肌醇脂质和cAMP在血小板活化因子诱导血小板聚集中的作用

目的：探讨肌醇脂质和cAMP两个细胞内第二信使系统在血小板活化因子(PAF)诱导血小板聚集过程中所起到的作用和相互关系。方法：采用PKC激动剂PMA和Ca^2 通道A23187,以及PKA激动剂Sp-cAMPS和抑制剂Rp-cAMPS干预的方法,分析观察这两个信使系统在PAF诱导血小板聚集过程中的作用;采用^3H—Inositol和^14C-Adenine双标记液体闪烁技术测定PAF诱导血小板可逆聚集过程中肌醇-1,4,5-三磷酸酯(IP3)和cAMP的水平变化的方法,分析研究这两个信使系统在PAF诱导血小板聚集过程中的相互关系。结果：(1)PMA和A23187能分别增强PAF的血小板聚集效应,而且两者具有协同作用;(2)Rp-cAMP和Sp-cAMPS两者本身都不能引起血小板聚集,但能分别增强和抑制PAF的聚集效应;(3)IP3和cAMP的水平变化分别与血小板的聚集和解聚过程一致。结论：(1)肌醇脂质信使系统是细胞内转导PAF诱导血小板聚集的主要胞内信使系统。(2)降低血小板内cAMP浓度不能诱导聚集,但能增强肌醇脂质信使系统的聚集效应;升高cAMP水平能拮抗肌醇脂质信使系统的作用,这可能是使可逆相聚集的血小板解聚的一个重要机制。     

蛋白激酶C在血小板聚集中的作用

本实验以洗涤血小板为材料,在阿斯匹林阻断花生四烯酸代谢情况下,研究血小板不同激动剂对蛋白激酶C的作用.血小板激动剂,在聚集浓度范围内,除肾上腺素外,PAF、ADP、凝血酶、胶原、PMA和A23187对     

蛋白激酶C激动剂PMA和凝血酶对血小板骨架蛋白的作用

本文研究PMA和凝血酶对血小板骨架蛋白形成的影响。结果表明,(1)在凝血酶诱导的血小板骨架蛋白不溶微丝中,肌动蛋白,肌球蛋白重链(MHC)、肌动蛋白结合蛋白。56K、80K、84K蛋白明显增加。PMA诱导     

肌醇脂质及cAMP第二信使系统在血小板活化因子诱导血小板聚集中的作用

本文观察了蛋白激酶C激动剂PMA、Ca~(2+)载体A23187及蛋白激酶A激动剂SPcAMPS和抑制剂Rp—cAMPS对PAF诱导兔血小板聚集的影响,并采用~3H—Inositol和~(14)C—Adenine同时标记血小板中肌醇和腺     

野菊花抗血小板聚集有效成分的筛选

以野菊花为材料,顺次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、水抽提,抽提物终浓度相当于1g草药/ml,对5μmol/L ADP诱导的血小板聚集分别抑制30.8±20.2％、49.3±29.4％、51.9±22.8％、43.5±18.0％、13.7±1.6％。野菊花乙酸乙酯抽提物抑制5μmol/L ADP诱导的血小板聚集IC_(50)=1mg/ml。乙酸乙酯抽提物用硅胶柱制备分离得C1、C2、C3、C4、C5、C6六种结晶,经TLC检识分别为一个斑点。定性分析知为基黄酮化合物。在0.5mg/ml浓度下,对2μmol/L ADP诱导的血小板聚集后三种物质分别抑制78.9％、85.3％、83.5％。     

69种中药抗血小板聚集作用的观察

本文用回流法,对69种中药进行沸水抽提,药浓度为0.2g/ml,用11头猪的混合富含血小板血浆(PRP),利用血小板聚集仪进行ADP诱导的聚集率测定,结果:69种中草药有抗聚集作用的中药有34种,分     

蛋白激酶C抑制剂Staurosporine对血小板聚集、蛋白磷酸化和肌动蛋白聚合的影响

目的：进一步研究蛋白激酶C抑制剂Staurosporine在血小板聚集、蛋白磷酸化、肌动蛋白聚合中的作用。方法：以32P－Na2HPO4标记血小板；以血小板聚集仪测定血小板聚集；以SDS－PAGE分离蛋白质，进行放射自显影；以TritonX－100抽提法沉淀骨架蛋白。结果：（1）1μmol／LStaurosporine完全抑制0．5U／ml凝血酶或10μmol／LPMA诱导的血小板聚集，大部分抑制20μmol／LA23187诱导的血小板聚集。（2）1μmol／LStaurosporine几乎完全抑制0．5U／ml凝血酶、或10μmol／LPMA、或20μmol／LA23187诱导的血小板40kD和20kD蛋白磷酸化。（3）1μmol／LStaurosporine完全抑制0．5U／ml凝血酶或10μmol／LPMA诱导的血小板肌动蛋白聚合。结论：Staurosporine抑制蛋白激酶C的活性．从而抑制血小板的聚集和肌动蛋白聚合；蛋白激酶C在血小板聚集和肌动蛋白聚合中起着重要调控作用。     

