抗氟苯虫酰胺小菜蛾差异表达基因及其通路

【目的】随着氟苯虫酰胺等双酰胺类杀虫剂的广泛应用,小菜蛾（Plutella xylostella）对该类药剂的抗性愈发突出。研究旨在从转录组水平研究小菜蛾对氟苯虫酰胺的抗性机制,明确小菜蛾对氟苯虫酰胺产生抗性的关键基因及通路,为揭示小菜蛾对氟苯虫酰胺的抗性机制打下基础。【方法】以室内筛选的小菜蛾抗氟苯虫酰胺品系（Rh28）、田间抗性种群（Rz36）和敏感品系（S）为材料,通过转录组测序技术（RNA-Seq）,获得抗性小菜蛾品系/种群在转录水平上的差异表达基因及抗性显著上调表达基因,采用基因本体（GO）显著性富集分析及京都基因与基因组百科全书数据库（KEGG）富集分析,确定差异表达基因具有的主要生物学功能及其参与的主要生化代谢和信号转导途径。【结果】通过将不同抗性品系/种群与敏感品系的RNA-Seq数据对比,获得数量不等的差异表达基因。将差异基因富集的生物学过程（biological process）和信号通路（pathway）进行GO分析,发现其主要集中于对刺激物的反应（response to stimulus）、催化活性（catalytic activity）和代谢过程（metabolic process）等条目中;而KEGG分析发现,差异基因主要集中于代谢通路（metabolic pathway）中,基因数量占比最高,为17.84%。通过统计分析进一步获得了抗性显著上调表达基因,并对其中218个基因开展了GO分析,其仍然主要集中在代谢过程、对刺激物的反应和生物调节（biological regulation）等条目中;通过对抗性显著上调基因进行KEGG分析,发现其仍主要集中在代谢通路中,其中谷胱甘肽-S-转移酶、细胞色素P450解毒酶及参与昆虫多种生理反应的热激蛋白（Hsp）超基因家族等基因的表达量均显著上调。通过聚类热图分析发现,显著表达上调的基因较多集中在内质网上蛋白质的加工（protein processing in endoplasmic reticulum）、酪氨酸代谢（tyrosine metabolism）、咖啡因代谢（caffeine metabolism）和Wnt信号通路（Wnt signaling pathway）中。【结论】获得了小菜蛾抗氟苯虫酰胺差异表达基因及抗性显著上调表达基因,其主要富集于代谢过程、应激反应及对刺激物的反应等条目中,这些基因的相互协同调控是小菜蛾对氟苯虫酰胺产生抗性的重要机制。     

双酰胺类杀虫剂对甜菜夜蛾毒力的温度效应

【目的】研究5种双酰胺类杀虫剂对甜菜夜蛾毒力的温度效应和变化趋势,为不同环境温度下甜菜夜蛾的化学防控提供依据,为有效的提高双酰胺类杀虫剂的利用率奠定理论基础。【方法】采用浸叶法测定5种双酰胺类杀虫剂在15~35℃对甜菜夜蛾3龄幼虫的室内毒力。【结果】在供试温度范围内,5种双酰胺类杀虫剂对甜菜夜蛾的毒力均呈正温度效应。氯虫苯甲酰胺、氟苯虫酰胺对甜菜夜蛾毒力分别增长了6 527.23和3 939.80倍,溴氰虫酰胺和氟氰虫酰胺温度系数稍低于前两者,分别为+407.24和+566.98,四氯虫酰胺温度系数最小,仅为+142.05。从各供试药剂温度系数变化趋势来看,除四氯虫酰胺温度系数增长趋势一直较为平缓外,其他4种供试药剂均在不同温度梯度下出现了明显的温度系数增长。【结论】在15~35℃范围内,5种双酰胺类杀虫剂对甜菜夜蛾的毒力均表现出极明显的正温度效应。     

双酰胺类杀虫剂对稻纵卷叶螟防效试验简报

为探究3种双酰胺类杀虫剂[Vayego 200 SC(四唑虫酰胺)、10％溴氰虫酰胺OD和200 g/L氯虫苯甲酰胺SC]对稻纵卷叶螟的防治效果,特进行了相关田间药效试验.结果表明,3种双酰胺类杀虫剂对稻纵卷叶螟的卷叶防效和虫口防效均显著优于1％甲维盐WP;药后7 d,每667 m2用Vayego 200 SC 8～1...     

