金耳菌丝体液体深层发酵和多糖提取研究

[目的]研究金耳菌丝体液体深层发酵的最佳培养条件及其多糖提取工艺。[方法]通过培养基筛选和培养条件优化确定了金耳菌丝体液体深层发酵的最佳培养条件,通过比较分析研究了碱提取法和热水浸提法对金耳多糖的提取效果。[结果]以玉米粉、麸皮和红薯粉作碳源时,金耳菌丝体产量分别为19．1、13．2和10．9g／L。当玉米粉的添加量为1％、2％、3％、4％、5％时,金耳菌丝体产量分别为8．6、17．1、19．5、15．4和7．2g/L。以蛋白胨、酵母膏、尿素和硫酸铵作氮源时,金耳菌丝体产量分别为18．9、10．3、6．7和5．2g/L。当蛋白胨的添加量为0．2％、0．4％、0．6％、0．8％、1．0％时,金耳菌丝体产量分别为10．1、15．7、23．0、20．3和18．7g/L。碱提取法提取的粗多糖和多糖分别比热水浸提法的提高了6．9％和36．4％。[结论]该试验为金耳菌丝体的生产及其多糖的提取提供了技术支持。     

发酵苹果渣多糖分离纯化、结构及其与加工特性的关系

【目的】在研究发酵苹果渣多糖分离纯化动态趋势的基础上,对其结构特性进行深入研究,进一步探究发酵苹果渣多糖分离纯化、活性及加工特性。【方法】以苹果原渣多糖(apple pomace polysaccharides,AP)、苹果酒渣多糖(wine fermented apple pomace polysaccharides,WFP)、苹果醋渣多糖(vinegar fermented apple pomace polysaccharides,VFP)为原料,对其含量进行分析,利用发酵苹果渣多糖不同组分间极性差异,采用DEAE-52纤维素,以Na Cl溶液进行梯度洗脱,部分收集器进行逐管收集,苯酚硫酸法测定吸光值,制作洗脱曲线;同时,对DEAE-52纤维素层析所得组分利用去离子水经Sephadex G-200凝胶柱,根据一定分子量截留的特点进行进一步分离纯化,测定所得组分纯度后,对不同组分进行结构表征,主要包括X衍射仪(XRD)观察晶体结构、热重分析仪进行热重分析(TG)、激光粒度仪对溶液粒度进行分析(LPSA)、同时通过刚果红试验探究其是否具有三螺旋结构,运用台式扫面电镜进行微观结构分析。【结果】粗多糖含量达到70%左右,同时不含蛋白质、核酸,提取效率较高;AP在0.1和0.2 mol·L-1 Na Cl洗脱液浓度下经DEAE-52纤维素层析、Sephadex G-200凝胶层析可得NAP0.1、NAP0.2;WFP在0.0、0.1和0.2 mol·L-1 Na Cl浓度洗脱下可得NWFP0、NWFP0.1、NWFP0.2,VFP可得NVFP0、NVFP0.1、NVFP0.2,以上所得成分含量均达到92%以上,分离纯化效果良好;3种多糖分离纯化前后皆为非晶态物质,呈无定型结构;多糖溶液浓缩过程温度应低于65℃,在加工中应注意控制温度在150℃以内;分离纯化前,3种多糖都存在三螺旋结构,分离纯化后,组分NWFP0、NVFP0、NVFP0.1出现了三螺旋结构,AP经分离纯化无三螺旋结构成分出现;苹果渣多糖在分离纯化后更加稳定,粒径差异更小,主要表现在经分离纯化后多糖的粒径分散系数更小;分离纯化导致片状结构变小,交联作用减弱,能更好发挥其生物活性。【结论】发酵苹果渣多糖含量达70%,经分离纯化后的含量与AP均可达92%;由XRD、TG、LPSA、刚果红、微观结构等方面得出其在溶解度、黏度、物理性质等方面的改变有利于更好发挥生物活性,同时获得更好的加工特性。     

青钱柳多糖组分及其降血糖活性研究

采用超声波萃取法，从胡桃科植物青钱柳中提取一种具有降血糖活性的多糖复合物，提取物得率为9．6％，用四氧嘧啶糖尿病小鼠模型验证了青钱柳多糖的生物活性，ig青钱柳提取物4周后，小鼠血糖值比糖尿病模型组降低了41．3％，葡萄糖耐量实验表明；青钱柳多糖能增强糖尿病小鼠对葡萄糖的耐受力。     

