黄芪多糖能促进肉鸡脾淋巴细胞转化率

陈洪亮等研究发现,黄芪多糖能剂量依赖性促进脾淋巴细胞转化率及细胞内NO、Ca2 浓度;当作用时间为20min时,40μg/ml黄芪多糖能增加cAMP浓度,降低cGMP浓度(P<0.01);而当作用时间为60min,对cAMP浓度无显著影响。以上结果提示,黄芪多糖能显著提高脾淋巴细胞免疫功能,其作用是通过改变细胞内信息传导实现的。黄芪多糖能促进肉鸡脾淋巴细胞转化率     

中药复方多糖对不同MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞免疫信号分子表达的影响

试验旨在探讨中药复方多糖对不同MHC B-LβⅡ基因型鸡免疫调节作用的影响。采用PCR-SSCP方法对500只试验鸡进行MHC B-LβⅡ基因分型,采集不同MHC B-LβⅡ基因型鸡的外周血淋巴细胞,分别加入终浓度为200、100、75、50、25、0μg/mL的中药复方多糖共培养24h,收集细胞,采用ELISA方法检测不同MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞培养液中环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、钙离子(Ca~(2+))、一氧化氮(NO)及诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)含量。结果显示,与对照组相比,中药复方多糖能显著提高不同MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞培养上清液中cAMP、cGMP、Ca~(2+)、NO和iNOS的含量(P0.05)。中药复方多糖剂量为50μg/mL时,AA、BC基因型鸡淋巴细胞培养上清液中cAMP、Ca~(2+)、NO和iNOS的含量最高,BC基因型鸡淋巴细胞培养上清液中cGMP的含量最高;中药复方多糖剂量为75μg/mL时,AA基因型鸡淋巴细胞培养上清液中cGMP的含量最高;中药复方多糖剂量为100μg/mL时,BB基因型鸡淋巴细胞培养上清液中cAMP、cGMP、Ca~(2+)、NO和iNOS的含量最高。本试验结果表明,中药复方多糖能不同程度地提高各MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞培养上清液中cGMP、cAMP、NO、Ca~(2+)和iNOS的含量,且不同MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞最适中药复方多糖免疫调节剂量不同。     

香菇多糖对肉鸡脾淋巴细胞转化及信息传导的影响

实验研究了香菇多糖对肉鸡脾淋巴细胞转化率及细胞内信息分子一氧化氮(NO)、Ca2 及cAMP、cGMP的影响。发现香菇多糖能剂量依赖性促进脾淋巴细胞转化率及细胞内NO、Ca2 浓度,当作用时间为20min时,能增加cAMP和cGMP浓度,而当作用时间为60min,对cAMP和cGMP浓度无显著影响。以上结果提示,香菇多糖能显著提高脾淋巴细胞免疫功能,其作用是通过改变细胞内信息传导实现的。     

山豆根多糖对鸡脾脏淋巴细胞信号转导相关分子水平的影响

为探讨山豆根多糖(SSP)对体外培养的鸡脾脏淋巴细胞信号分子的影响,采用终浓度为50、100、200、400μg/mL的山豆根多糖分4、8、12、24 h 4个时间段刺激培养鸡脾脏淋巴细胞,测定培养上清或细胞内环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)、血栓素B2(TXB2)和一氧化氮(NO)信号转导分子水平。结果表明,山豆根多糖在终浓度为100μg/mL时与鸡脾脏淋巴细胞共同培养8 h后能显著升高cAMP(P0.01)、6-keto-PGF1α(P0.05)、TXB2(P0.01)水平,4种浓度的山豆根多糖对NO分子水平随时间的变化有不同程度的升高(P0.05),影响cAMP/cGMP和6-keto-PGF1α/TXB2信号体系。提示山豆根多糖可通过影响免疫细胞内的信号转导而影响机体的免疫功能。     

