贝莱斯芽孢杆菌对肉鸡生产性能及霉菌毒素代谢的影响

为了研究贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)对肉鸡生产性能及霉菌毒素含量的影响，采用ELISA试剂盒方法检测肉鸡临床试验粪便样品中黄曲霉毒素(AFB₁)、伏马毒素(FB)、呕吐毒素(DON)和玉米赤霉烯酮(ZEN)的含量，并分析其对肉鸡生产性能的影响。结果表明：试验组(饮用水中添加200×10¹⁰ CFU/t、100×10¹⁰ CFU/t贝莱斯芽孢杆菌)肉鸡试验末平均体重显著大于对照组(P<0.05),试验组死淘率、料肉比显著低于对照组(P<0.05);试验Ⅰ组14～21日龄肉鸡粪便中黄曲霉毒素、呕吐毒素和玉米赤霉烯酮的含量均比对照组低。这说明添加贝莱斯芽孢杆菌(BLS-1)能够提高肉鸡的生长性能，降低料肉比及霉菌毒素代谢量，减少对动物机体的影响。     

黄曲霉毒素B_1降解菌的筛选与鉴定

黄曲霉毒素B_1主要由黄曲霉和寄生曲霉产生,其具有极高的致突变性、毒性和致癌性。黄曲霉毒素污染广泛存在于奶制品、饲料等行业中。本研究以香豆素为碳源,筛选出1株降解率为82. 77%的黄曲霉毒素B_1降解菌,经生理生化试验初步鉴定属于芽孢杆菌属。     

乳酸菌防霉去毒作用研究

探讨乳酸菌吸附黄曲霉毒素B1的强度及被吸附的黄曲霉毒素B1的致突变性.将乳酸菌细胞与黄曲霉毒素B1在生理盐水中相混合,在37℃振荡培养60和120min后检测生理盐水中黄曲霉毒素B1的含量,同时利用Ames试验检测被吸附的黄曲霉毒素B1的致突变性.结果表明,在使用的8株乳酸菌中,乳酸菌结合黄曲霉毒素B1的强度在4%～50%之间,其中干酪乳杆菌干酪亚种CGMCC1.539吸附黄曲霉毒素B1能力最强.Ames试验表明,被结合的黄曲霉毒素B1仍有较强的致突变性.乳酸菌对黄曲霉毒素B1有较强的吸附作用.     

改性硅铝酸盐霉菌毒素吸附剂对仔鸡日粮中维生素B_1、B_2含量的影响

研究了改性硅铝酸盐霉菌毒素吸附剂对仔鸡日粮中维生素B_1(VB_1)和维生素B_2(VB_2)两种维生素的吸附影响。结果表明:该吸附剂在酸性条件下对VB_1和VB_2均有较强的吸附作用,对VB_1的最大吸附率为25.14%,对VB_2的吸附率为9%—13%。随着营养物质含量的升高,吸附剂对2种维生素的吸附率呈增加趋势。     

黄曲霉毒素B1生物降解菌的快速筛选及鉴定

通过48孔板微培养的方法对336株芽孢杆菌菌株进行黄曲霉毒素B1生物降解菌的快速筛选,获得14株能在以香豆素作为惟一碳氮源的培养基中生长的芽孢杆菌菌株。在投料浓度为100μg/kg条件下,对这14株芽孢杆菌进行复筛,获得1株黄曲霉毒素B1降解率为83.20%的芽孢杆菌菌株。通过16S r DNA序列比对分析,初步确定这株芽孢杆菌为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)。     

乳酸菌和枯草芽孢杆菌对黄曲霉毒素产生菌生长的抑制作用研究

为了筛选对黄曲霉毒素产生茵的生长有抑制作用的微生物,选用乳酸茵和枯草芽孢杆菌与黄曲霉共培养,通过测定黄曲霉菌丝质量以及培养液pH来判断对霉菌生长的抑制作用强弱.结果表明:3株乳酸茵培养液上清液和4株枯草芽孢杆茵对黄曲霉菌丝的生长皆有明显抑制作用(P＜0.05),以乳酸菌A2培养液上清液抑制作用最强,茵丝质量为0.119...     

