甘薯绿原酸的提取及抑菌作用

研究甘薯不同器官绿原酸的提取及其提取液的抑菌作用.采用酸乙醇回流法从甘薯藤、叶和块根中提取绿原酸,紫外分光光度法测定其含量;用甘薯各器官的绿原酸提取液分别对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌进行抑菌试验.结果表明,甘薯叶和藤提取液中绿原酸含量较多;甘薯各器官绿原酸提取液对金黄色葡萄球菌的抑制效果比对大肠杆菌的抑制效果明显.得出甘薯各器官绿原酸提取液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑制作用的结论.     

地皮菜中多糖的抑菌特性研究

用超声波细胞破碎机对野生地皮菜破碎后,利用石油醚脱脂及乙醇提取其中的多糖并纯化,利用滤纸片法测定其含量,并检测提取多糖对一些致病菌的抑菌特性。结果表明,地皮菜中多糖含量可达8.5%,对大肠杆菌、炭疽杆菌及金黄色葡萄球菌有不同程度的抑制作用,且抑菌作用随着多糖浓度的增大而增强。     

牛脂肪间充质干细胞对金黄色葡萄球菌生长的影响

为探讨成体奶牛脂肪来源的间充质干细胞(bAD-MSCs)对奶牛乳腺炎来源的金黄色葡萄球菌生长的影响,首先分离纯化来自奶牛乳腺炎病例中的金黄色葡萄球菌,并通过比浊法测定其在细胞用培养基中的生长曲线,进一步通过将金黄色葡萄球菌与奶牛脂肪间充质干细胞共培养及体外平板计数法来探讨奶牛脂肪间充质干细胞对金黄色葡萄球菌体外增殖的作...     

食品中金黄色葡萄球菌的快速检测及其评估

[目的]分析食品样品中金黄色葡萄球菌的含量,评估金黄色葡萄球菌快检试剂盒的可操作性和准确性.[方法]分别购买市售苹果脆片和真空包装水果玉米,采用国标GB 4789.10-2006和快检试剂盒测定其金黄色葡萄球菌含量,并以金黄色葡萄球菌为目标菌,采用人工污染样品,根据《食品快速检测方法评价技术规范》评估其快检试剂盒的相关...     

不同方法对金黄色葡萄球菌基因组DNA提取效果的比较

分别采用酶解法、CTAB法、SDS法、CTAB/NaCl法等4种方法提取金黄色葡萄球菌基因组DNA,并进行比较改良。结果表明,SDS法提取的DNA含量最高;当金黄色葡萄球菌的DNA质量稀释至1.975×10-4pg时,SDS法提取的DNA仍能用于PCR扩增;此外,该方法稳定性好、经济性高,是理想的金黄色葡萄球菌基因组DNA提取方法。     

‘苦水玫瑰’花色苷的提纯及其抑菌活性

【目的】探讨‘苦水玫瑰’花色苷最佳提纯工艺参数及对几种常见致病菌的抑菌效果.【方法】采用有机溶剂浸提法,在单因素试验基础上,运用Box-Behnken响应面分析优化‘苦水玫瑰’花色苷最佳提取工艺条件,经D-101型大孔树脂的动态纯化工艺后,确定最佳纯化工艺参数,测定其纯度,并进一步运用滤纸片法探究其抑菌效果.【结果】‘苦水玫瑰’花色苷最优提取工艺条件:提取液pH=1.05、乙醇浓度81.5%、提取时间45min、料液比1∶90(g/mL),提取2次,提取率4.27 mg/g.最佳动态吸附条件:上样液pH=2,吸附流速1 mL/min,上样液浓度0.15mg/mL,吸附率76.25%,95%酸性乙醇将花色苷全部洗脱.纯化后的花色苷对大肠杆菌和沙门氏菌抑菌效果不明显,对金黄色葡萄球菌抑菌明显,其抑菌圈直径为(6.35～10.12)±0.05 mm,最低抑菌浓度为1 mg/mL.【结论】利用响应面法确定最佳提取工艺条件合理,可用于‘苦水玫瑰’花色苷的提取.苦水玫瑰花色苷纯度由原来的5.862%提高到了23.97%,纯化效果显著,对金黄色葡萄球菌有明显抑菌效果.     

