上海郊区猪戊型肝炎病毒分子流行病学调查

为了解上海郊区猪场戊型肝炎病毒(HEV)的感染情况,从3个猪场随机采集180份新鲜粪便样本,用逆转录巢式聚合酶链反应对HEV ORF2部分基因片段进行扩增、克隆及测序。结果表明:HEV RNA的PCR检测总阳性率为15.6%,个别猪场HEV RNA检出率达30%,且存在基因3型和4型同时检出的情况。经NCBI数据库BLAST比对分析,23份样本为基因4型,5份样本为基因3型。遗传进化分析显示,基因3型和4型毒株与来源于上海地区的参考毒株遗传关系最近,核苷酸同源性分别为97.9%和96.3%。研究表明,上海郊区某些猪场HEV感染率仍较高,且存在基因3型与4型共感染的现象,应注意加强防控。     

苏中某地区猪戊型肝炎病毒检测及基因序列分析

应用反转录-巢式聚合酶链法(RT-nPCR)对苏中某猪场猪粪便标本和生猪屠宰中心猪胆汁标本进行HEVRNA的检测,并对部分阳性标本进行克隆测序及阳性分析,以探讨猪戊型肝炎在该地区的流行特点。结果表明:采集的90份胆汁标本中,有4份HEV检测呈阳性,阳性率为4.44%。在140份猪粪便标本中,只有3～4月龄的35份标本中检出3份HEV RNA阳性,阳性率为8.57%。其余月龄粪便标本中均未检出HEV RNA阳性。序列分析发现猪HEV相互之间在ORF2部分区域的核苷酸序列的同源性为88.0%～100.0%。与基因Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型的同源性为78.0%～86.0%,81.3%～82.7%,78.7%～84.0%,86.0%～98.7%。证明该地区存在猪戊肝病毒,且该猪源HEV属于基因Ⅳ型。     

上海地区生猪屠宰产品中共存基因3型和4戊型肝炎病毒

调查了上海市部分规模化屠宰场生猪屠宰产品中戊型肝炎病毒的携带状况.从4个屠宰场采集60份猪胆汁、60份猪肝脏、印份猪脾脏、60份猪肠系膜淋巴结、160份猪粪便及61份猪血清样品.利用巢式简并引物和RT-PCR技术,检测样品中HEV RNA,并对阳性扩增子进行克隆测序,序列用生物信息学软件分析.结果表明:样品戊型肝炎病毒RNA阳性率为1.08%(5/461).其中胆汁检出率为3.3%(2/60)、粪样为o.6%(1/60)、血清3.2%(2/61)、肝脏、脾脏和肠系膜淋巴结未检测到HEY RNA.序列系统进化分析结果显示,5株HEV中3株为基因3型HEV,同源性为90.7%-98.6%;2株为基因4型,同源性为94.9%.结果证实屠宰场生猪携带的HEV主要存在于胆汁和血清中.因此提示.屠宰场在屠宰时要妥善处理生猪血清和胆汁以防污染其他屠宰产品.研究在屠宰生猪中检测到基因3型HEV RNA.结果提示,至少在较为局限的群体中基因3型和4型病毒可以共存.     

皖南某野生动物园戊型肝炎跨种感染的分析

从皖南某野生动物园采集包括鸟类在内的22种动物粪便样品共计38份,采用RT-nPCR法检测HEV。结果表明,28.9%的粪样呈HEV RNA阳性,其中包括多种鸟类粪样。对所有11个HEV分离株的基因序列分析表明,它们均属基因4型,同源性为96%~100%。这提示,在该野生动物中心发生了HEV的跨种间感染,并且哺乳动物HEV可以在自然条件下感染鸟类。     

上海地区猪戊型肝炎病毒部分序列的克隆与分析

对上海地区几个猪场的戊型肝炎感染情况进行了调查,共采集粪便样品36份,通过RT-nPCR的方法应用通用引物对病毒基因组的ORF2部分片断进行扩增,36份样品中有5份RT-nPCR阳性,HEV RNA阳性率为13.9%,去除相同的序列,得到2株HEV的ORF2部分序列。序列分析表明,这两段序列与基因I、II、III、IV的遗传距离分别为0.183、0.207、0.230、0.102和0.177、0.226、0.240、0.108。系统进化分析显示,这两株病毒都属于基因Ⅳ型。     

