微生物发酵秸秆日粮对湖羊育肥性能及其肠道微生物群落结构的影响

[目的]微生物发酵饲料具有提高饲料适口性和消化率以及促进动物肠道微生态平衡等作用.基于微生物发酵秸秆日粮系统分析断奶湖羊育肥性能及其肠道微生物群落结构,为揭示微生物发酵饲料促进湖羊肠道微生态平衡的机理及进一步促进秸秆利用提供科学依据.[方法]试验采用生物发酵方法发酵饲料,试验选取36只月龄一致、体质量相近的湖羊公羊,随...     

枯草芽孢杆菌对湖羊瘤胃菌群和血清代谢物的影响

【目的】利用16S rDNA高通量测序技术和LC-MS/MS非靶向代谢组学技术,研究短期和长期饲喂添加枯草芽孢杆菌日粮对育肥湖羊瘤胃内容物菌群和血清代谢物的影响。【方法】选择日龄((60±10) d)相近、体质量((19.51±2.07) kg/头)接近的湖羊断奶公羔36只,随机分为3组,分别为对照组(CON)、枯草芽孢杆菌Ⅰ组(BSN)和枯草芽孢杆菌Ⅱ组(BSH),每组12只羊。CON组饲喂基础饲粮,BSN组饲喂基础饲粮+100 mg/kg枯草芽孢杆菌,BSH组饲喂基础饲粮+200 mg/kg枯草芽孢杆菌。预试期10 d,正试期60 d,分别在正试期的第30天（短期）和第60天（长期）每组随机选择6只羊取瘤胃内容物和血清进行分析。【结果】① 短期和长期饲喂添加枯草芽孢杆菌饲粮对湖羊瘤胃微生物丰富度指数Chao 1指数和多样性指数Shannon指数、Simpson指数均无显著影响(P＞0.05)。湖羊瘤胃菌群在门水平上,短期饲喂BSN组的螺旋体菌门、迷踪菌门相对丰度较CON组显著降低(P＜0.05),长期饲喂BSH组的变形菌门相对丰度显著升高(P＜0.05);在属水平上,短期饲喂BSN组普雷沃氏菌属UCG-003相对丰度显著降低(P＜0.05),而瘤胃球菌属1相对丰度显著升高(P＜0.05)。长期饲喂BSN和BSH组湖羊普雷沃氏菌属UCG-003相对丰度显著降低(P＜0.05)。② 短期饲喂BSN和BSH组湖羊血清代谢物中L-苹果酸、D-2,3-二羟基丙酸、5-氨基水杨酸、2-氮杂环丁烷羧酸、棕榈酰溶血磷脂酸、1-磷酸果糖、核黄素均较CON组显著降低(P＜0.05);BSN组5 磷酸脱氧核糖、丙烯酸、甘氨酰异亮氨酸、2-酮丁酸、1,2,4-偏苯三酚、β-D-半乳糖、丁酸乙酯均较CON组显著降低(P＜0.05),而3′-磷酸腺苷较CON组显著升高(P＜0.05),差异代谢物相关通路为辅因子的生物合成、核黄素代谢、磷酸转移酶系统等。长期饲喂BSH组10E,12Z 共轭亚油酸、N4-乙酰胞嘧啶、吡咯烷酮羧酸、9,10-环氧十八烷酸、肌酸酐均较CON和BSN组显著升高(P＜0.05),差异代谢物相关性最高的关键通路为程序性坏死、鞘脂信号通路和鞘脂代谢。③ 属水平上差异微生物和差异代谢物相关性分析发现,普雷沃氏菌属UCG-003与大豆苷显著负相关(P＜0.05),螺旋菌属2与3′-磷酸腺苷显著负相关(P＜0.05),而瘤胃球菌属UCG-011与对苯二甲酸、喹啉酸、5,7-二羟基-2-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-4H-色胺-4-酮显著正相关(P<0.05)。【结论】枯草芽孢杆菌短期饲喂可调节湖羊瘤胃微生态平衡,使纤维降解有关的细菌相对丰度增加,但长期饲喂不仅调节能力降低,且长期大剂量（200 mg/kg饲粮）饲喂还会引起瘤胃微生物菌群失调;同时,枯草芽孢杆菌可影响湖羊代谢过程,短期饲喂可能调控辅因子的生物合成、核黄素代谢、磷酸转移酶系统等代谢过程,长期饲喂可能调控程序性坏死、鞘脂信号通路和鞘脂代谢。     

麦秸对湖羊瘤胃发酵代谢及肠道组织形态的影响

为探讨麦秸作为粗饲料的可行性,以苜蓿作为对照,通过对湖羊的饲喂试验分析麦秸对瘤胃发酵代谢及肠道组织形态的影响,测定湖羊的消化道内容物pH及重量、血液及瘤胃液脂多糖含量、瘤胃液酶活力、挥发性脂肪酸含量及脏器指数,并观察肠道组织形态.结果表明:1)与苜蓿干草组相比,麦秸组瘤胃pH显著降低(P＜0.05),网胃、瓣胃、皱胃及...     

