乳酸菌和枯草芽孢杆菌对黄曲霉毒素产生菌生长的抑制作用研究

为了筛选对黄曲霉毒素产生茵的生长有抑制作用的微生物,选用乳酸茵和枯草芽孢杆菌与黄曲霉共培养,通过测定黄曲霉菌丝质量以及培养液pH来判断对霉菌生长的抑制作用强弱.结果表明:3株乳酸茵培养液上清液和4株枯草芽孢杆茵对黄曲霉菌丝的生长皆有明显抑制作用(P＜0.05),以乳酸菌A2培养液上清液抑制作用最强,茵丝质量为0.119...     

1株海洋芽孢杆菌抑制黄曲霉生长和毒素合成的研究

采用滤纸片扩散法从海洋中分离筛选出1株抑制黄曲霉活性高的微生物,利用16S rDNA特异性扩增技术对其菌种进行鉴定,并研究其对黄曲霉菌丝延长、孢子萌发和毒素合成的影响,用Beacon黄曲霉毒素检测试剂盒测定黄曲霉毒素含量.结果表明:该菌株为一株海洋巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium),其菌体对黄曲霉菌丝延长、孢子萌发和黄曲霉毒素生物合成都有明显地抑制作用,1×109CFU·mL-1菌体对黄曲霉孢子萌发的抑制率达87%,1×108CFU·mL-1菌体对黄曲霉毒素合成的抑制率可达50.75%.初步认为其抑制机制是该海洋巨大芽孢杆菌可产生某种次级代谢产物来抑制黄曲霉孢子萌发和菌丝延长.     

黄曲霉毒素B_1单克隆抗体修饰金电极检测饲料中的黄曲霉毒素B_1

[目的]建立使用黄曲霉毒素B1单克隆抗体修饰金电极测定饲料中黄曲霉毒素B1的新方法。[方法]试验采用电化学方法优化检测条件,建立标准曲线并对样品进行检测。[结果]试验得出,黄曲霉毒素B1单克隆抗体修饰金电极检测饲料中黄曲霉毒素B1的最优条件为:电极修饰条件为4℃、8 h,磷酸盐缓冲溶液的pH为7.4。该检测方法对黄曲霉毒素B1的线性检测范围为1.427～150.000ng/ml,加标回收率在94.44%～101.36%。[结论]使用该免疫电化学方法,检出限较低,可以用于饲料中黄曲霉毒素的检测。     

伏马毒素B_1对猪肾上皮细胞增殖的影响

研究旨在探究伏马毒素B_1(FB_1)对猪肾上皮细胞增殖的影响,通过MTT检测FB1对PK15细胞活力和qPCR检测周期相关基因的mRNA表达水平。结果表明,FB1显著减少细胞活力,降低细胞核增殖抗原PCNA和周期蛋白Cyclin B和Cyclin D的mRNA表达水平,升高P21和P27的mRNA表达水平。说明FB1可通过调控细胞周期相关基因的表达抑制猪肾上皮细胞增殖。     

伏马毒素B_1对猪肾上皮细胞增殖的影响

研究旨在探究伏马毒素B_1(FB_1)对猪肾上皮细胞增殖的影响,通过MTT检测FB1对PK15细胞活力和qPCR检测周期相关基因的mRNA表达水平。结果表明,FB1显著减少细胞活力,降低细胞核增殖抗原PCNA和周期蛋白Cyclin B和Cyclin D的mRNA表达水平,升高P21和P27的mRNA表达水平。说明FB1可通过调控细胞周期相关基因的表达抑制猪肾上皮细胞增殖。     

饲料中黄曲霉毒素B_1的检测研究

通过霉菌培养鉴定、RF—510—TCS—Z薄层扫描、鸭雏饲养毒性观察等试验,对送检料进行了黄曲霉毒素B_1的定性、定量检测。结果表明,料中含有黄曲霉毒素B_1,含量为22—28μg/kg,略高于国家规定的标准,但此量不致于引起鸡的急性中毒死亡。     

黄曲霉产B_1毒素菌株的筛选

启东县是我国原发性肝癌高发区之一。当地畜禽的肝病也极为普遍。鸭子肝癌更有很高的检出率。从流行病学调查发现该地区的粮食霉变比较严重。自1972年12月起对该县的主粮:玉米、小麦、大米等进行了黄曲霉 B_1毒素的检测和产毒菌株的分离工作。根据对随机采集的711个玉米样品检测的结果,发现该地区玉米受黄曲霉污染的情况非常严重,有90%以上的检样可分离到黄曲霉。经薄层层析和“荧光反应法”证实约有35%左右的样品含有 B_1毒素。     

