银杏成熟胚乳培养的细胞组织学观察

诱导银杏（GinkgobilobaL．）成熟胚乳产生愈伤组织时无需胚的存在。单独使用生长素或在细胞分裂素／生长素为0．5～0．9的范围内均能诱导部分胚乳切块产生愈伤组织。并且在White＋Kt2．7mg·l-1＋2,4－D1．0mg·l-1＋NAA2．0mg·l-1的培养基上,愈伤组织的诱导率最高,达到83．3％。胚乳细胞脱分化进行有丝分裂和无丝分裂,其中无丝分裂可以观察到劈裂和缢裂两种类型。愈伤组织起源于胚乳表皮及其下方2～3层细胞,且愈伤组织的形成需经历一个“假愈伤组织化”阶段。     

银杏种实生长发育过程中胚乳淀粉体发育观察

对银杏胚乳发育过程进行连续2年的观察结果表明:1)发育成熟的银杏胚乳包括糊粉层与内胚乳2个部分,淀粉体主要积累在内胚乳细胞中,均为单粒淀粉,发育成熟的淀粉体可分为大粒和小粒2种;2)根据淀粉体的形状、大小和发育程度大致可分为淀粉体发生期、淀粉体体积与数量快速增长期、淀粉体发育成熟期3个时期;3)胚乳淀粉体的发生时期及充实部位表现出很大差异,合点端胚乳细胞中的淀粉体发生早,充实快,而珠孔端胚乳细胞中的淀粉体发生迟,充实速度慢;内胚乳外围细胞中淀粉体的充实要高于内部;颈卵器周围的胚乳细胞淀粉体的充实差。     

银杏成熟胚乳愈伤组织的诱导研究

以银杏成熟胚乳为外植体,在附加不同激素的的培养基上进行愈伤组织的诱导,筛选出诱导愈伤组织的最佳激素组合培养基,即MS+2 mg/L NAA+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT,获得绿色、紧密的愈伤组织.     

牡丹成熟胚离体培养的初步研究

研究了不同浓度GA3浸泡处理对解除‘凤丹'种子上胚轴休眠的影响.结果表明:浓度为500 mg/L的GA3浸泡种子48 h,胚的萌发率52.6%;经过对4种培养基的筛选,认为1/2MS+Ca2+可以作为胚培养的基本培养基;胚培养最佳培养基为1/2MS+GA30.5 mg/L.     

杜仲成熟胚离体培养研究

以杜仲种子为外植体进行离体培养,研究了胚培养方法、培养条件和影响因素.结果表明:可采用种子70%酒精处理30 s,0.1%升汞4 min,无菌条件下剖开种皮取胚接种,可有效控制污染,亦可保证胚的存活率;通过控制NAA、6-BA、2,4-D浓度配比可获得杜仲胚苗或愈伤组织;MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 1.5 mg/L蔗糖20%培养基,最适于不定芽的分化和增殖,分化率达90%;1/2MS+IBA 1.5 mg/L+蔗糖20%对不定芽生根的诱导效果最好,生根率达90.3%.     

提高银杏悬浮培养细胞内酯合成的研究

 对12个不同品种的银杏树幼叶及其诱导的愈伤组织进行银杏内酯含量测定, 发现不同基因型的银杏内酯含量存在较大差异: 圆铃和金坠两个品种含量最高, 分别达0. 43%和0. 41%; 七星果品种含量最低, 为0. 13%; 金坠品种幼叶愈伤组织中银杏内酯含量最高, 为0. 0334%; 有3 个品种的幼叶愈伤组织未检测到银杏内酯。选取银杏内酯含量高、生长旺盛的愈伤组织在B5 液体培养基中进行了细胞悬浮培养,研究多种生长因子对细胞生长和银杏内酯合成的影响。结果表明, 在150 mL 培养瓶中装50 mL 培养液, 接种量为30~ 40 g/ L, 培养液初始pH 为5. 8, 3 000~ 4 000 lx 的强光照, 以30 g / L 蔗糖和15 g/ L 葡萄糖为碳源最有利于细胞生长和银杏内酯的合成。用高效液相色谱检测结果显示, 银杏圆铃品种的悬浮培养细胞中银杏内酯B 最高含量可达细胞干样质量的0. 0758%。     

