盐藻超氧化物歧化酶分子类型鉴定

对盐藻细胞反复冻融和超声波破碎获得超氧化物歧化酶粗酶液,再经丙酮沉淀、70℃热处理、DEAE-52柱层析获得纯化超氧化物歧化酶,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,检测出1条超氧化物歧化酶谱带。该纯化超氧化物歧化酶在紫外光区的吸收峰波长259 nm和可见光区的吸收峰波长671 nm与报道的Cu/Zn-SOD基本一致,并且它对H2O2和KCN均敏感,说明盐藻中的超氧化物歧化酶为Cu/Zn-SOD类型。     

盐藻高密度培养的环境条件研究

在优化配方基础上,通过摇瓶培养考察了pH、接种密度、光照强度等环境条件对盐藻生长的影响,结果表明盐藻的最适生长pH为8.0～8.5,接种密度以(7.5～10)×10~4 cells/ml为宜,光强在3000～5000 lx范围内藻细胞生长较好,细胞密度较高。     

盐胁迫条件下盐藻的生长及特异表达蛋白的研究

采用不同NaC1浓度培养盐藻.通过分光光度法记录其生长状态.试验结果表明,在NaC1浓度为1.0～2.0 mol/L时.盐藻生长状态良好;NaCl浓度为3.0～4.0 mol/L时盐藻生长缓慢;盐藻经不同NaCI浓度培养0.5、5、23 h后抽提蛋白,所获得的粗提蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,观察不同NaCI浓度培养液中生长的盐藻可溶性蛋白质SDS-PAGE图谱.发现在低NaC1浓度(1.0～2.0 mol/L)下培养时23、51 kD蛋白略有变化但变化不大;在高NaC1浓度(3.0～4.0 mol/L)下胁迫5、23 h时23 kD蛋白显著增加;高NaC1胁迫23 h时51 KD蛋白含量下降明显.验结果证明51、23 kD蛋白可能与盐藻耐盐机制有关.     

鱼腥藻藻蓝蛋白的提取

对鱼腥藻藻蓝蛋白的大规模提取方法进行了初步的探索。对实验室精细的小规模分离提取方法进行了简化。用0．01mol／L磷酸盐缓冲液浸提，经3次反复冰融渗透震荡处理，使细胞破碎，释放藻蓝蛋白，然后离心分离。用磷酸缓冲液反复提取至上清液透明。采用这种方法从鱼腥藻中提取藻蓝蛋白，可处理的样品规模大，藻蓝蛋白得率高达98．8％，并且操作方法简便，节约药品，成本低。     

盐藻醛缩酶的盐适应性及其与物质积累的关系

在不同N aC l质量浓度下培养盐藻,分析盐藻醛缩酶的盐适应性及其与物质积累的关系。试验结果表明,在NaCl质量浓度为40～120 g/L时,盐藻醛缩酶活性与盐度具有正相关性;在NaCl质量浓度为120～200 g/L时,盐藻醛缩酶活性与盐度具有负相关性;在NaCl质量浓度为120 g/L时,盐藻醛缩酶活性最高。盐藻醛缩酶是一种高盐适应酶。盐藻醛缩酶活性与盐藻细胞密度、叶绿素形成和蛋白质积累均呈正相关关系。在盐藻醛缩酶活性最高时,盐藻物质积累量最多。     

杜氏盐藻和亚心型扁藻混合培养生长的初步研究

在实验室条件下研究了杜氏盐藻和亚心型扁藻在单独培养和相同接种比例混合培养下的生长情况。结果显示,单独培养盐藻的生长经历了3个明显的阶段,生长曲线呈现"S"型;单独培养扁藻与混合培养藻在18 d内还未到达稳定期,仍保持一定的生长态势。混合培养、单独培养盐藻以及单独培养扁藻的最大光密度值(OD680)分别为0.784、0.702和0.765。混合培养藻的生物量(0.841 mg/ml)也稍高于单独培养盐藻(0.582 mg/ml)和单独培养扁藻的生物量(0.819 mg/ml)。试验结果表明,混合培养盐藻和扁藻具有一定的促进藻生长和提高生物量产出的潜力。     

盐藻的培养及培养条件对β—胡萝卜素的影响

盐藻在分类上属绿藻门,绿藻纲,团藻目,盐藻科。盐藻属中,主要培养种类是盐藻(Dunaliella salinaTeod),又称杜氏藻,是一种单细胞的海洋经济藻类,广泛分布在世界各地的海洋、盐池、咸水湖和淡咸水中,是已知唯一能在接近淡水至饱和盐溶液中生长的真核生物。盐藻对于极端环境有极好的耐受性,在高盐、高光、高     

盐藻的开发利用

盐藻是β-胡萝卜素的最好天然产源，在适当的条件下，能大量累积β-胡萝卜素，最高可达干重的10％左右，远远高于其它动植物体内的含量。目前关于盐藻的养殖生物学、盐藻β-胡萝卜素的生产技术以及其开发和应用，已是各国海洋学家研究的焦点之一。随着盐藻的生物技术和应用研究的不断进展，盐藻在保健食品、功能性食品、医药行业和饲、饵料添加剂等领域将会得到广泛的应用，     

6-BA与盐藻生长的关系

试验结果表明,在6-BA质量浓度较低时,6-BA与盐藻生长正相关;在6-BA质量浓度较高时,6-BA与盐藻生长负相关;培养液中1.5 mg/L的6-BA是盐藻的最佳促生长质量浓度,且6-BA对盐藻生长的促进效果可被萘乙酸(NAA)提高.     

