2种果蝇取食后樱桃可培养微生物多样性的动态变化

[目的]确定黑腹果蝇和斑翅果蝇取食后樱桃微生物的动态变化。[方法]利用2种果蝇分别取食樱桃、共同取食樱桃和自然腐烂4种处理方式,经过2、4、6、8、10、12 d后,采用16S r DNA和ITS基因分析的方法分离鉴定樱桃中的微生物。[结果]所有处理共分离鉴定出16种细菌和12种真菌。随着时间的延长,不同处理樱桃中微生物的动态发生了变化。自然腐烂8~12 d的樱桃中微生物种类增多,优势细菌种群为荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)和葡萄球菌属(Staphylococcus sp.);黑腹果蝇取食第6天,微生物种类最多,优势细菌种群为厚壁菌门;而斑翅果蝇以及2种果蝇同时取食樱桃2 d后微生物种类就开始增加,可见斑翅果蝇的取食改变了微生物的多样性,从而加快了樱桃腐烂的速度,随后黑腹果蝇形成二次为害;另外,在2种果蝇取食后的樱桃中,白地霉(Geotrichum candidum)是樱桃中较稳定的优势真菌种群,但在自然腐烂的樱桃中并未发现。[结论]该研究可为探索微生物、樱桃、果蝇三者之间的协同进化关系提供理论依据。     

三种真菌对斑翅果蝇生理指标的影响

为明确半乳糖霉、柄篮状菌和雅致放射毛霉三种真菌对斑翅果蝇体内生理生化指标的影响,以侵染三种真菌的人工饲料饲养斑翅果蝇幼虫,并测定其体内部分物质含量和酶的活性。结果表明,取食接种雅致放射毛霉和柄篮状菌的人工饲料后,斑翅果蝇体内蛋白含量显著低于对照(取食不接菌人工饲料);取食接种雅致放射毛霉的人工饲料后,斑翅果蝇体内山梨醇含量显著低于对照;取食接种三种真菌的人工饲料后,斑翅果蝇体内纤维素酶和碱性磷酸酶活性均无显著变化,脂肪酶活性均显著低于对照。本研究可为探索真菌与果蝇间的协同进化关系提供重要的理论基础。     

5种常用杀虫剂对樱桃果蝇成虫的室内毒力测定

为筛选防治樱桃果蝇的药剂,采用胃毒触杀联合毒力测定方法在室内分别测定了5种常用杀虫剂对黑腹果蝇及斑翅果蝇成虫的毒力。结果表明:5种杀虫剂对斑翅果蝇成虫的毒力大小顺序为高效氯氰菊酯﹥多杀菌素﹥甲维盐﹥氯虫苯甲酰胺﹥阿维菌素,对黑腹果蝇成虫的毒力大小顺序为多杀菌素﹥甲维盐﹥高效氯氰菊酯﹥氯虫苯甲酰胺﹥阿维菌素。     

植物精油对果蝇的生物活性研究进展

植物精油是一种纯天然植物提取混合物。本文主要综述了对黑腹果蝇和斑翅果蝇具生物活性的植物精油种类和有效成分,阐述植物精油对两种果蝇生物活性及机理的研究现状,并对今后的研究思路和方向进行了展望。     

宁波地区杨梅地果蝇的消长动态及寄生蜂调查

为了明确宁波地区杨梅果蝇的发生危害规律,摸清果园内的天敌寄生蜂资源,为杨梅果蝇的绿色防控提供科学依据,2019年在宁波的东钱湖、余姚和慈溪三地分别采用糖醋液和扫网法调查杨梅果蝇的消长动态和寄生蜂种类,并对比了糖醋液和苹果醋液对果蝇成虫的诱集效果。结果表明:苹果醋诱集液对果蝇成虫的诱集效果显著低于糖醋液,不建议使用。宁波地区一共有六种果蝇,分别是拟果蝇、黑腹果蝇、斑翅果蝇、叔白颜果蝇、黑果蝇和伊米果蝇。成虫的高发期出现在6月的中上旬。杨梅果园的寄生蜂种类共有6大类,其中茧蜂科为优势种群。该研究为进一步利用天敌寄生蜂防治杨梅果蝇提供科学依据。     