蕨麻多糖对小鼠免疫细胞信号转导相关分子的影响

以50、100、200、400μg/mL的蕨麻多糖对小鼠脾淋巴细胞在体外分别孵育4、8、12、24 h,测定了细胞培养液中一氧化氮（NO）、6-酮-PGF1α及血栓素B2（TXB2）的水平和细胞内cGMP的含量,测定了加入蕨麻多糖后2、5、10 min时细胞内游离钙离子（Ca^2＋）的浓度。结果显示,蕨麻多糖能明显促进小鼠脾淋巴细胞分泌一氧化氮,显著升高小鼠脾淋巴细胞内cGMP及钙离子的水平,对细胞内TXB2的产生有抑制作用,能够调整花生四烯酸体系向6-酮-PGF1α一端偏移。提示蕨麻多糖能够增强脾淋巴细胞的免疫作用。     

黄芪多糖对肉鸡脾淋巴细胞转化及信息分子的影响

本实验研究了黄芪多糖对肉鸡脾淋巴细胞转化率及细胞内信息分子 -一氧化氮 (NO)、Ca2 + 及 c AMP、c GMP的影响。发现黄芪多糖能剂量依赖性促进脾淋巴细胞转化率及细胞内 NO、Ca2 + 浓度 ;当作用时间为 2 0 min时 ,4 0 μg/ ml黄芪多糖能增加 c AMP浓度 ,降低 c GMP浓度 (P<0 .0 1) ;而当作用时间为 6 0 m in,对 c AMP和 c GMP浓度无显著影响。以上结果提示 ,黄芪多糖能显著提高脾淋巴细胞免疫功能 ,其作用是通过改变细胞内信息传导实现的。     

分级醇沉刺五加多糖不同浓度对小鼠脾细胞增殖和IL-2表达的影响

为了研究不同醇沉浓度刺五加多糖对脾细胞增殖和细胞因子IL-2表达的影响,试验采用分级醇沉的方法对刺五加多糖进行醇沉得到粗糖,并去蛋白得到精制糖,研究分级醇沉刺五加多糖不同浓度对小鼠脾细胞增殖、ConA和LPS诱导的脾淋巴细胞的增殖反应和脾细胞产生细胞因子表达的影响。结果表明:40%醇沉组多糖浓度为7.8～125μg/mL时均能促进脾细胞增殖,并且其促进脾细胞增殖作用与多糖浓度呈剂量依赖性,促增殖作用增强;40%醇沉组多糖浓度为15.62～125μg/mL时能促进ConA诱导的脾淋巴细胞的增殖反应;各醇沉组多糖浓度为15.62～125μg/mL时均能显著促进LPS诱导的脾淋巴细胞的增殖反应;20%、40%、60%醇沉组多糖浓度为3.9～7.81μg/mL时IL-2的表达水平呈上升趋势;并且随药物浓度的增大细胞因子表达量先增多后减少。说明以40%醇沉刺五加多糖免疫增强效果优于其他醇沉多糖。     

牛磺鹅去氧胆酸对小鼠机体cAMP和cGMP含量的影响

为了研究牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)对小鼠机体环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)含量的影响,试验用环孢菌素A诱导特异性免疫低下模型,按相应组别对应的剂量对小鼠灌胃给药7 d,获取血清;体外培养正常小鼠腹腔巨噬细胞,用MTT方法筛选TCDCA作用于腹腔巨噬细胞的最佳药物浓度;用最佳药物浓度作用于巨噬细胞后超声破碎,获取上清液;ELISA方法测定血清和上清液中cAMP和cGMP的含量。结果表明:在TCDCA高剂量(0.2 g/kg)组小鼠血清中,cAMP含量极显著高于环孢菌素A组(P<0.01);各组小鼠血清cGMP含量差异不显著(P>0.05);TCDCA促进小鼠腹腔巨噬细胞增殖的体外浓度为1μg/mL、2.5μg/mL、5μg/mL、10μg/mL;1μg/mL、2.5μg/mL、5μg/mL的TCDCA均能显著或极显著提高细胞内cAMP含量(P<0.05或P<0.01),对cGMP含量均没有显著影响。说明TC-DCA能够显著提高正常和免疫抑制小鼠血清中和正常腹腔巨噬细胞内cAMP含量。     

