利用RAPD技术快速鉴定番茄杂种纯度

从两个番茄杂种Ｌ４０２、Ｌ４０４及它们的亲本共６份材料的叶片中提取ＤＮＡ,使用国产ＰＣＲ仪,建立了适合番茄ＲＡＰＤ分析的ＰＣＲ条件,进一步在１００个随机引物中找到了５个可用于鉴定这两个杂种纯度的引物,其中ＯＰＫ１４引物可同时用来鉴定两个杂种。利用该法鉴定杂种纯度不仅简单、迅速、可靠,而且因ＤＮＡ的用量少,不影响被检植株的后期生长。     

利用RAPD技术快速鉴定番茄种子纯度

种子质量是影响农作物品质和产量的重要因素，虽然我国已加入国际种子检验协会（ISTA），但由于种子检测设备、技术相对落后，至今仍未有通过ISTA认证的种子检测机构，使我国种子质量难以得到有效的保证。为了防止假冒伪劣种子给农业生产造成危害，实现种子的产业化，加快与国际接轨的步伐，必须进一步完善种子质量尤其是种子纯度检测技术。     

番茄杂种纯度的检验方法

近年来,我国各地有关单位及民间机构育成了许多番茄杂交种,这些杂种有如灿烂的群星,互相争奇斗艳,各具特色,受到广大种植者的欢迎。目前番茄杂交种由人工去雄、授粉所制而得,其中难免鱼目混杂。为此,对杂种种子纯度检验是必不可少的一环,只有经过严格的检验,才能确保种子的质量。其     

利用RAPD技术快速鉴定辣椒杂交种纯度的研究

以新椒系列辣椒杂交种父母本和一代杂种为材料,采用液氮-SDS法提取辣椒基因组DNA,研究PCR反应的主要影响因子,建立适合辣椒杂交种纯度RAPD分析的PCR反应体系,从120个随机引物中筛选出1个能鉴定新椒10号杂种纯度的引物S1220,从7个随机引物中筛选出1个能鉴定新椒3号杂种纯度的引物S1213。     

辣椒RAPD反应体系建立及杂交种纯度鉴定研究

以豫椒系列品种父母本和杂交种为材料，采用液氮-SDS法提取辣椒基因组DNA，使用Bio-RAD-Mycy-cler型PCR仪和Bio-RAD1000凝胶扫描仪，研究PCR反应的主要影响因子，建立适合辣椒RAPD分析的PCR反应体系，从40个10bp的随机引物中筛选出1个能鉴定豫椒968杂种纯度的引物S149。     

辣椒RAPD系统的建立及在杂种纯度鉴定中的应用

 对辣椒RAPD反应的各个环节, 包括DNA 提取、PCR反应和电泳检测进行了筛选和优化, 确定了一个简单、高效、相对稳定的RAPD 系统, 并筛选出12个较稳定的RAPD标记。可以用于‘中椒’系列辣椒的9个杂交种的纯度鉴定。     

利用RAPD快速鉴定甜瓜杂交种的遗传纯度

通过PCR程序优化 ,建立了快速进行甜瓜RAPD分析的技术体系。从 80个随机引物中选出 5个可进行 3个甜瓜杂交种纯度鉴定的引物 ,其中OPM17可同时用于 3个甜瓜杂交种的纯度鉴定。通过多个品种间的RAPD分析 ,建立了 3个杂交种的特有指纹图谱 ,可用于 3个杂交种的遗传纯度鉴定     

用ACP及ADH同工酶等电聚焦快速鉴定番茄杂种纯度

1 目的与材料方法 不同品种的番茄种子在形态上非常相似,采用田间形态法鉴定其纯度不但占用大量土地,而且周期长,费用大,并受到季节的限制。有的杂交种子甚至缺乏可资鉴定的农艺性状。因此,研究建立一种准确、快速、简便、实用的杂交番茄种子纯度检测技术显得非常重要。     

柑桔RAPD技术体系建立与体细胞杂种鉴定

通过优化反应条件,建立起柑桔ＲＡＰＤ分析技术体系,并成功地应用于体细胞杂种鉴定。柑桔ＲＡＰＤ以Ｍｇ２＋为１．５ｍｍｏｌ／Ｌ、〔ｄＮＴＰｓ〕为１００μｍｏｌ／Ｌ时扩增稳定,效果良好。用１６个引物扩增〔哈姆林甜橙（＋）粗柠檬〕融合植株,体细胞杂种表现为双亲谱带之和。结合染色体计数,可将〔Ｐａｇｅ桔柚（＋）粗柠檬〕融合再生的体细胞杂种（异源四倍体）、叶肉亲本类型及同源融合植株区别开来。     

黑皮冬瓜黑老粗F1种子纯度的RAPD鉴定

用CTAB法从冬瓜种子发芽幼根提取DNA,经电泳检测其条带清晰明亮,可满足RAPD分析要求。对黑皮冬瓜黑老粗F1及其亲本DNA用140个RAPD引物分别进行RAPD扩增,筛选获得1个在父母本间可产生稳定且为双亲互补型片段的引物SPS-C15。利用该引物对一批商品种进行纯度鉴定,纯度为90.7 %,实际田间形态鉴定的纯度为89.8 %,RAPD检测结果与田间鉴定结果基本吻合,表明RAPD技术可用于黑老粗F1的种子纯度快速检测。     