上海地区猪群中戊型肝炎病毒的流行情况

猪戊型肝炎是一种人畜共患病,为了弄清上海地区猪群中戊型肝炎的流行情况,评估其感染人的风险,于不同季节调查上海地区不同区(县)规模化猪场中不同月龄猪戊型肝炎病毒的感染状况.试验应用逆转录-巢式聚合酶链法fRT-nPCR)对9个区(县)51个猪场(次)的猪粪便标本和1个生猪屠宰中心的127份猪胆汁标本进行HEV RNA检测,结果为51个猪场次中31场次为阳性,阳性率为60.78%.1 699份猪粪便标本中201份为HEV RNA阳性,阳性率为11.83%;阳性标本季节分布明显,以夏秋季为主,平均阳性率为14.63%,而冬春季平均阳性率为5.91%;1月龄以内的仔猪感染率低于10%,为8.60%,其他均在10%～15%左右;9个养猪的区(县)中均存在戊型肝炎病毒的感染,但差异也较大,最高为18.30%,而低的只有0.61%.127份猪胆汁标本中有9份为阳性,阳性率为7.09%.结果说明上海地区的猪群中存在着较为广泛的猪戊型肝炎病毒的感染,提示密切接触者存在感染的风险.     

广西猪戊型肝炎血清流行病学调查

为了解广西各地猪群戊型肝炎（HE）的感染状况及其流行特点,采用双抗原夹心ELISA检测来自广西11个市34个猪场及南宁市某屠宰场猪血清中的抗HEV抗体,并比较分析不同地区、不同年龄段猪抗HEV抗体阳性率的差异。结果表明,所检测的34个猪场均为抗HEV抗体阳性猪场;537份血清中有448份呈阳性,阳性率为83．4％;其中2月龄以内、3-4月龄和5月龄以上猪的抗体阳性率分别为74．0％、47．0％和95．5％,差异显著（P〈0．05）;广西各地区猪群抗HEV抗体阳性率均在70．0％以上,差异不显著（P〉0．05）。可见,广西猪群普遍存在HEV感染,且母源抗体消失后,猪群抗HEV抗体阳性率随着年龄增长而升高。     

黑龙江省规模化猪场种猪RYRⅠ基因多态性检测分析

猪肉品质一直以来都是种猪培育过程中的一个关键指标。兰尼定Ⅰ型受体基因(RYRⅠ)是一个有效的影响猪肉品质的候选基因,它的第615位氨基酸突变是造成猪发生应激综合症,进而出现PSE肉的主要原因。因此,国内外很多猪场都对该基因进行了清除。为加速优质种猪选育进程,选择了黑龙江省5家规模化猪场,对猪场内后备种猪的RYRⅠ基因进行了基因分型与检测。结果表明:有3家猪场的后备种猪中有nn型个体,但数量非常少;5家猪场内均有杂合型个体,占到所检个体的10%~20%。说明黑龙江省种猪企业对RYR1基因的清除工作还有待加强,猪肉品质提升还有很大空间。     

阿克苏地区部分规模化猪场猪圆环病毒3型的感染情况调查

为了解阿克苏地区4个规模化养殖场感染猪圆环病毒3型（PCV3）的情况,在2020—2021年间,根据生产阶段采集了该猪场能繁母猪、仔猪和育肥猪共584份全血样本,利用PCR方法,检测猪圆环病毒3型。结果表明：PCV3平均阳性率为7.53%(44/584),其中繁育猪场平均阳性率14.07%(19/135),育肥猪场平均阳性率5.57%(25/449);能繁母猪、仔猪和育肥猪的阳性率分别为9.09%(5/55)、17.50%(14/80)和5.57%(25/449)。说明阿克苏地区部分规模化猪场存在PCV3感染,且繁育场猪比育肥场猪感染率更高。     

辽宁省猪血凝性脑脊髓炎病毒抗体的血清学调查

摘要： 从辽宁省各地区采集猪血清样本,应用血凝和血凝抑制试验检测血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)抗体。结果,910份样品中有451份呈现HEV抗体阳性反应,阳性率为49.6%;抽检了10个规模化养猪场共280份样品,阳性率高达70.0%;抽查了不同年龄阶段猪血清样品,种母猪阳性率最高,为73.8%,仔猪次之,为67.5%,育肥猪最低,为37.0%。调查证明辽宁省各地区普遍存在HEV感染,被采集血清的成年猪未表现临床症状,说明HEV在本地区的猪群中主要表现为隐性感染,仔猪有少数出现症状,诊断为HEV与猪瘟或猪繁殖与呼吸综合征等混合感染。关键词：血凝性脑脊髓炎病毒;血清学调查;猪;     

Seroprevalence of Hepatitis E Virus in Human and Pigs in Pig Farms from Guangdong Province,Southern China