纳豆芽孢杆菌培养条件研究

以纳豆菌悬浊液的吸光值作为检测标准,对纳豆菌的培养条件进行研究,探讨了种龄、接种量、温度和时间对纳豆菌生长的影响。确定最适种龄为22h,最佳接种量为5%。其最佳发酵工艺确定为：发酵温度为35℃,发酵时间25h。     

纳豆芽孢杆菌T1生长必需因子的研究

从腐烂稻草上分离筛选出一株活性较高的芽孢杆菌T1,经鉴定为纳豆芽孢杆菌,为了更好的开发利用此菌株,对该菌株进行生长必需因子的试验,结果表明T1在合成培养基添加维生素和核酸碱基均不生长,加不同种类的氨基酸都能生长,在完全培养基上生长特别好,对蛋白胨的需要量有一定的要求,添加1％的蛋白胨生长好,高于2％的茵体生长好,对孢子的快速形成有一定的影响,小于0．1％的菌体生长缓慢,甚至不生长。摇瓶发酵培养基蛋白胨2％,葡萄糖2％比例最佳。     

接种不同乳酸菌改善纳豆芽孢杆菌发酵的全豆豆乳品质研究

[目的]改善纳豆芽孢杆菌发酵的全豆豆乳品质。[方法]利用纳豆芽孢杆菌和不同的乳酸菌共同发酵全豆豆乳,对发酵过程中发酵豆乳的微生物数量、纳豆激酶酶活、pH的变化以及豆乳的感官评分进行研究。[结果]试验表明,利用汉森商业乳酸菌菌种与纳豆芽孢杆菌共同发酵全豆豆乳,豆乳中乳酸菌与纳豆菌均能够良好生长,所得发酵豆乳感官评分最高、纳豆激酶酶活最高。[结论]研究改善了纳豆产品的风味,可为大豆深加工提供参考。     

饲料中黄曲霉毒素B_1和呕吐毒素生物法降解研究进展

黄曲霉毒素B1(AFB_1)和呕吐毒素(DON)是由寄生曲霉、黄曲霉、镰刀菌等产生的次级代谢产物,广泛存在于受污染的饲料及其原料中,不仅给农业经济造成重大损失,也给动物的健康带来严重威胁。传统脱除AFB_1和DON方法主要有物理法和化学法,但上述两种方法都具有局限性,而利用微生物脱毒方法安全、高效,绿色环保已成为目前研究的热点,且展现出良好的应用前景。文章对AFB_1和DON的特点、危害和致毒机制以及生物脱毒方面的研究进展进行阐述。     

液相色谱法测定饲料中的黄曲霉毒素B_1

本文报导了用高效液相色谱———荧光检测法测定饲料中黄曲霉毒素B1的方法。采用C18色谱柱 ,甲醇∶水(3∶7)为流动相 ,荧光检测器检测 ,激发波长 365nm ,发射波长 45 5nm。方法的平均回收率 83% ,变异系数为2 2 4%。实验证明 ,本方法具有准确和灵敏的特点。     

花生中巨大芽孢杆菌对黄曲霉毒素合成相关基因的抑制

分别在UF 715133-1和Jinhua 1012花生仁上接种黄曲霉和巨大芽孢杆菌,高压液相色谱法测定花生中黄曲霉毒素含量,借助生物芯片和实时定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRTPCR)测定巨大芽孢杆菌对黄曲霉毒素生物合成途径基因表达的影响,并用基因本体(gene ontology,GO)功能分类和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路方法对基因进行分类分析。在实验组Jinhua 1012和UF 715133-1中,黄曲霉毒素B1的含量降低了85%以上,一些编码蛋白质酶的基因显著下调,如短链脱氢酶、非核糖体多肽合成酶等。结果表明,从海洋中分离出的巨大芽孢杆菌可显著抑制黄曲霉毒素在花生上的合成,黄曲霉中多种基因的表达受到抑制,但这些基因在黄曲霉毒素生物合成中的作用并未阐明,其作用机制还有待进一步深入研究。     

高效液相色谱法测定菜油中的黄曲霉毒素B_1

本文用高效液相色谱法分析测定菜油中的黄曲霉毒素B_1。色谱柱为4.6mm×15cmShimpack CLC—CN柱;紫外可见检测器,检测波长365nm;甲醇为流动相。     