田七总皂苷对兔全血血小板聚集的影响

目的观察田七总皂苷对凝血酶或ADP诱导的兔全血血小板聚集的影响。方法兔全血与田七总皂苷孵育5min,然后用凝血酶或ADP作用1min,用全血血小板聚集仪观察兔全血血小板聚集情况。结果田七总皂苷50、100和200μmol/L作用兔血小板后,用凝血酶诱导时对血小板聚集的抑制率分别为39%、60%和61%;用ADP诱导时抑制率分别为65%、79%和60%。结论田七总皂甙对凝血酶和ADP诱导的兔全血血小子板聚集都有抑制作用。     

槲皮素单硫酸酯和5''''-氯-5''''-脱氧腺苷合用对凝血酶诱导兔血小板聚集的影响

槲皮素(quercetin)是一种天然存在的具有多种药理作用的黄酮类化合物,广泛存在于植物界,化学名为3,5,7,3',4'-五羟基黄酮,已报道槲皮素及其衍生物具有多方面的心血管药理作用.腺苷及其类似物具有多种生物活性,包括舒张冠脉、减缓心率、抗血小板活性等作用.但两类药物合用对血小板的作用尚未见报道.本文用比浊法研究了槲皮素单硫酸酯和5'-氯-5'脱氧腺苷合用对凝血酶诱导兔血小板聚集的影响.结果显示,槲皮素单硫酸酯和5'-氯-5'脱氧腺苷对凝血酶诱导的兔血小板聚集都有抑制作用;槲皮素单硫酸酯与5'-氯-5'脱氧腺苷联合用药,增强凝血酶诱导兔血小板聚集的抑制作用.结果提示,槲皮素单硫酸酯与5'-氯-5'脱氧腺苷在一定的浓度范围内具有协同抗血小板聚集的作用.     

野菊花抗聚集有效成分的筛选

以野菊花为材料,对其抗聚集成分进行分离。在石油醚、氯仿、乙酸、乙酯、正丁醇、水抽提物中,终浓度为1g草药/ml,对5μMADP诱导的血小板聚集分别抑制30.8±20.2％,49.3±29.4％,51.9±22.8％。43.5±     

16种药用植物提取物抗凝血酶诱导的血小板聚集活性及辣木活性部位的GC-MS分析

【目的】测试16种缅甸药用植物乙醇提取物和中国不同产地辣木(Moringa oleifera Lam.)提取物抗凝血酶诱导的血小板聚集活性,并分析中国产辣木抗血小板聚集活性部位的化学成分。【方法】采用体外抗家兔血小板聚集活性测定方法测试提取物的活性,采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用方法分析提取物化学成分。【结果】16种缅甸药用植物的乙醇提取物对凝血酶诱导的家兔血小板聚集显示出弱的抑制作用。在提取物终质量浓度为1 500μg/mL时,辣木叶提取物(MMV201-1)、家独行菜(Lepidium sativum L.)种子提取物(MY46)、Aconitum ferox Wall. ex Ser.根提取物(MY53)和积雪草[Centella asiatica (L.) Urb.]全草提取物(MY89)的抑制率分别为27.0%±4.2%、20.0%±12.7%、20.4%±6.0%和20.5%±1.3%,其余提取物的抑制率低于20%。在提取物终质量浓度为1 000μg/mL时,云南德宏产辣木叶二氯甲烷萃取部位(PXS58-3-1)活性较好,抑制率为28.2%±17.8%。通过GC-MS...     