基因工程蛋白金葡菌α-溶血素的纯化及活性检测

【目的】分离纯化基因工程重组蛋白金黄色葡萄球菌溶血素(α-hemolysin,α-HL)并检测其生物学活性,为疫苗研发奠定基础。【方法】对含pET32a+-α-HL质粒的BL21(DE3)进行诱导表达,诱导成功后,将重组菌BL21(DE3)培养物用超声波裂解,并用凝胶过滤层析法对该基因工程蛋白进行分离纯化,用Bradford法及兔红细胞分别测定纯化产物的蛋白含量和溶血比活。【结果】纯化产物在SDS-PAGE电泳中53ku处呈现出单一清晰带,达电泳级纯度。纯化产物含量约为0.1277mg/mL,溶血比活为8192HU/mg。【结论】成功获得了金黄色葡萄球菌α-HL,且所获的α-HL具有良好的溶血活性。     

紫花地丁抗菌活性成分研究

采用超声波提取技术提取紫花地丁中的抗菌活性成分,通过抑菌试验进行活性部分追踪,运用化学方法进一步分离纯化其抗菌活性成分,并用紫外光谱分析和高效液相色谱法(HPLC)测定其纯度,最后用试管比浊法测定其抗菌活性。结果表明,分离纯化所得的化合物为黄酮类,纯度为97.50%;该化合物对沙门氏菌和乳房炎病原菌包括金黄色葡萄球菌、乳房链球菌、停乳链球菌、无乳链球菌及大肠杆菌的最低抑菌浓度分别为312,39,156,156,312及39μg/mL,最低杀菌浓度分别为625,312,312,312,625及312μg/mL。     

乌梅有机酸提取条件优化及其对生物膜形成的抑制作用

对乌梅总有机酸的提取条件进行优化并研究其对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)生物膜产生的抑制作用。通过单因素试验及正交试验对乌梅总有机酸提取条件进行了优化及验证,采用结晶紫染色法对金黄色葡萄球菌生物膜形成量进行了测定。结果表明,乌梅总有机酸最佳提取条件为乙醇70%(体积分数)、料液比3∶40(g∶mL)、超声提取时间1.5 h及超声提取温度50℃。在该条件下,乌梅总有机酸提取率为24.50%。提取物浓度为0.5MIC、MIC和2MIC时,对金黄色葡萄球菌生物膜形成的抑制率分别为13.06%、48.24%和74.01%。因此,该提取物对金黄色葡萄球菌生物膜的形成具有抑制作用。     

金黄色葡萄球菌基因组DNA提取方法的比较

为寻求一种较为实用的金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）基因组DNA提取方法,对酶解法、十二烷基硫酸钠（Sodium dodecyl sulfate,SDS）法、FDA法、热裂解法等常见的4种不同提取方法进行了改良和比较.结果表明,4种方法中,SDS法提取的DNA质量最好,检测灵敏度高,当金黄色葡萄球菌的DNA稀释至2.95 pg或更少时,SDS法还能够通过PCR将其检测出来;并且该方法的稳定性好,经济性高,是金黄色葡萄球菌基因组DNA理想的提取方法.     

培养条件对奶牛金葡菌5型荚膜多糖产量的影响（英文）

[Objective] The effect of different culture conditions on type 5 capsular polysaccharide production of Staphylococcus aureus from diary cattle was studied to provide simple way for CP production and preparation and laid foundation for carrying out new polysaccharide vaccine research.[Method] Staphylococcus aureus was isolated from milk sample of sick dairy cattle and capsular polysaccharide serotypes were identified.Type 5 capsular polysaccharide was cultured on BHI,solid columbia and mod110 culture media.Glucose and lactose were taken as carbon sources for every culture media in solid and liquid state.Therefore 9 different culture conditions were taken to study the effect of culture conditions on capsular polysaccharide production.[Result]Different culture conditions indicated that compared with columbia culture media,BHI culture media could decline capsular polysaccharide production and mod110 culture media could increase capsular polysaccharide production.While for same culture media,solid culture media was better for capsular polysaccharide production,meanwhile,taken lactose as carbon source could increase capsular polysaccharide production.     