白芍对雏鸭黄曲霉毒素B_1急性中毒的解毒实验的病理研究

一日龄北京雏鸭一次口服AFB_1 12和15微克/只,采用四种白芍制剂分别灌服进行防治。根据雏鸭死亡率,肝脏组织学病变等观察结果,表明白芍醇提物对雏鸭AFB_1急性中毒有明显缓解作用,白芍保健饮料“健康乐”的底料和药液缓解作用较差。     

抑制黄曲霉毒素前体合成的芽孢杆菌鉴定及其抑制活性研究

为了开发有效提高花生等农产品抗黄曲霉毒素污染能力的生物防腐剂,对已分离获得的一株生防细菌Hitwh-B05进行16S rDNA鉴定,并研究其防霉抑毒能力。结果表明,该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),产生抗黄曲霉毒素有效成分的能力不受传代次数影响,可在广温度范围内产生抑毒活性成分,培养基最佳初始pH为6,抑毒活性成分产生的最佳培养时间为6 d,菌株发酵上清液经甲醇提取获得的抑毒活性/mL时,对降散盘衣酸(norsolorinic acid,NA)积累抑制率均达到84%以上,抑制效果明显优于双乙酸钠,对花生的防霉抑毒处理起到良好的作用,结果对提高农产品的防霉抑毒能力,从污染源头有效阻止霉菌侵染,降低毒素产生,并减少化学防腐剂对环境和人体的危害具有重要意义。     

降解黄曲霉毒素B_1菌株的筛选及毒素降解酶的分离

为了筛选具有降解黄曲霉毒素B_1(AFB_1)作用的菌株,并分离纯化高效AFB_1降解酶,以AFB_1作为降解AFB_1菌株生长的能源和碳源进行初筛,将初筛得到的菌株接种于含有AFB_1的培养基中,选择降解率最高的菌株进行固体发酵培养后提取粗酶液,通过硫酸铵分级沉淀和葡聚糖凝胶对降解AFB_1的活性物质进行分离,SDS-PAGE蛋白质电泳检测降解酶蛋白质分子质量大小,并通过酶联免疫法测定不同分子质量的酶蛋白对AFB_1的降解率,26S rDNA和同源序列分析对降解率最高的菌株进行菌种鉴定。结果显示,降解AFB_1能力最高的菌株为Y8,降解率为77.05%,凝胶层析分离出的31.7 ku的酶蛋白对AFB_1的降解率达54.33%;菌种鉴定结果表明,真菌Y8为米曲霉。综上,筛选的米曲霉Y8能够高效降解AFB_1,可有效缓解黄曲霉毒素对畜禽的危害,具有提高养殖效益的潜在应用价值。     

黄曲霉毒素B_1降解菌的筛选与鉴定

黄曲霉毒素B_1主要由黄曲霉和寄生曲霉产生,其具有极高的致突变性、毒性和致癌性。黄曲霉毒素污染广泛存在于奶制品、饲料等行业中。本研究以香豆素为碳源,筛选出1株降解率为82. 77%的黄曲霉毒素B_1降解菌,经生理生化试验初步鉴定属于芽孢杆菌属。     

纳豆芽孢杆菌饲料添加剂的发酵培养研究

纳豆芽孢杆菌是一种可作为绿色饲料添加剂的益生菌,试验通过以豆粕为原料的纳豆,初步探索纳豆芽孢杆菌的发酵培养的最优条件,试验结果表明,培养基条件为葡萄糖2.5%,蔗糖1.5%,(NH4)2SO40.02%,NaCl0.6%的效果最好。     

纳豆芽孢杆菌脲酶酶学性质的研究

为了研究不同的碳源、氮源和不同的培养条件对纳豆芽孢杆菌(Bacillus subtilis natto)脲酶产量的影响,以及不同温度、pH和几种金属离子对脲酶活性的影响,采用了滴定法(国标法,标准号GB/T 1356787-1997)和Bradford蛋白浓度测定试剂盒测定不同碳源、氮源和不同培养条件培养的纳豆芽孢杆菌(CGMCC No.2801)脲酶总活性和浓度,以及不同温度、pH和金属离子条件下的脲酶活性。结果表明,当以谷氨酸为氮源、蔗糖为碳源、pH7、37℃条件下培养12h时脲酶的浓度最高,为57.2μg/mL。脲酶催化反应的最适条件为35℃、pH 7。实验选用的5种金属离子对脲酶活性均有抑制作用,抑制强度为Cu2+Zn2+Fe2+Mg2+Mn2+,最大抑制率为36.4%。这些结果为纳豆芽孢杆菌脲酶的进一步研究及低产氨纳豆芽孢杆菌的构建奠定了基础。