山苍子果渣对湖羊体外瘤胃发酵特性的影响

为了探讨山苍子果渣在反刍动物饲料中的利用价值,选用羊草作为对照,采集湖羊瘤胃液进行48 h体外培养试验,利用体外产气法研究山苍子果渣对湖羊瘤胃体外发酵特性的影响。结果显示:(1)山苍子果渣中干物质(DM)含量为95.18%、粗蛋白含量为(CP)13.01%、粗脂肪(EE)含量为34.74%、中性洗涤纤维(NDF)含量为44.06%、酸性洗涤纤维(ADF)含量为11.08%。(2)体外产气48 h后,山苍子果渣产气总量为-1.53 mL/g,极显著(P0.01)低于羊草;山苍子果渣与羊草发酵液pH值分别为6.67和6.54,差异显著(P0.05);山苍子果渣与羊草发酵液中总可挥发性脂肪酸(TVFA)浓度分别为8.74 mmol/L和39.85 mmol/L,差异极显著(P0.01),其中,乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、异戊酸浓度均极显著(P0.01)低于羊草组,戊酸浓度显著(P0.05)低于羊草,但乙酸与丙酸比值组间差异不显著(P0.05)。以上结果表明,山苍子果渣营养成分丰富,但对瘤胃微生物的生长有抑制作用,不利于反刍动物瘤胃发酵产气。     

包被尿素对活体外瘤胃发酵特性和微生物蛋白合成的影响

选用普通尿素、包被尿素和大豆分离蛋白为氮源,以蒸汽压片玉米为主要碳源,配制等氮日粮,利用人工瘤胃双外流连续培养系统,研究包被尿素在基于蒸汽压片玉米日粮条件下对瘤胃发酵和微生物蛋白合成的影响。结果表明:大豆分离蛋白组的干物质(DM)和有机物(OM)消化率最高,普通尿素组最低(P=0.02),包被尿素组居中。普通尿素组的氨态氮NH3-N质量浓度最高(1.99 mg/dL),相比之下,包被尿素组的NH3-N质量浓度降低了30.2%(1.39 mg/dL),但仍然高于大豆分离蛋白组(1.04 mg/dL,P<0.000 1)。各处理间的总挥发性脂肪酸(TVFA)浓度无显著性差异(P=0.72),但TVFA中,各挥发酸摩尔比在处理间存在显著性差异(P<0.05),相比大豆分离蛋白组日粮,普通尿素和包被尿素组具有较高的乙酸摩尔比例和乙酸/丙酸值(P<0.001),而大豆分离蛋白组的异丁酸摩尔比是其他2种日粮的3.9~6.8倍;日粮处理间的微生物蛋白合成效率(MOEFF)差异显著(P=0.05),与普通尿素组(真可消化有机物的含氮量为11.27 g/kg)相比,包被尿素组提高了15.6%(真可消化有机物的含氮量为13.03...     

啤酒糟替代饲粮中不同比例精料对湖羊瘤胃发酵及微生物多样性的影响

【目的】研究啤酒糟替代饲粮中不同比例精料对湖羊瘤胃发酵及微生物多样性的影响,促进啤酒糟在湖羊饲养中的合理利用。【方法】选择体况良好、相近体重（15.90±0.36 kg）的湖羊24只,随机分为4组,分别为饲喂基础饲粮（玉米+豆粕为精料,占比36%,Ⅰ组,CK）及啤酒糟替代1/3（Ⅱ组）、2/3（Ⅲ组）和全部（Ⅳ组）基础饲粮中精料。试验结束后,每组随机选取3只羊,测定羊瘤胃发酵参数和瘤胃微生物多样性。【结果】1）啤酒糟替代饲粮中不同比例精料对湖羊瘤胃的pH值、氨态氮、乙酸等挥发性脂肪酸的含量无显著影响（P>0.05）,试验Ⅱ组的异丁酸含量显著高于其他试验组（P<0.05）。2）在门水平上,啤酒糟替代饲粮中不同比例精料对湖羊瘤胃微生物厚壁菌门（Firmicutes）、拟杆菌门（Bacteroidetes）、变形菌门（Proteobacteria）、互养菌门（Synergistetes）、纤维杆菌门（Fibrobacteres）、放线菌门（Actinobacteria）、变形杆菌门（Epsilonbacteraeota）、螺旋体门（Spirochaetes）和无壁菌门（Tener...     