不同降温方式对野生黑腹果蝇麻醉与复苏的影响

黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)是葡萄、草莓等水果的主要害虫而且分布广泛。为探索不同降温方式对野生黑腹果蝇的麻醉与复苏状态的影响,采用4种不同的降温处理培养野生黑腹果蝇。观察野生黑腹果蝇种群的麻醉状态以及复苏时间,进行统计分析。结果表明:不同降温方式培养的野生黑腹果蝇麻醉与活力复苏时间的影响差异显著。每隔2℃的逐渐降温形式对野生黑腹果蝇麻醉时间最短,复苏时间最短,活力恢复比例最高。     

斑翅果蝇危害健康水果机理研究进展

斑翅果蝇(Drosophila suzukii)原产于东南亚,是果蝇属中少有的能危害成熟水果的重要害虫,近年来,该虫传入美洲、欧洲许多国家并扩散蔓延,对当地水果造成严重危害,斑翅果蝇作为一种重要的水果害虫引起了国内外的广泛关注。综述了关于斑翅果蝇危害新鲜水果机理的研究,旨在为今后相关研究提供明晰的方向,并为我国开展该虫的防治工作提供参考和借鉴。     

基于CO-1基因分析狼蛛进食果蝇后的消化速率

为探究狼蛛进食黑腹果蝇后的消化情况,于狼蛛进食3头果蝇后0、1、2、4、8、16、24h分别提取基因组DNA,采用PCR扩增黑腹果蝇CO-1基因,检测狼蛛消化道靶标虫体的残留量,并通过Gel-Pro analyzer4.0软件计算黑腹果蝇CO-1基因质量浓度,分析靶标猎物在狼蛛体内的消化情况。结果表明,随着时间的延长,狼蛛体内检测到的黑腹果蝇成分逐渐减少。在有效时间内,狼蛛体内果蝇CO-1基因残留量与消化时间满足方程y=-0.757 9x+15.742(R2=0.674)。其中,狼蛛进食0h时,其体内黑腹果蝇CO-1基因质量浓度为25mg/L;进食16h时,黑腹果蝇CO-1基因质量浓度降至2.2mg/L;进食24h后,狼蛛体内未检测出黑腹果蝇DNA。     

