应用仔猪肾细胞培养荧光抗体法诊断猪瘟的研究(摘要)

我们曾经进行了应用猪扁桃体冰冻组织切片荧光抗体法诊断猪瘟的研究,证明在人工感染猪瘟强毒后72～96小时检查到阳性反应,对急性猪瘟的早期诊断可以达到快速、特异的诊断目的。但是自然感染病例在病的后期往往由于细菌的继发感染,扁桃体化脓导致扁桃体隐窝上皮细胞部分或全部破坏,或扁桃体的采取、处理不当等都可影响检出率。基于上述原因,又开展了应用细胞培养免疫荧光抗体法诊     

应用荧光抗体法诊断猪瘟的研究 Ⅲ.仔猪肾细胞培养-荧光抗体法诊断猪瘟的研究

用猪扁桃体冰冻切片荧光抗体法诊断人工感染猪瘟及在应用上的几个问题已作过报导。自然感染的猪瘟病例,由于在病的后期往往因细菌性感染,使扁桃体化脓,以致扁桃体隐窝上皮细胞部分或全部破坏;或因扁桃体的采取、处理不当等,都影响检出率。     

应用荧光抗体法诊断猪瘟的研究 Ⅰ 对人工感染猪瘟猪扁桃体冰冻切片荧光抗体法诊断的研究

Solorzand(1962)首先提出用荧光抗体法诊断猪瘟,认为此法不仅敏感,而且特异性亦高。1963年Stair,1964年Aikenct等应用组织切片和压片做了猪瘟荧光抗体法的研究。1963年Mengeling等应用猪肾继代细胞(РК—15)进行了猪瘟荧光抗体的研究。1969年须原贤治等报导了应用扁桃体冰冻切片荧光抗体染包诊断猪瘟的方法。目前,美、日、法、荷等国均已广泛采用荧光抗体法做为常规的猪瘟诊断方法。荧光抗体     

猪瘟荧光抗体的制备及其在自然感染病例中的应用

用硫酸铵盐析法从抗猪瘟高免血清中提取免疫球蛋白，应用搅拌标记异硫氰酸荧光素（FITC），葡聚糖凝胶G-25层析除去标记物中游离的荧光素，制备出猪瘟荧光抗体（CSF—FA）。经测定．标记荧光抗体的染色效价为1：4。用此浓度荧光抗体，结合常规诊断检测猪瘟，从33例采自陕西省不同地区自然发病猪的扁桃体中检出猪瘟阳性病例7份，阳性率21．3％（7／33）。结果表明，制备的荧光抗体诊断猪瘟敏感性高、特异性强；陕西省猪瘟自然感染发病率高。     

荧光抗体技术在猪瘟净化中的应用研究

猪瘟(HC)是由黄病毒科瘟病毒属的猪瘟病毒引起猪的一种高度传染性、致病性病毒病.控制和净化猪瘟的关键在于采取有效方法尽快查出抗原体,找出"带毒猪"并淘汰.采用荧光抗体试验(fluorescentantibody teclmology,FAT)检测猪瘟病毒是一种灵敏而又特异的诊断方法.因此,2005年应用FAT技术在广西一些规模化猪场进行了检测猪扁桃体猪瘟病毒、清除带毒猪、控制与净化猪瘟的试验,达到了预期的净化效果.     

ELISA间接法检测猪瘟抗体的研究

本文介绍了以中国株猪瘟兔化弱毒乳兔组织冻干疫苗为原料提取猪瘟抗原,以酶标葡萄球菌蛋白 A(PPA)代替酶标抗猪IgG,建立ELISA间接法检测猪瘟抗体的方法。该方法与血清兔体中和试验对73份猪血清进行检测猪瘟抗体的同步试验,结果基本一致( P >0.05)。敏感性、特异性及准确性分别为100％、92.16％及94.52％。用该方法对1528头份猪血清及36头份猪扁桃体浸出液进行猪瘟抗体测定,结果稳定,重复性好。     

应用FA及PPA-ELISA技术对猪瘟的检测

用免疫荧光抗体诊断技术及单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验诊断技术对疑为猪瘟病毒感染猪进行了检测 ,重点阐述了 2种方法的技术原理和操作过程。通过用免疫荧光抗体诊断技术检测了 5份病料 ,其中有 2份为阳性 ,阳性率为 40 % ;用单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验诊断技术检测了猪瘟血清抗体 ,在 40头母猪血清样品中 ,猪瘟弱毒抗体效价 OD值较高 ,有 1 0 0 %的保护率 ,但是发现母猪群中有 1 0 %隐性猪瘟感染 ,其强毒抗体效价 OD值大于 0 .5,体内带有猪瘟病毒。结果及过程表明此两种诊断方法检测快速、鉴别准确、分辨率高     