Hepatitis E is caused by hepatitis E virus (HEV), which has been classified into four genotypes. Genotypes 3 and 4 are regarded as zoonotic pathogens. Accumulating researches indicate that genotype 4 is the main HEV strain circulating in China, and there are high levels of seropositive pigs and human in some provinces of China. In this study, serum samples from pigs and from human occupationally exposed to pigs were obtained from pig farms in Guangdong Province, in subtropical southern China, in order to investigate for the first time the prevalence of anti-HEV immunoglobulin G (IgG) in the region. Antibodies against HEV were detected by Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) using a commercially marketed kit. The results showed that high numbers of pigs (74/94; 78.7%) and human (50/94; 53.2%) from three pig farms in Guangdong Province were positive for anti-HEV IgG. The correlation coefficient relating the prevalence in pigs and human on different farms was 0.920. The seropositive rate in males (human) was 48.8% (20/41) and that in females was 47.7% (9/19), which showed no statistically significant difference. These data indicated that there was a high prevalence of anti-HEV antibodies in pigs and in human with occupational exposure to pigs. The risk of infection with HEV in both human and pigs in Guangdong Province appeared to be age-dependent, to a certain extent. This study provided basic data for further researches on HEV and was a reminder that more attention should be paid to HEV infection both in pigs and workers on pig farms in the study region.     

广西猪牛羊鸡戊型肝炎血清流行病学调查分析

[目的]全面掌握了解广西各地猪、牛、羊、鸡戊型肝炎(HE)的感染状况及其流行特点.[方法]采用双抗原夹心ELISA检测来自广西各地猪(850份)、牛(392份)、羊(428份)、鸡(352份)共2022份血清中的抗HEV抗体,并比较不同地区、不同动物间抗HEV抗体阳性率的差异.[结果]4种主要畜禽的血清总抗HEV抗体阳性率为44.76%(905/2022),其阳性率大小排序为:猪(77.53%)>牛(27.81%)>羊(21.03%)>鸡(13.35%);不同地区的畜禽血清抗HEV抗体阳性率都是以猪群的最高,均在59.00%以上.而从不同地区的4种畜禽血清总抗HEV抗体阳性率来看,以南宁市的最高(61.94%)、河池市的最低(30.93%).[结论]广西的猪、牛、羊、鸡群中均存在HEV感染,且猪在传播HEV方面起主导作用.     

微生物发酵床对猪舍大肠杆菌病原生物防治作用的研究

 【目的】通过调查微生物发酵床养猪基质垫层大肠杆菌及其毒素基因的数量分布变化动态,分析微生物发酵床对猪舍大肠杆菌的生物防治作用。【方法】分离不同使用时间、不同层次基质垫层的大肠杆菌,利用PCR特异性扩增UdiA基因来鉴定、检测大肠杆菌,并对大肠杆菌12种毒素基因进行多重PCR检测。构建大肠杆菌种群分布的动态模型,分析微生物发酵床对大肠杆菌病原的生防效果。【结果】从不同使用时间不同层次基质垫层分离鉴定出大肠杆菌419株,并从这些菌株中检测出59株携带毒素基因,毒素基因类型为8种。其中1个月基质垫层的毒素基因阳性检出率最高,为22.47%,其次是7个月基质垫料,为16.5%,最低的是9个月基质垫料,为4.23%。大肠杆菌在微生物发酵床基质垫层种群数量时间变化规律为：随着使用时间的增加种群数量逐步减少;种群数量空间变化规律为：表层（第1层0—10 cm） 和底层（第4层60—70 cm）分布量最大,第2层（20—30 cm）分布量最少。大肠杆菌毒素基因的分布规律与之类似。从构建的大肠杆菌种群分布动态模型可以看出,基质垫层第1层（y=169.67x-1.0137）和第3层（y=313.11x-2.1885）大肠杆菌种群数量随使用时间呈指数线性方程分布;第2层（y=0.1006x3-2.3733x2+16.094x-22.454）和第4层（y=0.3159 x3+6.0913x2-35.634x+79.513）大肠杆菌种群数量随使用时间呈一元三次方程分布,基质垫层能明显抑制大肠杆菌的生长。基质垫层使用后期（第9个月）比使用初期（第1个月）大肠杆菌种群数量明显减少,降低幅度在67.45%—96.53%,说明微生物发酵床对猪舍大肠杆菌能起到显著的生物防治作用。【结论】微生物发酵床能抑制大肠杆菌特别是携带毒素基因大肠杆菌的生长,且对大肠杆菌的生防效果随使用时间的延长而增加。     