《中国心血管病报告2017》概要

目的测试16种缅甸药用植物乙醇提取物和中国不同产地辣木(Moringa oleifera Lam.)提取物抗凝血酶诱导的血小板聚集活性,并分析中国产辣木抗血小板聚集活性部位的化学成分。方法采用体外抗家兔血小板聚集活性测定方法测试提取物的活性,采用气相色谱−质谱(GC-MS)联用方法分析提取物化学成分。结果16种缅甸药用植物的乙醇提取物对凝血酶诱导的家兔血小板聚集显示出弱的抑制作用。在提取物终质量浓度为1 500 μg/mL时,辣木叶提取物(MMV201-1)、家独行菜(Lepidium sativum L.)种子提取物(MY46)、Aconitum ferox Wall. ex Ser.根提取物(MY53)和积雪草[Centella asiatica (L.) Urb.]全草提取物(MY89)的抑制率分别为27.0%±4.2%、20.0%±12.7%、20.4%±6.0%和20.5%±1.3%,其余提取物的抑制率低于20%。在提取物终质量浓度为1 000 μg/mL时,云南德宏产辣木叶二氯甲烷萃取部位(PXS58-3-1)活性较好,抑制率为28.2%±17.8%。通过GC-MS法对活性部位PXS58-3-1的化学成分进行分析,共鉴定出10种化合物,相对含量较高的是2-吡咯烷酮(44.58%)、烟酰胺(23.05%)和棕榈酸(9.24%)。结论家独行菜和Aconitum ferox的抗血小板聚集活性值得进一步研究,辣木中的抗血小板聚集活性成分还需要深入的研究来阐明。     

不同剂量阿司匹林和波立维对阿司匹林抵抗患者血小板聚集功能的影响及护理

目的 观察不同剂量阿司匹林和波立维对冠心病阿司匹林抵抗患者血小板聚集功能的影响,并提出相应护理对策.方法 筛选出冠心病患者中发生阿斯匹林抵抗的患者48例入选本研究,随机分为3组,分别给予阿司匹林100、300 mg和阿司匹林100 mg 波立维75 mg,14 d后采用全血电阻法检测血小板聚集功能.结果 阿司匹林100 mg和阿司匹林300 mg患者的血小板聚集功能比较差异均无统计学意义(P＞0.05);加服波立维可使二磷酸腺苷诱导的血小板聚集功能显著抑制(P＜0.01),但对花生四烯酸诱导的血小板聚集无明显影响.结论 加大阿司匹林剂量或合用波立维不能明显改善冠心病患者的阿司匹林抵抗,对该类患者应加强临床观察和护理.     

PKC、PKA和TPK在血小板激活中的作用

目的：研究蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）,蛋白激酶Ａ（ＰＫＡ）,酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）在血小板聚集激活中的作用。方法：本实验是在阿斯匹林阻断花生四烯酸代谢,Ａｐｙｒａｓｅ去除ＡＤＰ情况下,利用３２Ｐ－ＮａＨ２ＰＯ４标记猪血小板,然后以ＰＭＡ、凝血酶、ＰＧＦ１、腺苷等处理。以血小板聚集仪测定血小板聚集;ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分离血小板蛋白;并进行放射自显影;碱处理电泳凝胶检测酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）底物;ＴＬＣ进行磷酸氨基酸分离。结果：（１）随着ＰＭＡ激活ＰＫＣ,血小板发生聚集;（２）３５μｍｏｌ／ＬＰＧＦ１或１ｍｍｏｌ／Ｌｄｂ－ｃＡＭＰ不能抑制５０ｎｍｏｌ／ＬＰＭＡ诱导的血小板聚集,腺苷却能抑制ＰＭＡ诱导的血小板聚集（ＥＣ５０＝０．１ｍｍｏｌ／Ｌ）．（３）ｄｂ－ｃＡＭＰ、腺苷都不能抑制１００ｎｍｏｌ／ＬＰＭＡ诱导的４０ｋＤ蛋白磷酸化,ＰＫＡ激活不能抑制ＰＭＡ激活的ＰＫＣ。（４）在ＰＭＡ、凝血酶激活的血小板中,ＰＫＣ、ＴＰＫ都发生激活,４０ｋＤ底物既是ＰＫＣ的底物又是ＴＰＫ的底物。结论：ＰＫＣ和ＴＰＫ在血小板聚集中起着重要的调节作用。     

血小板激活中PKC与PKA、TPK、MLCK的关系

本实验以洗涤血小板为材料,研究蛋白激酶C蛋白激酶A(PKA)酪氨酸蛋白激酶(TPK)肌球蛋白轻链激酶(MLCK).(1)腺苷环化酶激活剂PGE1不能使50nMPMA诱导的血小板聚集受抑制。(2)腺苷及其类似     

