微藻冷冻保藏的研究

将小球藻和蛋白核小球藻都分别加入10％、20％、30％的DMSO以及20％、35％和50％的甘油，保存在-20℃、-75℃和-196℃的液氮中，再各取一些不加任何防冻剂保存在20℃的培养箱里。3个月后取出培养，观察颜色变化并测量其中的叶绿素含量。结果表明：浓缩的藻液可以在20℃下长期保存；小球藻浓缩藻液添加20％的甘油在各种不同的温度下保存效果都很好，其次是10％的DMSO；而衣藻则加入10％的DMSO在各种温度下保存都较好，加入20％的甘油，在液氮中保存的效果最好。浓度大于10％的DMSO和大于20％的甘油对微藻细胞的保藏效果不佳。     

含油微藻的选育及其冷冻保藏研究

在东北地区水域采集含有浮游微藻的水样,用纱布过滤去掉水体中较大的沉淀物,取100 mL滤液转入500 mL的三角摇瓶中,加入100 mL BG11培养基,在25～28℃、光照强度为3 000 Lux,光暗比为14∶10下富集培养,采用稀释涂布法分离纯化至明显的绿色.对筛出微藻在200 mL柱式光照反应器中进行光照通气培...     

微藻高密度培养中的生长指标和适应机制

以雨生红球藻为材料，利用5cm光径平板式光生物反应器，在室内人工光照、通气条件下，建立高密度培养体系，探讨了微藻高密度培养中的生长指标问题。结果发现，表述微藻生长的传统指标出现失真现象。如在高密度培养生物量增加时，叶绿素含量或细胞数目指标都在一定程度上与干重指标反映的生长信息相背离，甚至出现相反的变化趋势。这主要是由于随着密度增高，细胞间的互相遮蔽作用加剧，单个藻细胞所能获得的光能逐渐减少。细胞在适应光能减弱的过程中，无论藻细胞体积大小还是单个藻细胞叶绿素含量都发生了明显变化。因此，建议评估高密度体系中微藻细胞的生长状况时，应当充分地考虑高密度效应对藻细胞生物学特性的影响，从对多种生长指标的综合分析中获得正确、客观的生长信息。同时，作者还发现微藻细胞群体和个体之间存在两种完全不同的高密度适应机制，协同适应机制和争夺机制。     

褶皱臂尾轮虫的高密度培养

本文针对冬季育苗生物饵料缺乏,褶皱臂尾轮虫幼体成活低的问题,采用室内高密度培育轮虫的方法,提高产量.赣榆县广星育苗场,25#～35#池用于轮虫培养,38 m2/池,1#、2#、3#池饵料培育.     

盐藻高密度培养的环境条件研究

在优化配方基础上,通过摇瓶培养考察了pH、接种密度、光照强度等环境条件对盐藻生长的影响,结果表明盐藻的最适生长pH为8.0～8.5,接种密度以(7.5～10)×10~4 cells/ml为宜,光强在3000～5000 lx范围内藻细胞生长较好,细胞密度较高。     

微藻的应用与封闭式培养方式

微藻是一种微型单细胞植物,通常具有太阳能利用率高、个体小、营养丰富、生长繁殖迅速、对环境的适应能力强、容易培养等优点,因此受到人们的重视。自１８９０年荷兰细菌学家 Ｂｅｉｊｅｒｒｉｎｃｋ用培养细菌的方法进行小球藻（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａ）和其他单细胞绿藻的分离培养以来,微藻的培养研究经历了一百多年的曲折历程。Ｗａｒｂｕｒｇ（１９１９）曾报道过高密度培养小球藻来研究植物和光合作用,并由此发现某些种类的微藻其生物量每天可以增加几倍,并且粗蛋白的含量可达到５０％以上。德国首先进行了大规模的微藻培养,其目的…     

