金钗石斛原生态栽培方法及技术

为金钗石斛栽培技术的推广应用,从栽培方法,技术及田间管理方面介绍金钗石斛原生态的种植技术。     

金钗石斛栽培技术

兰科植物金钗石斛．别名扁金钗、吊兰花。多年生草本植物．高20～50厘米,具白色气生根。茎直立,丛生,黄绿色,稍扁,具槽,有节。     

HPLC法测定金钗石斛中石斛碱含量

采用反相高效液相色谱法测定不同产地金钗石斛茎的石斛碱含量。结果表明,贵州赤水产金钗石斛石斛碱含量最高（0．55％）,罗甸产金钗石斛石斛碱含量最低（0．04％）;石斛碱在0．01～0．05μg范围内线性关系良好。     

不同附生树种对金钗石斛石斛碱含量的影响

[目的]测定不同附生树种金钗石斛中石斛碱的含量。[方法]以贵州赤水仿野生3年苗为试验材料,不同树种继续附生生长1年,采用气相色谱内标法,测定不同附生树种金钗石斛中石斛碱的含量。色谱柱:DB-1(30 m×0.25 mm×0.25μm);程序升温:初始温度80℃,10℃/min升温至250℃,保持5 min;进样口温度250℃;FID检测器温度250℃。[结果]不同附生树种金钗石斛中石斛碱的含量有明显差异,其中,杉木附生金钗石斛的石斛碱含量最高,为0.932%,枇杷、杨梅、龙眼附生金钗石斛石斛碱含量分别为0.825%、0.790%和0.601%。[结论]不同附生树种的金钗石斛石斛碱含量均符合2015版《中国药典》限量要求,该研究为确定适宜的附生树种提供参考依据。     

金钗石斛林下栽种固定法试验报告

[目的 ]移栽时,种苗贴石固定方法(传统固定法有泥糊固定、牛粪固定、直接压石、低标号水泥固定等)不同,直接影响金钗石斛苗的成活率。本试验在传统经验基础上,通过不同栽种固定法试验,探索金钗石斛组培苗栽种的最佳固定方式。[方法 ]设置5种不同的移栽方式观察记录金钗石斛的生长状况。[结果 ]线卡固定苔藓盖根的金钗石斛长势最好。[结论]在实际生产中当选用线卡固定苔藓盖根的移栽方式。     

赤水地区金钗石斛垒石原生态集约化栽培技术

为了探索金钗石斛原生态集约化栽培,促进金钗石斛产业规模化集约化生产,实现金钗石斛产业的快速健康发展,在扶贫项目资金的支持下,在赤水市复兴镇和丙安乡开发出了金钗石斛垒石原生态集约化栽培技术。通过对不同条件下的金钗石斛垒石原生态集约化栽培技术的调查研究,初步研究出了适宜赤水地区金钗石斛垒石原生态集约化栽培技术模式和栽培管理技术。     

赤水市金钗石斛基地建设经济效益分析

通过分析2010年3月至2011年12月金钗石斛种植的投入与产出,对其种植效益进行评价。     

金钗石斛的组织培养和快繁技术

该项目选用宝天曼国家自然保护区野生的金钗石斛茎段,消毒后接种于MS 6-BA2．0 NAA0．5 2.0％蔗糖培养基上诱导出再生植株．在MS 6-BA2．0 NAA1．0 2．0％蔗糖培养基上,增殖系数可达5～6,在MS KT2．0 IBA0．5 2．0％蔗糖培养基上,培养30天左右,可形成3-4条粗壮的根、6-7cm的完整植株,移栽到小树皮 小兰基石十椰壳粉(1．5：1．5：1)基质上,成活率可达到95％。     

金钗石斛林下栽培移栽遮阴度试验报告

[目的 ]金钗石斛组培苗移栽后,光照强度是影响成活率和生长发育的关键因素之一。通过对其伴生树种的修剪来调控遮阴条件,在一定程度上控制遮阴度。通过本试验研究,探索金钗石斛生长的适宜遮阴条件。[方法 ]以不同遮阴度为试验因素,设置4个处理,观察记录金钗石斛的生长状况。[结果]金钗石斛在中等遮阴(55%-65%)长势最好。[结论 ]在实际生产中通过调节伴生树种试石斛栽培地的遮阴度尽量为中等遮阴(55%-65%)。     

光照强度对金钗石斛吸收氮素的影响

应用15N 研究光强度对金钗石斛吸收氮素的影响,结果表明光强度为 2×104Lx 处理,在石斛生长的四个阶段吸收营养液中氮量分别比光强度为 5×10Lx 处理高 26．54％,50．07％,31．11％和 22．22％;吸收木屑培养基质中的氮量分别提高 32．84％,43．41％,21．85％和 19．01％;吸收总氮量分别提高 29．19％,46．44％,26．01％和 20．51％。在石斛生长的四个阶段,光照强度为 2×104Lx 处理,植株干物重分别比 5×103Lx 处理提高 12．40％,22．22％,17．08％和 15．00％;但是,光照强度为 5×103Lx 处理根干物重较光强为 2×104Lx 处理高 18．21％,9．63％,10．04％和18．45％。     

金钗石斛的组织培养和快繁技术

以宝天曼国家自然保护区野生的金钗石斛茎段为试材,消毒后接种于MS 6-BA2.0mg/L NAA0.5mg/L 2.0%蔗糖培养基上诱导出新生芽,在MS 6-BA2.0mg/L NAA1.0mg/L 2.0%蔗糖培养基上,增殖系数可达5～6,在MS KT2.0mg/L IBA0.5mg/L 2.0%蔗糖培养基上,培养30d左右,可形成3～4条粗壮的根和6～7cm的完整植株,移栽到小树皮 小兰基石 椰壳粉(1.5:1.5:1)基质上,成活率可达到95%。     

