地衣芽孢杆菌发酵条件优化和抑菌活性测定

【目的】探究不同培养及发酵条件对地衣芽孢杆菌19148抑菌作用的影响及地衣芽孢杆菌19148的耐药性。【方法】设计单因素试验,分别在不同温度、酸碱度、金属离子、摇床转速、发酵时间和接种量的条件下培养地衣芽孢杆菌19148菌液,将培养后的菌液离心、过滤制成无菌滤液,并通过牛津杯抑菌试验探究无菌滤液对大肠杆菌K88、鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌1882的抑制能力。通过药敏纸片法探究地衣芽孢杆菌19148对27种抗菌药的耐药性。【结果】地衣芽孢杆菌19148在4和75 ℃下生长受到抑制,25、37和45 ℃能正常生长,其中在37 ℃抑菌活性最好。在pH 5.0~9.0的条件下能正常生长,在pH为6.0条件下抑菌活性最好,对铜离子不耐受,但对镁离子表现出了良好的耐受性,且不同浓度镁离子处理组间抑菌活性无显著差异（P＞0.05）。体外发酵试验中,地衣芽孢杆菌19148在3%种子液接种量、150 r/min发酵28 h时,体外发酵的抑菌活性最好。耐药性评价试验结果显示,地衣芽孢杆菌19148对青霉素、四环素、头孢他啶、呋喃唑酮和多黏菌素B 5种抗菌药中介,对头孢哌酮和红霉素等其他22种抗菌药敏感。【结论】地衣芽孢杆菌19148具有较好的稳定性,能应用于工业发酵饲料生产,对抗菌药不具有耐药性。     

5株解淀粉芽孢杆菌的益生特性及抑菌活性研究

【目的】探究5株自筛解淀粉芽孢杆菌(YN-BA1、YN-BA2、YN-BA3、YN-BA4、YN-BA5)的生长曲线、pH和胆盐耐受性、抑菌活性和抗生素敏感性等特性,为将其开发成微生态制剂应用于养殖中提供理论依据。【方法】采用比浊法测定解淀粉芽孢杆菌生长曲线,将5株解淀粉芽孢杆菌分别接种于经盐酸配制成pH为2.0、3.0、4.0和7.0的LB肉汤中培养2 h和0.3%胆盐环境中培养5 h,以评价其在人工胃肠液中的耐受性;采用琼脂打孔法测定体外抑菌活性,采用KB纸片法测定抗生素敏感性。【结果】5株解淀粉芽孢杆菌在经过0～2 h的缓慢生长和6～8 h生长速度降低后,其生长量快速上升,进入对数生长期;36 h后生长量下降,进入衰退期。5株解淀粉芽孢杆菌均具有不同的耐酸、耐胆盐能力,其中YN-BA2菌株在pH 2.0、3.0、4.0存活率分别为42.10%、51.50%和74.67%,均高于另外4株菌;在0.3%胆盐处理5 h后,YN-BA2菌株存活率为51.00%,高于另外4株菌,表明YN-BA2菌株的耐受力最高。5株解淀粉芽孢杆菌对肠炎沙门氏菌(YN-S1、YN-S2)、鸡白痢沙门菌(YN...     

中草药及复方制剂对3种致病菌及枯草芽孢杆菌J-4的体外抑菌研究

采用牛津杯法、琼脂板扩散法和比浊法,测定10种中药、2种方剂及复配制剂对3种致病菌及枯草芽孢杆菌J-4的体外抑菌效果,并测定中药最低抑菌浓度(MIC)。结果显示,黄连、黄柏对大肠杆菌抑制作用较强,MIC均为7.8 mg/mL;石菖蒲对沙门菌抑制作用最强,抑菌圈达16.53 mm,MIC为125 mg/mL;对痢疾杆菌,各单味中药抑制作用均较弱。太无神术散抑菌作用强于二妙丸,但均弱于复配制剂,对3种致病菌的MIC分别为3.9 mg/mL,7.8 mg/mL,7.8 mg/mL。黄连、生姜对J-4均表现为抑制作用,2%太无神术散对J-4增殖作用最明显,其他各药对J-4增殖作用因药物浓度不同而不同。     

