4种思茅松总DNA提取方法的比较

以思茅松(Pinuskesiyavarlangbianensis)针叶为材料,分别采取了简易提取法、高盐沉淀法、CTAB沉淀法和高盐低pH法提取基因组DNA,并通过琼脂糖凝胶电泳、限制性内切酶处理和RAPD3种方法对所提取的DNA样品进行检测,将它们在DNA产量、质量等方面的优缺点进行总结,并根据群体分子遗传学研究工作的实际特点确定了高盐沉淀法为最佳方法     

大豆不同组织材料的DNA提取

以大豆叶片、愈伤组织和干种子为材料进行大豆基因组DNA提取的比较试验.结果表明:从以上3种组织材料中均能提取到较高质量的DNA,利用愈伤组织为材料提取的DNA质量比叶片和种子略好,从愈伤组织中可以提取到质量较高的模板DNA.     

猪肾组织中DNA提取的研究

对血液中提取基因组DNA的方法加以改进,获得了一种提取猪肾组织中DNA的有效方法。试验表明DNA在不同浓度的电解质中溶解度不同。     

一种少量提取植物组织DNA的快速方法

为了从植物组织中快速提取核酸,从多种DNA提取方法中遴选出2种基本方法。通过优化基本方法的操作步骤、试剂用量与作用时间,建立了一种改良的DNA快速提取方法。在此方法中,用氯仿代替液氮或提取液进行植物组织研磨,之后加入提取液抽提DNA,并用氯仿-异戊醇反复抽提,可显著降低蛋白质含量;通过应用RNA酶可获得纯度较高的DNA。该方法的特点是在室温下即可进行简便操作,快速(提取核酸的过程仅需30min),污染器皿少,实用性强,提取物产量高,纯度好。     

育珠蚌不同组织基因组DNA提取质量比较

利用饱和酚-氯仿法分别提取了三角帆蚌（Hyriopsis cumingii）6个组织斧足、鳃、闭壳肌、性腺、肝脏、心脏中的基因组DNA,并采用紫外分光光度法、琼脂糖凝胶电泳、PCR扩增法分析了三角帆蚌不同组织基因组DNA的提取效果。结果表明：三角帆蚌6个组织均能成功地提取基因组DNA,但6个组织提取的DNA质量存在差异,斧足中提取的DNA纯度、浓度最高,PCR扩增条带最亮,因而是三角帆蚌提取DNA的最佳组织,其次为斧足和闭壳肌、心脏和性腺提取的DNA较差。     

PEX法提取植物组织DNA

介绍了一种简单而实用的DNA提取法,利用PEX试剂从高粱与转基因玉米的新鲜叶片中提取植物组织DNA。所得DNA经定量检测后,可满足AFLP分析及PCR-Southern杂交等要求。     

德州驴不同组织材料总DNA提取的有效方法

[目的]为了分析德州驴的种群结构和种间遗传相似性关系,以及预测选配和杂交配合等方面提供一定的科学依据,并为做好德州驴的保种育种工作提供一个新的思路。[方法]根据德州驴血液、肌肉和毛发3种样品的特点,分别采用相适合的方法提取基因组DNA,并对提取的基因组DNA进行检测。[结果]结果表明:这3种DNA抽提方法及相应改进的可靠性,得到的DNA纯度较高。[结论]该方法可应用于PCR扩增等后续分子生物学试验研究。     

用于Real-time PCR检测的牛肉组织DNA提取方法探索

使用Chelex-100提取牛肉组织DNA,并用紫外分光光度法检测所提取的DNA浓度和纯度,结果表明所提取的DNA A260 nm/A280 nm在1.662～1.826之间,纯度较高。Real-time PCR扩增提取的DNA模板,表现出较高的敏感性。该DNA提取方法效率较高,操作简便,能够获得较高质量的DNA,适合检疫部门的快速检测需要。     

盐溶法提取动物组织DNA的技巧及问题解析

盐溶法提取动物组织DNA操作简单、快速,DNA产量高,适合学生集体开展实验.实验中所用组织的取材、处理,操作的规范性及技巧性影响实验结果.同时使用氯仿去除杂质相对于其他方法更加安全、经济.     

不同白蚁基因组DNA提取方法的比较

[目的]筛选一种高效、简单、快速、价格合理的白蚁基因组DNA提取方法。[方法]比较了CTAB法、离心柱试剂盒和磁珠法试剂盒提取白蚁基因组DNA的效果。[结果]对于新鲜和保存得当的标本,3种方法提取的DNA质量均较好;但对于保存时间较长,出现降解的标本,磁珠法试剂盒的效果明显优于其他方法。[结论]获得分子检测所需要的最佳DNA提取方法。     