斑翅果蝇气味结合蛋白OBP56h与小分子化合物的结合特征

【目的】克隆斑翅果蝇（Drosophila suzukii）气味结合蛋白56h（odorant binding protein 56h,OBP56h）基因,诱导表达斑翅果蝇OBP56h重组蛋白(DsuzOBP56h),研究其与小分子化合物的结合特性。【方法】通过RT-PCR并设计特异性引物克隆斑翅果蝇OBP56h ORF全长,从NCBI数据库中下载相似度高的昆虫气味结合蛋白序列,进行序列比对和分析。以NdeⅠ和XhoⅠ为酶切位点,将OBP56h连入pET-30a(+)原核表达载体,将重组质粒转入BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞。扩大培养阳性菌株,并用IPTG诱导表达DsuzOBP56h重组蛋白。收集菌液,通过超声波破碎细胞得到蛋白,利用Ni-NTA柱纯化蛋白,进行Tris-HCl透析,用BCA法测定蛋白浓度。蛋白用50 mmol·L ^-1 Tris-HCl（pH 7.4）稀释至终浓度2 μmol·L ^-1,配基用色谱级甲醇稀释至终浓度1 mmol·L ^-1,以4,4′-二苯胺基-1,1′-联萘-5,5′-二磺酸二钾盐（4,4′-dianilino-1,1′-binaphthyl-5,5′-disulfonic acid dipotassium salt,bis-ANS）荧光探针为报告子,利用荧光竞争结合试验检测DsuzOBP56h蛋白与18种候选小分子化合物配基的结合特性。 【结果】克隆获得了斑翅果蝇OBP56h的ORF全长,共405 bp,N-端含有19个氨基酸组成的信号肽,具有6个保守半胱氨酸位点,符合OBP的典型特征,与其同属的黑腹果蝇OBP56h进化关系最近。成功连入pET-30a(+)表达载体,在1 mmol·L ^-1IPTG、28℃条件下诱导DsuzOBP56h蛋白表达,并过柱纯化得到目的蛋白。荧光光谱试验显示,荧光探针bis-ANS与DsuzOBP56h的解离常数为0.9568 μmol·L ^-1,适合作为本试验中竞争性荧光结合试验的报告子;进一步的荧光竞争结合试验表明,在18种候选配基中,苦味物质盐酸小蘖碱和香豆素与DsuzOBP56h的结合亲和性较强,解离常数分别为12.16和17.93 μmol·L ^-1,柚皮素与DsuzOBP56h的解离常数为25.32 μmol·L ^-1,草莓叶片产生的一种对斑翅果蝇具有吸引作用的挥发性气味物质β-环柠檬醛也能与DsuzOBP56h结合,其解离常数为31.37 μmol·L ^-1。【结论】斑翅果蝇气味结合蛋白OBP56h能与测试的多种植物苦味物质和挥发性气味物质结合,表明DsuzOBP56h很有可能参与斑翅果蝇对食物味觉和嗅觉的识别行为,研究结果可为理解斑翅果蝇的取食行为提供理论依据,并为开展斑翅果蝇的生态防控提供新思路。     

10种杀虫剂对蓝莓重要害虫黑腹果蝇生物活性的测定

黑腹果蝇Drosophila melanogaster为皖南山区危害蓝莓的一种重要害虫。采用药膜接触法测定了10种杀虫剂对黑腹果蝇成虫的生物活性。供试药剂以乙基多杀菌素的杀虫活性最高,溴氰虫酰胺和核型多角体病毒的生物活性次之。乙基多杀菌素以15 mg·L~(-1)处理后24 h和48 h试虫的校正死亡率分别为91.8%和100.0%,处理后24和48 h的LC50分别为6.90和1.74 mg·L~(-1)。溴氰虫酰胺以40 mg·L~(-1)处理后72 h试虫的校正死亡率为93.7%。核型多角体病毒、甲氨基阿维菌素和苏云金杆菌按厂家推荐剂量处理后72 h对黑腹果蝇也表现出较好的生物活性。乙基多杀菌素和溴氰虫酰胺可作为防治蓝莓园黑腹果蝇的理想杀虫剂加以交替轮换施用。     

茯苓多糖的抗氧化作用

:以果蝇为动物模型,对茯苓多糖进行抗氧化防衰老的研究.给30日龄果蝇饲喂茯苓多糖10d后处死,测定果蝇匀浆的超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氧酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量.结果表明,各茯苓多糖处理组的雌蝇SOD活性上升,雄蝇MDA含量降低,雄蝇CAT活力升高,与对照组相比差异显著;0.2mg/g浓度组雌雄果蝇与对照组比较可延长平均寿命和平均最高寿命.茯苓多糖可以提高果蝇的抗氧化能力,抑制脂质过氧化,延长果蝇寿命.     

斑翅果蝇Yolk Protein 1基因原核表达及抗体制备

斑翅果蝇(Drosophila suzukii)是一种农业害虫,在世界范围内分布广泛,可对多种水果产生不可逆损害,造成巨大经济损失.本试验对斑翅果蝇Yolk Protein 1(Ds-YP1)基因进行原核表达,并对Ds-YP1蛋白的功能结构域和信号肽进行预测,克隆多肽并构建pET-32a-c(+)-Ds-YP1原核表达...     

