7种油茶花粉数量及花粉萌发率的测定

以普通油茶、红皮糙果茶、博白大果、茶梨、越南油茶、大花红山茶和攸县油茶的花粉为材料,研究了花药内花粉数量和花粉离体培养萌发率.结果表明:7种油茶的单花药花粉平均数量分别为2 498、3 503.7、9 441.3、3 331.3、8 397.7、3 985.7、3 141.3粒,普通油茶、红皮糙果茶、博白大果和茶梨的花粉在10 g·L-1琼脂+0.1 g·L-1硼酸+100 g·L-1蔗糖的培养基上萌发率最高,萌发率分别为59.4%、56.3%、92.7%、95.3%;越南油茶、大花红山茶和攸县油茶的花粉在10 g·L-1琼脂+0.1 g·L-1硼酸+50 g·L-1蔗糖的培养基上萌发率最高,萌发率分别为39.6%、62.1%、72.1%.     

4个油茶优良无性系花器特征及花粉萌发率

以怀化地区选育的怀06062、怀06018、怀06175、怀06122这4个油茶优良无性系花朵及花粉为试材,研究了油茶花的生物学特性、花粉数量和花粉萌发率。结果表明:怀06062、怀06018、怀06175、怀06122单花药花粉平均数量分别为2 566.7、2 000.0、4 450.0和2 350.0粒;怀06062和怀06175的花粉在5%蔗糖+0.01%硼酸+1%琼脂的培养基上萌发率最高,萌发率分别为94.31%和87.71%;怀06018的花粉在10%蔗糖+0.01%硼酸+1%琼脂的培养基上萌发率最高,为90.22%;怀06122的花粉在10%蔗糖+0.005%硼酸+1%琼脂的培养基上萌发率最高,萌发率为40.70%。     

影响杂交榛花粉萌发和花粉管生长的培养基组分研究

采用固体培养基研究了不同浓度的蔗糖、硼和钙配比对杂交榛花粉萌发及花粉管生长的影响.结果表明:蔗糖、硼酸浓度间对花粉萌发有显著影响,钙浓度间对花粉萌发的促进作用不明显;蔗糖150 g·L~(-1)、硼酸100 mg·L~(-1)时最适宜花粉管伸长;蔗糖的缺乏会导致胼胝质在花粉管顶端积累,使其生长停滞,缺硼时胼胝质在花粉管内分布正常.杂交榛花粉适宜的培养基为:蔗糖150 g·L~(-1)+硼酸100 mg·L~(-1)氯化钙100 mg·L~(-1)琼脂10 g·L~(-1).     

黄牡丹花粉生活力测定方法的比较研究

以黄牡丹的新鲜花粉为试材,利用单因子试验比较了液体培养基中蔗糖浓度、硼、钙、镁、钾对黄牡丹花粉萌发的影响,在此基础上进行了正交试验,比较了蔗糖、H₃BO₃及CaCl₂对黄牡丹花粉萌发的影响;通过对醋酸洋红染色法、I-KI染色法和TTC染色法的比较,寻找快速测定黄牡丹花粉生活力的方法。试验结果表明:蔗糖及H₃BO₃对黄牡丹花粉萌发有极显著影响。在pH值为6.0时,蔗糖150 g·L^-1+H₃BO₃30 mg·L^-1+CaCl₂20 mg·L^-1适宜黄牡丹花粉培养,萌发率为68.7%;纯水培养没有造成花粉原生质体破裂,内含物外流,但萌发率极低,仅为3%;200 g·L^-1以上的高浓度蔗糖溶液和300 mg·L^-1以上的高浓度盐溶液会造成原生质体失水萎缩,质壁分离,这两种情况都抑制花粉萌发;TTC染色法测得的花粉活力率为64.9%,是快速测定黄牡丹花粉生活力的最适染色法。     

西南桦花粉离体萌发的适宜条件与萌发特征

应用各种浓度蔗糖、蔗糖 硼酸培养基于系列温度下开展西南桦花粉萌发对比试验,研究了蔗糖、硼酸浓度对西南桦花粉离体萌发的影响,筛选出适合西南桦花粉萌发培养基的适宜组分和适宜培养温度,并应用4个单株的花粉对其萌发特征进行了初步研究.结果表明:蔗糖基本培养基上添加硼酸能够显著促进西南桦花粉萌发;西南桦花粉离体萌发的合适培养基为15%蔗糖 200 mg·kg-1硼酸,适宜培养温度为30℃;在此条件下培养3 h后花粉萌发率基本稳定,培养7 h后花粉管长度也趋于稳定.     