鲍鱼内脏多糖分离纯化与抗氧化活性评价

[目的]分离纯化鲍鱼内脏多糖(Abalone viscera polysaccharide,AVP),并评价其抗氧化活性,为AVP的高值化利用提供参考依据.[方法]以鲍鱼内脏为原料,采用酶法提取并初步纯化出AVP,测定其DPPH自由基清除率、羟自由基(OH自由基)清除率和还原力3个抗氧化指标,评价AVP抗氧化能力;同时用葡聚糖凝胶G-100柱层析分离AVP,并对分离出的组分进行抗氧化能力比较.[结果]AVP质量浓度在1~10 mg/mL时,DPPH自由基清除率线性方程为y=9.715x+1.0182(R2=0.9958),半抑制浓度(IC50)为5.04 mg/mL;OH自由基清除率线性方程为y=6.2778x-8.5275(R2=0.9603),IC50为9.32 mg/mL;还原力线性方程为y=0.0782x+0.0045(R2=0.9989),A700,0.2为2.50 mg/mL.AVP具有一定的抗氧化能力,但与抗坏血酸(Vc)相比,其抗氧化能力较弱.AVP经葡聚糖凝胶G-100柱层析可分离出两个组分(AVP1和AVP2),AVP1和AVP2均具有一定的抗氧化活性,且AVP1抗氧化能力强于AVP2.[结论]通过葡聚糖凝胶柱层析可从AVP中有效分离出AVP1和AVP2两个组分,其中AVP1的抗氧化能力更强,在抗氧化添加剂及保健品等领域具有较好的开发利用前景.     

樟芝多糖的分离纯化和抗氧化活性

【研究目的】研究樟芝多糖分离纯化的方法以及其体外抗氧化活性,【研究方法】水浸提樟芝多糖,Sevag法除蛋白,利用sephadexG-200凝胶柱层析进行分离纯化,红外光谱、高效液相色谱测定结构和分子量,并进行樟芝多糖的体外抗氧化试验。【结果】樟芝菌丝体多糖ACP1和樟芝发酵液多糖ACP2多糖含量分别为31.76%和38.09%,提取率分别为1.59%和4.89%,特性粘度为[η]=8.382和[η]=1.999。红外光谱测定表明,ACP1、ACP2具有多糖的特征吸收,并且其糖环为吡喃环。ACP1、ACP2经高效液相色谱GPC柱分离得到三个峰,计算得各组分的数均分子量和重均分子量。利用sephadexG-200凝胶柱层析ACP1和ACP2后各得到2个洗脱主峰ACP1-1和ACP2-1。对ACP1-1和ACP2-1进行纯度鉴定,结果表明两者为均一多糖,超氧自由基的清除率分别达到61.6%和54.7%,【结论】樟芝多糖具有较强的抗氧化能力。     

金耳菌丝体多糖对高血糖小鼠血糖作用的研究

[目的]研究金耳菌丝体多糖对四氧嘧啶致高血糖模型小鼠血糖及糖耐量的调节作用。[方法]选用昆明种雌性小鼠,将以四氧嘧啶尾静脉注射诱导的高血糖小鼠随机分成4组,分别为低(50 mg/kg)、中(100 mg/kg)、高(150 mg/kg)剂量组和高血糖模型对照组,另设正常对照组。各剂量组连续灌胃金耳菌丝体多糖28 d后,研究金耳菌丝体多糖对高血糖小鼠血糖及糖耐量的影响。[结果]与模型组相比,各剂量组的体重显著提高(P0.05);高剂量组小鼠空腹血糖值明显降低15.4%(P0.05)。糖耐量测定中,与模型对照组相比,高剂量组灌胃葡萄糖0.5和2 h后血清血糖值分别降低了9.4%(P0.05)和12.8%(P0.05),血糖曲线下面积降低了10.3%(P0.05)。[结论]150 mg/kg剂量组的金耳菌丝体多糖降低高血糖小鼠血糖的作用并能增强糖尿病小鼠的葡萄糖耐受能力;50、100和150 mg/kg剂量组的金耳菌丝体多糖能够改善高血糖小鼠体重减轻症状。     