猴头菇多糖对小鼠脾淋巴细胞体外NO分泌及iNOS mRNA表达的影响

为了研究猴头菇多糖(Hericium erinaceus polysaccharide,HEP)对小鼠脾淋巴细胞NO生成及iNOS mRNA表达的影响。采用Griess法测定HEP单独或协同ConA诱导脾淋巴细胞分泌NO含量;RT-PCR法检测脾淋巴细胞iNOS mRNA表达量。结果与细胞对照组比较,HEP在25~400μg/m L的浓度范围内能单独诱导脾淋巴细胞NO分泌及iNOS mRNA表达(P0.05);与ConA对照组比较,HEP在100~400μg/m L浓度范围内能协同Con A诱导脾淋巴细胞NO分泌及iNOS mRNA表达(P0.05)。表明HEP能单独或协同Con A诱导小鼠脾淋巴细胞分泌NO,此作用可能是通过促进i NOS mRNA表达而实现。     

沙葱多糖对绵羊外周血淋巴细胞的调节作用研究

试验研究沙葱多糖（Allium mongolicum regel polysaccharides）对绵羊外周血淋巴细胞增殖及一氧化氮（NO）、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的影响。试验设置不同浓度（0~250μg/ml）的沙葱多糖和不同的作用时间（24、48、72 h），以MTT比色法检测淋巴细胞增殖；以培养24 h的绵羊外周血淋巴细胞为研究对象，以微板法、硝酸还原酶法分别测定NO及iNOS。结果表明，沙葱多糖浓度为50~100μg/ml时抑制淋巴细胞的增殖，当浓度为150~250μg/ml时促进淋巴细胞的增殖，且作用时间为24 h时增殖效果最强。较低浓度的沙葱多糖（50~100μg/ml）抑制淋巴细胞分泌NO，随着浓度的加大，NO分泌量增加。沙葱多糖对淋巴细胞内iNOS 活性没有显著影响（P>0.05）。因此，沙葱多糖能够影响淋巴细胞的增殖，释放 NO 及 iNOS，并且呈现量效和时效关系，说明沙葱多糖对绵羊外周血淋巴细胞具有免疫调节作用。     

黄芪多糖对小鼠免疫细胞信号转导相关分子的影响

为探讨黄芪多糖(APS)免疫调节的作用机理，观察了黄芪多糖对小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮(NO)生成、对体外培养的小鼠脾脏淋巴细胞内游离钙离子水平和蛋白激酶C(PKC)活性的影响。结果显示黄芪多糖能明显促进小白鼠腹腔巨噬细胞NO生成，显著升高小鼠脾淋巴细胞内游离钙离子的水平，引起细胞PKC活性明显升高。提示黄芪多糖通过NO介导信号传递通路，调节脾淋巴细胞内游离钙离子的浓度，升高细胞蛋白激酶活性而影响机体免疫细胞的信号转导，发挥其免疫调节作用。     

朱砂七多糖体外免疫增强活性研究

研究朱砂七多糖(Polygonum cillinerve polysaccharide, PCP)对鸡外周血淋巴细胞和小鼠脾淋巴细胞免疫活性的影响。用MTT法和ELISA等方法分别检测PCP对鸡外周血淋巴细胞和小鼠脾淋巴细胞的毒性、细胞增殖及小鼠脾淋巴细胞IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ细胞因子分泌水平的影响。结果显示,PCP浓度为1.95μg/mL～31.25μg/mL时,对鸡外周血淋巴细胞和小鼠脾淋巴细胞无毒性,能促进鸡外周血淋巴细胞和小鼠脾淋巴细胞增殖,促进小鼠脾淋巴细胞分泌IL-2、IL-10、IFN-γ等细胞因子,表明PCP在体外具有较好的免疫增强活性。     