一株解淀粉芽孢杆菌的特性及抑菌活性研究

试验旨在对一株牛瘤胃源解淀粉芽孢杆菌的生长曲线、耐酸性和耐胆酸盐性等特性进行分析,同时对该菌发酵产物的抑菌活性和抑菌活性稳定性进行测定。采用生长速率法测定该菌生长曲线,活菌计数法测定耐酸性和耐胆酸盐性等特性,牛津杯法测定抑菌活性和抑菌活性稳定性。结果显示,该菌生长4 h时进入对数生长期,20 h后生长趋于稳定,进入生长稳定期;同时该菌表现出较好的耐酸性,在pH 3.0~7.0时存活率为23.8%~90.6%;有较好的耐胆酸盐性,在0.1%~0.4%的胆酸盐中存活率为64.2%~83.6%。以大肠杆菌（Escherichia coli）、副溶血弧菌（Vibrio parahemolyticus）、藤黄八叠球菌（Sarcina lutea）和产气杆菌（Aerogenes）等细菌和黑曲霉（Aspergillus niger）、黑根霉（Rhizopus nigricans）等霉菌作指示菌进行抑菌试验发现,该菌的发酵产物具有抑菌活性,同时其抑菌活性物质的耐热性和耐酸性较好。本试验通过对该解淀粉芽孢杆菌的特性进行研究发现,该菌具有耐酸、耐胆酸盐等特性;其抑菌活性及抑菌稳定性较好,具有耐酸碱及耐高温特性。     

中药复方对猪大肠杆菌的体外抑菌活性探究

本文探究中药复方对猪大肠杆菌体外抑菌活性,选择常用5种中药复方展开体外抑制猪大肠杆菌活性试验,对比5种中药复方体外抑制猪大肠杆菌活性效果。综合来看,复方1与复方2具有良好的抑菌性与杀菌性,抑菌浓度均达到15.63 mg/mL,其余3种复方抑菌效果并不显著,但有着相对较高的抑菌浓度与杀菌浓度;同时复方1为中敏,平均抑菌圈范围最大,因此,复方1抑制体外猪大肠杆菌活性效果最佳。5组中药复方对体外抑制猪大肠杆菌活性都有一定作用,但综合对比来看其中以黄连、白术、赤石脂、黄柏、防风复方效果最为突出,抑菌强度高、抑菌范围广,建议广泛推广。     

短小芽孢杆菌B102的分离鉴定、抑菌活性及安全性试验研究

试验旨在研究短小芽孢杆菌B102的分离鉴定、抑菌活性剂及安全性.在细菌分离培养过程中,发现1种具有抑菌活性的革兰氏阳性芽孢杆菌,命名为B102菌株.在此基础上,提取B102菌体基因组DNA,进行16S rRNA PCR扩增、测序,进行序列同源性比较,建立遗传发育树.应用常规的牛津杯法、平皿药敏试纸片扩散法、小鼠饲喂试验...     

地衣芽孢杆菌的分离鉴定及其抑菌活性分析

为了研究不同来源的地衣芽孢杆菌对常见致病菌的抑菌效果等生物学特性,试验采用细菌形态学、生理生化、16S rRNA基因测序、系统发育树分析、牛津杯抑菌试验等检测技术,对5株不同来源(鸡粪、羊粪、牛瘤胃内容物、猪肠内容物及土壤)的地衣芽孢杆菌进行了分离鉴定及体外抑菌活性检测。结果表明：5株分离株B₁₇(鸡粪)、B₃₀(羊粪)、B₃₂(牛瘤胃内容物)、B₃₅(猪肠内容物)和B₃₈(土壤)均可在LB固体培养基上生长,其中有3株不同来源的分离株B₃₀、B₃₅和B₃₈菌落形态相同;镜检可见分离株均为革兰氏阳性杆菌、均有近中生的孢子,符合芽孢杆菌的菌体特征;生理生化特性与芽孢杆菌相符;PCR扩增均得到约为1 500 bp的目的片段;所有分离株与GenBank中的地衣芽孢杆菌在同一簇,均鉴定为地衣芽孢杆菌;在5株地衣芽孢杆菌中,除猪源地衣芽孢杆菌B₃₅外,其余4株均有抑菌作用,羊源及牛源地衣芽孢杆菌B     

枯草芽孢杆菌发酵培养基及发酵条件优化

本文对枯草芽孢杆菌的发酵培养基和发酵条件进行了筛选优化。采用单因素试验和正交试验方法,确定该枯草芽孢杆菌的优化培养基为:豆粕40 g/L、玉米粉20 g/L、葡萄糖15 g/L、磷酸氢二钾3 g/L、磷酸二氢钾1.5g/L、硫酸镁0.5g/L、硫酸铵0.35g/L、酵母浸粉0.2g/L、硫酸锰0.2g/L、硫酸亚铁0.1g/L、碳酸钙0.1g/L。最适发酵条件为:初始pH7.2,接种量5%,发酵温度35℃,摇床转速250 r/min。     