盐藻过氧化氢酶对盐的适应性及其与物质积累的关系

将盐藻分别接于NaCl质量浓度为40、80、120、160、200g/L的培养液中,置光照培养箱中培养,分析盐藻过氧化氢酶对盐的适应性及其与物质积累的关系。结果表明,在NaCl质量浓度为40～120g/L和120～200g/L的范围内,盐藻过氧化氢酶活性与NaCl质量浓度分别具有正负相关性;在盐度为120g/L时,盐藻过氧化氢酶活性最高。盐藻过氧化氢酶是一种高盐适应酶,活性与盐藻细胞密度、叶绿素形成和蛋白质积累呈正相关关系。在盐藻过氧化氢酶活性最高时,盐藻物质积累量最多。     

一株野生型耐饱和盐度的盐藻

从江苏盐城射阳盐场自然海水中分离得到一株可在NaCl浓度为6.15 mol/L培养基中很好生活的野生型盐藻,是目前已报道的最高盐度.研究其在不同盐度下的生长适应性,发现该盐藻细胞可以生活在多个NaCl浓度培养基中;以纵裂方式增殖;盐藻细胞通过改变自身的形状和形成透明状膜来快速响应盐度突然改变.     

锰对盐藻生长与物质积累的调控作用

试验结果表明,培养液中锰质量浓度过高或过低都不利于盐藻细胞的生长与物质积累。培养基中锰质量浓度为4.0 mg/L时,盐藻细胞生长、蛋白质合成与β-胡萝卜素积累最多。当培养液中锰质量浓度较高(8.0 mg/L)或较低(2.0 mg/L)时,单个盐藻细胞中的蛋白质与β-胡萝卜素含量较高。但此时,因培养液中细胞密度较低,盐藻细胞积累的物质总量仍然较少。在锰质量浓度较高或较低的逆境条件下,盐藻可能通过适应性反应形成了逆境蛋白质与胡萝卜素等。     

盐度对盐生杜氏藻生长及其色素积累的影响

试验结果表明.在试验盐度范围内(30～120).较低的盐度有利于盐生杜氏藻生长和分裂,最大细胞密度为8.92×105cell/ml.对照组仅为3.81×105cell/ml;盐度为60时.β-胡萝卜素含量最高,为102 mg/g.对照组仅为36 mg/g;盐度为30时,叶绿素a含量最高,为82 mg/g.对照组最低,为17 mg/g;低盐度有利于细胞蛋白质合成.蛋白质最高含量为37.5%,对照组仅为27.9%.     

锰钼组合在盐藻生长与物质积累中的作用

研究了微量元素锰、钼的不同质量浓度组合对盐藻细胞生长与物质积累的影响.试验结果表明,培养液中适当锰钼质量浓度的组合对盐藻细胞的生长和物质积累有促进作用,而锰钼质量浓度过高或过低则都是相对不利的.在试验的9种锰钼质量浓度组合中,以培养液中4 mg/L锰和60 μg/L钼质量浓度组合对盐藻细胞的生长和物质积累促进作用最好,它可使培养液中的盐藻细胞密度、蛋白质积累量和β-胡萝卜素积累量均达到最高.培养液中6 mg/L的锰和80 μg/L的钼质量浓度组合可使单个盐藻细胞中β-胡萝卜素、蛋白质积累量最高,但可能仅是在锰、钼过多的逆境条件下,盐藻细胞的适应性反应.     

七种常用培养基对盐藻生长和色素含量的影响

为筛选出能应用于大规模盐藻生产的最适培养基,选择7种常用的培养基来培养盐藻,分析其生物产量和色素含量。试验结果表明,改良Johnson培养基和改良Pick培养基能较好的促进盐藻的生长和色素累积,但生长和色素累积的最适培养基不一致,改良Pick培养基培养的盐藻生物产量最高,改良Johnson培养基培养的盐藻色素含量最高。由投入产出比可知,改良Pick培养基最适合于高生物产量和高色素产量兼顾的盐藻大规模生产,而改良Johnson培养基最适合于高色素产量的盐藻大规模生产。     

VB6对盐藻色素形成、细胞生长和蛋白积累的影响

将盐藻接入不同质量浓度的VB6培养液中,检测其对盐藻色素形成、细胞生长与蛋白质积累的影响。试验结果表明,VB6对盐藻的作用效应表现为低质量浓度促进高质量浓度抑制。能够使盐藻β-胡萝卜素、叶绿素a、叶绿素b形成最多、细胞繁殖最快、蛋白质积累量最大的VB6质量浓度为250μg/L。在此质量浓度下,每个细胞中的蛋白质含量相对较低,这可能是由于盐藻细胞快速繁殖所致。