花生酱制品中黄曲霉毒素B_1及霉菌污染调查

为分析和评价我国花生酱制品的安全性,随机采集全国不同地区商业化生产的10个品牌的花生酱产品,采用ELISA法检测黄曲霉毒素B_1,采用琼脂培养法检测霉菌含量,结果表明:10个样品中的黄曲霉毒素B_1含量在1.02~19.93μg/kg之间,均低于我国食品安全标准限量(20.0μg/kg),但仅有1个样品达到欧盟食品安全标准限量(2.0μg/kg);有1个样品的霉菌总数超过我国食品安全标准限量(25cfu/mL)。     

荧光定量检测试纸检测饲料中黄曲霉毒素B_1

研究建立了饲料中黄曲霉毒素B_1荧光定量检测方法。饲料样品经70%甲醇溶液提取,过滤后,用0.01 mol·L~(-1) pH 7.4 PBS复溶,结果表明,黄曲霉毒素B_1在5～80μg·mL~(-1)浓度范围内线性关系良好,r~2=0.998。以配合饲料、浓缩饲料、预混料为添加基质,其回收率在80%～120%,检出限为5μg·mL~(-1)。结果显示,本方法灵敏度高,操作简单,结果准确,可满足饲料中黄曲霉毒素B1的分析检测。     

饲料中黄曲霉毒素B_1的检测研究

通过霉菌培养鉴定、RF—510—TCS—Z薄层扫描、鸭雏饲养毒性观察等试验,对送检料进行了黄曲霉毒素B_1的定性、定量检测。结果表明,料中含有黄曲霉毒素B_1,含量为22—28μg/kg,略高于国家规定的标准,但此量不致于引起鸡的急性中毒死亡。     

贮藏时间及温度对全株青绿玉米低温制粒颗粒料的影响

为促进全株青绿玉米的应用,本试验研究贮藏时间(1、8、16、24 d)和贮藏温度(低温0~4℃、中温16~20℃和高温30~34℃)对全株青绿玉米低温制粒颗粒料自由基、自由基清除剂、淀粉酶活性、pH值、乳酸菌、霉菌及黄曲霉毒素等指标的影响。结果表明贮藏时间和贮藏温度对过氧化氢、乳酸菌、霉菌和黄曲霉毒素的含量及pH值影响显著(P0.05)。随着贮藏时间的延长,低温下1~24 d各指标无显著变化(P0.05);高温下过氧化氢、丙二醛含量及过氧化氢酶和过氧化物酶活性、pH值表现为先升高后降低,第8 d时达到高峰;高温下霉菌和黄曲霉毒素含量逐渐增加,乳酸菌含量逐渐降低;大肠杆菌各处理均未检出。建议高温下贮藏时间不超过8 d,低温下可以适当延长贮藏时间。     

纳豆芽孢杆菌的制备及其对番鸭生产性能的影响

采用液态发酵法和固态发酵法制备纳豆芽孢杆菌,并研究日粮中添加不同浓度纳豆芽孢杆菌制剂对番鸭生产性能的影响.结果表明:采用周态发酵法制备纳豆芽孢杆菌优于液态发酵法;在番鸭基础日粮中添加0.2％和0.4％纳豆芽孢杆菌制剂可显著提高番鸭日增重(P＜0.05)、采食量(P＜0.05)和饲料转化率(P＜0.01),以添加0.4％纳豆芽孢杆菌制剂的效果最佳.而日粮中添加0.1％纳豆芽孢杆菌制剂对番鸭日增重、采食量和饲料转化率的作用均不显著(P＞0.05).     

1株海洋芽孢杆菌抑制黄曲霉生长和毒素合成的研究

采用滤纸片扩散法从海洋中分离筛选出1株抑制黄曲霉活性高的微生物,利用16S rDNA特异性扩增技术对其菌种进行鉴定,并研究其对黄曲霉菌丝延长、孢子萌发和毒素合成的影响,用Beacon黄曲霉毒素检测试剂盒测定黄曲霉毒素含量.结果表明:该菌株为一株海洋巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium),其菌体对黄曲霉菌丝延长、孢子萌发和黄曲霉毒素生物合成都有明显地抑制作用,1×109CFU·mL-1菌体对黄曲霉孢子萌发的抑制率达87%,1×108CFU·mL-1菌体对黄曲霉毒素合成的抑制率可达50.75%.初步认为其抑制机制是该海洋巨大芽孢杆菌可产生某种次级代谢产物来抑制黄曲霉孢子萌发和菌丝延长.     