日粮中添加米糠和玉米胚芽粕对泌乳奶牛瘤胃发酵及微生物菌群的影响

为探究泌乳奶牛日粮中添加米糠和玉米胚芽粕对奶牛瘤胃发酵及微生物菌群的影响,选择24头健康荷斯坦奶牛,其胎次、产奶量和泌乳天数相近,将24头奶牛分为4组(完全随机区组),以NRC (2001)为参照依据,以奶牛基础日粮干物质为基础,对照组(CK组)不添加米糠和玉米胚芽粕,试验A、B、C组日粮中分别添加3.40%米糠和6.80%玉米胚芽粕、6.65%米糠和13.30%玉米胚芽粕、9.98%米糠和19.98%玉米胚芽粕。分别于07:30、14:30和20:30饲喂,试验期包括预饲期(14 d)和正饲期(42 d),试验期共56 d。结果表明:不同处理间泌乳奶牛的瘤胃pH值、氨态氮、挥发性脂肪酸和微生物蛋白无显著差异;试验A组可提高黄色瘤胃球菌和溶纤维丁酸弧菌基因相对表达量,促进瘤胃中纤维降解菌和蛋白降解菌群,提高瘤胃对养分的吸收利用效率。     

过瘤胃甜菜碱对育肥湖羊生长性能的影响

为观察肉羊日粮中添加过瘤胃甜菜碱对肉羊日增重、降低料重比的影响,试验选择已断奶2～3月龄,平均体重在30kg左右的育肥羊羔60只,按体重和体型相近原则分为两组,30只为对照组,其余30只为试验组,分栏饲喂,结果表明,在育肥肉羊日粮中添加过瘤胃甜菜碱可以提高肉羊平均日增重,促进肉羊采食,加快采食速率,增加采食量的同时对防...     

不同碳水化合物结构日粮对山羊瘤胃发酵和 微生物氨基酸组成的影响

 【目的】研究日粮中不同碳水化合物结构对山羊瘤胃发酵和微生物氨基酸组成的影响,为回答“瘤胃微生物的氨基酸组成是否恒定？”这一国际学术界仍有争论的问题提供理论依据。【方法】选用4头装有永久性瘤胃瘘管的徐淮山羊,采用4×4拉丁方试验设计,以玉米、豆粕、稻草为基础日粮,研究不同非结构性碳水化合物与结构性碳水化合物之比(NSC/SC)处理(A：0.33、B：0.63、C：1.17及D：2.18)对pH、NH3-N、VFA浓度及瘤胃微生物氨基酸组成的影响。【结果】随着日粮中NSC/SC的升高,瘤胃pH显著降低(P＜0.05),NH3-N浓度显著升高(P＜0.05),乙酸的摩尔百分比和乙酸/丙酸的比值随日粮中NSC/SC的升高而显著降低(P＜0.05)。不同NSC/SC的日粮下的细菌氨基酸含量中,天冬氨酸、丝氨酸、甘氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、精氨酸、脯氨酸含量都存在显著差异或极显著差异(P＜0.05),原虫氨基酸中天冬氨酸、丙氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、组氨酸、脯氨酸产生了显著变化(P＜0.05)。【结论】瘤胃微生物氨基酸组成会受到日粮中NSC/SC比例的影响。     

精饲料对育肥阶段湖羊增重的影响

湖羊属于一种具有夜食特点的绵羊品种,肉质鲜美,没有太大膻味,具有较好的屠宰性能.对湖羊的有效育肥能获得更高的经济效益,提高其羊肉品质.本文通过试验来探究精饲料对育肥阶段湖羊增重的影响,对其作出具体分析,以供参考.     