金耳类酵母型菌株分离与高产胞外多糖培养基优化

为获得纯金耳多糖,采用担孢子弹射法分离获得金耳类酵母型菌株(EF145),通过ITS序列测定对分离的菌株进行鉴定,测定金耳多糖的抗氧化性,通过正交试验优化高产胞外多糖培养基配方。结果显示：EF145菌株的菌体呈卵圆形,大小约为(2.5～4.0)μm×(2.0～4.0)μm,出芽增殖;菌落乳白色、表面凸起、光滑、湿润;其ITS序列与金耳子实体小条带一致,经Blast比对确定该菌株为金耳(Tremella aurantialba);该菌株多糖的羟自由基清除率为57.67%,超氧阴离子清除率为51.73%,DPPH自由基清除率为17.43%。EF145菌株培养的最佳碳源、氮源和无机盐分别是蔗糖、酒石酸铵和磷酸二氮钾,EF-145菌株产胞外多糖最佳培养基配方为蔗糖40 g·L^-1、酒石酸铵7.5 g·L^-1、磷酸二氢钾4 g·L^-1、土豆浸粉3 g·L^-1、维生素B₁ 0.2 g·L^-1。     

仙人掌多糖的降血糖作用

为观察仙人掌多糖的降血糖作用,依次往小鼠腹腔注射链脲佐菌素120,40mg,kg,建立糖尿病模型;然后,将小鼠随机分为3组,分别灌胃仙人掌多糖150,200,250mg／kg,并测定其各项生理指标．结果表明,仙人掌多糖能明显改善糖尿病小鼠多饮、多食、消瘦症状,具有降血糖作用．     

甘蔗叶多糖的分离纯化及其体外活性分析

以甘蔗叶为原料,采用机械力辅助超声法提取甘蔗叶粗多糖。经除蛋白、除色素、除小分子杂质等预处理后,用DEAE-52纤维素离子柱及DEAE-琼脂糖凝胶FF离子柱对甘蔗叶粗多糖进行分离纯化,得到SCLP-1和SCLP-5两种甘蔗叶纯多糖,并对其红外吸收特征、抑菌性能和抗氧化性能进行进一步研究。结果表明：甘蔗叶粗多糖提取率为1.8%,除蛋白率为39.8%,除蛋白过程多糖保留率为58.6%,除色素率为67.9%;除色素过程的多糖保留率为60.2%,除小分子杂质过程的多糖保留率为96.8%。红外光谱扫描结果显示, SCLP-1和SCLP-5这两种甘蔗叶纯多糖均具有多糖特征吸收峰;抗氧化试验结果显示,SCLP-5的抗氧化能力略高于SCLP-1的抗氧化性但均低于V_C;抑菌试验结果显示,两种纯化组分对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有良好的抑制作用,且对大肠杆菌的抑制效果优于金黄色葡萄球菌。     

金耳高级营养保健饮料的研究——Ⅰ金耳的深层发酵条件

本研究以豆饼粉、白沙糖和玉米淀粉为主要原料,选择珍贵的食药兼用金耳菌[Tremellaaurantia Schw.ex Fr]为菌种进行发酵,利用发酵液开发了一种新型高级营养保健饮料.研究表明:以接种量10%,恒温25±1C,罐压0.5kg/cm~2,通气1:0.7,搅拌110～120rpm,发酵54h为最佳发酵条件,在该条件下发酵,即可得到具有苹果香味和蜂蜜味的金黄色发酵液.     

灰树花多糖的分离、纯化与理化性质

灰树花子实体用热水提取，乙醇沉淀，透析冻干得灰树花多糖粗品，再经Sevag法脱蛋白，DEAE－Sephadex A-25柱层析纯化得到4种多糖分别为PGF－1，PGF－2，PGF－3和PGF－4。4种多糖经纸层析，Sephadex G-200柱层析及聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。结果表明都为单一均匀组分：PGF－1经纸层及气相色谱分析证实它是一种葡萄糖；凝胶渗透色谱测定其分子量为11万。红外光谱揭示PGF－1含β－型糖苷键。     

金耳原生质体制备与再生研究(英文)

[目的]对金耳原生质体制备与再生体系进行研究。[方法]采用正交试验法筛选金耳原生质体制备和再生体系中酶体系、菌龄、温度、时间、渗稳剂的最佳用法。[结果]金耳原生质体的释放方式有三种类型:酶解初期的顶端释放、侧位释放和后期的原位释放。其最佳制备条件为:液体静置培养3d的菌丝体,在1%纤维素酶+1%蜗牛酶+1%溶壁酶的混合酶液中,以0.6mol/L蔗糖为渗稳剂,36℃酶解4h,得到原生质体制备率达1.76×107个/ml;最佳再生条件为:液体静置培养5d的菌丝体,在1.5%溶壁酶的酶液中,以0.6mol/L蔗糖为渗稳剂,33℃酶解3h,得到原生质体再生率达0.22%。[结论]为金耳的原生质体融合、紫外线诱变育种、基因工程研究等提供了有益支持。     

