果"花皮"发生严重,重病田盘腐病的发病率达100％,给该地区食用向日葵制种和生产造成了巨大损失.2017年和2018年从酒泉食用向日葵罹病花盘和"花皮"瘦果样本上分离得到34株根霉属真菌,...     

海南湛江柑桔疫霉种的鉴定及交配型研究

 1988~1990年,从海南和湛江地区发生柑桔脚腐病的11个柑桔园采集了大量的病组织和病株基部的土壤样品,经分离共获得48个疫霉分离菌,根据孢子囊形态、脱落性、卵孢子产生、最高生长温度和淀粉利用能力等将其鉴定为寄生疫霉(Phytophthora parasitica Dast)柑桔褐腐疫霉(P.citrophthora R.E.&E.H.Smith)和辣椒疫霉(P.capsici Leonian)。这三种疫霉均是柑桔树的致病菌,其中寄生疫霉和柑桔褐腐疫霉的出菌率高,认为是这两个地区柑桔脚腐病的主要致病菌,而辣椒疫霉在中国柑桔园是首次发现。交配型测定结果以寄生疫霉的A~1,交配型占绝对优势。     

A new method for inoculation of fruit with <Emphasis Type="Italic">Guignardia citricarpa</Emphasis>, the causal agent of citrus black spot

Citrus black spot (CBS) is a fungal disease, caused by Guignardia citricarpa, that has a high economic impact on citrus. Although G. citricarpa has been associated with black spot of citrus, an adequate pathogenicity test is still not available. Thus, our objective was to develop and evaluate a simple, safe, and practical pathogenicity test. We used fruits from Pera-Rio and Valencia sweet orange trees from two different orchards, located in the State of São Paulo, Brazil. Inoculation was performed by placing six disks colonized by G. citricarpa, onto the peel of healthy fruits, previously bagged. In the Pera-Rio sweet orange grove, initial symptoms of the false melanose type resulting from the inoculations were observed 55 days after inoculation (dai). In the Valencia grove, initial symptoms also of the false melanose type resulting from the inoculations occurred 73 dai. A total of 92.8% and 86.6% of the Pera Rio and Valencia fruits inoculated, respectively, showed symptoms of CBS. Citrus black spot symptoms were not observed in any of the control fruits.     

洋葱伯克霍尔德氏菌JX-1防治番茄青枯病机理的初步分析

本研究分离得到一株对茄科雷尔氏菌Ralstonia solanacearum具有明显拮抗作用的根围细菌JX-1,其温室防治番茄青枯病的防效达80.89％.形态学、生理生化、16S rDNA序列和gyrB序列分析表明,该菌株属于洋葱伯克霍尔德氏菌Burkholderia cepacia.生防相关性状分析表明,菌株JX-1...     

西葫芦根腐和茎基腐病新病原-露湿拟漆斑菌Paramyrothecium roridum

 2013年12月,甘肃省白银市水川镇日光温室中的西葫芦发生了严重的根腐和茎基腐,部分棚室病株率达50%,从病根和病茎上分离得到拟漆斑菌属真菌3株,病株分出率27.3%。采用胚根和茎基部接种法测定了菌株FG-62对西葫芦的致病性:茎基部接种后27 d,植株开始出现凋萎;接种后40 d,两种接种法的西葫芦苗均呈现严重根腐和茎基腐症状,茎基部接种的西葫芦凋萎株率达30%;从病根和病茎上均可再分离出原接种菌。菌株FG-62在PDA平板上25℃培养14 d,产生大量墨绿色至黑色分生孢子座,分生孢子无色至淡榄黑色,单胞,杆状或腰鼓状,两端钝圆,大小为(7.04~9.15)μm ×(1.97~2.46)μm,聚集的分生孢子呈黑色。BLASTn分析结果显示,菌株FG-62(GenBank 登录号 MK252098)的rDNA-ITS序列与露湿拟漆斑菌Paramyrothecium roridum分离物E-469 (GenBank 登录号KY582183.1)和CBS 357.89(源自模式材料,GenBank 登录号NR_145077.1)的序列相似性分别达99.65%和96.83%。依据病原菌形态学和rDNA-ITS序列,将其鉴定为露湿拟漆斑菌P. roridum (Basionym:Myrothecium roridum)。这是露湿拟漆斑菌引起西葫芦根腐和茎基腐的首次报道。     