不同种源油茶良种花粉生活力研究

采用TTC法和琼脂培养基离体萌发法对来自湖南、江西、广西种源的油茶主栽良种进行了花粉生活力和萌发力的测定。结果表明:(1)油茶不同种源良种之间花粉生活力存在较大差异,本实验良种中的花粉生活力较高,花粉活力值范围在87.51%~66.98%之间,花粉萌发力值范围在87.91%~70.47%之间,显示了良种的优良特性;(2)湖南种源油茶良种花粉萌发最适培养基为1%琼脂+10%蔗糖+0.015%硼酸,江西和广西种源的良种通过调整蔗糖和硼酸浓度可使花粉萌发达最佳。采用TTC法和琼脂培养基离体萌发法同时检测花粉生活力可以相互校验;(3)花粉生活力大小与品种内在遗传特性有关,也与立地和气候有一定关系。     

银杏花粉离体萌发培养基的优化

为优化银杏花粉萌发培养基,采用离体萌发法,通过单因素试验和正交试验分析培养基中不同营养成分对银杏花粉萌发的影响。结果表明:在单因素试验中,蔗糖、硼酸和氯化钙在适宜质量浓度范围内促进花粉萌发,过高质量浓度反而不同程度地抑制花粉萌发;在正交试验中,蔗糖、硼酸和氯化钙对银杏花粉在培养基上离体萌发的影响表现极显著,适宜质量浓度分别为100 g·L-1、10 mg·L~(-1)、40 mg·L~(-1)。     

‘聊红’槐花粉萌发率的测定及荧光显微观察

以国槐、‘聊红’槐的花粉为材料,研究了其花药内花粉数量以及不同浓度的蔗糖和硼酸对花粉萌发率的影响,同时对国槐和‘聊红’槐花粉萌发情况进行了荧光显微观察。结果表明:国槐、‘聊红’槐每个花粉囊内花粉数量分别为41 750粒、29 840粒;花粉萌发的最优培养基为1%琼脂+0.02%硼酸+0.2%蔗糖,花粉萌发率分别为43.3%、39.5%;荧光显微观察国槐的花粉管伸长速度快于‘聊红’槐。     

不同培养条件对油茶花药愈伤组织形成的影响

为了提高油茶花药培养的愈伤组织诱导率,以普通油茶、小果油茶、浙江红花油茶、广宁红花油茶为试验材料,初步研究了不同蔗糖质量浓度、培养基类型、琼脂用量、取材时期、是否光照培养及培养基是否添加活性炭等不同的培养条件对油茶花药愈伤组织形成的影响,来筛选较为适宜的培养条件．研究结果表明,在盛花初期所采样品的愈伤组织诱导率高于盛花末期所采样品的诱导率;以MS琼脂固化培养基、蔗糖质量浓度30～40g·L~(-1)为最佳的油茶花药愈伤组织的诱导培养基配方;在黑暗条件下培养可以提高油茶花药愈伤组织的诱导率．     

油松花粉离体萌发培养基及花粉贮藏条件研究

花粉生活力对油松杂交育种至关重要.为筛选油松花粉离体萌发培养基,探讨不同温度贮藏下花粉的生活力,采用正交试验设计,研究不同水平蔗糖、硼酸和pH值对油松花粉离体萌发的影响;测定不同温度贮藏下油松花粉萌发率随时间的动态变化.结果表明:油松新鲜花粉在蔗糖100 g·L-1、硼酸0.10 g·L-1、琼脂8 g·L-1、pH值...     

Photosynthetic characteristics of Fagus sylvatica and Quercus robur established for stand conversion from Picea abies

Efforts in Europe to convert Norway spruce (Picea abies) plantations to broadleaf or mixed broadleaf-conifer forests could be bolstered by an increased understanding of how artificial regeneration acclimates and functions under a range of Norway spruce stand conditions. We studied foliage characteristics and leaf-level photosynthesis on 7-year-old European beech (Fagus sylvatica) and pedunculate oak (Quercus robur) regeneration established in open patches and shelterwoods of a partially harvested Norway spruce plantation in southwestern Sweden. Both species exhibited morphological plasticity at the leaf level by developing leaf blades in patches with an average mass per unit area (LMA) 54% greater than of those in shelterwoods, and at the plant level by maintaining a leaf area ratio (LAR) in shelterwoods that was 78% greater than in patches. However, we observed interspecific differences in photosynthetic capacity relative to spruce canopy openness. Photosynthetic capacity (A₁₆₀₀, net photosynthesis at a photosynthetic photon flux density of 1600 μmol photons m⁻² s⁻¹) of beech in respect to the canopy gradient was best related to leaf mass, and declined substantially with increasing canopy openness primarily because leaf nitrogen (N) in this species decreased about 0.9 mg g⁻¹ with each 10% rise in canopy openness. In contrast, A₁₆₀₀ of oak showed a weak response to mass-based N, and furthermore the percentage of N remained constant in oak leaf tissues across the canopy gradient. Therefore, oak photosynthetic capacity along the canopy gradient was best related to leaf area, and increased as the spruce canopy thinned primarily because LMA rose 8.6 g m⁻² for each 10% increase in canopy openness. These findings support the premise that spruce stand structure regulates photosynthetic capacity of beech through processes that determine N status of this species; leaf N (mass basis) was greatest under relatively closed spruce canopies where leaves apparently acclimate by enhancing light harvesting mechanisms. Spruce stand structure regulates photosynthetic capacity of oak through processes that control LMA; LMA was greatest under open spruce canopies of high light availability where leaves apparently acclimate by enhancing CO₂ fixation mechanisms.     

