牛促黄体素（bLH）同源放射免疫分析法的建立

本实验用兔抗牛LH血清、~(125)I-标记的牛LH建立牛LH的放射免疫分析法。本方法灵敏度为0.12ng USDA-bLH-B-5/ml,与NIH-bTSH-S_(10),USDA-bFSH-BP_3和oPRL的交叉反应分别小于1.0％,0.1％和0。牛血浆添加USDA-bLH-B-5的回收率为100.8±4.7％,标准曲线的范围为0.019-1.25ng USDA-bLH-B-5。组内变异系数为3.4％(n=20)、组间变异系数为5.2％(n=7)。垂体兴奋试验表明本方法能灵敏、特异地测定出牛血液中LH的变化。     

用促黄体素(LH)配合黄体酮治疗奶牛卵巢滤泡囊肿

奶牛卵巢滤泡囊肿,在孕牛中占的比例较大,它不但给奶牛的繁殖工作带来了很大的困难,而且如不及时治疗或治疗不当都会导致奶牛终身不孕,从而造成极大的经济损失。我站近年来共发生三例,笔者在实践中采取低价药来源容易的黄体酮为主,LH 为辅治疗,除66号牛由于缺 LH 时间拖得过长失败外,现22号、1266号均已治愈受孕,取得了良好的效果,现将该病的症状、诊断及治疗方法介绍如下:     

多种动物血清中生物活性LH/CG的放射受体测定法(RRA)

利用绵羊卵巢黄体细胞膜作为 LH / CG受体来源 ,以放射性12 5 I- h CG作为示踪标记配体 ,以高纯度的h CG为标准品建立标准曲线 ,建立了一种有效的 LH- RRA测定方法。它能够直接检测多种动物血清中与受体结合的具有生物活性的 LH的动态变化。该法测定程序简单 ,在 2 h内完成并获得可重复性结果。测定方法的灵敏度为 0 .3ng/管 ,批内和批间误差分别为 ( 3.4 1± 3.14 ) %和 ( 8.70± 7.93) %。动物 (牛、兔、猪 )垂体液中 LH含量反应曲线和 h CG标准曲线平行良好。牛、羊、猪、兔、鼠和仓鼠血清中 LH的剂量反应曲线和h CG标准曲线的平行性表明 ,该 LH- RRA可以用来检测不同动物血清中的具有生物活性的 LH变化。回收试验表明 ,在该测定方法中加入 3、10、30 ng h CG时的回收率分别为 ( 10 0 .59± 5.55) %、( 99.55± 9.86 ) %、( 10 4 .2 8± 7.4 5) %,说明测定结果的正确性。该 LH - RRA的测定结果反映了动物正常的生理状态。本试验垂体中有活性的 LH水平远远高于外周循环中的水平 ,雌、雄动物循环血液中的 LH含量不一致。     

应用合成的促黄体素释放激素(LH—RH)治疗牛卵泡襄肿的研究:Ⅱ注射前后卵泡襄肿牛血液LH的变化

牛卵池囊肿的发生原因已有种种报道,认为它直接与垂体前叶的促性腺激素分泌机能的异常有关。但对在各种状态下牛血液中的LH浓度的报道甚少。最近随着放射免疫法(RIA)的发展,确认在牛垂体机能异常时,特别是牛患卵泡囊肿时血液中LH浓度比正常牛发情期以外的浓度要高。     

双峰驼排卵机制的研究Ⅰ.促黄体素(LH)的放射免疫测定技术

本实验以羊参考制剂 NIH—LH—S_(18)为标准品,利用抗羊 LH 血清—放射性碘标记羊 LH 异源放射免疫测定系统(双抗体法)测定了双峰母驼卵泡发育期和精液诱导排卵前后血液中 LH 的水平。对此测定方法的特异性、灵敏度、准确度和精确度均分别进行了相应的检验,证明这一异源放射免疫测定系统可以对双峰驼血液中的 LH 进行测定,为双峰驼排卵机制的研究提供了一种有用的手段。测定时标准曲线的范围为0.125～32.0ng,灵敏度为0.1ng。一次测定内的变异系数为5.84％,测定间的变异系数为17.38％。应用此技术测得两头母驼的4个卵泡发育期中血液内 LH 的基础水平为2.70±1.29ng/ml;两例母驼在人工输精后5～8小时内血液中 LH 的峰值为11.20±4.67ng/ml,约为基础水平的4倍;经直肠检查,在 LH 峰值后40小时左右排卵。     

垂体促滤泡素(FSH)和垂体促黄体素(LH)对母貂生殖机能的影响及与绒膜激素(HCG)的对比分析

<正> 水貂是季节性繁殖动物,其生殖机能和性器官的发育与衰退随季节的变化而变化。在引起这种变化的诸因素中,起主导作用的是日照长度。有些新办场、个体养貂户往往缺乏这方面的知识,忽视了光照对母貂生殖机能的严重影响,以致造成很大的损失。为了探索阳H、LH在水貂生     