金耳原生质体制备与再生研究

[目的]对金耳原生质体制备与再生体系进行研究。[方法]采用正交试验法筛选金耳原生质体制备和再生体系中酶体系、菌龄、温度、时间、渗稳剂的最佳用法。[结果]金耳原生质体的释放方式有3种类型:酶解初期的顶端释放、侧位释放和后期的原位释放。其最佳制备条件为:液体静置培养3 d的菌丝体,在1%纤维素酶+1%蜗牛酶+1%溶壁酶的混合酶液中,以0.6 mol/L蔗糖为渗稳剂,36℃酶解4 h,得到原生质体制备率达1.76×107个/ml;最佳再生条件为:液体静置培养5 d的菌丝体,在1.5%溶壁酶的酶液中,以0.6mol/L蔗糖为渗稳剂,33℃酶解3 h,得到原生质体再生率达0.22%。[结论]为金耳的原生质体融合、紫外线诱变育种、基因工程研究等提供了有益支持。     

白术多糖的提取、纯化和活性研究

[目的]提取和纯化白术多糖,并探讨多糖中蛋白对小鼠脾淋巴细胞转化的影响。[方法]采用醇沉分级、脱蛋白和Sephadex G-75制备柱从中药白术中提取分离得到cPAM、zPAM和PAM 3种多糖,并对这3种多糖进行体外淋巴细胞转化试验。[结果]3种白术多糖对ConA诱导的T淋巴细胞增殖均有促进作用;浓度为5μg/ml的zPAM对小鼠脾淋巴细胞增殖有明显的促进作用;浓度为5和10μg/ml的PAM对小鼠脾淋巴细胞增殖有明显的促进作用。[结论]白术多糖的纯化程度与脾淋巴细胞增殖有一定关系;纯化程度高的多糖对小鼠脾淋巴细胞的增殖有促进作用;白术粗多糖中的蛋白对小鼠脾淋巴细胞的增殖没有影响。     

山药多糖提取分离纯化及生物活性的研究进展

山药多糖(Rhizoma dioscorea polysaccharide,RDP)的提取、分离纯化及生物活性等对山药多糖的深度研发具有重要意义。本文通过查阅国内外近年来有关山药多糖的提取、分离纯化及生物活性研究进行分析和总结,结果表明,山药多糖的提取方法有热水浸提法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法、酶法、超声波-酶辅助提取法;含量测定方法有苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法、紫外分光光度法、高效液相色谱法(HPLC);分离纯化方法有离子交换树脂法、凝胶过滤柱色谱法。不同提取和分离纯化方法之间存有利弊,建议科研工作者对自身研究的目的、条件及研究结果对其合理选择;RDP的生物活性研究虽已取得一定进展,但更多局限于RDP粗提物,对于开发更多符合临床需求的药物制剂及相关保健产品有待进一步深入研究。     

虎奶菇菌核多糖对四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠的降血糖作用

通过腹腔注射四氧嘧啶建立小鼠糖尿病(DM)模型, 分别用虎奶菇菌核水提多糖(W-HNP)、碱提多糖(A-HNP)按每千克体质量200和100 mg灌胃给药,阳性对照用盐酸二甲双胍片(MH)按每千克体质量500 mg灌胃给药,连续15 d后,分别测定空腹12 h后血糖,并对小鼠血清进行乳酸脱氢酶(LDH)同工酶电泳.试验结果显示:与DM对照组相比,W-HNP、A-HNP处理组的小鼠血糖分别降低了(34.499±9.345)%、(46.820±7.032)%(P＜0.01),且不影响正常小鼠血糖;同时,多糖可改善DM小鼠的饮水、摄食和体质量,提高DM小鼠的胸腺、脾指数;DM对照组血清的LDH4、LDH5的活性比正常组高,W-HNP、A-HNP处理组的LDH4、LDH5活性比DM对照组低.     

基于模糊数学法综合评价金耳石斛保健饮料的制备工艺

[目的]研究金耳石斛保健饮料的最优工艺配方。[方法]采用模糊数学原理建立系统评价方法,以感官评定为指标,获得最佳工艺配方。[结果]通过试验确定的回归方程,经检验分析显著,得出最佳工艺配方为干金耳40 g、鲜石斛50 g、白砂糖119.07 g。[结论]基于模糊数学原理建立的评价方法对金耳石斛保健饮料工艺配方的优化是可行的,试验结果与预测结果基本接近,表明该优选配方具有合理性和可信性,同时该方法也为保健饮料的开发提供了有效、科学的感官评价依据。