薄荷蔗糖酶的化学修饰

采用NBS、 PMSF、 IAc、 BrAc、 SUAN、 TNBS、 PCMB、 DTT以及金属离子和相关试剂在一定条件下选择性修饰蔗糖酶. 结果表明 0.5 mmol/L的PMSF使酶活性丧失95%, 10 μmol/L的NBS使酶活性丧失93%, 0.5 mmol/L的PCMB使酶活性降至12%, 酶修饰呈一级反应, 推测Trp、 Ser的残基可能是薄荷叶片蔗糖酶的活性必需基团, 而His、 Lys的残基不在薄荷蔗糖酶的活性中心.     

嗜热真菌耐热木聚糖酶的活性中心

应用NBS ,WRK ,DTNB ,PMSF ,Phenylgloxalhydrate,DEPC等化学修饰剂对嗜热真菌所产的耐热木聚糖酶进行了化学修饰。分别作用于色氨酸残基和谷氨酸 (或天冬氨酸 )残基的NBS和WRK可使耐热木聚糖酶活性显著降低 ,而其他几种修饰剂无明显作用。木聚糖对NBS的修饰有抑制作用 ,3 0mg·mL-1的桦木木聚糖底物可完全阻止NBS对耐热木聚糖酶的修饰作用 ,但木聚糖底物不能阻止WRK对耐热木聚糖酶的失活作用。实验结果表明 ,色氨酸残基和谷氨酸 (或天冬氨酸 )残基位于酶的活性中心 ,且色氨酸残基位于酶的底物结合中心 ,而谷氨酸(或天冬氨酸 )残基可能位于酶的催化中心。     

罗非鱼碱性磷酸酶的化学修饰

采用PMSF、PCMB、NBS、TNBS、SUAN、DTT、IAc、BrAc等化学修饰剂在一定的条件下选择性修饰罗非鱼ALP,研究罗非鱼ALP分子中氨基酸侧链基团与酶活性中心的关系.结果表明:PMSF、NBS等两种化学修饰剂能显著抑制酶的活力,而PCMB、TNBS、SUAN、DTT、IAc、BrAc等对酶的活力影响不大.说明对丝氨酸残基、色氨酸残基的化学修饰后对酶的活力影响很大,而酶分子中的其他功能基团不在酶的活性中心,修饰后对酶的活力影响不大.     

黄鳝内脏碱性磷酸酶功能基团的初步研究

经Tris—HCl缓冲液（pH8．6）抽提,正丁醇脱脂,硫酸绥分级沉淀分离,DEAE—Sepharose Fast Flow和Sephacryl S-200柱层析,从黄鳝内脏中提取出电泳纯的碱性磷酸酶。用PCMB,NBS,PMSF,TNBS,SUAN,DTT及IAA在一定条件下选择性修饰该酶的各种氨基酸残基,并对酶活力的变化作出测定。结果表明,PMSF,NBS,TNBS,SUAN和DTT的修饰能显著抑制酶的活性,且酶活力降低程度与修饰别的浓度相关;IAA和PCMB的修饰不表现对酶的抑制作用。初步认为,Ser,Lys和Trp残基为黄鳝碱性磷酸酶的必需功能基团,部分二硫键对保护酶的催化能力是必需的。     

黄鳝内脏碱性磷酸酶功能基团的初步研究

经Tris-HCl缓冲液(pH 8.6)抽提,正丁醇脱脂,硫酸铵分级沉淀分离,DEAE-Sepharose Fast Flow和Sephacryl S-200柱层析,从黄鳝内脏中提取出电泳纯的碱性磷酸酶.用PCMB,NBS,PMSF,TNBS,SUAN,DTT及IAA在一定条件下选择性修饰该酶的各种氨基酸残基,并对酶活力的变化作出测定.结果表明,PMSF,NBS,TNBS,SUAN和DTT的修饰能显著抑制酶的活性,且酶活力降低程度与修饰剂的浓度相关;IAA和PCMB的修饰不表现对酶的抑制作用.初步认为,Ser,Lys和Trp残基为黄鳝碱性磷酸酶的必需功能基团,部分二硫键对保护酶的催化能力是必需的.     