黑龙江省家畜血清HEV抗体和抗原水平的检测

[目的]探索黑龙江省戊型肝炎病毒（HEV）在家畜中的分布情况。[方法]采用酶联免疫吸附试验法（EusA）,检测来自黑龙江省2个地区血清样品3月龄以上大猪719份、3月龄以下小猪840份、牛505份、羊515份HEV抗原和抗体阳性率。[结果]猪群抗体水平最高,猪群（89．71％）可能比其他种群更容易感染HEV（P〈O．001）。黑龙江省共检测出HEYAg阳性血清样品猪59份,牛3份,羊1份。与吉林、辽宁相比,黑龙江省猪群HEV感染率较高。[结论]黑龙江省猪群感染HEV较为普遍,且大猪感染率高于小猪。     

遗传基础和种植方式对玉米单倍体成活率及授粉成功率的影响

采用种植方式及遗传基础的二因素随机区组试验设计,对5个No Reid×Dom遗传选育基础经诱导产生的单倍体,在直接播种、2~3叶期的小苗移栽和4~6叶期的大苗移栽3种种植方式下,对单倍体植株成活率及授粉成功率进行研究,以明确不同种植方式对成活率及授粉成功率的影响。结果表明:2~3叶期的小苗移栽单倍体成活率最高,平均为81.70%,授粉成功率平均为11.33%;4~6叶期的大苗移栽单倍体成活率平均为79.12%,授粉成功率最高,平均为11.34%;直接移栽单倍体成活率最低,平均为72.47%,授粉成功率最低,平均为10.30%。这说明,单倍体处理后育苗移栽可以有效地提高单倍体幼苗成活率及授粉成功率。     

不同玉米基因型叶片呼吸速率的差异及与光合特性关系的研究

对４０个我国常用玉米自交系和２２个不同类型玉米材料测定的结果表明,玉米基因型间呼吸速率存在显著的差异,可做为基因型分析的重要生理指标。４０个自交系呼吸速率平均值为（ＣＯ２）６．６４ｍｇｄｍ＾－２ｈ＾－１,变异系数为２２．０３％。不同玉米类型间呼吸速率高低依次是普通杂交组合、姊妹系、自交系、糯质玉米和甜质玉米,与类型间光合速率高低的排列是一致的。杂交种呼吸速率呈明显的正优势,超中亲率平均为２４．５８     

高负荷条件下厌氧氨氧化处理猪场废水启动效果研究

以厌氧反硝化泥为接种污泥启动厌氧氨氧化反应器后处理猪场废水的研究结果表明,高负荷处理条件下对废水的NH4 -N、COD、NO2-N最高去除率分别为60%、80%、99%,平均去除率分别为45%、75%、75%。     

玉米孤雌生殖单倍体诱导效率优化方法研究

玉米孤雌生殖单倍体的诱导是进行单倍体育种的重要环节。本研究选择20个杂交种作母本进行单倍体诱导,结果表明:不同母本基因型间单倍体频率差异显著,其中高频材料的单倍体频率约为低频材料的5倍。以郑单958为母本和CAUHOI-1杂交经多年试验初步表明在海南冬季进行单倍体诱导的效率(3.39%)显著高于北京夏季(1.86%)。杂交诱导果穗不同部位的单倍体频率存在差异,顶部的单倍体频率较高。吐丝后不同时期的单倍体诱导表明,在吐丝早期授粉的诱导效率最高。初步研究结果表明母本基因型、诱导地点以及授粉时期均对单倍体诱导有重要影响。选择高频的母本材料,在合适的地点于吐丝早期进行单倍体诱导是单倍体诱导的最佳方案。     

Detection and characterization of Hepatitis E virus from commercial rabbit livers in Hebei,China

Rabbit hepatitis E virus (HEV) has been reported for years and is thought to have the potential for zoonotic transmission from rabbits to humans. As reported, HEV genotype 3 (gt3) is the most prevalent form of HEV in rabbits. To determine the prevalence of HEV in commercial rabbit livers, 176 liver samples were collected from an abattoir in Hebei Province, China. Three (1.7%) samples tested positive for RNA of HEV-ORF2 (open reading frames-2). Sequence analysis showed that the three isolates shared high identities with each other (94.08–98.85%). Further analysis showed that all the rabbit strains clustered together in the branch of HEV gt3. Further study by immunohistochemistry (IHC) assays showed that 131 (74.4%) liver samples were positive for HEV ORF2 protein. Pathological changes including cell degeneration, inflammatory cell infiltration and bile duct epithelial cell hyperplasia were observed under microscopy. These findings indicated the presence of HEV in commercial livers of rabbits. Additional studies should be conducted to investigate the infectivity of rabbit HEV (rHEV) and the potential risks of zoonotic transmission of rHEV from rabbits to human beings.