天草杂柑胚乳培养研究初报

柑橘胚乳的离体培养是获得三倍体无籽柑橘的重要途径,关于柑橘胚乳再生植株诱导的培养时有报道,研究表明柑橘胚乳培养存在愈伤组织诱导率较低,愈伤组织分化不定芽困难等现状。本文针对这一现状以天草杂柑为对象进行研究,以期找到提高柑橘胚乳再生植株诱导率的新途径,提高柑橘胚乳培养成功率。     

叶籽银杏胚乳淀粉特性及系统学意义

旋光法和凯氏定氮法测定表明,叶籽银杏正常种子和叶生种子胚乳淀粉含量分别为63.22%和61.91%;蛋白质含量分别为11.35%和13.36%。SEM 观察结果表明,叶籽银杏淀粉粒形状大多为球形和椭圆形,有A、B、C（大、中、小）3 种类型。正常种子和叶生种子均含有A 和B 型淀粉粒,C 型淀粉粒仅在叶生种子中发现。正常种子A 型淀粉粒大小为14.28 μm × 11.96 μm,长轴/短轴比为1.24;叶生种子分别为13.63 μm × 10.55 μm 和1.30。正常种子B 型淀粉粒大小为8.29 μm × 7.28 μm;叶生种子为8.90μm × 7.68 μm。叶生种子C 型淀粉粒大小为2.07 μm × 1.84 μm。与正常种子相比,叶生种子淀粉粒特点是大小不一,B 型和C 型淀粉粒明显可见以“出芽”方式从大淀粉粒上长出,淀粉粒间空隙大,基质蛋白丰富,淀粉粒上有凹陷区。淀粉粒类型、大小、形态和含量在不同单株间存在较大差异,不同单株的基质蛋白质存在较大差异,尤其在正常种子和叶生种子间淀粉粒和蛋白质相互连接方式及在淀粉粒上的分布差异明显。叶生种子淀粉含量低及形态多样性与其胚乳发育滞后、种粒小有关。对叶籽银杏淀粉粒的系统学意义进行了探讨。     

银杏幼胚离体培养再生植株的研究

 以佛手银杏幼胚为外植体, 研究了不同大小幼胚在不同培养条件下, 愈伤组织和胚状体的诱导发育情况。结果表明: 大于3 mm的幼胚, 在MK +NAA 1.0 mg·L ^{- 1} +BA 1.0 mg·L ^{- 1}培养基上胚状体诱导率最高, 达到53.6% , 最多的一块愈伤组织形成多达38个胚状体。暗培养不利于胚状体的发生。在MK培养基上添加10%椰汁对胚状体的生长发育有很好的促进作用, 有34.5%生长成苗。     

‘罗田甜柿’胚乳培养获得十二倍体再生植株

 取‘罗田甜柿’自然授粉后约70 d 的胚乳, 采用不同细胞分裂素和生长素组合进行离体培养。结果表明: 以1/ 2MS (1/ 2N ) + ZT (玉米素) 1.1 mg/ L + 2,4-D 1.0 mg/ L + CH (水解酪蛋白) 1000mg/ L 诱导产生的愈伤组织易获得再生植株; 形态学和细胞学检测确认再生植株中存在2n=12x=180 的个体。该十二倍体植株对中国原产甜柿的遗传改良可能具有潜在的应用价值。     

柑桔胚乳培养体系的建立与优化

利用Minitab软件正交试验设计L9(33),以MS培养基,分别加入不同质量浓度的6-BA、2,4-D、对柑桔胚乳愈伤组织诱导;以MS培养基,分别加入不同质量浓度TDZ和NAA对愈伤组织诱导不定芽。结果表明:柑桔愈伤组织诱导最佳组合为6-BA1.0mg/L+2,4-D 0.2mg/L+sucrose 40g/L,愈伤组织诱导率可达30%;柑桔不定芽诱导最佳组合为TDZ 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L+sucrose40g/L,不定芽诱导率可达35%。     