凝结芽孢杆菌抑菌特性的研究进展

凝结芽孢杆菌是近几年来我国开始逐渐研究的新型微生态制剂。相比于乳酸菌等益生菌,其不仅拥有与之类似的保健功效,同时拥有良好的耐高温,耐酸,耐胆盐等高抗逆性,并且对肠道致病菌有较佳的抑制力。本文主要针对凝结芽孢杆菌的抑菌特性、抑菌机制和应用状况进行了综述。     

枯草芽孢杆菌B43对香蕉枯萎病菌抑菌活性及其活性成分分析

为明确拮抗菌枯草芽孢杆菌B43菌株拮抗香蕉枯萎病菌4号小种(Fusarium oxysporum f.sp. cubense race 4,FOC-4)的能力及其抑菌活性物质的性质,本研究采用平板对峙法进行抑菌谱试验;酸沉淀、有机溶剂萃取法提取B43菌株中的抑菌活性物质并作稳定性测定;根据脂肽类抗生素合成相关基因序列对B43基因组进行PCR扩增检测,运用LC-MS对粗提物作成分分析。结果表明,B43菌株对21种植物病原真菌均有较好的抑菌活性;酸沉淀法粗提物具有较好的耐热及耐紫外线特性,但不耐强酸强碱;通过特异性引物PCR检测,B43菌株基因组中含有srfAB、ituA、ituB、ituD、fenD、yndJ、sfp、mycB、lpa-14或fenB等脂肽类合成相关基因;LC-MS分析发现粗提物中含有Surfactin、Iturin、Mycosubtilin、Bacillomycin和Fengycin 5类脂肽类抗生素的同系物24种。枯草芽孢杆菌B43菌株抑菌谱广,其发酵液酸沉淀粗提物对FOC-4具有良好的抑菌活性以及较好的稳定性,本研究不仅检测推断出粗提物中含有多种脂肽类抗生素及其同系物,且于菌株基因组中扩增出多种脂肽抗生素基因,说明该菌株可能能够产生多种脂肽类抗生素。B43菌株与已报道的多数拮抗FOC-4的芽孢杆菌菌株相比,效果好、活性物质种类更多,因此具有良好的生物农药开发应用前景。     

纳豆芽孢杆菌的液体发酵条件研究

试验采用PB液体培养基测定纳豆芽孢杆菌生长曲线,确定了最佳接种时间为14h。对碳源和氮源分别采用单因子试验,对无机盐和培养条件分别采用L9(34)正交试验,筛出最佳液体发酵培养基配方为:葡萄糖2g/L、豆饼粉20g/L、氯化猛0.1g/L、磷酸氢二钾2g/L、磷酸二氢钾1g/L、硫酸镁1g/L;发酵温度33℃,初始pH值8.0,接种量为7%,250mL三角瓶的装量为40mL,芽孢数量为19.5亿/mL。     

瘤胃源枯草芽孢杆菌BX1-12的筛选鉴定及其产酶抑菌活性

本试验通过筛选瘤胃环境中具产酶抑菌活性的芽孢杆菌,为开发功能型饲用微生态制剂奠定基础。采用可培养的方法从健康高产奶牛瘤胃液中分离芽孢杆菌,并测定其产酶能力及抑菌活性,同时对筛选到的功能菌株进行生理生化和分子生物学鉴定。结果显示：从健康高产奶牛瘤胃液中筛选出一株芽孢杆菌BX1-12,其产纤维素酶、蛋白酶及α-淀粉酶活力分别为27.33、137.54 U/mL和1450.53 U/100 m L,同时该菌具广谱抑菌效果,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和伤寒沙门氏菌的抑菌圈直径分别为13.62、23.21 mm和25.97 mm。结合Biolog生理生化实验及16S rRNA序列分析,鉴定该菌为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。综上,从健康高产奶牛瘤胃液中分离得到的这株枯草芽孢杆菌BX1-12,具有产多种酶活及广谱抑菌的能力,是一株良好的用于奶牛微生态制剂的候选菌株。     

凝结芽孢杆菌NJh032产酶抑菌活性及其发酵产品性能探究

试验对猪肠道中分离出的一株产乳酸的芽孢杆菌进行形态、生理生化鉴定,研究该菌株的产酶抑菌活性,进行该菌粉剂体外耐高温、耐酸耐胆盐分析,药敏性和副溶血症试验.结果 显示,该菌株经鉴定为凝结芽孢杆菌,被命名为凝结芽孢杆菌NJh032.产酶抑菌试验结果表明,其对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠...     

