黄伞种质资源遗传多样性的RAPD分析

利用RAPD分子标记技术对9个黄伞菌株进行遗传多样性分析.结果表明:RAPD技术是准确评估黄伞遗传多样性的有效方法.50条RAPD引物中筛选出8条多态性引物,共检测出226条带,其中多态性条带143条,多态率为63％.菌株之间遗传相似系数(GS)变幅范围为0.6181～0.9306,平均GS值为0.746,表明黄伞遗传变异较丰富.聚类分析结果表明,在相似系数0.763处可将9个黄伞菌株划分为4类.     

黄瓜种质资源遗传多样性及其亲缘关系的AFLP分析

 采用AFLP分子标记技术，对中国黄瓜种质资源遗传多样性及其与外来种质的关系进行了分析， 结果表明8对AFLP引物在70份黄瓜种质中共扩增出425条带，多态性带的比例为66％。供试黄瓜种质的平 均期望杂合度为0．376，中国种质的平均期望杂合度为0．387，明显高于国外种质的n 291。西双版纳黄瓜和印度野生黄瓜具有一些栽培种质没有的特异位点，中国栽培种质的特异位点多于外来栽培种质，后者也有一些中国栽培种质没有的特异位点。聚类分析将70份种质分为三大组群，即西双版纳黄瓜(Cucumis sativus L.vaF．xishuangbannanesis Qi et Yuan)组群，e sativus var．hardwickii野生黄瓜组群和栽培黄瓜组群。西双版纳黄瓜与栽培黄瓜的距离最远，与野生黄瓜次之。按一定的遗传距离可以将中国和外来栽培种质分开。大多数 华南型和华北型种质归属于不同的亚组。这些结果有助于有目的地利用这些变异拓宽育种材料的遗传背景。     

黄瓜种质资源研究进展与展望

本文综述了国内外黄瓜种质资源的收集、保存、鉴定评价及种质创新的主要研究成果；简要分析了我国近二十年来黄瓜主推杂交品种的亲本来源及我国黄瓜种质资源利用现状；结合目前研究中存在的问题，提出了黄瓜优异种质创新体系，并展望了相关研究的发展方向。     

黄瓜种质资源抗灰霉病的鉴定与评价

利用菌片接种法进行灰霉病苗期人工接种抗性鉴定，对国家蔬菜种质资源中期库中保存的不同来源地及农艺性状差异较大的96份黄瓜种质资源进行初步抗性评价。结果显示，不同黄瓜种质材料的平均病斑面积在0～367.4mm^2之间，对灰霉病的抗性差异明显。     

山东省黄瓜地方品种资源亲缘关系的AFLP 分析

 利用AFLP 技术对包括80 份山东黄瓜地方品种和24 份其他地区品种的遗传亲缘关系进行了研究。用11 对引物进行选择性扩增, 21%的扩增条带表现多态性。聚类分析结果显示: 山东黄瓜地方品种与日本品种和欧美品种分属不同类群或亚类群, 山东地方品种分为8 组, 各组内生态类型基本一致。试验得到不同生态型黄瓜的特征差异带和它们之间的遗传距离。     

黄瓜主要种质资源耐旱性评价

以16个主要黄瓜品种为试材,通过设定正常水分处理和干旱处理(正常水量的50%)的方法,研究了干旱对黄瓜成株期植株的形态、生理生化指标的影响,以期筛选出黄瓜耐旱性鉴定指标,为抗旱黄瓜品种的选育提供依据。结果表明:干旱处理对不同生态类型黄瓜的根干质量、地上部干质量、株高、丙二醛含量、净光合速率、蒸腾速率、气孔导度及叶面积有显著影响,应用隶属函数值法对黄瓜抗旱性进行分析,得出根干质量是与耐旱性相关性最大的指标,并通过逐步回归建立总隶属函数值与根干质量的最优回归方程Y=0.575+0.417X,用此方程对供试材料进行预测,预测值与总隶属函数值基本一致。     

番茄种质资源遗传多样性的RAPD分析

利用RAPD分子标记技术,对63份番茄种质资源进行了遗传多样性研究。结果表明:从180个RAPD引物当中,筛选出22条稳定性好、多态性强的RAPD引物,共扩增出多态性带207条,多态性条带比率为86.96%,63份番茄栽培品种或品系间的相似系数介于0.28～0.99之间,说明RAPD能很好的对番茄野生种、近缘野生种和栽培种进行多态性分析。采用UPGMA进行聚类分析,得到与生物学分类地位基本一致的结果。     