思茅松嫩枝扦插育苗技术研究

从影响思茅松扦插生根的内因、外因和内外因相互作用等方面开展研究,应用对比分析、方差分析和多重比较寻找适合思茅松扦插的基质种类、植物生长调节剂浓度、穗条年龄和长度及扦插时间等,结果表明：思茅松基本属于愈伤组织生根型;8～10 cm长的穗条是嫩枝扦插较为合适的长度;扦插繁殖存在明显的年龄效应,1年生嫩枝的扦插生根率明显高于2年生母株上的嫩枝;嫩枝扦插以山地红壤较好。     

思茅松RAPD反应体系的优化

从思茅松幼苗的嫩叶中提取基因组DNA作为模板,运用均匀设计方法,获得思茅松RAPD扩增反应的优化体系:20μL反应体系中,DNA模板用量50ng,引物浓度0.5mmol.L-1,Mg2 浓度4mmol.L-1,TaqDNA聚合酶用量2.0U,dNTP浓度0.75mmol.L-1。用19条引物进行验证,证实该体系重复性好、结果稳定。     

思茅松AFLP分子标记体系的建立

采用改进的SDS法,提取思茅松胚乳DNA,获得较高质量的DNA样品,用Eco RI和Pst I 2种限制性内切酶完全酶切后,再经过预扩和选扩,从82对引物中筛选出24对带型分布均匀、多态性高且分辨力强的引物。扩增产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳后,可获得清晰指纹图谱,重复性较好。建立的思茅松AFLP体系可用于后续研究。     

思茅松树皮低聚原花青素提取工艺研究

[目的]研究思茅松树皮低聚原花青素的最适提取条件,为开发思茅松树皮低聚原花青素提供有利参数。[方法]在单因素试验和正交试验的基础上,采用溶剂回流提取法,用70%乙醇作提取溶剂从思茅松树皮中提取有效成分低聚原花青素。[结果]影响提取工艺各因素的主次顺序依次为:提取时间提取温度料液比。确定最佳的超声提取条件为:提取温度为55℃,料液比1∶20,提取时间为2 h,提取3次。[结论]按此条件制备得到的低聚原花青素提取率达到2.30%。     

思茅松嫩枝扦插繁殖技术的研究

[目的]了解思茅松嫩枝扦插繁殖技术。[方法]采用不同育苗方式、外源激素和扦插时间进行思茅嫩枝扦插,统计生根率。[结果]采用地床扦插穗条的生根率比采用营养袋扦插穗条的生根率高;激素以ABT11000mg/L速蘸方式处理插穗的生根效果较理想,生根率为67.53%;思茅松扦插时间以10月～次年2月较好。[结论]不同育苗方式、外源激素和扦插时间的思茅嫩枝扦插生根率有差异,所以应选择合适的技术进行扦插繁殖。     

思茅松人工林研究现状与展望

综述了思茅松人工林在遗传改良、立地选择、整地、密度、病虫害控制、林地地力维护等方面的研究现状与成效,并针对思茅松人工林生产率和生态方面存在的问题,提出了思茅松人工林经营的目标和方向。     

NaCl胁迫对思茅松幼苗生长的影响

[目的]以思茅松幼苗为研究对象,研究NaCl胁迫对其种子发芽和幼苗生长的影响。[方法]分别用25、50、100、200、300 mmol/L的NaCl处理种子,分析各处理下思茅松种子发芽情况,幼苗生长情况以及对4种生理生化指标的影响。[结果]在100 mmol/L盐分范围内,幼苗能正常生长,发芽率与发芽势与对照无显著差异。在100 mmol浓度下,幼苗的SOD酶含量最大。200 mmol/L浓度时,思茅松幼苗的发芽率、发芽势降低,植物的可溶性糖、叶绿素总量最大。300 mmol/L,幼苗不能正常生长,出苗死亡率高,畸形苗多。幼苗体内的MDA含量随着盐胁迫浓度的增加而增加。[结论]思茅松幼苗在100 mmol/L以内的盐分范围内能正常生长。     

思茅松针叶束水培生根的研究

以思茅松不同年龄母树的针叶束为繁殖材料,通过不同预处理、激素处理及不同水培营养液的3因素4水平正交试验,研究不同处理对思茅松针叶束水培生根的影响.结果表明,影响2年生3、年生母树针叶束水培生根率的主导因素是营养液,影响4年生母树针叶束水培生根率的主导因素是预处理;思茅松针叶束的生根率、生根速度具有随着母树年龄的增加而下降的趋势;本试验中以3年生母树针叶束的生根率最高,最佳营养液是9号液(75mg/kgH3BO4,20mg/kgNH4NO3,20mg/kg维生素B1)     

思茅松遗传改良研究现状及育种策略的探讨

总结了思茅松在种源试验、引种及种子园技术研究等遗传改良方面的研究现状，提出了今后的遗传改良策略：进行种源试验、优树补选和基因资源的收集；进行无性繁殖技术的研究，逐步推行无性系育种；加强现有种子园的花粉管理；高世代种子园的营建和母树林的改建；开展杂交育种工作研究；积极探讨和应用现代生物技术，如胚培养技术等．