添加脂肪对反刍动物瘤胃发酵影响的研究进展

本文综述了关于添加脂肪对瘤胃发酵的影响,即添加脂肪对瘤胃的 pH、微生物的生长与活动、纤维素(CF、NDF、ADF)的消化、瘤胃蛋白质降解、淀粉消化、挥发性脂肪酸(VFA)的产量、乙/丙酸比例变化、甲烷气(CH_4)的产生量和矿物质(Ca、Mg)消化的影响,并提出了减少添加脂肪对瘤胃发酵负效应的途径。     

不同pH对瘤胃细菌数量和菌群结构的影响

【目的】试验旨在研究瘤胃不同pH下瘤胃酸中毒相关细菌数量和瘤胃细菌菌群结构的变化。【方法】选取5头干奶期荷斯坦奶牛作为瘤胃液供体,调节瘤胃液pH分别为6.5、5.8、5.5、5.2和5.0。培养3 h后,采用qPCR技术测定瘤胃酸中毒相关细菌数量,采用16S rDNA高通量测序技术研究瘤胃细菌菌群结构的变化。【结果】（1）瘤胃pH对白色瘤胃球菌（Ruminococcus ablus）的相对数量没有影响（P>0.05）,但显著影响了乳酸产生菌和乳酸利用菌的相对数量（P<0.05）。其中牛链球菌（Streptococcus bovis）相对数量随着pH的下降而升高,在pH 5.0处极显著高于其余各组（P<0.05）;埃氏巨型球菌（Megasphaeraelsdenii）、反刍兽新月单胞菌（Selenomonas ruminantium）及乳酸杆菌（Lactobacillus species）随pH下降呈现先升高后下降的趋势,pH分别在pH 5.5或pH 5.2处达到最大值（P<0.05）;(2)α多样性结果显示,瘤胃细菌数量和菌群的丰富度及多样性呈现随瘤胃pH下降先...     

茶皂素对湖羊瘤胃培养物发酵的影响

在瘤胃培养液中分别添加0.25%、0.50%、0.75%的茶皂素提取物,经过体外培养发酵试验表明:添加茶皂素提取物的各组均使活原虫数显著减少(P<0.01);并且能够显著提高产气量(P<0.01),从而提高饲料的转化效率;并使湖羊获得更多的菌体蛋白和能量。     

硫胺素和硫水平对山羊人工瘤胃代谢和微生物菌群的影响

【目的】探讨在不同硫水平条件下,添加硫胺素（维生素B1）对人工瘤胃内营养物质消化代谢的影响。【方法】按2×2因子试验设计,因子一为不同的氮硫比（高硫水平,即N﹕S=5﹕1;低硫水平即N﹕S=15﹕1）,因子二为不添加和添加硫胺素（0和60 mg•kg-1）进行人工瘤胃培养试验。【结果】 添加硫胺素对pH和NH3-N浓度的影响不显著;高硫水平能够抑制细菌蛋白的合成,显著提高了瘤胃培养液中原虫和细菌蛋白质的比值（P/WB）（P＜0.05）;在低硫水平下,添加硫胺素处理组TVFA的摩尔浓度和丁酸百分含量均高于不添加硫胺素组（P＜0.05）,而乙酸低于不添加硫胺素组。在高硫水平下,添加硫胺素处理组与不添加组之间总挥发性脂肪酸和单一脂肪酸的摩尔浓度无显著差异（P＞0.05）。高硫水平能够降低培养液中硫胺素的总量,而添加的硫胺素则增加了培养液中硫胺素的总量;高硫水平可以降低乳酸的浓度;同一氮硫水平下,添加硫胺素处理组的牛链球菌的相对数量比非添加组分别降低了5.90%（P＜0.05）和2.05%（P＜0.01）;添加不同水平的硫和硫胺素对溶纤维丁酸弧菌的相对数量的影响不显著（P＞0.05）。【结论】人工瘤胃中硫水平对瘤胃发酵有一定影响,高硫水平可显著降低培养液中的乳酸浓度,提高原虫蛋白质的合成量,而抑制细菌蛋白质的合成;无机硫和硫胺素在降低瘤胃内乳酸浓度和缓解瘤胃酸中毒中起重要作用,并且二者对乳酸浓度的影响存在互作效应。添加不同水平的硫和硫胺素能够降低瘤胃液中牛链球菌的相对数量,对瘤胃液中溶纤维丁酸弧菌的相对数量的影响不显著（P＜0.05）。     

半胱胺对山羊瘤胃微生物体外发酵的影响

利用来自4头装有永久性瘤胃瘘管本地成年山羊的瘤胃液，以0．7g草粉和0．3g精料（由70％玉米＋30％豆粕组成）为底物，在体外厌氧条件下，研究了不同浓度的半胱胺（10mg/L、50mg/L、100mg/L、200mg/L和500mg/L)对瘤胃微生物体外发酵的影响。结果表明：当培养液中半胱胺浓度为50mg/L时，培养液中氨氮浓度比对照组降低5．7％（P＜0．05），而微生物蛋白浓度、总挥发性脂肪酸浓度、丙酸比例和体外发酵总产气量分别比对照组提高66％（P＜0．05）、56％（P＜0．05）、6％（P＜0．05）和11．4％（P＜0．05），发酵总产气量和总挥发性脂肪酸浓度开始高于对照组，微生物蛋白在发酵5h后开始高于对照组。结果显示，半胱胺可促进山羊瘤胃微生物发酵。     