黄瓜种质资源单性结实性评价

 在春季日光温室条件下,对75份黄瓜种质资源的单性结实性进行了评价。结果表明：75份材料的单性结实率在0~100%呈连续分布。其中强单性结实材料40份,占53.3%,中等单性结实材料24份, 占32%,弱单性结实材料11份,占14.7%。其中的24份品种资源中,强单性结实品种20个,占83.3%,其余为中等单性结实。单性结实性强弱表现为坐果率的差异,不同种质资源无籽果实与有籽果实的单瓜重和瓜形指数基本相似。单性结实性一般随着节位升高而增强,其评价工作可侧重于20节内的低节位。     

黄瓜高丙醇二酸含量种质资源筛选

采用高效液相色谱法（HPLC）对56份不同类型的黄瓜种质资源进行了丙醇二酸含量的检测。结果表明：黄瓜果实中丙醇二酸含量在品种和类型间存在明显的差异,变幅在1.77～10.22 g•kg^-1之间;筛选出丙醇二酸含量在7.54 g•kg^-1以上的高丙醇二酸含量的黄瓜种质资源5份,丙醇二酸含量在2.55 g•kg^-1以下的低丙醇二酸含量的黄瓜种质资源5份。     

黄瓜种质资源果实苦味评价

采用新的的苦味等级分级标准,通过分级打分法对63份不同生态类型的黄瓜种质资源结果初期与结果盛期的商品瓜头部(花萼端)与尾部(果梗端)的苦味进行评价。试验结果表明,不同生态类型的黄瓜品种间果实苦味表现不同,以华南型品种果实苦味表现最为突出;结果初期与结果盛期果实头部苦味差异极显著,果实尾部苦味差异不显著;结果初期果实头部与尾部苦味差异不显著,而结果盛期果实头部与尾部苦味差异极显著;筛选出黄瓜果实苦味平均分1的材料3份,分别为1号、2号、33号;果实苦味为0的材料20份,其中华南型1份,华北型8份,腌渍型2份,欧洲温室型9份。     

黄瓜耐热性研究进展

就近年来有关高温对黄瓜生长发育的影响、黄瓜耐热性的评价以及耐热性的遗传作了简要综述,对黄瓜耐热性研究存在的问题进行了总结,并展望了黄瓜耐热性研究的方向。     

黄瓜倍性鉴定方法的研究

 以黄瓜未受精子房培养的再生植株群体为材料, 研究和比较了几种倍性鉴定方法。结果表明:体细胞染色体计数法是最可靠的直接方法; 体细胞染色中心大小、异染色质数目以及保卫细胞叶绿体数目与黄瓜倍性密切相关, 是有效的间接方法; 不同倍性植株在长势、花冠形态、花粉粒及结籽等方面有明显差异, 也能间接确定植株倍性。     

壳聚糖对黄瓜幼苗抗热性的影响

试验分别采用0(对照,CK)、50、75和100 mg/L 4个浓度的壳聚糖(CTS)处理一叶一心的黄瓜幼苗,喷施一次CTS溶液,进行白天/夜间温度(45℃/40℃)的高温处理4 d,并每隔24h喷一次CTS溶液,以研究CTS对黄瓜幼苗抗熟性的影响.结果表明,CTS处理可以提高高温胁迫下黄瓜叶片超氧化歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)的活性,有效降低O2-产生速率.表明适宜浓度的CTS具有增强活性氧清除能力,降低细胞膜脂过氧化水平和膜透性增加的程度,保护生物膜功能,提高黄瓜幼苗抗高温的作用.     

金属硫蛋白基因转化黄瓜的研究

以黄瓜无菌苗子叶切段为外植体,通过叶盘转化法与根瘤农杆菌进行共培养建立了黄瓜的遗传转化体系.比较了不同苗龄,不同侵染时间对黄瓜离体再生的影响,并做了潮霉素敏感性测试.结果表明:苗龄3～4 d的子叶,侵染时间为15min,潮霉素浓度为25 mg/L最适分化出抗性小苗.最终获得3株抗性植株,经过PCR和PT-PCR检测,初步确定均为阳性转化植株.     

