银杏内生真菌抗真菌活性菌株的分离和筛选

从银杏(Ginkgo biloba L．)的根、茎、叶和果实中分离获得522株内生真菌,采用菌丝生长抑制法测定 了对7种植物病原真菌的抑制作用。结果表明302株具有抗菌活性,占总数的57．85％,其中12株抗菌效果非 常明显。银杏组织中存在丰富的内生菌,不同组织内生真菌的数量存在一定差异;对病原真菌具有活性的内 生真菌比例较高;对大多数供试病原菌都可以筛选到拮抗效果较好的菌株;银杏内生真菌可以产生丰富的具 有抑菌活性的次生代谢产物,可以作为对多种病原物具有抑菌活性物质筛选的资源。     

镉诱导黄瓜金属硫蛋白的分离、纯化和鉴定

[目的]通过不同浓度Cd2+诱导黄瓜产生金属硫蛋白,探寻植物金属硫蛋白含量与Cd2+浓度关系。[方法]用不同浓度Cd2+诱导黄瓜幼叶组织产生金属硫蛋白,经Sephadex G-50凝胶过滤层析纯化后用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定黄瓜金属硫蛋白的分子量。[结果]1 000 mg/LCd2+诱导黄瓜幼叶产生金属硫蛋白的产量最高,可达2.62μg/g。黄瓜金属硫蛋白的分子量为9.5 kD。[结论]黄瓜是一种对Cd2+敏感的植物。Cd2+诱导的金属硫蛋白含量与Cd2+浓度呈正相关。     

银杏叶苯丙氨酸解氨酶分离纯化条件的研究

对银杏(Ginkgobiloba)叶中苯丙氨酸解氨酶(PAL)的分离纯化条件进行了研究。离子交换条件优化的研究结果是最适洗脱缓冲液的pH8 9,最佳洗脱离子浓度(NaCl)为0 3mol·L-1。经过一系列的分离纯化,蛋白质得率为0 35%,酶的得率为1 17%,纯化倍数为3 32。     

诸葛菜种子抗真菌蛋白的提取及其抑菌活性

通过柱层析技术从诸葛菜种子中分离抗真菌蛋白,并采用纸片扩散法、琼脂平板稀释法和凹玻片法对抗真菌蛋白的抑菌活性和稳定性进行研究.结果表明:从诸葛菜种子中分离出一种分子质量约为10 ku的抗真菌蛋白,命名为Zp;经QE质谱鉴定,Zp蛋白可能是诸葛菜种子中的一种防御素蛋白.Zp蛋白对11种植物病原真菌均具有较强抑制作用,其中对尖孢镰刀菌生长的半抑制浓度(IC_(50))为54.36μg·mL~(-1),对其孢子萌发的IC_(50)为15.97μg·mL~(-1).Zp蛋白的抑菌活性在温度0～100℃和pH 1～14的范围内稳定,其对有机溶剂(15%甲醇、乙醇、异丙醇、乙醚和丙酮)和金属阳离子(50～250 mmol·L~(-1) Mg~(2+)、K~+、Mn~(2+)和Ca~(2+))也具有较强的耐受力.     

天麻抗真菌蛋白基因(GAFP)转化彩色棉新品系抗黄、枯萎病性鉴定

将天麻抗真菌蛋白基因(Gastrodia Antifargal Protein,GAFP)利用花粉管通道法导入彩色棉品种新彩棉1号和新彩棉3号,转化后代经卡那霉素初筛、分子检测、农艺性状选择,培育出16个转基因新品系,对其在人工病圃进行田间黄、枯萎病的抗性鉴定,结果表明:参试的转基因品系中LBS007、ZB5020等5个品系既抗黄萎病又抗枯萎病,为兼抗类型;其余11个品系均为抗黄萎病耐枯萎病类型.     

一株具有抗真菌活性的食酸丛毛单胞菌的分离和鉴定

在土壤中分离到一株细菌STRA，菌块测定法显示该菌可显抑制玉米小斑病菌和稻恶苗病菌，具有抗真菌活性，该菌可以在SFM和LB等多种培养上生长，且菌落生长无明显终止现象；革兰氏染色为阴性，电镜观察可见2-4根鞭毛。（G C）%在59%-67%范围内。生化指标的检测显示该菌株对所测试的多数糖类不能发酵，经BioMerieux Vitek的革兰氏阴性菌检测试验卡（GNI）鉴定为食酸丛毛单胞菌（Delftia acidovorans）。设计两对简并引物对其16SRNA进行PCR扩增，16SRNA的序列及其相关生物信息学分析结果进一步确证生化鉴定结果。该分离株的抗真菌物质的特性鉴定、结构分析及作用机制有待进一步研究。     