常用海洋单细胞藻种的固体培养基保藏技术

单细胞藻种液经200IU／ml硫酸庆大霉素和200IU／ml青霉素处理，接种到不同营养成分的固体培养基，在自然光照，5℃－10℃的低温条件下可以保藏1－2年。     

轮虫的室内高密度培养与营养强化

随着海水育苗（特别是海水鱼育苗）的发展,轮虫的培养日益受到水产工作者的重视,轮虫培养技术不断进步。尤其是近几年发展起来的生物“包裹”技术,利用轮虫这个活载体,可以将海水鱼幼苗所需的某些营养物质,如二十二碳六稀酸（DHA）、二十碳五稀酸（EPA）、各种维生素等传递给幼苗。这一技术已在欧、美、日等国家的海水育苗场中得到广泛的应用。因此,如何培养出高质量的轮虫,是育苗工作中重要一环。笔者根据近两年来在大黄鱼育苗中的一些体会,将轮虫的培养及营养强化技术作一简单总结,供同行参考。1种源一是利用冬卵（也称休眠卵…     

关于轮虫高密度培养的研究

综述了国内有关轮虫高密度培养方面的研究现状,着重介绍了轮虫高密度培养过程中轮虫种类的选择、饵料种类的选择、培养条件的设置,培养的方式方法和营养强化等方面的研究成果。     

海洋微藻全封闭、连续式培养初步试验

采用连续式微藻培养系统(包括封闭式光合反应器和连续式水处理器)对小球藻和新月菱形藻的生长情况进行研究。结果表明：(1)用该技术培养的微藻生长速度快，培养密度大，培养密度可提高3倍以上。常规培养7—8d所达到的生物量在光合反应器中3d即可完成。(2)在连续培养状态下，每日收获1／5藻液，可使反应器内保持较高密度。因此该反应器具有稳定生产微藻能力。     

鲑鳟鱼类精子超低温保存研究进展

鱼类精子超低温冷冻保存技术发展至今已有60年的历史,取得了巨大的成就,尤其在鲑科鱼类的精液冷冻保存及应用方面。经过统计发现,国外学者在精子超低温冷冻方面取得的主要突破都集中在鲑鳟鱼类领域。本文综述了鲑鳟鱼类精子超低温保存技术的发展史、相应的关键技术和冷冻保存研究的意义、基本生物学原理以及有关精液冷冻保存的研究现状与进展。     

富含EPA的海洋微藻的规模化生产

单细胞海洋微藻是人类正在开发的具有极大应用价值的生物资源,在微藻代谢产生的诸多化合物中,二十碳五烯酸（EPA,20：5n-3）尤其引起人们的关注。EPA在预防和治疗人类多种疾病（如心血管疾病、癌症和炎症性疾病）方面有显著作用,而且还能起到延缓衰老的生理作用。如今EPA的唯一商业来源是深海鱼油,但由于味道、气味和稳定性等方面的问题,这种资源不尽人意。此外,鱼油中大量的其他多不饱和脂肪酸使得EPA的提纯更为复杂,导致纯品的价格很高。     

六株海洋微藻强化的酵母轮虫对中华绒螯蟹溞状幼体的影响

实验用6株海洋微藻来强化用酵母预培养的褶皱臂尾轮虫,并将强化后的轮虫投喂中华绒螯蟹的溞状幼体,以研究使用经不同食物强化后的轮虫投喂溞状幼体对溞状幼体变态时间及成活率的影响。结果表明：经过直链藻强化的轮虫投喂的溞状幼体的成活率及变态时间均优于其他海洋微藻强化的褶皱臂尾轮虫,海水蒜头藻与海水小球藻次之,酵母轮虫最差。     

宁波海洋文化及旅游开发研究

海洋文化是人类社会历史实践过程中受海洋影响所创造的物质财富和精神财富的总和。宁波市丰富的海洋文化遗存给海洋文化旅游发展提供了有利条件。海洋文化旅游资源的开发将有力地推动宁波旅游业的发展，发挥海洋旅游产业在宁波建设现代化国际城市中的作用。文章通过对宁波海洋文化内涵及其价值的分析，探讨了旅游开发的思路。     

对虾高密度养殖水体中有机物含量的变化

对对虾高密度养殖水体中有机物含量的变化进行了监测和分析。试验结果表明:对虾高密度养殖水体中总有机物含量和可溶性蛋白质含量是随着养殖时间的延长而不断增加,而可溶性糖的含量则随着养殖时间的延长而逐渐减少,并维持在一个较低的水平。     