银杏叶复方对脾虚小鼠小肠淋巴细胞体外增殖的影响

为了探究不同浓度的银杏叶复方在脂多糖(LPS)或植物血凝集素(PHA)刺激下对脾虚小鼠小肠淋巴细胞体外增殖的影响,试验用不同浓度的银杏叶复方(200μg/mL、100μg/mL、10μg/mL、1μg/mL、0.1μg/mL)同LPS或PHA刺激小肠淋巴细胞分裂增殖的方法研究对小鼠淋巴细胞体外增殖的影响。结果表明:对于脾虚小鼠小肠B淋巴细胞,以200μg/mL、100μg/mL的浓度刺激效果最佳(P0.05);相比于1μg/mL、0.1μg/mL浓度,浓度为200μg/mL时更有利于正常小鼠小肠B淋巴细胞增殖(P0.05);对于脾虚小鼠小肠T淋巴细胞,以100μg/mL浓度最佳(P0.05),浓度为200μg/mL和100μg/mL时对正常小鼠小肠T淋巴细胞的刺激增殖效果显著(P0.05)。说明银杏叶复方浓度为200μg/mL、100μg/mL时能有效刺激正常和脾虚小鼠的小肠淋巴细胞分裂增殖。     

天门冬多糖对猪脾淋巴细胞体外增殖的影响

试验旨在研究不同浓度的天门冬多糖(ASP),在ConA或LPS的协同刺激下对猪脾淋巴细胞体外增殖的影响。猪脾淋巴细胞体外培养体系中加入不同浓度的天门冬多糖使其终浓度为400、200、100、50、25、12.5μg/ml,在ConA(5μg/ml)或者LPS(10μg/ml)的协同刺激作用下,细胞培养24、48、72 h时,观察猪脾淋巴细胞增殖情况。结果表明,天门冬多糖及其协同ConA或LPS能显著或极显著的促进猪脾淋巴细胞体外增殖(P<0.05或P<0.01)。     

香菇β-葡聚糖对雏鸡脾和胸腺淋巴细胞以及腹腔巨噬细胞一氧化氮产生的影响

为探讨香菇β-葡聚糖（lentinan,LTN）对雏鸡免疫增强作用的机理,从体内和体外2种途径研究了LTN对雏鸡脾和胸腺淋巴细胞以及腹腔巨噬细胞NO产生的影响.体内试验的4组21日龄雏鸡分别腹腔注射1 g/L的LTN、10 g/L的LTN、20 g/L的硫乙醇酸钠和生理盐水各2 mL,3 d后测脾和胸腺淋巴细胞以及腹腔巨噬细胞产生NO的量;分别以50、100、200、400 mg/L的LTN刺激经硫乙醇酸钠活化的巨噬细胞,测定其N0的生成量.结果显示,1 g/L和10 g/L的LTN均能刺激体内脾和胸腺淋巴细胞以及腹腔巨噬细胞产生NO;不同浓度的LTN均能使体外巨噬细胞NO的生成量增加.证实,适度促进免疫细胞NO的生成可能是LTN的主要免疫作用机理之一.     

蒲公英根多糖的体外抗炎作用研究

从蒲公英根(Taraxacum root)中提取植物多糖(TRP),并探究其对脂多糖(LPS)引起小鼠单核巨噬细胞系(RAW264.7)细胞炎症模型的抗炎作用。采用MTT法检测不同浓度(50μg/mL,100μg/mL,200μg/mL)多糖提取物对细胞的毒性作用。Griess法检测一氧化氮(NO)的分泌量,反转录-聚合酶链反应(PCR)检测细胞炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA转录水平。结果表明,TRP在50μg/mL～200μg/mL的剂量范围内对RAW264.7细胞无明显细胞毒作用,TRP可以显著抑制小鼠单核巨噬细胞NO的分泌,且IL-1β、IL-6、TNF-α的表达量下调。结果表明,TRP具有一定的体外抗炎作用,体外抗炎效果与质量浓度呈现出剂量依赖关系。     