银杏雌配子体发育过程中淀粉和蛋白质的积累与代谢

 以20年生银杏核用品种‘佛指’（Ginkgo biloba L.‘Fozhi’）为试材,通过树脂切片对雌配子体发育过程中淀粉和蛋白质形成与代谢进行显微和超微结构观察。结果表明：（1）雌配子体发育过程中,细胞内淀粉和蛋白质的积累呈现规律性变化。表现为受精作用发生前,套细胞、帐篷柱细胞和颈细胞内迅速积累大量淀粉粒,靠近颈卵器周围胚乳细胞中的淀粉粒逐渐被转移而减少。受精作用发生时,套细胞和帐篷柱细胞内淀粉粒代谢迅速,靠近颈卵器周围的胚乳细胞中淀粉粒全部消失,细胞壁呈现皱缩解体现象,颈细胞的细胞壁开始解体。受精作用完成后,套细胞、帐篷柱细胞、颈细胞和颈卵器周围胚乳组织出现相继解体现象;（2）雌配子体胚乳细胞内的淀粉和蛋白质积累可分为胚乳薄壁细胞增殖期、淀粉粒和蛋白质形成期、淀粉粒和蛋白质快速积累期和淀粉粒和蛋白质缓慢积累期;（3）淀粉体由造粉质体发育而来,每个造粉质体可含一到多个淀粉体,以芽孢或中间缢断的方式增殖。蛋白质体存在P1和P2两种形式,其中P1存在于内部的胚乳细胞中,P2存在于外围的糊粉层中。受精作用发生前套细胞、帐篷柱细胞内充满了大量的淀粉体和蛋白质体等营养物质,并分布有较多的线粒体、内质网和小泡等细胞器。     

西瓜离体培养技术的研究

本文研究了西瓜主芽、子叶、下胚轴和根的离体培养技术。结果表明：芽增殖速度与ＢＡ、ＮＡＡ含量关系密切，诱导芽增殖以Ｗ１４（ＭＳ＋ＢＡ２＋ＮＡ０．１＋蔗糖３％）培养基较佳；子叶离体培养诱导不定芽与苗龄、培养基、子叶组织的部位有关；培养基中ＮＡＡ、ＩＢＡ的存在及含量对下胚轴、胚根愈伤组织的产生有直接的关系。芽经诱导成苗后，转移到生根培养基中（１／２ＭＳ＋ＩＢＡ１＋蔗糖３％），长出根后移到珍珠岩中保温保湿     

'Fresno Seedless'葡萄幼胚和胚乳发育及败育的组织学观察

以种子败育型无核葡萄品种‘Fresno Seedless’为试材,采用石蜡切片技术和铁矾媒苏木精染色法,对‘Fresno Seedless’葡萄的幼胚和胚乳的发育及败育过程进行了系统的细胞学观察,以期确定其幼胚和胚乳开始败育的时期。结果表明:‘Fresno Seedless’葡萄合子于花后16d开始分裂,经过二细胞原胚、多细胞原胚,发育至球形胚时期,开始退化败育,时间为花后38d;‘Fresno Seedless’葡萄初生胚乳核于花后6d开始分裂,待胚乳细胞基本充满胚囊后开始退化败育,时间为花后32d。胚囊内胚乳首先从胚囊珠孔端开始败育,随后合点端胚乳开始败育。因此,‘Fresno Seedless’葡萄的胚挽救最佳取样时期是花后32～36d。该研究结果为利用‘Fresno Seedless’葡萄做母本进行胚挽救育种的大田取样时期提供了较为科学的参考依据。     

西瓜离体培养研究进展

本文综述了西瓜不定芽诱导、体细胞胚胎发生、花药培养、原生质体培养和体细胞杂交、体细胞无性系变异及转基因等方面取得的研究进展,并对西瓜离体培养、遗传转化与育种的前景作了展望。     

离体培养技术在葡萄上的应用

葡萄是多年生浆果果树,栽培历史悠久,用途广泛,是当今世界上栽培面积和总产量都占第一位的果树。离体培养作为一门新兴技术和研究手段,已广泛应用于葡萄育种、葡萄生产和葡萄生理研究等方面,本文仅就有关资料作一综述。一、在葡萄育种上的应用     

果实组织离体培养在国外的研究与应用

果实组织离体培养在国外的研究与应用房经贵，章镇（南京农业大学园艺系２１００９５）果实组织离体培养的最早报道是用鳄梨中果皮和香橼的中果皮。迄今为止，对葡萄、梨、苹果、草莓、柑桔和柠檬等果实（组织）的培养均已获得成功。它可以对果实生长发育过程中的生理生化...     

辣椒的离体培养与遗传转化

综述了辣椒离体培养和遗传转化的研究进展。通过幼苗外植体培养、原生质体培养和花药培养三条途径建立辣椒离体再生系统。通过根癌农杆菌的Ti质粒和电激法，成功地介导子叶和原生质作进行遗传转化，获得转基因植株。还讨论了辣椒离休培养和遗传转化中存在的主要问题。