小菜蛾对沙蚕毒素类杀虫剂抗性的生化遗传分析

利用室内选育的小菜蛾抗杀虫双品系、抗杀螟丹品系和敏感品系 ,研究了各杂交世代小菜蛾的生物学特性以及蛹期的乙酰胆碱酯酶 (AchE)和羧酸酯酶 (CarE)活性。结果表明 :杀虫双和杀螟丹的选择作用没有改变小菜蛾的性比、蛹重和羽化率等生物学特性 ;抗性品系和敏感品系的AchE和CarE活性没有明显差异。由此进一步证明AchE和CarE的活性变化不是小菜蛾对杀虫双和杀螟丹抗性的主要机理。     

4种双酰胺类杀虫剂对不同虫态草地贪夜蛾的毒力比较

为明确4种双酰胺类杀虫剂对不同虫态草地贪夜蛾的敏感性,采用浸卵法、浸叶法、饲喂毒营养液法测定了氯虫苯甲酰胺、氟苯虫酰胺、四氯虫酰胺、溴氰虫酰胺对草地贪夜蛾的卵、幼虫、成虫毒力。结果表明,4种双酰胺类杀虫剂均不影响卵的发育,但可以明显降低初孵幼虫存活率;四氯虫酰胺对草地贪夜蛾3龄幼虫毒力最高,LC₅₀值为0.12 mg/L,其次是氯虫苯甲酰胺、氟苯虫酰胺,分别为溴氰虫酰胺毒力的33.83、5.21、2.24倍;对成虫敏感性最高的是氯虫苯甲酰胺,为6.20 mg/L,其次是四氯虫酰胺、溴氰虫酰胺,氟苯虫酰胺敏感性最低,为25.96 mg/L。采用3种生测方法测定了不同虫态草地贪夜蛾对4种双酰胺类杀虫剂敏感性,可以为草地贪夜蛾的化学防治和抗性治理提供依据。     

杀虫剂对小菜蛾的防治研究

用锐劲特、甲维盐、阿维菌素、高效氯氰菊酯对小菜蛾进行田间药效试验。结果表明,锐劲特和甲维盐对小菜蛾的防效基本一致,均优于阿维菌素,明显优于高效氯氰菊酯;且两者均具有高效、低残留、持效期长等特点。因此,锐劲特和甲维盐适宜在无公害蔬菜生产基地推广使用。     

以RyR为靶标的新型酰胺类杀虫剂的研究进展

以氟虫酰胺、氯虫酰胺为代表的新型酰胺类杀虫剂,作用靶标是鱼尼丁受体,其作用机理新颖,与传统杀虫剂无交互抗性,对害虫高效而对哺乳动物低毒,已经成为农药研究的热点,是一种具有良好发展潜力的杀虫剂。     

福州地区小菜蛾全长cDNA文库构建与分析

采用ZAP Express cDNA Gigapack Ⅲ Gold Cloning Kit试剂盒,构建了小菜蛾(Plutella xylostella)的全长cDNA文库.利用TRIzol试剂盒提取小菜蛾成虫总mRNA,通过Oligo试剂将mRNA反转录成cDNA,再以第一链cDNA产物为模板合成第二链cDNA,该cDNA产物经分级分离和体外包装,即获得小菜蛾cDNA原始文库,其滴度为1.5×106pfu.mL-1.扩增后的cDNA文库的滴度为1.4×1010pfu.mL-1.取适量扩增文库稀释并铺平板,挑取20-25个独立噬菌斑,用M13±通用引物PCR扩增后,测得文库的重组率大于95%,插入cDNA片段的长度平均为1.25 kb.该文库的构建,可为小菜蛾抗药性基因的相关研究提供一个平台.     

不同种类杀虫剂对小菜蛾的防治效果

小菜蛾（Plutella xylostella）是十字花科蔬菜的重要害虫。在田间对几种常用杀虫剂和新农药进行小区试验，评价其防治小菜蛾的药效。结果表明生物农药蔬丹防治效果最佳，甲胺磷的防效最差。     