日粮不同NFC/NDF比对山羊瘤胃发酵与瘤胃微生物区系结构的影响

【目的】探讨日粮中非纤维性碳水化合物/中性洗涤纤维（NFC/NDF）比对山羊瘤胃发酵、瘤胃细菌与瘤胃产乳酸菌菌群结构组成,以及瘤胃产乳酸菌、总细菌与大肠杆菌数量的影响。【方法】试验选用4只装有永久性瘤胃瘘管、健康阉割的长江珠三角白山羊,采用自身对照试验设计,共分3期进行,每期15 d,依次饲喂 NFC/NDF比值分别为0.42（Ⅰ期）、1.04（Ⅱ期）、2.73（Ⅲ期）的3期日粮,分别于第13、14和15天采集瘤胃内容物。采用PCR/DGGE（denaturing gradient gel electrophoresis）分析瘤胃微生物区系结构,采用real-time PCR定量瘤胃内容物中总菌、乳酸杆菌、牛链球菌与大肠杆菌数量。【结果】随日粮中NFC/NDF比值提高,瘤胃pH显著降低（P＜0.05）;瘤胃液中乳酸、乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸、异戊酸和总挥发性脂肪酸（total violate fatty acid,TVFA）浓度均显著增加（P＜0.05）,而乙酸与丙酸比显著降低（P＜0.05）;DGGE图谱分析表明,来自NFC/NDF比值不同的瘤胃样品分别聚成一族;real-time PCR测定表明,随NFC/NDF比值提高,乳酸杆菌数量显著增加（P＜0.05）,总细菌数量显著下降（P＜0.05）,牛链球菌及大肠杆菌数量未发生显著变化（P＞0.05）。【结论】瘤胃发酵模式受日粮NFC/NDF比值的影响,随NFC/NDF比值增加,瘤胃发酵从乙酸型发酵转向丙酸型发酵;同时,瘤胃微生物区系组成发生改变,瘤胃细菌总量下降。     

不同饼粕组合对奶牛瘤胃发酵的影响

[目的]探讨3种饼粕不同组合对奶牛瘤胃发酵的影响。[方法]将豆粕、花生粕和棉籽粕分别按1/3和2/3的比例合成6个组合,利用短期人工瘤胃技术研究6种组合对体外培养瘤胃液pH值、氨态氮（NH3-N）浓度和挥发性脂肪酸（VFA）浓度的影响。[结果]各组间pH值差异不显著;在NH3-N浓度上第2组极显著高于其他组（P〈0.01）;第3组在VFA浓度上极显著高于其他组（P〈0.01）。[结论]在6种豆粕组合中,第3组（2/3豆粕和1/3棉籽粕组合）最有利于奶牛瘤胃发酵。     

日粮添加蚕豆皮对湖羊空肠屏障相关基因表达、消化酶活性和微生物菌群的影响

[目的]本试验旨在研究日粮添加蚕豆皮对湖羊空肠屏障相关基因表达、消化酶活性和微生物菌群的影响。[方法]30只4月龄体重相近[(27±2.0)kg]的雄性湖羊分为2组,分别饲喂基础日粮(对照组,CON)和添加30%蚕豆皮日粮(蚕豆皮组,BBS)。预饲期10 d,正式期50 d。试验结束后采集空肠组织及食糜(n=5),通过RT-qPCR检测黏膜屏障相关基因的表达,生化试剂盒检测消化酶活性,高通量测序分析食糜微生物菌群。[结果]与对照组相比,BBS组空肠黏膜细胞连接基因Claudin-1、Occludin、MUC-2和ZO-1,促炎因子IL-6、IL-10和TNF-α mRNA水平无显著变化(P>0.05),而IL-1β mRNA水平显著降低(P<0.05)。2组空肠黏膜α-淀粉酶、胰蛋白酶和脂肪酶活性无显著变化(P>0.05)。BBS组食糜微生物Shannon、Chao1和Observed＿otus指数显著降低(P<0.05);门水平上,BBS组变形菌门(Proteobacteria)相对丰度显著升高(P<0.05),厚壁菌门(Firmicutes)、髌骨细菌...