种猪场猪瘟病原和抗体检测与分析

为了解某规模化种猪场猪瘟野毒感染情况和猪瘟抗体免疫状况,研究分别采用RTPCR、基因测序和阻断ELISA方法对该场36份猪扁桃体样品和102份血样进行了猪瘟病原和猪瘟抗体检测。结果表明:群体猪瘟野毒阳性率为8.3%,其毒株基因型属于2.1c亚型;种母猪群猪瘟抗体阳性率91.7%、离散度23%,猪瘟免疫效果理想;仔猪猪瘟抗体阳性率80%、离散度46%,猪瘟抗体水平较高但参差不齐。该场通过淘汰野毒感染猪、抗体阴性猪群补打疫苗等综合措施实施猪瘟净化,节本增效,净化取得初步成效。     

猪瘟荧光抗体的制备及应用评价

制备猪瘟荧光抗体并用于猪只活体扁桃体组织抹/涂片检测。将制备的猪瘟高免血清采用硫酸铵分级沉淀法纯化免疫球蛋白,反向透析法标记荧光素,过葡聚糖凝胶柱(Sephadex G-50)去除游离荧光素,通过扁桃体组织匀浆吸附去除异嗜性或交叉反应抗体。以5?S做稀释液,以RT-PCR检测阳性样本的冰冻切片确定其最大稀释度为1/60,最佳工作浓度为1/30,阻抑试验证明荧光为特异荧光。用标记的荧光抗体检测活体扁桃体样本39份,检出阳性11份,与IDEXX猪瘟抗原检测试剂盒复核结果完全吻合。结果表明,本实验所制备的猪瘟荧光抗体具有很高的灵敏性和特异性,可用于猪瘟净化中扁桃体组织抹/涂片检测。     

用冰冻切片荧光抗体法诊断猪瘟自然病例

采用冰冻切片荧光抗体法对猪瘟自然病例进行诊断,收到了满意的效果,现报告如下。材料和方法一、被检材料:来自全省几个地、市、县的养猪场和个体饲养户的发病猪,主要采集扁桃体和肾脏。大部分病料在本站剖检采集,部分病料由低温保存送检。二、荧光抗体:由中国兽药临察所提     

规模化猪场猪瘟病原与抗体检测分析

为了解规模化猪场猪瘟野毒感染情况和猪瘟疫苗免疫效果,分别采用RT-PCR和ELISA方法对某场72份猪扁桃体样和419份血样进行了猪瘟病原和抗体检测。结果表明,该场无猪瘟野毒感染;种猪群猪瘟抗体阳性率高于90.3%、离散度低于33.1%,猪瘟疫苗免疫效果理想;保育猪猪瘟抗体阳性率仅为79.3%,离散度达到50.4%,抗体水平参差不齐,需采取综合防控措施进一步提高猪瘟抗体水平;母猪猪瘟抗体阳性率随着胎次的增加而呈递减趋势。     

应用荧光抗体法诊断猪痢疾

目前认为,猪痢疾密螺旋体 Treponema hyo-dysenteriae 是猪痢疾的病原体,检出和鉴定该微生物是本病诊断的主要方法。为此,我们试用了免疫荧光法。采用兔的高免血清制备出营光标记抗体。高免     

荧光抗体法检测猪细小病毒

猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)为引起母猪繁殖障碍性疾病的主要病原之一.猪细小病毒感染的主要特征是孕猪在怀孕前容易受到感染,可引起胚胎或胎儿的感染和死亡,导致母猪发生流产,死胎,胎儿木乃伊化及新生仔猪的死亡.目前,国内外检测猪细小病毒的方法主要有原位杂交、银加胶体金检测法、ELISA双抗体夹心法、聚合酶链反应和荧光抗体法等.免疫荧光技术是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应.笔者认为荧光抗体法较适用,而关于此方法的报道甚少,因此进行了以寻求快速、特异的直接荧光抗体检测方法为目的的研究.     