外源蔗糖对NO3-胁迫下黄瓜幼苗生长及抗氧化酶活性的影响

采用营养液培养试验,通过叶面喷施不同浓度（0、0．5、1、3、5mmol／L）的蔗糖,研究外源蔗糖对NO;胁迫下黄瓜幼苗生长及叶片抗氧化酶活性的影响。结果表明,140mmoL／L NO3-胁迫下,外加1mmol／L蔗糖处理后7d,黄瓜幼苗叶片中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）和抗坏血酸过氧化物酶（APX）活性显著升高,丙二醛（MDA）含量显著降低,说明外加1mmol／L蔗糖增强了黄瓜幼苗对活性氧的清除能力,降低了膜脂过氧化程度,幼苗生长势增加,对高浓度NO3-胁迫的抗性增强;当蔗糖浓度高达5mmol／L处理后7d,其叶片SOD、POD、CAT和APX活性均开始降低,MDA含量增加,黄瓜幼苗受害加重。     

枯草芽孢杆菌WHNB 02植酸酶的酶学性质研究

从118份样品中分离到1株产植酸酶的枯草芽抱杆菌（Bacillus subtilis WHNB02）,其发酵液经乙醇沉淀、硫酸铵分级沉淀及Sephadex G-100柱层析等步骤后分离纯化了该酶,纯化倍数约为31．5倍,回收率为13．0％。该酶为单体酶,SDS—PAGE测得的分子量约为43KD,以植酸钠为底物的Km值为0．5mmol／L,酶反应的最适温度为60℃,80℃作用10min酶活保存61％,最适pH为7．0,在pH6．0—10．0范围内稳定,酶活性及稳定性都需Ca^2＋存在。EDTA,Mn^2＋,Ba^2＋（5mmol／L）对酶活具有很大的抑制作用。     

外源NO对Pb胁迫下亚麻幼苗的保护效应

采用0．1mmol／L、0．5mmol／L和1．0mmol／LSNP溶液处理Pb（Ac）2胁迫下亚麻幼苗,测定不同时期叶片内游离脯氨酸含量、丙二醛含量、过氧化氢酶活性、过氧化物酶活性、超氧化物歧化酶活性的变化。结果表明,NO缓解了Pb胁迫下亚麻幼苗叶片中丙二醛含量的升高,促进脯氨酸含量升高,提高了抗氧化酶的活性。且保护效应与SNP的浓度相关,0．1mmol／LSNP处理效果显著优于1．0mmol／LSNP处理。     

斑叶丽格海棠组织培养的研究

以斑叶丽格海棠的叶柄和叶片为外植体进行愈伤组织诱导、继代和再分化培养，结果发现：与叶片相比，叶柄愈伤组织分化芽的能力强；诱导愈伤的培养基为MS 6-BA0．5mg／L NAA1．0mg／L 3％蔗糖 0．7％琼脂；继代增殖的最适培养基为1／2MS 6-BA1．0mg／L NAA0．1mg／L 2％蔗糖 0．5％琼脂，增殖倍数为6～8；生根的最适培养基为1／2MS IAA0．5mg／L 1．5％蔗糖 0．5％琼脂。     

印楝的组织培养和快速繁殖

以印楝带芽茎段为外植体,进行快速繁殖技术研究,愈伤组织诱导率为100％,其繁殖系数30d可达5～7倍,生根率30d可达100％。诱导培养基以MS BA1．0mg／L NAA0．01mg／L 3％蔗糖最佳,继代增殖以MS BA0.5mg／L NAA0．1mg／L 3％蔗糖为宜。生根培养以1／2MS NAA0．1mg／L 1．5％蔗糖效果最好。     