应用合成的促黄体素释放激素(LH—RH)治疗牛卵泡囊肿的研究:Ⅰ卵泡囊肿的治疗效果

对于牛卵泡囊肿的治疗,日本以往主要是应用大剂量的人绒毛膜促性腺激素(HCG)。关于卵泡囊肿牛的治愈机理,山内等进行了探讨。他们应用大剂量的HCG,并配合应用促黄体素,诱发卵泡囊     

用促性腺素释放激素(GnRH)类似物治疗牛卵巢疾病

对210头患卵巢疾病的病牛(奶牛121头,日本种牛89头),用肌注GnRH类似物进行治疗。注射量,卵巢囊肿一次500μg,排卵障碍、卵巢静止、卵巢萎缩、滤泡发育不全以200μg为标准,根据症状不同而增减。注射GnRH后,调查了1个月以内的发情率和2个月以内受精的怀胎率。64例卵巢囊肿的发情率为36％,怀胎率为39％,到发情为止的日数为17.5±8.6日。51例排卵障碍的发情率为88％,怀胎率69％,到发情为     

3个品种绵羊超数排卵处理后卵巢上促黄体素受体表达差异的研究

本研究旨在探讨在具有不同超数排卵效果的绵羊品种中,在进行超排处理后其卵巢上的促黄体素受体(LH receptor,LHR)分布情况,为进一步研究二者的相关性以及据此为改进超排效果奠定基础.根据超数排卵效果的优劣依次选择3个我国地方绵羊品种:小尾寒羊、白滩羊和乌珠穆沁羊.在常规超排最后一次注射FSH后的8、16和24 h分别各取3只绵羊的卵巢,采用免疫组织化学法观察3个品种绵羊卵巢上LHR的分布情况.结果表明:LHR存在于3个地方品种绵羊卵巢有腔卵泡的颗粒细胞和膜细胞上,但在早期卵泡上不表达;各品种绵羊的近成熟卵泡上LHR阳性细胞率都显著高于相应的次级卵泡(P＜0.05);3品种绵羊近成熟卵泡中LHR的阳性变化率存在显著差异,从高到低依次为小尾寒羊＞白滩羊＞乌珠穆沁羊(P＜0.05).籍此可以得出以下结论:LH对绵羊早期卵泡发育的诱导可能不需要通过其特异性受体起作用;3品种绵羊近成熟卵泡中LHR的阳性变化率与超排效果是一致的,表明超数排卵的效果可能与绵羊卵巢上的LH受体分布存在一定的联系.     

家禽在强制休产期内血浆中促黄体分泌素(PRL)和促黄体素(LH)的浓度

对禁食并给予8小时光照:16小时黑暗而引起停产的白来航母鸡的PRL和LH浓度进行测定。PRL和LH浓度在禁食时下降,重新喂食后又上     

宁夏滩羊发情周期血液中促黄体素(LH)、孕酮、雌二醇——17β含量的测定

用放射免疫测定法测定了宁夏滩羊母羊(13只)外周血清中促黄体素(LH)、孕酮及雌二醇—17β的含量及其变化。血清LH的含量,在黄体期,其值很低,为5.0±0.41ng/ml,到发情开始后约6—12小时增至75.13±17.64ng/ml。孕酮含量的变化,在周期的黄体期,其值最高为2.84±0.10ng/ml;而在发情开始到发情后第二天最低0.52±0.06ng/ml。雌二醇—17β的含量是在发情开始前6—24小时时上升的;其值的变化范围是从黄体期的14.86±1.24Pg/ml到发情开始时的38.7±5.8Pg/ml。     

绒毛膜促性腺激素(HCG)对母牛受胎率的影响研究

研究了在母牛发情期用绒毛膜促性腺激素(HCG)对母牛受胎率的影响。结果显示,在牛人工授精工作中使用绒毛膜促性腺激素,能够显著提高母牛受胎率。     

用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测牛病毒性腹泻/粘膜病(BVD/MD)

ELISA是检测BVD/MD的一种快速、灵敏、可靠而经济的血清学诊断方法,其结果与病毒中和试验相符合,而与补体结合试验却不十分相符。有人认为ELISA比中和试验更少受试验用毒株的影响。 本试验既可用间接法,也可用阻断法。建立该试验的主要困难在于制备出有足够效     

用 MTT 比色分析法检测牛白细胞介素-2的研究

以伴刀豆蛋白 A(Con A)活化的牛外周血单个核细胞(PBM)作应答细胞,对四甲基偶氮唑盐(MTT)比色分析法检测牛白细胞介素-2(IL-2)的各项参数作了系统探讨,首次建立了检测牛 IL-2的 MTT 比色分析法。结果表明,活化应答细胞时的细胞密度以2.5～5×10~6个/ml、Con A 浓度以12.5μg/ml、活化时间以48～72小时为宜;MTT 比色分析的最适条件为:应答细胞密度1～2×10~5个/孔,α-甲基-D-甘露糖苷(α-mM)终浓度为12.5mg/ml,样品与应答细胞作用时间为36～48小时,MTT 用量为50μg/孔,MTT 作用时间为2.5小时,结果证明,本方法可检出少至390个活应答细胞、0.03个单位(U)的重组人 IL-2(rhIL-2)和2~(-5)稀释的含牛 IL-2培养上清.本方法避免了传统~3H-胸腺嘧啶核苷(TdR)掺入法的诸多不便,是一种方便、敏感、可靠和安全的牛IL-2检测法.     