培养条件对奶牛金葡菌5型荚膜多糖产量的影响

奶牛乳腺炎是奶牛生产上的重要疾病,不仅影响奶牛的产奶量、降低牛奶品质,而且严重威胁消费者健康,已成为制约奶牛业发展的主要原因之一。据国内外相关资料显示,50％以上的奶牛乳腺炎是由金葡菌（Staphylococcus aureus,S.aureus）所引起的。研究发现,94％～100％的从患乳腺炎奶牛乳汁中分离到的金葡菌菌株表面带有多糖物质构成的保护性荚膜荚膜具有11种血清型,     

培养条件对奶牛金葡菌5型荚膜多糖产量的影响

[目的]研究不同培养条件对牛源金葡菌5型荚膜多糖产量的影响,以便于CP5的生产制备,从而为开展奶牛金葡菌新型多糖疫苗的研究奠定基础。[方法]从患隐性乳腺炎奶牛乳样中分离金葡菌,鉴定荚膜多糖血清型,对5型荚膜多糖菌株,采用BHI,哥伦比亚固体培养基,mod110三种培养基,每种培养基分别采用固体培养,碳源为葡萄糖的液体培养和碳源为乳糖的液体培养三种方式,共组成9种不同培养条件进行培养,研究培养条件对金葡菌荚膜多糖产量的影响。[结果]不同培养结果表明,与常用哥伦比亚培养基比较,BHI培养基能降低荚膜多糖产量,而mod110培养基能提高荚膜多糖产量;同种培养基,固体培养方式比液体培养方式有更高的荚膜多糖产量,同时乳糖作为碳源可提高荚膜多糖产量。     

金黄色葡萄菌5型荚膜多糖偶联鞭毛蛋白疫苗对小鼠乳腺炎模型的保护作用

[目的]金黄色葡萄菌5型荚膜多糖(CP5)分别与鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白Flagellin、牛血清白蛋白(BSA)进行了偶联,并在小鼠模型上比较了这2种偶联疫苗所引起的体液免疫和粘膜免疫反应。[方法]以鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白为载体蛋白,与CP5进行化学偶联,并在小鼠乳腺部位免疫,然后通过检测小鼠乳汁中的抗体分析其对小鼠的免疫保护作用。[结果]乳腺局部免疫后flagellin-CP5组在乳腺部位引起了sIgA为代表的粘膜免疫反应和IgG为主的体液免疫反应。CP5和鞭毛蛋白的偶联物能够诱导更高的体液免疫以及粘膜免疫反应。[结论]鞭毛蛋白具有较强的免疫佐剂作用。     

松茸发酵物中活性成分的提取与作用的研究

采用松茸深层液体发酵生产,经丙酮乙醚萃取法提取其中抗癌的有效成分松茸多糖,并对其中活性成分松茸多糖进行了抑菌和抗癌试验.结果表明,该物质有明显的抑菌和抗癌作用,对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径最大为31 mm,对S-180、B16和肝癌细胞的抑制率分别为47.7%、75.4%和80.6% .     

香菇多糖抑菌作用的研究

为研究香菇多糖对细菌的抑制作用,采用分光光度法研究香菇多糖对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、沙门氏菌(Salmonella)的抑制作用,并探讨作用时间和pH值对其抗菌活性的影响,以确定最佳抑菌时间和pH值。结果表明,香菇多糖对四种菌的抑制作用由强到弱依次为金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌。对沙门氏菌的抑制作用在24h时达到最大,对其它3种菌均在12h时达到最大。pH值对抑菌作用有一定的影响,对金黄色葡萄球菌的抑制作用在pH值为6时最大;对其它菌的抑制作用均在pH值为5时最大。     