荆州周边地区猪场饲料真菌及霉菌毒素的检测

以湖北荆州周边地区3个猪场所使用的饲料为研究对象,采用吸水纸检测法对饲料中的真菌种类进行了调查,并采用真菌毒素ELISA试剂盒对饲料样品中黄曲霉毒素B_1、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素、T-2毒素、呕吐毒素和伏马毒素进行了检测,分析了饲料被污染的程度。结果表明,所检测的配合饲料、全价饲料、玉米和豆粕普遍受到了以上6种霉菌毒素的污染。饲料样品中玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素的检出率高达100%,黄曲霉毒素B_1和T-2毒素的检出率平均在80%以上。     

花生中巨大芽孢杆菌对黄曲霉毒素合成相关基因的抑制

分别在UF 715133-1和Jinhua 1012花生仁上接种黄曲霉和巨大芽孢杆菌,高压液相色谱法测定花生中黄曲霉毒素含量,借助生物芯片和实时定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRTPCR)测定巨大芽孢杆菌对黄曲霉毒素生物合成途径基因表达的影响,并用基因本体(gene ontology,GO)功能分类和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路方法对基因进行分类分析。在实验组Jinhua 1012和UF 715133-1中,黄曲霉毒素B1的含量降低了85%以上,一些编码蛋白质酶的基因显著下调,如短链脱氢酶、非核糖体多肽合成酶等。结果表明,从海洋中分离出的巨大芽孢杆菌可显著抑制黄曲霉毒素在花生上的合成,黄曲霉中多种基因的表达受到抑制,但这些基因在黄曲霉毒素生物合成中的作用并未阐明,其作用机制还有待进一步深入研究。     

不同吸附材料及改性处理对三种常见霉菌毒素脱毒效果研究

利用季铵盐及载金属离子对5种吸附材料改性处理,测定改性前后其对黄曲霉毒素B1(AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEN)和呕吐毒素(DON)脱毒效果,分析pH、吸附时间对最佳吸附材料改性前后吸附能力影响及解吸特性,并表征吸附材料结构。结果显示,蒙脱石吸附能力最强,改性处理后对3种毒素吸附能力均显著增加(P0.05),其中十八烷基三甲基氯化铵(STAC)改性处理后脱毒能力最强。pH和吸附时间对其脱毒能力无显著影响(P0.05),STAC改性处理显著降低毒素解吸率(P0.05)。改性后蒙脱石结构疏松,层间距变大,红外光谱中出现STAC特征峰。蒙脱石为5种材料中最佳脱毒材料,对3种毒素脱毒能力最强。季铵盐改性效果优于载金属离子,其中十八烷基三甲基氯化铵处理是最佳改性方式。改性后STAC基团成功插层至蒙脱石分子结构中,增强其对霉菌毒素吸附能力。研究为霉菌毒素吸附剂筛选和改性方式选择提供理论依据。     

复合乳酸菌制剂对全株玉米青贮饲料品质的影响

为研究复合乳酸菌制剂对全株玉米青贮饲料品质的影响,对从贵州地区筛选的短乳杆菌和戊糖片球菌制成的复合乳酸菌制剂和商品化复合乳酸菌制剂在自然条件下发酵60 d后进行分析。结果表明,用复合乳酸菌制剂发酵的全株玉米青贮饲料中大肠杆菌、酵母菌和霉菌数量大幅减少,显著降低了pH值、氨态氮/总氮和酸性洗涤纤维含量(P0.05),显著增加了乳酸、乙酸和粗蛋白含量(P0.05),丙酸、丁酸和中性洗涤纤维含量差异不大(P0.05),常见的5种真菌毒素(黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、T-2毒素)均符合相关标准要求。由此说明,复合乳酸菌制剂处理发酵全株玉米青贮饲料品质得到改善,与商品化复合乳酸菌制剂相比,从贵州地区筛选的短乳杆菌和戊糖片球菌制成的复合乳酸菌制剂改善青贮品质的效果更显著。     