某规模化猪场猪瘟抗体水平及其野毒感染的检测与分析

为了解某规模化猪场后备种猪群猪瘟野毒感染情况和猪瘟抗体免疫状况,研究分别采用荧光抗体技术和阻断ELISA方法对该场825份猪扁桃体样品和825份血清样品进行了猪瘟病毒和猪瘟抗体检测。结果表明:猪瘟病毒阳性率为2.06%(17/825),猪瘟抗体阳性率为86.06%(710/825),抗体离散度为33.02%。说明该场后备种猪群的猪瘟免疫情况较理想,猪瘟病毒阳性率较低,并且猪瘟抗体免疫合格率较高,但抗体离散度偏高。分析猪瘟抗体水平和感染猪瘟野毒之间的相互关系可知,无论猪瘟免疫抗体水平是否合格,均有可能感染猪瘟野毒,但感染率随着猪瘟抗体阻断率的升高而逐渐降低。     

猪瘟病毒抗体纳米荧光检测试纸条的临床应用

为探究猪瘟病毒抗体纳米荧光检测试纸条的临床应用效果,对181份未免疫猪瘟疫苗、71份已免疫猪瘟疫苗的临床猪血清,采用本研究试纸条和北京世纪元亨公司的ELISA试剂盒分别进行抗体检测,对4头存在母源抗体的不同免疫时间仔猪血清、不同阶段的猪血清,采用本研究试纸条进行抗体检测,并对检测结果进行分析统计。结果显示,本研究试纸条与北京世纪元亨公司的ELISA试剂盒的阴性符合率为100%,阳性符合率为95.77%,经Kappa检验两者一致性良好;初生仔猪首免后,猪瘟抗体滴度有所下降,30 d后加强免疫,抗体滴度逐渐升高,试纸条检测结果与猪瘟抗体衰减变化过程呈正相关;不同阶段猪群的猪瘟抗体阳性率均为100%,抗体平均值较高,离散度较整齐,与规模化养猪场合理免疫程序相吻合。综合表明,本试纸条的临床应用效果较好,可用于实时监控猪群的猪瘟抗体变化,适用于基层规模化猪场的猪瘟抗体快速检测。     

螢光抗体技术在猪瘟诊断中的应用

现在日本采用萤光抗体法诊断猪瘟。萤光抗体技术是将抗体(或抗原)标记上萤光色素,与相应抗原(或抗体)结合后,在萤光显微镜下,呈萤光现象的一种特异免疫萤光反应方法。诊断猪有三种作法。 1.组织切片法:从病猪采取扁桃体的薄     

荧光抗体技术在猪瘟净化中的应用

荧光抗体技术(FAT)是一种灵敏而又特异的诊断方法,被世界各国作为猪瘟的法定诊断方法。采用FAT对猪瘟病毒进行控制和净化,其方法简单、快速、技术可靠,检测成本相对较低。2005~2007年笔者采用FAT对规模化猪场猪瘟进行2~3次净化,可以稳定地控制猪瘟,使猪瘟的阳性率下降至3%左右,大大降低了各阶段猪群的死亡率,并明显提高了母猪的繁殖性能,取得了良好的经济效益。     

免疫荧光抗体法检验猪瘟病毒在患猪各组织器官出现的时间

猪瘟由猪瘟病毒感染引起,是危害养猪业最主要的传染病之一,为寻求猪瘟患猪早期诊断采集受检材料的依据,我们采用荧光抗体法检查病毒侵害感染猪各器官的时间、报告如下:1 材料与方法1.1 材料:猪瘟非免疫健康猪4头,购自贵州省生物药品厂实验猪场和贵州省畜牧兽医科研所养猪室猪场.自然感染猪12头选自黔西、安顺、花溪农户或专业户患猪.     

某规模化猪场主要疫病抗体水平检测与分析

为了解某猪场猪瘟、蓝耳病及伪狂犬病三大疫病的免疫与感染状态,评价免疫效果及潜在风险,为免疫程序制定提供理论依据。采集各猪群血液样品,用ELISA方法进行了猪瘟、蓝耳病及伪狂犬病的抗体检测,结果表明,该猪场猪蓝耳病免疫效果比较理想。但保育猪猪瘟抗体阳性率及阻断率偏低,初免设计不合理,存在一定的感染风险,各猪群存在较高比例的伪狂犬病野毒感染,基于抗体检测结果建议调整优化免疫程序并加强生物安全体系建设。     

猪瘟荧光抗体的制备及应用

用硫酸铵盐析法从抗猪瘟血清中提取免疫球蛋白，应用搅拌法标记荧光素，硫酸铵盐析、Sephadex G-25层析和肝粉吸收三法结合去除标记物之游离荧光素，制备猪瘟荧光抗体。经测定，标记的荧光抗体工作稀释度为1：16～1：32。用标记的荧光抗体诊断猪瘟，从39份可疑病料中检出阳性病例12份。