黑松和马尾松苗受松材线虫侵染后部分化学物质的响应

为研究松材线虫侵染对寄主植物生理生化物质代谢的影响,以黑松和马尾松4 5年生苗为实验材料,测定了接种松材线虫对2种寄主植物的营养物质和次生代谢物质含量的变化及其规律。结果显示:接种松材线虫初期,黑松和马尾松的总糖含量均较高,随接种时间的延长,总糖含量呈不断下降趋势;黑松的可溶性糖含量一直降低并明显低于对照,马尾松的可溶性糖含量在侵染前期与对照相比变化不明显,而15 d后快速降低;黑松和马尾松的可溶性蛋白含量侵染前期均低于对照,后升高,再降低;黑松的单宁含量明显高于对照,马尾松的单宁含量接种第1天略低于对照,第3天后开始升高;黑松和马尾松的总酚含量均在侵染前期高于对照,而后降低。这些物质的变化趋势显示松材线虫侵染不同寄主植物的生理反应。     

三年桐、千年桐感染枯萎病病原菌后的生理反应

枯萎病是油桐毁灭性病害。中国广泛种植的油桐有三年桐和千年桐,三年桐易感枯萎病,千年桐抗枯萎病。为探讨三年桐与千年桐在枯萎病应答过程中的差异,在对油桐枯萎病灾区调研的基础上,进行枯萎病病原菌的分离、鉴定,并进一步探讨三年桐、千年桐接种枯萎病病原菌后超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量的变化。结果表明:油桐枯萎病病原菌为尖孢镰刀菌,接种试验显示千年桐在接种尖孢镰刀菌后SOD、POD、CAT较三年桐均呈现较高活性,在接种后SOD、POD活性先升高后降低,CAT活性升高并维持高活性,MDA含量变化不明显;三年桐SOD活性和MDA含量均先升高后降低,POD活性先降低再升高,CAT活性先降低后升高又降低。千年桐作为抗病种,其抗病性可能与其本身具有较高的SOD、POD、CAT活性有关,并且和病原菌感染后酶活上升有关;三年桐为易感病种,接种后SOD、POD、CAT活性有变化,但仍不能抵御病原菌的危害。     

不同绿僵菌菌株对筛胸梳爪叩甲幼虫的毒力测定

竹林金针虫是南方竹林笋期最为重要的害虫之一,筛胸梳爪叩甲幼虫是竹林金针虫的优势种群,应用绿僵菌防治具有重要意义。测定了3株绿僵菌对筛胸梳爪叩甲幼虫的毒力,并比较了毒土法和毒饵法两种施菌方式对绿僵菌致病力的影响。结果表明,平沙绿僵菌WP08菌株和金龟子绿僵菌30104菌株对筛胸梳爪叩甲幼虫具有明显的致病效果,在30 d的试验期内,校正累计死亡率分别为90.0%和66.3%,半数致死时间（LT₅₀）分别为15.8 d和25.8 d;毒土法的校正累计死亡率略高于毒饵法,分别为60.1%和52.0%,LT₅₀分别为22.6 d和28.0 d。金龟子绿僵菌LRC112菌株对金针虫无致病力。     

马尾松钙调素基因的克隆及响应松材线虫侵染的表达特征

松材线虫病是由松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)侵染引起的严重病害,引起重大的经济和生态损失。钙调素(CaM)是真核生物中Ca2+主要传导蛋白,本研究采用RT-PCR方法,首次从马尾松中克隆获得CaM,命名为pmCaM,并检测了其响应松材线虫侵染的表达特征。序列分析表明:pmCaM完整的开放阅读框核苷酸序列为450bp,编码149个氨基酸的蛋白质;该蛋白含有4个EF-hand结构域,具有钙调素的典型特征,与其它植物的CaM蛋白均有较高同源性。实时荧光定量PCR分析显示:接种松材线虫后30 180 min时间段,马尾松苗根、茎、叶器官中的pmCaM均下调表达,但不同器官间显著下调表达的时间点存在差异;同时,不同器官pmCaM表达量变化均存在特异的随时间发展的波动特征,其中发现,根茎pmCaM在松材线虫接种45 min时均处于表达量高峰。本研究结果显示pmCaM表达响应了松材线虫侵染,揭示pmCaM可能参与了调控松材线虫-马尾松互作早期的钙信号响应。     