亚致死浓度甲氧虫酰肼对甜菜夜蛾蛋白质和糖类含量的影响

研究了亚致死浓度甲氧虫酰肼对甜菜夜蛾幼虫血淋巴蛋白质和糖类含量的影响,结果表明:甲氧虫酰肼处理甜菜夜蛾幼虫72 h后,能显著提高血淋巴中的蛋白质含量,并且随着处理浓度的增加而升高,LC_(40)处理组蛋白含量最高为6.74 mg/mL。此外亚致死浓度甲氧虫酰肼处理后对甜菜夜蛾还存在一定的后续影响,4龄时,LC_(10)、LC_(20)和LC_(30)处理组的蛋白质浓度显著高于对照组,而LC_(40)处理组的蛋白质浓度在各处理组中最低为7.61 mg/mL。血淋巴SDS-PAGE分析也表明,LC_(10)、LC_(20)和LC_(30)处理组几条主要蛋白条带含量要明显高于对照组。5龄时LC_(10)、LC_(20)处理组的蛋白含量要显著低于LC_(30)、LC_(40)处理组和对照组。SDS-PAGE分析结果表明,5龄血淋巴中最主要蛋白条带(85.1KD)含量在LC_(10)、LC_(20)处理组中要明显低于对照组和其他处理组。对甜菜夜蛾幼虫血淋巴中总糖含量测定结果表明,亚致死浓度的甲氧虫酰肼对甜菜夜蛾幼虫血淋巴中总糖含量的升高具有促进作用。杀虫剂处理72 h后,各处理组的总糖含量要显著高于对照组。甲氧虫酰肼处理结束后,对甜菜夜蛾幼虫后续不同发育阶段的总糖含量也有一定持续影响,如4龄和5龄各处理组的糖含量都明显高于对照组。     

温度对黑腹果蝇生长发育、繁殖和种群增长的影响

黑腹果蝇Drosophila melanogaster Meigen是杨梅、樱桃等浆果果实最主要害虫。为明确温度对黑腹果蝇种群增长的影响,掌握黑腹果蝇饲养合适温度,在室内观察了黑腹果蝇在15,20,25,30和35℃条件下的生长发育、存活与繁殖能力,并计算各温度条件下的种群增长参数。结果表明：在35℃条件下,黑腹果蝇不能完成发育,其他温度条件下黑腹果蝇从卵孵化至蛹羽化成成虫,发育速率随温度升高明显加快,在15℃下,完成发育需要长达41 d,而在30℃下,黑腹果蝇完成发育仅需7 d;黑腹果蝇成虫寿命随温度的升高而明显缩短,在15℃下,雌、雄平均寿命分别高达70,80 d,在30℃下,平均寿命都仅为30 d;黑腹果蝇在20和30℃的平均繁殖力没有显著差异,分别为138.85和137.97粒卵·雌-1,但在以上条件下的平均繁殖能力显著低于25℃条件下的平均繁殖力,25℃条件下黑腹果蝇平均产卵量高达375.4粒（P<0.01）;黑腹果蝇的种群增长参数净生殖率（R0）、内禀增长率（rm）,在25℃时达最高值分别为55.10和1.021 d-1,而在15℃条件下值最小,分别为36.67和0.189 d-1。据此得出,25℃是最适宜黑腹果蝇生长发育和繁殖的温度,温度过高或过低都不利于黑腹果蝇种群增长。黑腹果蝇的发育起点温度为12.8℃,充分完成发育所需的有效积温为123.3日·度。     

邻苯二甲酸二甲酯(DMP)对黑腹果蝇生长发育及繁殖的影响

研究了邻苯二甲酸二甲酯(DMP)对模式生物黑腹果蝇生长发育及繁殖的影响。结果表明,邻苯二甲酸二甲酯(DMP)对黑腹果蝇的生长发育有明显抑制和致畸作用,随着其质量浓度升高,黑腹果蝇的蛹化数率和羽化数呈先增加后降低趋势,繁殖性能随着邻苯二甲酸二甲酯(DMP)质量浓度的升高表现出先升高后降低的趋势。     