番麻蛋白酶活性中心基团的初步研究

在不引起酶变性的条件下,用半胱氨酸(Cys)专一性化学修饰试剂碘乙酸、对氯汞苯甲酸(?)(CMB),5,5′-二硫双硝基苯甲酸(DTNB)对酶分子进行化学修饰后,酶活性显著下降。发现酶的失活程度与修饰剂浓度间存在着化学计量关系,同时底物(酪蛋白)对酶活性有明显的保护作用。说明被修饰的部位(Cya残基)是酶的活性中心基团。Cys对酶有明显的激活作用;同时,(?)CMB、DTNB、碘乙酸对酶活性有明显的抑制作用(?)CMB抑制或O_2氧化而失活的酶溶液,又可被Cys重新激活,而恢复其活力,进一步证明其活性中心存在着Cys残基。以上事实均与典型的植物巯基蛋白酶——木瓜蛋白酶一致,说明番麻蛋白酶是一种巯基蛋白醇,其活性中心存在着Cys。     

大豆籽粒尿囊素酶的变性和化学修饰

大豆籽粒尿囊素酶对十二烷基磺酸钠、尿素、盐酸胍变性处理较不敏感．十二烷基磺酸钠、尿素变性处理的尿囊素酶可通过稀释而恢复活力，但一经盐酸胍变性后却难以通过稀释而恢复活力．酶蛋白质氨基酸残基化学修饰结果表明，巯基、赖氨酸残基、酪氨酸残基不是构成酶分子活力中心的必需基团，色氨酸残基是酶活性中心的必需基团．甘油醛、异烟肼不影响酶反应，而乙酰氧肟氧肟酸抑制酶活力３９．６％     

施用甘蔗酒精废液对土壤水解酶活性的影响

土壤酶参与土壤矿质化和腐殖化的转化过程,可作为评价土壤肥力和环境质量的重要参考指标。在广西扶绥蔗地上设计6个处理:CK1(不施肥),CK2(施常规化肥)和4个酒精废液处理45 t/hm2,75 t/hm2,75t/hm2CK,105 t/hm2,其中除处理75 t/hm2CK外,其他处理都种植甘蔗,研究酒精废液的施用对土壤水解酶活性的影响机理。结果表明:随着酒精废液施用量的增加,甘蔗各生育期土壤蛋白酶活性没有表现出一致的增加趋势,而土壤蔗糖酶活性则一致增加;酒精废液各处理在苗期的土壤蛋白酶活性显著或极显著高于CK1,在苗期、分蘖期、成熟期的土壤蔗糖酶活性也显著或极显著高于CK1;酒精废液各处理土壤蛋白酶或蔗糖酶活性显著或极显著高于施N、K化肥前的CK2,在CK2施用N、K化肥后各处理与CK2的酶活性差异不显著;在酶促反应诱导阶段的苗期,土壤蛋白酶活性与NO3--N和全N、有机质分别呈极显著和显著正相关,蔗糖酶活性与全N、有机质和NH4 -N、NO3--N分别呈极显著和显著正相关。说明45t,75 t,105 t(t/hm2)酒精废液的蔗地施用加快了土壤矿化和腐殖化进程,提高了土壤肥力,促进了土壤蛋白酶尤其是蔗糖酶活性的提高,其活性的提高与微生物数量、养分含量的增加关系密切。     

Chemical aspects of enzyme inhibition

The use of chemical reagents as enzyme inhibitors has yielded information concerning the mechanism of inhibition and the role in catalysis played by active groups on the protein apoenzyme, the coenzyme, or the metal component. Inhibition analysis has also furnished valuable clues concerning the architecture, chemical properties, and catalytic mechanism of the active site of the enzyme. In many cases, in vivo effects of inhibitors can be closely correlated with in vitro inhibition of purified enzyme systems. The effects of antimicrobial and anticancer agents, insecticides, and drugs can often be explained in terms of enzyme inhibition. The design and synthesis of new inhibitors offers great promise when applied to the control of undesirable organisms and to the prevention and cure of disease in the immediate future.     