槲皮素单硫酸酯和5’-氯-5’-脱氧腺苷单用与合用对凝血酶诱导兔血小板聚集的影响

目的：研究槲皮素单硫酸酯和5’-氨-5’-脱氧腺苷合用对凝血酶诱导兔血小板聚集的影响。方法：用比浊法检测血小板聚集。结果：槲皮素单硫酸酯和5’-氨-5’-脱氧腺苷对凝血酶诱导的兔血小板聚集都有抑制作用，两者合用作用增加。结论：槲皮素单硫酸酯与5’-氨-5’-脱氧腺苷具有协同抗血小板聚集的作用。     

四种槲皮素水溶性衍生物对凝血酶诱导兔血小板聚集的影响

目的 :研究四种人工半合成槲皮素水溶性衍生物 ,即乙氧基槲皮素、槲皮素磷酸酯 (B)、槲皮素单硫酸酯和槲皮素二硫酸酯对凝血酶诱导兔血小板聚集的影响。方法 :用比浊法检测血小板聚集。结果 :乙氧基槲皮素对血小板聚集无影响 ;槲皮素磷酸酯 (B)、槲皮素单硫酸酯和槲皮素二硫酸酯对血小板聚集有抑制作用 ,IC5 0 分别为 80μ mol/ L、95μ mol/ L和 1 85μ mol/ L。结论 :槲皮素磷酸酯 (B)、槲皮素单硫酸酯和槲皮素二硫酸酯具有抗血小板活性     

抑肽酶对凝血酶诱导的猪血小板中钙流动的影响

凝血酶诱导的Ca~(2+)流动在血小板的分泌和聚集中起着重要的作用。本文发现一种广谱蛋白酶抑制剂抑肽酶能抑制凝血酶诱导的血小板中Ca~(2+)的流动:(1)当胞外存在0.5mmol/LCa~(2+)时,抑肽酶抑制凝血酶(0.1     

FGF-21对大鼠血小板聚集和活化的抑制作用

临床上大部分抗血小板药物存在继发性出血等副作用,亟需寻找一种安全有效的抗血小板药物。二磷酸腺苷(ADP)和花生四烯酸(AA)是介导血小板聚集的主要物质,文章探讨成纤维细胞生长因子-21(FGF-21)是否抑制ADP或AA诱导大鼠血小板聚集和活化。将大鼠分为正常对照组、正常鼠血小板活化组、阿司匹林干预后血小板活化组、FGF-21高、中、低剂量干预后血小板活化组。给药干预后提取各组血小板,分别用ADP或AA处理,观察处理后血小板聚集情况以及P选择素和血栓素(TXB2)表达水平。与正常对照组相比,正常鼠血小板经ADP或AA处理活化后,血小板聚集率显著升高,血浆中P选择素和TXB2含量明显上升;与正常鼠血小板经ADP或AA处理活化后相比,经阿司匹林和FGF-21干预后分别经ADP或AA处理活化后的血小板聚集率显著下降,血浆中P选择素和TXB2含量显著下降;FGF-21干预组经ADP或AA活化后,血小板聚集率、P选择素和TXB2含量下降水平呈明显剂量依赖性。目前国内外尚未发现FGF-21对血小板聚集与活化作用的相关报道,研究首次证明FGF-21具有抑制ADP和AA诱导血小板聚集和活化作用及明显的抗血凝作用,填补FGF-21在抗血凝研究领域空白,为开发安全有效的抗血凝药物提供理论依据。     

金丝桃苷对SLT-Ⅱ e诱导大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌PGI2、TXA2及PAF的影响

通过检测金丝桃苷对SLT-Ⅱe诱导的大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌前列环素(PGI2)、血栓素(TXA2)及血小板活化因子(PAF)的影响,探索中药复方有效成分金丝桃苷对仔猪水肿病的疗效机制。将培养的肠黏膜微血管内皮细胞分为阴性对照组、阳性对照组、不同质量浓度金丝桃苷处理组等6个组,采用ELISA法测定了培养3,6,9和12 h时细胞上清液中PGI2、TXA2及PAF质量浓度的变化。结果表明,不同质量浓度金丝桃苷处理组对SLT-Ⅱe诱导肠黏膜微血管内皮细胞过量分泌PG12、PAF无明显的抑制作用;1和5μg／mL质量浓度金丝桃苷处理组对SLT-Ⅱe诱导肠黏膜微血管内皮细胞TXA2的分泌具有明显的下调作用。南此可见,金丝桃苷通过抑制SLT-Ⅱe诱导肠黏膜微血管内皮细胞TXA2的过量分泌,阻止血小板聚集,避免微血栓形成,以达到治疗疾病的目的;金丝桃苷保护大鼠肠黏膜微血管内皮细胞损伤的模型剂量为1和5μg／mL。