聚乙二醇修饰蛋白的快速分离与纯化

【目的】建立聚乙二醇修饰蛋白的快速分离纯化方法。【方法】以4种聚乙二醇化药用蛋白为研究对象,采用阳离子交换树脂进行纯化。纯化条件:Hiprep 16/10 CM Sepharose FF(1 mL)预装柱;流动相:A液为20mmol/L pH4.0的醋酸缓冲液;B液为A液中加入1 mol/L NaCl;B液以0~100%离子强度线性梯度洗脱100 min,流速0.2 mL/min,波长280 nm检测,收集各洗脱峰。【结果】一步纯化可将单点修饰产物与聚乙二醇、多点修饰产物以及未修饰蛋白分离开来,单点修饰产物经SDS-PAGE检测呈单一条带,经质谱检测其相对分子质量与预期相符。【结论】所建立的纯化方法可快速分离纯化聚乙二醇修饰蛋白。     

玉米籽粒淀粉结合蛋白分离纯化研究

以高淀粉玉米自交系415084-2为材料,系统分析了十二烷基硫酸钠(Sodium Dodecyl Sulfate,SDS)浓度、煮沸时间对分离纯化淀粉粒结合蛋白(Starch Granule-Associated Protein,SGAPs)数量的影响,结果表明,提取SGAPs时最适SDS缓冲液浓度为10%,最适煮沸时间为2～3min。对于深入研究玉米SGAPs的性质、功能,及其相互作用具有重要意义。     

海洋假交替单胞菌抗真菌活性 物质的纯化和鉴定

洋假交替单胞菌 JI V-49产生的抗真菌活性物质对白色念珠菌、新型隐球菌、烟曲霉、黑曲霉、红色毛 癣菌和须癣毛癣菌等多种真菌的生长有明显抑制作用。 为了明确其抗真菌活性物质的化学本质、采用透析、活性炭 脱色、丙酮-乙醇沉淀等方法对 JI V-49发酵液中的抗真菌活性物质进行粗提取、得到了活性成分的粗提液。 粗提液 经 AB-8大孔吸附树脂柱层析、Sephadex G-100柱层析和 Sephadex G-25 柱层析进一步纯化、 经硅胶薄层层析检查 证明抗真菌活性物质已得到纯化、得到海洋细菌 JI V-49 产抗真菌活性成分的纯化物。 对纯化后的抗真菌活性物质 进行茚三酮反应、紫外光谱和红外光谱分析、确定该活性物质为环脂肽。 对该活性物质进行抗真菌谱分析、发现该物 质的抗真菌谱比目前临床使用的抗真菌药物更广。     

香菇子实体蛋白多糖Le-Ⅲ的分离、纯化及其性质研究

香菇子实体经热水提取,乙醇沉淀,脱蛋白,ＤＥＡＥ纤维素柱及纤维素凝胶柱层析得到淡黄色纤维状疏松固体Ｌｅ－Ⅲ,Ｌｅ－Ⅲ经聚丙烯酰胺凝胶电泳和Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ－６Ｂ柱层分析,证明了分子量分布均一的多糖－蛋白质复合物。Ｌｅ－Ⅲ红外扫描有典型的多糖吸收峰,气相色谱测单糖组成为阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖,摩尔比０．３１：０．４７：１．００：１．１５：８．９２。     

产黄酮银杏内生菌的分离与鉴定

从健康银杏植株中分离到126株内生菌,并通过HPLC-UV检测方法筛选到8株内生菌产黄酮类物质。用察氏平板培养基分离菌株,根据菌株的菌落形态、大小、颜色、生长速率、质地、生长培养基颜色变化以及菌丝体和孢子的形态特征进行鉴定。初步鉴定结果分别属于匐柄霉、丛梗孢属、交链孢属、镰孢霉属、赤霉属、蜜孢霉、放线菌属和暗梗单孢霉属。     

银杏内生真菌的分离纯化及抑菌性的鉴定

采用组织分离法从银杏(Ginkgo biloba)健康组织中分离得到25株内生真菌,根据菌株在PDA培养基上的培养特征,5株被鉴定为链孢霉菌属、4株为酵母属、4株为曲霉属,3株为毛霉属、3株为青霉属,2株为根霉属,1株为简梗孢霉属,3株分离菌株不产孢子。测定25株内生真菌对3种受试指示菌的抑制作用,共筛选得到11株至少对一种指示菌的生长有抑制作用的菌株,对抑菌活性较强的菌株进行形态学和显微分析鉴定。     