基于核酸适配体检测饲料中黄曲霉毒素B1的方法

【目的】建立一种基于核酸适配体检测饲料中黄曲霉毒素B_1的方法,为饲料中黄曲霉毒素B_1的检测提供技术支撑。【方法】利用FAM荧光标记的核酸适配体与黄曲霉毒素B_1的特异性结合,而与偶联BHQ1的互补序列无法配对,导致荧光值变化而实现检测。【结果】在优化条件下,链亲和素浓度为100μg/mL,核酸适配体浓度为250nmol/L,互补序列浓度为500nmol/L,黄曲霉毒素B_1在0.01～10.0ng/mL范围具有较好的线性关系,最低检测限为0.01ng/mL;与黄曲霉毒素B_2、黄曲霉毒素G_1、黄曲霉毒素G_2、桔霉素和赭曲霉素A的交叉反应率均较低,饲料样品中添加黄曲霉毒素B_1的平均回收率为91.3%～105.0%。【结论】建立的方法快速、准确、灵敏,选择性好,可用于饲料中黄曲霉毒素B_1的分析检测。     

QuEChERS-高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱同时测定饲料中17种霉菌毒素

建立同时检测饲料中黄曲霉毒素(B_1、B_2、G_1、G_2)、赭曲霉毒素A、T-2毒素、HT-2毒素、橘青霉素、蛇形菌素、疣孢青霉原、新茄镰孢菌醇、O-甲基杂色曲霉素、杂色曲霉素、青霉酸、环匹阿尼酸、伏马菌素(B1、B2)等17种霉菌毒素的QuEChERS(quick、easy、cheap、effective、rugged、safe,简称QuEChERS)-高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(high performance liquid chromatography-quadrupole-time of flight mass spectrometry,简称HPLC-Q-TOF/MS)检测方法。待测样品经乙腈水溶液(含1%甲酸)提取,采用QuEChERS方法净化后,以0.1%甲酸水溶液和乙腈为流动相,经ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)分离,结合建立的17种霉菌毒素的标准谱图库,在多反应监测模式进行分析,采用外标法定量。该方法在1.0~200.0μg/L范围内呈线性,相关系数均大于0.990,检出限在0.5~3.0μg/kg之间,定量下限在1.0~10.0μg/kg之间。该方法简便、准确、灵敏、有效,可适用于饲料中17种霉菌毒素的残留检测。     

家禽黄曲霉毒素和霉菌中毒的防治

霉菌侵入谷物内,不仅消耗大量的营养物质用于生长,而且还分泌有毒物质。一些霉菌毒素因植株生长时被霉菌感染出现在植物成熟的果实里;另一些霉菌是在收获后保存过程中被污染产生。真菌还污染工业生产的饲料(鱼粉、肉骨粉、饼粕等)。特别要注意的是曲霉菌和镰刀菌分泌的毒素。黄曲霉毒素是很危险的,它不仅具有毒性,还有致癌和致畸作用。原发性黄曲霉毒素是由曲霉形成。黄曲霉毒素 B_1具有较强的毒性和传播性。它在食品中的最大允许含量是5微克/千克,饲料中是20微克/千克。     

东北地区不同饲料原料中霉菌毒素含量的测定

采用酶联免疫吸附法测定东北地区饲料原料中6种霉菌毒素(黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、伏马毒素、赭曲霉毒素A、T-2毒素)含量,了解东北地区饲料原料中霉菌毒素污染情况.采集黑龙江、吉林地区玉米(60份)、DDGS(12份)、玉米蛋白粉(10份)、玉米胚芽粕(8份)、玉米蛋白饲料(11份)、饼粕类(15份)等饲料原料共116份,进行6种霉菌毒素测定.结果表明,样品中6种霉菌毒素污染情况较普遍,特别是玉米副产品(DDGS、玉米蛋白粉、玉米蛋白饲料)中霉菌毒素污染较严重,其中玉米赤霉烯酮、呕吐毒素和伏马毒素含量高,超标率高.