免耕和秸秆还田对我国土壤碳循环酶活性影响的荟萃分析

【目的】探讨免耕和秸秆还田措施对我国农田土壤碳循环酶活性的影响,为有机物质转化和土壤健康提升提供科学依据。【方法】通过文献搜集,获得了目标文献56篇,建立了翻耕清茬（CT,507组）、翻耕+秸秆还田（SR,305组）、免耕（NT,291组）和免耕+秸秆还田（NTS,122组）处理对土壤碳循环酶（转化酶、纤维素酶、β-葡萄糖苷酶和多酚氧化酶）活性影响的数据库。采用数据整合（Meta-analysis）和增强回归树（BRT）的分析方法,探讨不同管理措施下土壤碳循环酶活性的差异,并量化气候特征、土壤特性和种植制度等因子对其影响程度。【结果】与CT相比,SR（28.0%）、NT（13.7%）和NTS（23.2%）处理显著增加（P<0.05）了土壤碳循环酶活性;SR、NT和NTS处理显著促进了转化酶活性,增幅分别为25.3%、16.2%和22.5%;SR处理对纤维素酶活性的增幅为36.6%。对于低土壤有机碳（SOC<10 g·kg^-1）而言,SR、NT和NTS处理对转化酶活性增幅分别为26.7%、24.2%和37.9%。在碱性（pH>7.5）土壤中,SR和NTS处理下转化酶活性分别增加了22.3%和28.7%。对于不同黏粒含量的土壤而言,黏粒含量<20%的土壤中SR和NT处理下转化酶活性分别提高了21.5%和22.3%;黏粒含量为20%—30%的土壤中SR、NT和NTS处理下转化酶活性增幅分别为26.1%、16.1%和25.3%。干旱指数较大（2—3.5和>3.5）时,SR（29.1%和20.5%）、NT（13.4%和17.0%）和NTS（9.0%和36.9%）处理均显著提高了转化酶活性。对于轮作种植制度而言,SR和NTS处理促进了转化酶活性,增幅分别为24.0%和29.4%;而在连作种植制度下,SR处理下转化酶活性提高了29.4%。对于不同试验年限而言,NTS处理对转化酶活性的提高幅度表现为：长期（>10年;39.9%）>中期（5—10年;31.7%）>短期（<5年;17.6%）;短期和中期秸秆还田（SR）均显著增强了转化酶活性,增幅分别为22.0%和27.3%。免耕和秸秆还田对转化酶活性的交互作用在SOC含量低（<10 g·kg^-1）、pH呈碱性（>7.5）、黏粒含量低（<20%）、干旱指数高（>3.5）、轮作和持续年限长（>10年）的土壤中较小。BRT分析结果表明,黏粒含量和土壤pH是影响SR处理对转化酶活性提高的主要因素,而SOC含量和干旱指数是影响免耕措施（NT和NTS）提高转化酶活性的主要因素。【结论】在我国实施免耕和秸秆还田措施,尤其是在SOC和黏粒含量较低或干旱指数较高的地区,对于转化酶活性的提高具有重要意义。     

三峡库区不同林龄柑橘土壤酶活性的演变

土壤酶驱动土壤生态系统养分的循环和控制生态系统的功能。本研究以生长年限为10、20年和30年的柑橘林0~20 cm和20~40 cm土层土壤为研究对象,主要探讨了土壤脲酶、转化酶和过氧化氢酶活性随着柑橘林龄的延长和土壤深度的增加的变化规律。结果表明,随着柑橘林龄的延长,0~20 cm土层土壤过氧化氢酶活性10年和20年样地之间无显著性差异,但都显著大于30年的样地;而0~20 cm土层土壤转化酶和脲酶活性逐渐提高,20年时达到最大值,其后又降低。随着土壤深度的增加,过氧化氢酶、转化酶和脲酶活性在3个林龄的柑橘林中都呈现显著的下降趋势。相关性分析的结果表明,土壤转化酶活性、脲酶活性都与土壤有机碳和微生物量碳氮之间都具有显著的正相关性,而过氧化酶氢活性与土壤理化特性及其微生物量之间都无显著的相关性。主成分分析结果进一步显示,土壤转化酶活性、脲酶活性、有机碳和微生物生物量碳氮均在第一主成分中具有较大的载荷,对第一主成分的贡献最大。以上结果表明脲酶和转化酶活性能够做为柑橘土壤质量变化的敏感指标。     