杀虫剂对小菜蛾幼虫的毒力研究

采用浸叶法测定10种杀虫剂对海南省海口、三亚、儋州小菜蛾田间种群的毒力。结果表明：10种药剂对海口地区小菜蛾3龄幼虫的毒力LC50大小顺序为：Bt〉氟啶脲〉多杀菌素〉茚虫威〉虫螨腈〉阿维菌素〉丁醚脲〉虫酰肼〉杀螟丹〉高效氯氰菊酯：三亚地区小菜蛾3龄幼虫的毒力三％大小顺序为：Bt〉多杀菌素〉氟啶脲〉茚虫威〉虫螨腈〉阿维菌素〉虫酰肼〉丁醚脲〉杀螟丹〉高效氯氰菊酯：儋州地区小菜蛾3龄幼虫的毒力L氏大小顺序为：Bt〉多杀菌素〉茚虫威〉氟啶脲〉虫螨腈〉阿维菌素〉丁醚脲〉虫酰肼〉杀螟丹〉高效氯氰菊酯。3个地区对Bt和多杀菌素均表现敏感。海口地区小菜蛾种群除对高效氯氰菊酯、杀螟丹和Bt外,对其他药剂的敏感性均比三亚种群和儋州种群敏感。     

常用杀虫剂对小菜蛾的毒力测定

以小菜蛾作为供试昆虫,通过浸叶法测定几种常用的药剂的毒杀效果,同时比较阿维菌素不同农药剂型的毒力大小,为合理应用药剂对小菜蛾进行综合治理提供依据。     

拟南芥和小菜蛾相互作用的差异蛋白分析

以模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)和专食性害虫小菜蛾(Plutella xylostella)为研究系统,运用蛋白质组学方法分析了拟南芥在小菜蛾取食诱导条件下叶片蛋白的差异表达情况。结果表明:有52个蛋白点在小菜蛾取食诱导条件下发生显著变化,其中28个蛋白点表达量上调,24个蛋白点表达量下调。运用质谱技术对其中的部分差异蛋白进行了鉴定,发现富含甘氨酸的RNA结合蛋白,3-磷酸甘油醛脱氢酶,ATP合酶的α亚基和β亚基在植物诱导防御中具有重要的作用,为揭示植物在昆虫取食条件下的化学防御机制提供蛋白质水平方面的理论基础。     

新型酰胺类杀菌剂双炔酰菌胺

<正>双炔酰菌胺属于新型酰胺类低毒广谱杀菌剂,制剂为250克/升悬浮剂,2007年在我国取得农药临时登记证书。1理化性质双炔酰菌胺原药外观为浅褐色无味细粉末;pH值6～8;     

几种杀虫剂对小菜蛾的药效试验

通过田间4种药剂防治小菜蛾药效试验结果表明:0.5%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐具有一定的速效性和持效性,可广泛用于蔬菜小菜蛾的防治;5%锐劲特也具有一定的速效性,但持效期短;5%抑太保、40%毒死蜱防效最差。为了避免小菜蛾产生抗性,延缓药剂寿命,生产上建议5%锐劲特与0.5%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐药剂交替使用。     

抗杀虫双品系小菜蛾抗药性的RDA分析

以抗杀虫双及敏感品系小菜蛾为研究对象,运用代表性差异分析方法对抗杀虫双品系小菜蛾在分子水平上进行抗药性机理分析。对得到的RDA序列进行BLAST分析。结果在抗杀虫双品系的RDA序列中找到了一些与人的K离子通道相关的序列,以及一条与家蚕(Bombyx mori)p50 cDNA clone ws00064高度相关的序列。这些研究结果将为进一步在分子水平上研究小菜蛾的抗性机理提供研究基础。     

小菜蛾田间种群对杀虫剂的抗药性测定

为弄清小菜蛾田间种群对杀虫剂的抗药性,采用浸叶和点滴方法,就贵阳、安顺和遵义3个地区的小菜蛾田间种群对多杀霉素、虫螨腈和苏云金杆菌等13种杀虫剂的抗药性进行了测定。结果表明:3个地区小菜蛾田间种群对多杀霉素、虫螨腈、苏云金杆菌和氟虫腈的敏感性很高,对杀螟丹和杀虫双的敏感性较差,对阿维菌素、甲维盐和拟除虫菊酯类杀虫剂产生了严重的抗药性。     

几种杀虫剂对小菜蛾的田间防治效果

小菜蛾是十字花科蔬菜主要害虫.目前对小菜蛾的防治以化学防治为主.选用多种低毒药剂进行田间药效试验.结果表明:5％氯虫苯甲酰胺悬浮剂、150 g/L茚虫威悬浮剂、100 g/L虫螨腈悬浮剂和3％甲维盐乳油等4种药剂对小菜蛾的防效较好,防治效果均在80％以上.其中5％氯虫苯甲酰胺悬浮剂和150 g/L茚虫威悬浮剂的田间持效期较长,药后10d防治效果仍可保持在60％左右.