用M_(13)克隆系统建立牛传染性鼻气管炎病毒基因组无性繁殖系

用M_(13)克隆系统对牛传染性鼻气管炎病毒进行克隆,获得14个重组体。用其中9.6kb片段制成的探针,可与IBRV—DNA进行杂交,证实已建立了IBRV基因组的无性繁殖系。 牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)属于疱疹病毒,它的基因组是线性双链DNA,约154kb(千碱基对)。 M_13为丝状雄性特异的大肠杆菌噬菌体,它具有一个单链环状DNA基因组及蛋白外壳,当感染宿主细胞后,单链环状的基团组(ssDNA)转变为双链环状的复制型((?)DNA)。M_(13)DNA经改造已成为有效的克隆载体,并广泛地应用于核酸的序列分析及单链DNA探针。我们采用了M_(13)mp作为克隆载体。改建的M_(13)载体转染JM_(103)细菌后可以产生有活性的β—半乳糖苷酶(Lac~ ),在用IPTG诱生和用X-gal作为酶底物时可以形成蓝色空斑,在Lac DNA的多个单一酶切点序列中插入外源基因,就不能产生有活性的半乳糖苷酶,从而形成透明空斑,可以用这种正性标记挑选重组体。     

牛生长激素研究的进展(综述)

牛生长激素从50年前即被认为可以提高产奶量。近年来的一系列研究报道都证实了它在奶牛乳合成中的积极作用。在美国加州大学戴维斯分校举行的81届美国乳牛协会年会上,牛生长激素的研究论文至少达12篇,人们称其为美国乳牛业的冲击波。关于生长素的研究报道国外几乎没有中断过,近年来更是大量     

黑龙江乳牛(黑白花演州牛)用荷兰牛杂交改良的效果

根据黑龙江乳牛育种的需要,近年黑龙江省有部分场引用荷兰进口的小型荷兰种公牛及日本进口的大型荷兰种公牛(以下简称小型荷兰牛、大型荷兰牛或小型、大型),分别与黑龙江乳牛进行了杂交。旨在通过导入杂交的方法,提高黑龙江乳牛的产奶量、乳脂率,改善外貌桔构上的尖、斜、高尻,腰背结合不良,乳房发育不足,毛色杂乱等缺点,并增加其肉用性能。逐步培育适合农村和城市饲养的乳肉兼用型和乳用型牛。1961—1962年,黑     

LH对沼泽型水牛超数排卵的作用(研究简报)

水牛超数排卵中主要技术难题之一是经人工数素超排后,卵巢中己发育的卵泡,不能正常排出卵子,本试验目的是探讨如何提高超排水牛的排卵率。8头具有正常的性周期,年龄6～8岁的本他沼泽型水牛用于该项研究。首先对试验水牛进行二次性周期同期化处理,每头肌注PG(前列腺素F_2α)0.3mg,相隔11天。在母牛第二次发情后11天,进行连续5天的超数排卵处理。每头母牛每天注射2次FSH—OV(北京动物所生产的高纯度促卵     

肿瘤转移抑制因子(Kisspeptin)对牛卵巢颗粒细胞凋亡的影响

肿瘤转移抑制因子(Kisspeptin)在颗粒细胞上有表达,但其对颗粒细胞凋亡的作用尚不清楚,本试验旨在利用流式细胞术和荧光定量PCR的技术研究Kisspeptin对牛卵巢颗粒细胞凋亡的影响。向DMEM-F12培养液中分别添加0、100 nmol/L的Kp-10培养牛颗粒细胞,24 h后收集细胞,用流式细胞技术检测细胞凋亡和细胞周期,用荧光定量PCR技术检测Caspase-3、Bcl-2、Fas和Fasl的m RNA表达。结果表明:Kisspeptin可显著促进牛颗粒细胞凋亡,且伴随着Caspase-3、Fas和Fasl m RNA表达上调及Bcl-2 m RNA表达下调(P0.01);流式细胞分析表明,Kisspeptin可使牛颗粒细胞在G1期增加、S期下降(P0.05)。研究结果说明,Kisspeptin可促进牛颗粒细胞凋亡,这一作用可能通过上调促凋亡基因Caspase-3、Fas、Fasl和下调抗凋亡基因Bcl-2的m RNA表达实现。