大菱鲆胚胎的玻璃化冷冻保存

Vitrification solutions were examined for their suitability of cryopreservation of turbot (Seophthulnms maximus) embryos. PMPI gave higher survival rate (75.68%) than other vitrification solutions and was considered to be suitable liar the cryopreservation of turbot embryos. The freezing point of the vitrification solutions consisted of PG and MeOH in the proportion of 3:2 was measured when the vitrification solutions were cryopreserved. It showed that the vitrification solutions with a cryoprotectant concentration of over 41% have no freezing point and the freezing points of vitrification solutions containing 33.33%-40% cryprotectants were between -32.4℃ and -65.4℃, The freezing point decreased with the increase of cryoprotectant concentration. The resistance of turbot embryos at different stages to the cryoprotectants was studied, It was found that the turbot embryos from 4-5 pairs somite to tail bud were more resistant to cryoprotectants and suitable to vitrify. A live embryo was obtained after cryopreservation in liquid nitrogen for 14h and was hatched out。     

中华绒螯蟹胚胎的玻璃化冷冻保存

研究了中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)4个不同发育时期胚胎对A号玻璃化液的耐受性和玻璃化冷冻保存。结果表明,不同时期的胚胎对玻璃化液的耐受能力不同,其中卵裂期胚胎对玻璃化液的耐受能力较差(20~30 min),前无节幼体期和原溞状幼体期胚胎在玻璃化液中的适应时间较长(40~60 min);随着平衡时间的延长,中华绒螯蟹各个时期的胚胎成活率逐渐下降。中华绒螯蟹前无节幼体期胚胎在A号玻璃化液中平衡40 min,0.25mol/L的蔗糖分别洗脱5、10、15、20 min后,胚胎成活率无显著性差异(P>0.05)。前无节幼体期胚胎在A号玻璃化液中平衡40 min,在–196℃冷冻40 min,快速解冻后用0.25 mol/L的蔗糖洗脱10 min,有8个胚胎成活,成活率为(9.3±2.5)%,胚胎培养至第4天死亡;原溞状幼体期胚胎在A号玻璃化液中平衡40 min,在–196℃冷冻35 min,经相同浓度的蔗糖洗脱相同的时间,有7个胚胎成活,成活率(11.3±3.6)%,培养至第6天时,1个胚胎孵化出膜,出膜胚胎成活1d后死亡。     

中华鲟胚胎细胞的冷冻保存及其核移植

为了保存濒危鱼类中华鲟种质资源,对其囊胚细胞和原肠细胞进行了冷冻保存和核移植试验。用二甲亚砜(DMSO)、1,2-丙二醇(PG)、羟乙基淀粉(HES)3种抗冻剂,配制4种冷冻保护液:CP1(12%D)、CP2(10%P)、CP3(8%D 6%E)、CP4(7%P 6%E),冷冻细胞存活率分别为47.4%±4.7%、64.4%±3.6%、54.7%±4.7%、76.7%±5.7%,CP4保存效果最好,说明添加非渗透型抗冻剂羟乙基淀粉能提高冷冻保存细胞的存活率。比较了两种冷冻方法,发现细胞在-7℃平衡30min之后直接投入液氮的一步冷冻降温法是可行的。对不同发育时期的胚胎细胞冷冻存活率进行了比较,结果表明原肠细胞冷冻存活率(64.4%±11.8%)明显比囊胚细胞的(57.1%±11.2%)高(P<0.05)。用冷冻复苏后的囊胚细胞和原肠细胞作供体,以中华鲟未受精卵作受体进行核移植,各移植了469和392枚卵,分别获得了5尾和2尾克隆鱼,核移植成功率分别为1.1%和0.5%。表明可通过冷冻保存胚胎细胞结合核移植技术保存鱼类种质资源。     

日本蟳精子超低温冷冻保存技术的研究

以精子存活率作为评价指标,采用两步降温法研究了稀释剂、抗冻保护剂和预冷时间对日本蟳精子超低温冷冻保存效果的影响。结果表明:以采用稀释剂II、15%二甲基亚砜(DMSO)作为抗冻保护剂的保存效果最佳。在液氮中保存24 h后,精子存活率可达83.76%,保存一年后可达73.81%。精液的第一次预冷时间以25 min为宜。