大蒜素对金黄色葡萄球菌抑菌作用的研究

[目的]研究不同种类,不同处理方法蒜液抑菌效果及大蒜素最低抑菌浓度和对金黄色葡萄球菌生长曲线的影响,为进一步利用大蒜素资源提供理论依据。[方法]用大蒜提取蒜液为材料,定硫法测定其中蒜素含量,研究大蒜素对金黄色葡萄球菌的抑菌作用。[结果]大蒜液中含有的大蒜素对金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用,经过机械破碎或挤压得到的蒜液抑菌效果比蒸煮后蒜液好,紫蒜抑菌效果优于白蒜,蒜素的最低抑菌浓度为32 mg/ml。细菌生长曲线表明,对数生长期的金黄色葡萄球菌对大蒜素敏感,而稳定期的菌体抑制作用较弱。[结论]大蒜素在体外对金黄色葡萄球菌有很好的抑菌作用。     

蜀本草多糖的提取及抑菌活性研究

[目的]研究蜀本草多糖的优化提取工艺和抑菌活性.[方法]通过提取温度、提取时间、料液比等单因素和正交试验对匀浆热水提法提取蜀本草多糖工艺进行了优化,同时利用所得多糖进行体外抑菌活性试验和热稳定性研究.[结果]蜀本草多糖提取最优条件为提取温度65℃、料液比（m/v）1∶45、提取时间75 min,多糖得率最高为6.28％;抑菌活性试验结果表明,蜀本草多糖提取物对酵母菌无明显抑制作用,对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌有明显抑制作用;蜀本草粗多糖提取物在100℃及以下活性稳定.[结论]该研究为开发利用蜀本草多糖提供理论依据.     

食品中金黄色葡萄球菌DNA环介导恒温扩增快速检测方法的建立与应用

【目的】金黄色葡萄球菌是一种人畜共患病的重要致病菌,主要经食品传播,引起食物中毒、组织及器官的化脓性炎症,建立快速、准确的检测方法对预防和控制金黄色葡萄球菌的传染具有重要意义。【方法】DNA环介导恒温扩增(loop-mediatedisothermalamplification,LAMP)是一种新颖的快速、高灵敏核酸扩增技术,本研究利用该技术建立金黄色葡萄球菌LAMP检测方法。基于金黄色葡萄球菌高度保守的Sa442基因序列,设计4条特异性LAMP扩增引物,两条外引物F3和B3及两条内引物FIP和BIP,在BstDNAPolymerase作用下,65℃恒温水浴中,对26个种类共45株细菌进行扩增,所试的20株金黄色葡萄球菌均为LAMP阳性,说明所设计的LAMP引物具有高度特异性。【结果】本LAMP方法对纯培养的金黄色葡萄球菌检测灵敏度为25CFU/mL,对污染食品中金黄色葡萄球菌的检测灵敏度为42CFU/g,40—60min内即可完成检测。检验检疫实践证明,利用本LAMP方法对958份肉类、蛋奶及其制品、人工污染样品等进行检测,检出115份LAMP阳性,与国标法(GB)检测结果一致。【结论】本LAMP方法操作简便、特异性强、灵敏度高,具有良好的实用性。     

香水百合总黄酮提取液体外抑菌活性研究

建立了香水百合(Lilium casa blanca)中总黄酮提取液体外抑菌活性的测定方法。以70%乙醇水溶液提取香水百合中的总黄酮,以芦丁为标准品,利用分光光度法测定其总黄酮含量。以金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌为供试菌,采用滤纸片法和最低抑菌浓度法(MIC)测定了提取液的体外抑菌活性。结果表明,香水百合中总黄酮含量为137 mg/g(13.7%);总黄酮提取液对金黄色葡萄球菌的抑菌圈平均直径为13.25 mm,对大肠埃希氏菌的抑菌圈平均直径为9.75 mm;最低抑菌浓度分别为0.587 5 mg/m L(金黄色葡萄球菌)和2.350 0 mg/m L(大肠埃希氏菌)。香水百合总黄酮提取液具有一定的抑菌活性,且对金黄色葡萄球菌的抑菌效果比大肠埃希氏菌好。