金钗石斛茎生长变化规律观察初报

观察金钗石斛一年中的茎增长、茎增粗、分蘖率、展叶数等得出,金钗石斛的茎长、茎粗、累计抽芽数、展叶数在1—8月增长较快,并于8月左右达到峰值。     

金钗石斛的组织培养和快繁技术

选用宝天曼国家自然保护区野生的金钗石斛茎段,消毒后接种于MS+6 BA2.0+NAA0.5+2.0%蔗糖培养基上诱导出新生芽,在MS+6 BA2.0+NAA1.0+2.0%蔗糖培养基上,增殖系数可达5～6,在MS+KT2.0+IBA0.5+2.0%蔗糖培养基上,培养30d左右,可形成3～4条粗壮的根、6～7cm的完整植株,移栽到小树皮+小兰基石+椰壳粉(1.5∶1.5∶1)基质上,成活率可达到95%。     

铁皮石斛和金钗石斛杂交后代的分子鉴定

铁皮石斛和金钗石斛是《中华人民共和国药典(2015版)》收录的2种药用石斛,具有重要的药用价值和经济价值。然而,目前关于这2种石斛药用价值的遗传基础研究和优良新品种选育等相对较弱。本研究以铁皮石斛和金钗石斛2个亲本,以及它们的131个F₂代杂交单株作为研究对象,从320对SSR引物中筛选出特异性引物,用于铁皮石斛和金钗石斛杂交后代的真假杂种鉴定。结果表明,3对石斛属特异性SSR引物DNtSSR013、DNtSSR147和DNtSSR150,可将杂交群体扩增带型分为真杂交种型、母本型、父本型、缺失型,进而从131个杂交群体F₂代中共鉴定出119个真杂交种,真杂交种占杂交群体的91%。因此,利用SSR分子标记技术鉴定石斛杂交群体是可行的,相关结果为铁皮石斛和金钗石斛的遗传图谱构建,石斛多糖和石斛碱等活性成分QTL定位奠定了基础。     

铁皮石斛与金钗石斛杂交及回交后代的SSR鉴定

[目的]鉴定铁皮石斛与金钗石斛杂交F_1代和回交后代的真假性。[方法]以14株铁皮石斛与金钗石斛杂交F_1后代及18株以铁皮石斛为母本回交后代为试验材料,从24对特异性SSR引物中筛选引物用以鉴定。[结果]从24对SSR基因组引物中,筛选出4对双亲多态性引物。用该4对石斛特异性引物可从14株杂交F_1群体中鉴定出11株真杂交种,占杂交群体的78.6%;18株回交群体中,被4对引物同时鉴定出真杂种率达38.9%。[结论]利用SSR分子标记技术鉴定石斛种间杂交与回交是可行的,对提高石斛育种效率、缩短育种年限和石斛种质资源的保护与利用具有重要意义。     

贵州省赤水市大棚种植金钗石斛的气候评价

对赤水市大棚小气候特征与石斛生长气象条件进行对比分析。结果表明,整个春末至秋初,棚内气温达到石斛生长适宜温度,冬季气温满足石斛冬眠需要;夏季棚内最高气温超出石斛生长的最高临界温度4.0～7.0℃,春秋两季棚内最高气温上限也达到石斛生长的最高临界温度,但最低气温均高于石斛生长的最低临界温度。对不利于大棚石斛生产的气象条件,提出具有针对性和合理化的小气候调控措施。     

金钗石斛菌根、茎和叶内生真菌的分离与鉴定

[目的]分离鉴定铁皮石斛不同组织内生真菌,以期为提高其组培苗的大田定植成活率提供试验依据。[方法]以改良PDA-抗生素酸性培养基为基础分离培养基,分别从金钗石斛菌根、茎和叶中分离内生真菌,利用切片法对分离得到的菌株进行纯化,并观察其菌落形态。[结果]通过菌落形态观察,初步鉴定所纯化的6个内生菌株分别为:NJJG-1,NJJG-2,NJJR-1,NJJR-2,NJJR-3和NJYJ-1。试验结果表明材料表面消毒条件和方法以及分离培养基的选用,均直接影响真菌的分离纯化效果和分离得到的内生菌的多样性,其中以75%酒精处理30 s,再用0.1%升汞处理7 min的表面消毒效果稳定,再配合改良的PDA-抗生素酸性培养基分离内生菌,可以分离出较多的内生菌种类。[结论]该研究结果为铁皮石斛不同组织内生真菌的分离鉴定提供了指导方法,同时为提高其组培苗的大田定植成活率提供了试验依据。     

干旱胁迫对金钗石斛幼苗生理生化的影响

用加有不同浓度聚乙二醇(PEG6000)(0,5%,10%,15%,20%,25%)的MS培养液模拟干旱胁迫,胁迫时间分别为3 d9、d和15 d,并测定干旱胁迫对金钗石斛幼苗生理生化特性的影响。结果表明:干旱胁迫可以引起金钗石斛幼苗脯氨酸、可溶性糖的积累,降低可溶性蛋白质相对含量,增大细胞质膜的相对透性;随着胁迫强度和时间的增加,各生理生化特性变化明显。     

金钗石斛生物碱组分GC指纹图谱的建立

目的:建立金钗石斛药材指纹图谱,为其内在质量控制提供部分科学依据。方法:采用气相色谱法,OV1701石英毛细管柱(30m×0.32mm,0.25μm),以FID为检测器,石斛碱为对照品,建立金钗石斛药材的指纹图谱。结果:金钗石斛由8个峰组成,其峰面积大于90%,精密度、稳定性、重复性均符合《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》要求。结论:本法可以作为金钗石斛内在质量控制的标准。