昆虫纲与线虫纲miRNAs碱基组成特征分析

[目的]为全面认识miRNA的结构属性和miRNA基因识别策略的设计提供帮助。[方法]利用miRNA数据库,借助于相关的生物信息学软件和数据统计软件,对昆虫纲与线虫纲部分物种(黑腹果蝇、暗果蝇、西方蜜蜂、冈比亚疟蚊、秀丽线杆线虫、线虫种)的已知miRNA序列的碱基组成进行统计分析。[结果]6种生物的miRNA序列中,腺嘌呤(A)含量较为稳定,在碱基组成上AU含量高于GC含量。比较同一物种pre-miRNA与mat-miRNA间相同碱基含量发现,除黑腹果蝇pre-miRNA与mat-miRNA在胞嘧啶(C)的含量上存在显著差异外,其余均未见显著差异。[结论]推测miRNA碱基组成上AU含量高可能与其调控基因表达功能和物种的进化关系有关。     

高温胁迫下黑壳楠的抗性生理研究

以黑壳楠(Lindera megaphglla)幼苗为材料,模拟30、35、40℃高温处理后,观察黑壳楠幼苗及叶片的生长情况,并测定叶片中可溶性糖含量、游离脯氨酸(Pro)含量过氧化物酶(POD)活性和丙二醛(MDA)含量等4个生理指标。结果表明,黑壳楠幼苗在30℃和35℃高温胁迫下形态变化不大,但40℃胁迫后植株叶片基本死亡;可溶性糖含量在30℃和35℃胁迫下变化不明显,在40℃胁迫下随时间延长而增加;Pro含量30℃和35℃胁迫下变化不显著,40℃下开始明显增加,可达到对照的15.34倍;高温胁迫下黑壳楠幼苗叶中POD活性表现出较明显的增长,但随着胁迫时间的延长表现出先增后降的趋势;高温胁迫下MDA含量与对照相比均有不同程度的增加,其中40℃胁迫下增加十分明显,并随胁迫时间延长而增加。     

北冬虫夏草提取液对果蝇繁殖力及寿命的影响

采用不同浓度的北冬虫夏草(简称北虫草)提取液(0.625%,1.250%,5.000%)分别处理野生黑腹果蝇,研究北虫草提取液对果蝇繁殖力及寿命的影响。结果表明:5.000%浓度组F1果蝇数与对照组比较有极显著差异(p<0.01),当北虫草提取液浓度低于1.250%时,果蝇的繁殖力有增加趋势;北虫草提取液对果蝇平均寿命无显著延长作用,但可显著提高第一子代果蝇营养物质的积累,促进其生长发育。     

NaCl对果蝇生长发育的影响

[目的]探索最适的食用NaCl浓度,为合理健康膳食提供科学依据。[方法]以野生型黑腹果蝇为材料,在含有不同浓度NaCl（0、10、50、100、200mmol／L）的培养基上培养果蝇,分析NaCl对果蝇幼虫生长发育、子代果蝇数目、成虫体重、群体的雌雄平衡等所产生的影响。[结果]含低浓度NaCl（10mmol／L）组子代蛹化数目和子代羽化数目有所增加;而高浓度NaCl组（100、200mmol／L）子代蛹化数目和子代羽化数目明显减少。不同浓度NaCl对子代果蝇体重的影响并不明显,但是随着NaCl浓度的提高,雄蝇体重和雌蝇体重都有减轻的趋势。[结论]一定量的NaCl能够影响果蝇生长发育、子代数量,干扰果蝇群体的雌雄平衡,影响子代果蝇体重。     

香烟烟雾水溶液对雄果蝇生育力的影响

[目的]探讨香烟烟雾对雄果蝇生育力的影响。[方法]将野生型黑腹果蝇用含不同浓度香烟烟雾水溶液的培养基培养,然后使之与处女蝇交配,统计其蛹的发生量。[结果]随着香烟烟雾水溶液的浓度的增加,雄果蝇生育力降低。[结论]不同浓度香烟烟雾水溶液对雄果蝇的生育力有显著影响。