甜瓜分子标记纯度鉴定研究

以2个甜瓜品种西域雪1号、西域雪2号及其亲本为试材,建立并优化了单粒种子DNA快速提取法和适合甜瓜的RAPD、SSR分子标记杂交种纯度鉴定体系。从100条随机引物中筛选出G17用于西域雪2号纯度鉴定,可有效区分母本和杂交种。从19对SSR引物中筛选出9对稳定扩增、多态性丰富的引物构建西域雪1号、西域雪2号的SSR指纹图谱。SSR分子标记用较少引物即可扩增出品种特异性条带,且多数F1代带型呈双亲互补,非常适合种子纯度鉴定。同时,使用高浓度、非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染,条带更清晰,可区分只相差1个碱基的扩增片段,同RAPD相比,SSR分子标记更适合甜瓜杂交种纯度快速鉴定。     

厚皮甜瓜亲缘关系及纯度的RAPD标记

利用２０个随机引物对厚皮甜瓜８个亲本与４个杂交种进行ＲＡＰＤ分析。１０个引物的扩增ＤＮＡ谱带具有多态性,亲本具有各自的特异谱带,绝大部分Ｆ１的扩增带型是双亲的互补带。各试材的相似系数范围为６３．６％－９６．５％。遗传距离聚类分析图表明,Ｆ１易与双亲或其一聚在一起。上述结果说明,可以利用ＲＡＰＤ标记在ＤＮＡ水平上进行厚皮甜瓜的亲缘关系及纯度的鉴定。     

茄子种子纯度SSR标记快速鉴定

以茄子杂交种"京茄218"及其父母本为试材,采用SSR分子标记技术,研究了其双亲及F1之间的多态性,并结合田间鉴定对其进行验证。结果表明:在152对SSR引物中有2条引物(qzssr17和qzssr20)的扩增产物在杂交种中呈现父母本互补带型。利用qzssr17引物对6个制种单位繁制的"京茄218"杂交种进行SSR纯度鉴定,其鉴定结果与田间鉴定结果具有较好的一致性。试验证明,与田间种植鉴定相比,SSR标记是一种更准确、简单高效的茄子种子纯度鉴定方法。     

利用同工酶鉴定柑桔杂种与遗传分析的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法对柑桔几个杂交组合材料进行了同工酶分析。结果表明,利用谷草转氨酶(GOT)同工酶可以鉴别华农本地早×三湖化红的杂种植株。谷草转氨酶、过氧化物酶(POX)、苹果酸脱氢酶(MDH)三种同工酶系统以及叶片形状四个指标均能充分鉴别华农本地早×宜昌橙的杂种。对华农本地早×宜昌橙F_2代进行GOT、POX同工酶遗传分析表明,GOT-2的分离符合二个或三个基因位点控制的假说;而POX-B分离广泛,尚难以进行遗传解释。对GOT-2、POX-B两种同工酶谱之间及其与叶片形状、嫩梢颜色两个形态学性状之间进行了独立测验,表明它们之间无连锁关系。     

厚皮甜瓜亲缘关系及纯度的RAPD标记

利用２０个随机引物对厚皮甜瓜８个亲本与４个杂交种进行ＲＡＰＤ分析。１０个引物的扩增ＤＮＡ谱带具有多态性,亲本具有各自的特异谱带,绝大部分Ｆ１的扩增带型是双亲的互补带。各试材的相似系数范围为６３．６％－９６．５％。遗传距离聚类分析图表明,Ｆ１易与双亲或其一聚在一起。上述结果说明,可以利用ＲＡＰＤ标记在ＤＮＡ水平上进行厚皮甜瓜的亲缘关系及纯度的鉴定。     

番茄RAPD分析适宜引物的筛选

使用国产ＰＣＲ－９０ＡＤ反应仪,对野生番茄及栽培番茄的基因组ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ分析,从１００个随机引物中找到了３５个扩增效果良好的引物,为ＲＡＰＤ技术应用于番茄的遗传研究奠定了基础。     

利用多重PCR鉴定西瓜杂交种纯度

为快速、高效鉴定西瓜杂交种纯度,建立一套完善的SSR分子标记鉴定体系,利用覆盖西瓜全基因组的192对SSR标记对小果型西瓜品种‘锦霞八号’亲本进行多态性筛选,共获得36个条带清晰、多态性好的SSR标记,多态性率为18.8%,这些标记分别位于西瓜第1、2、3、4、5、6、8、10、11号染色体。根据这些多态性标记的扩增片段大小,从中选出4对进行双重PCR和三重PCR分组扩增,成功建立了‘锦霞八号’杂交种的双重和三重PCR纯度鉴定体系。3组标记鉴定结果基本吻合‘,锦霞八号’杂交种的纯度为100%。将标记鉴定结果与田间形态学鉴定结果对比,2种方法鉴定的结果高度一致。将三重PCR技术用于鉴定西瓜杂交种纯度,为西瓜杂交种纯度快速高效鉴定奠定了研究基础。     

辣椒品种和纯度的现代鉴定技术

本文概述了生理生化鉴定技术和DNA分子标记的原理在辣椒品种和纯度分析上的研究进展和应用情况，分别讨论了它们的优缺点及其发展方向。     

电泳分析在辣椒杂种纯度检验中的应用

通过对辣椒种子贮存蛋白进行电泳分析，发现不同类型辣椒在其种子贮存蛋白质水平上存在差异，并且这种差异在其交配种中可以表达出来。运用辣椒的这种特性可以在室内对辣椒交配种进行纯度检验，其结果与大田表现相吻合。     

金棚1号番茄种子纯度检测的SCAR标记

以金棚1号番茄及其父、母本为试材,提取叶片DNA,优化构建了稳定的RAPD反应体系。从在番茄上多态性丰富的100条随机引物中筛选获得1条可用于鉴别母本和F₁的引物S130,2条可用于鉴别父本和F₁的引物S296和S114。将扩增所得到的差异条带进行克隆、测序,设计出1对SCAR引物RF2/FF2,能特异鉴别F₁和母本。进一步建立了以干种子为试材检测金棚1号番茄种子纯度的SCAR标记检测体系。