Blood catalsase polymorphism: some immunological aspects

The immunological properties of the erythrocyte catalase of mice-normal (wild type) strain, one lacking catalase (acatalasemic), and four with only slight catalase activity (hypocatalasemic strains)-have been investigated. Agardiffusion tests and antigen titration of red-cell lysates against rabbit antiserum to catalase from normal mouse blood showed that immunologically identical catalase protein was present in large amounts in the acatalasemic as well as in the hypocatalasemic mutant strains. Despite lack of catalatic activity, the erythrocytes lacking catalase as well as those with only a little catalase contain catalase protein that has been modified at the site of enzyme activity, although the antigenic determinants are identical with those of normal catalase protein. This mutation is purely structural, being characterized by modification of the enzyme active site but not of the antigenic site.     

锰对商陆根际微生物及土壤酶的影响

进一步阐明植物对锰毒的耐性机制,通过盆栽试验对不同Mn浓度下美洲商陆根际微生物及土壤酶活性的影响及用顺序浸提法研究商陆根际Mn形态与6种土壤酶的关系.结果表明:1)随Mn浓度的增加,真菌数量逐渐减少,细菌、放线菌数量变化呈波动性.2)低浓度Mn可刺激脲酶、磷酸酶的活性;高浓度下,脲酶、蛋白酶、转化酶、过氧化氢酶、磷酸酶活性均受到不同程度的抑制;多酚氧化酶活性在高浓度下增加.3)相关分析表明,锰浓度与土壤酶活性间存在显著负相关性,相关程度为过氧化氢酶＞脲酶＞磷酸酶＞多酚氧化酶＞蛋白酶＞转化酶;脲酶、蛋白酶、转化酶、多酚氧化酶、磷酸酶5种酶的活性间呈显著正相关,表明它们对锰胁迫有相似的适应性.过氧化氢酶、脲酶对锰的影响作用最敏感.4)土壤酶与锰化学形态多呈线性关系,各形态Mn与脲酶、磷酸酶、过氧化氢酶活性均呈显著或极显著负相关,而与转化酶活性的负相关性很小,全Mn与蛋白酶活性及专性吸附态Mn与多酚氧化酶活性的相关性显著.5)各形态锰含量与土壤酶活性的相关关系优于总量锰,因此可将锰各形态含量关系作为评价红壤锰污染程度的主要生物学指标.     

太行山南麓侧柏人工林土壤酶活性和无机氮含量分布特征

为研究人工林生态系统土壤酶活性与活性氮周转的相互关系,以太行山南麓地区15 a侧柏人工林下土壤为研究对象,对比分析不同土层土壤转化酶、脲酶活性及土壤铵态氮（NH₄⁺-N）、硝态氮（NO₃^--N）含量的季节变化特征。结果表明,土壤转化酶、脲酶活性和NH4+-N含量具有明显的季节变化特征（P<0.05）,且均在6月达到峰值;土壤转化酶、脲酶活性和NO₃^--N含量均随土层深度的增加显著降低（P<0.05）,相较于0~10 cm土层,20~40 cm的年均降幅均超过25%,呈表层富集现象;线性回归分析表明土壤转化酶和脲酶活性与NH₄⁺-N和NO₃^--N含量呈显著线性正相关关系（P<0.05）,酶活性与土壤无机氮含量的耦合作用在6月表现最强烈（P<0.05）,暗示了土壤转化酶与脲酶活性可作为催化剂间接指示有机氮向无机氮的周转能力。