一株产银杏黄酮类成分内生菌的筛选

[目的]保护银杏资源,寻找生产黄酮类物质的内生菌。[方法]以健康银杏叶片、树根为材料,通过组织块分离法和划线分离法分离银杏内生菌;再以银杏黄酮类提取液为对照,对各发酵液进行薄层层析（TLC）分析,用Al（NO3）3-NaNO2为黄酮类物质特异性显色剂。[结果]共筛选出8株内生菌。薄层层析检测表明,菌株07-Y8的发酵产物有1条层析带,与银杏黄酮类提取液的层析带迁移率相当。[结论]菌株07-Y8内生菌能分泌黄酮类或其类似化合物,这为银杏黄酮类成分的开发利用提供了新途径。     

银杏物候学研究进展

介绍了银杏物候研究的概念、内容以及发展历史,综合论述了银杏物候研究各个阶段的研究成果与应用,对银杏物候研究的前景作出展望,认为银杏物候研究与银杏生产有着直接的关系,银杏物候研究还需进一步发展。     

银杏烂皮病的发生与防治

介绍银杏烂皮病的发生症状和发病规律,并提出相应的防治对策,以为该病的防治提供参考。     

银杏繁殖技术研究

银杏是古老的孑遗植物,具有重要的观赏价值、药用价值、生态价值及经济价值,在我国的栽培发展迅速,因此各地对银杏苗木的需求也在逐步增大,文章就常用的银杏繁殖技术进行了综述,以期为银杏的生产提供科学依据。     

银杏产黄酮内生真菌的分离与鉴定

为了保护银杏资源,寻找生产黄酮类物质的替代品,采用选择性培养基,从银杏Gingkgo biloba L.的根、茎和叶中分离7株内生真菌,经高效液相色谱分析,证实3株内生真菌可产生槲皮素和山萘素类黄酮物质,其中内生真菌Enf 7的黄酮产量最高,达到70mg·100g-1干菌丝,可作为生产银杏黄酮的候选菌株.根据真菌的孢子结构、菌丝形态、菌落生长速度等形态学特征,结合核糖体RNA基因的居间序列(internal transcribed spacer,ITS)的碱基差异,确定3株产黄酮内生真菌分别属于安培菌属的白粉菌寄生菌Anpelomyces humuli、茎点霉属的头状茎点霉Phoma glomerata和镰孢属的茄镰孢Fusarium solani.     

银杏多糖的生物活性研究进展

银杏多糖具有多种重要的生物活性和功能，是目前药物开发和研究的热点之一。对银杏多糖生物活性的研究现状进行了综述，并指出研究中存在的问题和今后的研究方向。     

银杏胚愈伤组织的继代培养及其生理特性研究

以银杏的胚为材料诱导愈伤组织产生,研究愈伤组织生长量及其培养过程中过氧化物酶(POD)活性和ATP含量的变化,结果表明,2,4-D与BA组合比NAA和KT有利于各种外植体愈伤组织的诱导,NAA与KT组合更利于愈伤的继代培养。未成熟胚子叶愈伤组织的生长曲线大致为"S"型,在含BA的培养基上,愈伤组织前期生长较快,而在后期(24~28 d)鲜重有所下降,POD活性和ATP含量在20 d时达到最大;在含KT培养基上,愈伤组织在24~28 d期间仍有增长,其POD活性和ATP含量在28 d时最大,且有继续上升的趋势。这表明POD活性和ATP含量与银杏愈伤组织的生长有一定的相关性。     

不同肥料配方对银杏叶片叶绿素及含水量的影响

以生长健壮的3年生银杏为试材,研究了不同肥料配方叶面喷施对银杏观赏叶片生长季节叶绿素a、b含量变化及叶片含水量的影响。结果表明：叶面喷肥处理能提高银杏叶片叶绿素a含量,且使第2个高峰期比对照提前1个月,但不能改变叶绿素a生长季节的变化动态。5～9月份各喷肥处理叶片叶绿素b含量均高于对照,到10月份PF2、PF4仍高于对照。叶面喷肥在一定程度上可以提高叶片含水量,但差异不明显。综合分析认为,以PF4处理即叶面喷施0.5%尿素和0.5%磷酸二氢钾效果较好,在一定程度上可以提高银杏叶片夏秋季的观赏价值。