利用黄瓜远缘群体遗传连锁图谱进行始花节位定位

利用黄瓜远缘群体的分子遗传连锁图谱,对雌花节位性状进行了QTL定位。共找到8个控制雌花节位的QTL位点:ff-1、ff-2、ff-3、ff-4、ff-5、ff-6、ff-7、ff-8,分别位于LG2、LG3、LG6、LG7连锁群上,这些QTL位点对雌花节位性状表型变异贡献率分别为81.6%、81.0%、81.0%、80.0%、80.6%、81.1%、81.0%、80.7%,其中ff-1、ff-2、ff-5、ff-6、ff-7、ff-8加性效应值为正,为增效加性效应,ff-3、ff-4加性效应值为负,是减效加性效应。     

利用RAPD快速鉴定甜瓜杂交种的遗传纯度

通过PCR程序优化 ,建立了快速进行甜瓜RAPD分析的技术体系。从 80个随机引物中选出 5个可进行 3个甜瓜杂交种纯度鉴定的引物 ,其中OPM17可同时用于 3个甜瓜杂交种的纯度鉴定。通过多个品种间的RAPD分析 ,建立了 3个杂交种的特有指纹图谱 ,可用于 3个杂交种的遗传纯度鉴定     

黄瓜全雌性基因连锁的AFLP和SCAR分子标记

 本研究以全雌品种‘戴多星’自交系和弱雌品种‘北京截头’自交系为双亲杂交获得F₁ ,然后得到F₂ 性型分离群体, 利用分离群体分组分析法(Bulked Segregant Analysis, BSA) 构建全雌和弱雌两个基因池, 筛选了64对AFLP选择性引物EcoR I-NN +Mse I-NNN组合, 发现EcoR I-TG +Mse I-CAC引物组合在全雌基因池中扩增出一条分子量为234 bp的特异带。经F₂ 代单株验证, 该特异条带能在全雌单株中稳定出现。以MAP MAKER (Version 310) 软件分析, 该标记与全雌性位点的连锁距离在617 cM。命名该连锁标记为TG/CAC₂₃₄。将该特异条带回收、克隆、测序, 设计特异SCAR引物, 再对F₂ 代单株基因组DNA进行扩增, 仅在全雌单株中扩增出1条分子量为166 bp 的特异带, 表明已成功地将与黄瓜全雌性连锁的AFLP标记转化为操作简便、表现稳定的SCAR标记, 该标记命名为SA₁₆₆。     

黄瓜抗病基因类似序列( RGA) 的同源性分析和Southern鉴定

 使用ClustalW和DNAMAN 3.0分析了本实验室克隆的15个黄瓜抗病基因类似序列(RGA)之间以及与烟草的N 基因、亚麻的L6基因和拟南芥的RPS2基因之间的同源性, 并对这些RGA进行了PCR和Southern验证与分析。结果表明: 15个黄瓜RGA中, 核苷酸序列同源性最高的是CsRGA2、CsRGA4和CsRGA5, 其次是CsRGA6、CsRGA7、CsRGA8和CsRGA9, CsRGA1和CsRGA3也存在较高的同源性; 其余的RGA同源性较低。在氨基酸序列上也表现了相同的特征。与N、L6和RPS2等抗病基因的产物之间同源性最高46% , 最低22%。根据核苷酸序列设计了15对特异引物, 用PCR方法验证了所有黄瓜RGA的存在, 其中CsRGA3在黄瓜品种间表现出多态性。利用特异引物PCR方法合成了15个黄瓜RGA的地高辛探针, 与EcoRⅤ酶解的黄瓜‘215’、‘129’和‘L18’的基因组DNA进行Southern杂交, 证实了各个RGA在基因组上的存在, 同时发现, CsRGA9、CsRGA11～CsRGA15都是多拷贝,CsRGA3是单拷贝, 其余为双拷贝。     

VA 菌根菌对日光温室黄瓜生长发育的影响

 研究了不同VA 菌根菌与不同季节日光温室黄瓜共生, 对黄瓜苗期、营养生长期、生殖生长期的生长发育和最终经济产量的影响。结果表明: VA 菌根菌能与黄瓜共生在不同季节日光温室中, VA 菌根菌中Glomus mosseae ( GM) 的侵染率最高; 三种VA 菌根菌都显著促进共生黄瓜幼苗期的生长( 株高、茎粗、叶面积) , 促进营养生长期的生长发育, 使地上部和地下部干、鲜样质量增加; VA 菌根菌提高了日光温室黄瓜的经济产量, 其中GM 的促进作用最显著。