柑桔脂点黄斑病病原菌的研究

 根据对采自江、浙、黔、川、滇等省部分产桔区的病叶进行分离培养和接种的研究,证明上述各地都有柑桔脂点黄斑病发生。本病症状初呈黄斑,后转为脂斑,有时可进而转变成褐色小园星。病原菌为柑桔球腔菌(My-cosphaerella citri Whiteside),无性阶段为柑桔灰色疣丝孢(Stenella citri-grisea (Fisher) Sivanesan),其主要形态特征与J.O.Whiteside报道的美国佛罗里达州柑桔脂斑病病原菌基本相同,但接种后表现的病状有所差异。病菌的假囊壳产生在落地将朽的病叶上,子囊孢子起着初侵染作用;发生在落叶上的分生孢子数量很少,看来再侵染作用不大,但在培养基上可产生较多的无性孢子.接种表明,病菌从寄主的气孔侵入,潜育期1~2个月以上,其长短与柑桔品种有关,在江苏太湖桔区,此菌主要以菌丝体在病叶中越冬,翌年4-9月间落叶上产生子囊孢子传播侵染,春、夏、秋、梢的新叶均可受害,以春梢叶片被害最重.     

柑橘黄龙病菌在染病贡柑枝条和果实橘络内的分布规律

柑橘黄龙病是柑橘生产上最具毁灭性的病害之一,由目前还无法分离培养的候选韧皮部杆菌亚洲种("Candidatus Liberibacter asiaticus", CLas)引起的。早期研究表明CLas在染病柑橘植株内的分布并不均匀。为进一步探究CLas在染病枝条及果实内的空间分布规律,本研究以感染黄龙病的贡柑(带果实)枝条为材料,利用定量PCR(quantitative PCR, qPCR)分析同一枝条不同部位及果实橘络中的CLas浓度。结果表明,带果贡柑枝条不同部位的CLas分布不均匀且以果实橘络部位的CLas浓度最高(15 487.6 CLas cells/ng总DNA)。通过对同一橘络不同片段长度(每1.5 cm)中的CLas进行定量分析发现,同一橘络中的CLas同样呈不均匀分布(CLas个数范围:12 407～10 271 089)。此外,定量分析发现黄龙病引起的畸形果大小两侧橘络中的CLas浓度差异不显著。该结果可为探究CLas在柑橘枝条及果实中的转运规律提供参考。     

柑橘黄龙病菌在染病贡柑枝条和果实橘络内的分布规律

 柑橘黄龙病是柑橘生产上最具毁灭性的病害之一,由目前还无法分离培养的候选韧皮部杆菌亚洲种(“Candidatus Liberibacter asiaticus”, CLas)引起的。早期研究表明CLas在染病柑橘植株内的分布并不均匀。为进一步探究CLas在染病枝条及果实内的空间分布规律,本研究以感染黄龙病的贡柑(带果实)枝条为材料,利用定量PCR(quantitative PCR, qPCR)分析同一枝条不同部位及果实橘络中的CLas浓度。结果表明,带果贡柑枝条不同部位的CLas分布不均匀且以果实橘络部位的CLas浓度最高(15 487.6 CLas cells/ng总DNA)。通过对同一橘络不同片段长度(每1.5 cm)中的CLas进行定量分析发现,同一橘络中的CLas同样呈不均匀分布(CLas个数范围:12 407~10 271 089)。此外,定量分析发现黄龙病引起的畸形果大小两侧橘络中的CLas浓度差异不显著。该结果可为探究CLas在柑橘枝条及果实中的转运规律提供参考。     

柑橘木虱寄生性天敌调查及一新种记述

柑橘木虱Diaphorina citri Kuwayama既是柑橘上的重要害虫,又是柑橘黄龙病的传播虫媒,对我国柑橘产业存在潜在威胁。进一步调查柑橘木虱的寄生性天敌资源,明确其种类和鉴别特征,对筛选优势天敌种类并开展生物防治应用具有重要意义。本文调查结果有柑橘木虱初寄生蜂2种,分别为亮腹姬小蜂Tamarixia radiate（Waterston）、阿里食虱跳小蜂Diaphorencyrtus aligarhensis（Shafee,Alam et Argarwal）;重寄生蜂4种,分别为新种小斑塔姬小蜂Tamarixia micromacula Wang et Huang,sp.n.（姬小蜂科Eulophidae）、沃氏卡棒小蜂Chartocerus walkeri Hayat、黄食虱跳小蜂Psyllaphycus diaphorinae Hayat（中国新记录属、新记录种）、恩蚜小蜂Encarsia sp.♂。记述了寄生性天敌分类鉴别的主要形态特征及其发生概况,描述了新种小斑塔姬小蜂,提供了寄生性天敌的形态特征照片。新种模式标本及其他研究标本保存于福建农林大学植物保护学院。