松墨天牛对云南松的分解作用分析

为探索松墨天牛取食对林木的分解作用,本文通过对松墨天牛幼虫及成虫取食量的测定,寄主云南松韧皮组织及松墨天牛幼虫排泄物成分对比分析,并与资源利用相同的木材微生物分解能力进行对比,阐明了松墨天牛作为分解者的重要分解作用。研究表明,松墨天牛幼虫期(约为55 d)取食分解林木生物量平均为12.42 g(24.40 cm3),成虫期取食分解林木生物量平均为12.87 g(25.28 cm3);松墨天牛幼虫对糖类物质的利用度很高,具有较强的纤维分解利用能力,取食分解后总糖减少83.58%,粗纤维减少23.87%,1头松墨天牛幼虫期分解的林木粗纤维质量为1.93 g,分解利用率为0.008 g.d-1。松墨天牛对林木的分解证明,天牛作为一种重要的林木分解的先驱者,可以分解林木,更重要的是松墨天牛攻击亚健康林木,为微生物分解林木提供了容易入侵的途径,加速了亚健康林木的分解与循环,在森林生态系统物质分解与循环中具有重要的促进作用。     

赤桉GAPDH家族基因的克隆及其序列分析

GAPDH is a typical structural protein in eukaryote organism, which plays an important role involved in the biosynthesis of cell composition and the expression of genetic information. In order to reveal the biological function of GAPDH in the growth and development of Eucalyptus, 3 genes were obtained and named as EC-GAP1, EC-GAP2 and EC-GAP3 by amplification with primers for GAPDH genes conserved regions and RACE method from the young leaf of Eucalyptus camaldulensis. The bioinformatics analysis suggested that the proteins encoded by corresponding genes owned the typical conserved domains of GAPDH and showed high homology with those of other plant species.     

杜仲1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶基因cDNA全长克隆与序列分析

以杜仲叶片cDNA为模板,采用反转录RCR及RACE技术分离出DXR基因cDNA全长。序列分析结果表明该基因序列全长1 814 bp,共编码478个氨基酸,推导的蛋白质分子量为51.71 kD,理论等电点5.79,命名为EuDXR。推导的EuDXR蛋白质序列具有植物DXR酶的5个典型基序,并预测出26个潜在的功能位点。系统进化树分析表明EuDXR蛋白与玉米、水稻亲缘关系最近,其次为橡胶、拟南芥、烟草。     

马尾松谷胱甘肽过氧化物酶PmGPX6基因cDNA克隆及转化拟南芥耐旱性初步研究

[目的]克隆马尾松谷胱甘肽过氧化物酶基因,并对其进行功能研究。[方法]采用RACE技术克隆基因c DNA序列,实时荧光定量PCR检测基因在马尾松干旱胁迫下的表达模式,花序浸泡法转化拟南芥,并对转基因与野生型拟南芥的生长表型和根系生长进行分析。利用荧光显微镜技术对转基因拟南芥不定根进行GFP荧光检测。[结果]克隆到1个871 bp的GPX基因全长c DNA序列,命名为Pm GPX6。Pm GPX6包括513 bp的完整开放阅读框,编码170个氨基酸残基。Pm GPX6蛋白与油松Pt GPX蛋白同源性达95%。Pm GPX6在马尾松根中高表达,茎、叶中表达量低。在干旱胁迫下,Pm GPX6在根、茎、叶中的表达量均在第15天达到最大,随后出现下降趋势。过表达Pm GPX6与野生型拟南芥植株在正常水分条件下表型与根长差异不大,但在干旱胁迫下,转基因植株根系更长。转基因拟南芥根在蓝色光激发下能发出强烈的绿色荧光,表明Pm GPX6基因能高效表达。[结论]推测Pm GPX6可能参与马尾松干旱胁迫应答。     

A new coumarin from Sarcandra glabra

Sarcandracoumarin (1), the first coumarin having a 1-phenylethyl substituent at the C-3 position, was isolated along with eleven known phenolic compounds from the water extract of Sarcandra glabra. Its structure was elucidated on the basis of spectroscopic data. Compound 1 exhibited moderate or weak cytotoxicity against several tumor cell lines.