两种益生芽孢杆菌体外抑菌活性及其耐药性研究

试验分别采用牛津杯法和微量肉汤稀释法进行益生芽孢杆菌体外抑菌活性及耐药性研究,结果显示,枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌对大肠埃希菌C83901、C83917和沙门菌有中、低度抑制作用;对抗敌素、硫酸黏菌素、喹乙醇有一定耐药性．而吉他霉素和硫酸新霉素对这2种杆菌抑制作用较强,不宜联用。     

枯草芽孢杆菌抑菌成分研究进展

枯草芽孢杆菌因其分布广泛和对环境无公害,在农业、工业、医药卫生等行业有着广泛的应用。近年来,国内外对枯草芽孢杆菌进行了探索,其菌体在新型抑菌生物制剂中有所应用,但以其分泌的抑菌成分作为原材料的抑菌制剂目前还处在理论阶段。本文主要从四方面对枯草芽孢杆菌抑菌成分进行综述,分别为抑菌成分的分类、抑菌机制、未来可能的应用和提取方法的优化。同时,为了使枯草芽孢杆菌抑菌成分能广泛应用于食品防腐技术、食品杀菌技术等多个方面,生产大剂量、高纯度的抑菌成分成为亟待解决的问题,这需要进一步提高抑菌成分的纯度与产量的相关研究。最后,为枯草芽孢杆菌抑菌成分的未来探索提供了可行的方向。     

鸡芽孢杆菌的分离、鉴定及体外抑菌研究

试验从鸡的粪便中分离到8株芽孢杆菌，经过生化试验初步结果为：A1、A2、A3和A7为巨大芽孢杆菌，A4为地衣芽孢杆菌，A5、A6和A8为蜡样芽孢杆菌。采用牛津杯法测定这8株芽孢杆菌的发酵液、代谢产物和菌体对病原菌的抑菌活力，结果表明：这8株芽孢杆菌对大肠杆菌和葡萄球菌都有一定的抑制作用，其中A2、A4和A6抑菌效果较好。这8株芽孢杆菌发酵液的抑菌效果要比代谢产物要好，而其代谢产物的抑菌效果要比菌体要好。     

凝结芽孢杆菌芽孢高产固体发酵的研究

为研究凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）固体发酵大量生成芽孢的方法,就固体发酵的不同底物（麦麸、糠粉、玉米粉和谷草粉）、湿度、初始pH值和添加物质（碳源、氮源和盐类）等因子进行单因素试验,探索芽孢形成的最佳的培养条件;其次采用正交设计法对固体发酵培养基优化.结果表明底物的理化性质对固体发酵生产芽孢影响明显,其中以麦麸为底物进行固体发酵时,促进芽孢形成的能力最强.在以麦麸为底物,温度37℃,湿度为60％,初始pH7.5,添加外源物质为葡萄糖1.00％、蛋白胨2.00％,KH2PO40.50％,MnSO40.05％所形成的固体培养条件下进行48 h的发酵,芽孢生成进一步提高,优化验证试验结果表明凝结芽孢杆菌的芽孢产量可以达3.80×1010个/克以上,明显高于对照组2.98×109个/克.     

一株解淀粉芽孢杆菌的益生特性及抑菌性研究

本试验旨在研究自筛解淀粉芽孢杆菌DHN04的生长曲线、人工胃肠液、pH及猪胆盐耐受性,并研究其抑菌特性及抗生素敏感性。试验采用生长速率法测定该菌生长曲线,活菌计数法测定人工胃肠液耐受性、耐酸性和耐胆盐等特性,牛津杯法测定抑菌活性,药敏试片测定抗生素敏感性。结果表明,解淀粉芽孢杆菌DHN04在经过4~6 h的缓慢生长期后,进入对数生长期,12~24 h为该菌的稳定生长期;在人工胃液和人工肠液中保持3 h后存活率分别为55.55%和53.33%;pH 2.0时该菌存活率为14.14%,随着酸性的减弱,存活率逐渐上升,在pH 7.0时存活率可以达到93.85%;随着胆盐浓度增加,解淀粉芽孢杆菌的存活率逐渐下降,相同的胆盐浓度,24 h的存活率低于3 h。解淀粉芽孢杆菌对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌及四联球菌均具有一定的抑制作用;对抗生素阿莫西林耐药。综上,解淀粉芽孢杆菌能够快速活化,对人工胃肠液、胆盐及pH的耐受性良好,对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌等具有一定的抑制作用,对阿莫西林耐药。因此,解淀粉芽孢杆菌DHN04可作为一种潜在的益生菌菌株应用于畜禽养殖生产。