黄芪多糖对小鼠脾淋巴细胞蛋白激酶C活性的影响

采用反相离子对高效液相色谱法测定脾淋巴细胞蛋白激酶C（PKC）活力，观察黄芪多糖（APS）体外对小鼠脾淋巴细胞蛋白激酶C活性的影响。结果表明：ASP（100μg/ml）能引起小鼠脾淋巴细胞PCK活性明显升高，提示APS的免疫增强作用与升高脾淋巴细胞蛋白激酶活性有关。     

猪圆环病毒2型对仔猪淋巴细胞内cAMP和cGMP的影响

为探讨猪圆环病毒2型(PCV2)作用下淋巴细胞的免疫活性,本研究通过体外培养仔猪脾脏淋巴细胞及巨噬细胞(Mφ),分别以PCV2和PCV2+Mφ与淋巴细胞相互作用,同时设Mφ和空白对照组.培养0h、6h、12h、24 h后收取各组淋巴细胞,放射免疫法检测胞内cAMP和cGMP浓度.另外,选取15头PCV2阴性仔猪,每头滴鼻PCV2病毒悬液,分别于14d、21 d、35 d迫杀,每次5头,并设立阴性对照组4头.放射免疫法检测脾脏cAMP和cGMP浓度,并计算cAMP/cGMP比值.体外检测结果显示:PCV2对体外培养淋巴细胞内cAMP和cGMP浓度影响不大;而在Mφ存在时PCV2在6h时能显著降低cAMP和cGMP浓度和cAMP/cGMP比例(p＜0.05); 12 h时cGMP浓度下降(p＜0.05),cAMP和cGMP比例上升(p＜0.05); 24 h时cGMP浓度上升(p＜0.05),但cAMP/cGMP比例降低(p＜0.05).体内检测结果表明,PCV2能显著降低仔猪脾脏细胞内cAMP浓度(p＜0.05)及cAMP/cGMP比值(p＜0.05).该研究结果表明,在巨噬细胞存在时PCV2能够降低淋巴细胞内cAMP/cGMP的比值,从而影响淋巴细胞的功能.     

淫羊藿多糖对鸡脾脏淋巴细胞的调节作用研究

为研究淫羊藿多糖(EPS)体外增强免疫活性,采用酶学检测法测定淫羊藿多糖活性及对鸡脾脏淋巴细胞的增殖作用。根据活性检测结果,选择用50%的乙醇醇沉的淫羊藿多糖进行安全浓度试验;根据安全浓度检测结果,选择2 500.00μg/mL、1 250.00μg/mL、625.00μg/mL、312.50μg/mL、156.25μg/mL 5个浓度,用MTT法测定淫羊藿多糖单独和协同LPS刺激对鸡脾脏淋巴细胞增殖率的影响。结果显示:不同浓度乙醇醇沉的淫羊藿多糖均具有良好的活性,但乙醇浓度为50%醇沉的淫羊藿多糖活性最佳。淫羊藿多糖对鸡脾脏淋巴细胞的安全浓度为2 500.00μg/mL。淫羊藿多糖无论是单独还是协同LPS刺激脾脏淋巴细胞,均显示出不同程度增强脾脏淋巴细胞的活性,且均在浓度为1 250.00μg/mL时显示出较强的体外增强鸡脾脏淋巴细胞增殖的能力,说明淫羊藿多糖在安全浓度范围内可刺激鸡脾脏淋巴细胞增殖,从而实现调节免疫功能的作用。     

4种中药多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

本试验旨在研究黄芪多糖(APS)、芦荟多糖(AP)、银耳多糖(TFPS)、黑木耳多糖(AAP)4种中药多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响.将4种多糖体外作用于小鼠脾淋巴细胞;采用MTT法测细胞增殖活性.结果显示,与对照组相比较,4种多糖在浓度为400 μg/mL时均能促进静止态淋巴细胞增殖;多糖协同ConA或LPS作用于淋巴细胞,4种多糖表现不同程度的增殖促进作用.在静止态淋巴细胞增殖以及协同丝裂原作用于淋巴细胞的增殖试验中,芦荟多糖所表现的促进增殖作用较强于其他3种多糖.