禽霍乱＋大肠杆菌病 二联蜂胶灭活疫苗与油佐剂疫苗注射部位的动态病理组织学比较观察

用禽霍乱 大肠杆菌二联蜂胶灭活疫苗和油佐剂疫苗分别胸肌注射免疫肉鸡，分别于免疫后7d、14d和28d剖杀，取注射部位的肌肉组织，常规石蜡包埋切片观察。结果为，蜂胶疫苗免疫组免疫后7d时，肌纤维轻度水肿，纤维间有大量淋巴细胞和巨噬细胞的浸润，巨噬细胞吞噬有蜂胶颗粒，14d时肌纤维则恢复正常；油苗注射组免疫后，7d时肌肉中度水肿，其间有大量油乳状疫苗残留，镜检可见肌纤维断裂、坏死，其间有较多较大的油囊，囊壁由大量增生的成纤维细胞、异嗜性粒细胞、巨噬细胞、小血管及淋巴样细胞组成，细胞增生持续存在到28d，最后形成肉芽肿结构。研究结果表明，蜂胶疫苗免疫后对局部组织学影响明显小于油苗注射组。     

猪生殖和呼吸系统综合征蜂胶疫苗和油乳剂疫苗注射部位的组织学变化比较

用猪生殖和呼吸系统综合征（PRRS）蜂胶灭活疫苗和油乳剂疫苗给小白鼠腿肌注射免疫，分别于免疫后第2、7、14和35d剖杀，采取注射局部肌肉组织进行病理组织学观察。结果显示，蜂胶疫苗注射后即被吸收，局部不留痕迹，组织学变化轻微；油乳剂疫苗注射后在35d试验期内一直未能全部吸收，局部呈炎性组织学变化。峰胶灭活疫苗不但对局部的组织学影响明显小于油乳剂疫苗，而且可趋化大量吞噬细胞到注射局部，促进抗原的高效递呈，并且可在注射局部的吞噬细胞浆中停留35d以上，可能起到了类似“抗原库”的作用，从而更加持久有效地诱导免疫应答。     

猪伪狂犬病蜂胶疫苗和油佐剂疫苗对小白鼠注射部位损伤的病理组织学比较

用猪伪狂犬病 g E/ g I基因缺失蜂胶灭活疫苗和油佐剂疫苗分别腿肌注射免疫实验动物小白鼠 ,分别于免疫后 2 ,7,1 4 d和 3 5d剖杀 ,取注射部位的肌肉组织 ,常规石蜡包埋切片观察。结果表明 ,蜂胶苗注射后立即吸收 ,局部不留痕迹 ,感官与对照相比无任何差异。免疫 2 d注射局部显微变化轻微 ,7d后肌纤维间隙发现吞噬黄色蜂胶疫苗的细胞 ,1 4 d此种细胞更多 ,3 5d汇聚成片 ;油苗注射后在 3 5d的试验期内一直未能全部吸收。免疫 2 d见肌纤维断裂、肿胀、坏死 ,大量嗜中性粒细胞浸润 ,肌纤维间隙广泛分布油囊 ,7d时局部炎症仍很严重 ,1 4 d表现炎症转归 ,至 3 5d形成肉芽组织包裹的油囊结构。结果表明 ,蜂胶疫苗免疫后 ,不但局部组织学影响明显小于油苗注射组 ,而且可趋化大量吞噬细胞到注射局部 ,促进抗原高效递呈 ,且可在注射局部的吞噬细胞胞浆中停留 3 5d以上 ,可能起到了类似“抗原库”的作用 ,从而更加持久有效地诱导免疫应答     

禽霍乱与大肠杆菌病多价蜂胶二联灭活疫苗的研究

为研制绿色环保型的禽霍乱与大肠杆菌病多价二联灭活疫苗,本研究以禽多杀性巴氏杆菌强毒株G48-1、G48-2和禽致病性大肠杆菌常见血清型01/0154、02/086、078、018、08/093等为制苗菌株,分别以改良马丁琼脂和马丁肉汤进行固体表面培养和高密度发酵培养制备抗原,将灭活的抗原铺以具有广谱生物学活性的天然物质-蜂胶为免疫增强剂,已拥有完全自主知识产权的纳米蜂胶疫苗制造工艺技术平台制备禽霍乱与大肠杆菌病多价蜂胶二联灭活疫苗.试验结果表明,疫苗安全可靠,无明显的干扰现象,免疫后5～7 d产生坚强保护力,对禽霍乱和鸡大肠杆菌病的近期保护率均为100%.以实验动物小鼠代替本动物进行二联疫苗效检取得成功,本效检方法可缩短检验期限7 d,降低检验成本,具有更敏感、更特异、更客观、更简便等特点.禽霍乱采用攻毒法,大肠杆菌采用改良微量凝集试验测定抗体效价法测定禽-大二联疫苗的免疫期与保存期.结果表明,该疫苗的免疫期为6个月以上,-10℃保存期为18个月;4℃～8℃为12个月;15℃～30℃为6个月.田间免疫试验表明,疫苗安全可靠,现场应用已逾2亿羽份,效果良好.     

禽霍乱蜂胶灭活疫苗形态结构的电镜观察

对禽霍乱蜂胶灭活疫苗的形态结构进行了电镜观察。结果表明，该疫苗的形态结构主要为蜂交颗粒与菌体相联的复合物，也有少量裸露游离的菌体和蜂胶颗粒，蜂胶颗粒均为球形，直径一般在１００－２００ｎｍ之间。蜂胶与菌体之间的独特构型可能是该疫苗具有免疫期长且产生免疫力时间早的主要原因。     

禽霍乱、大肠杆菌病和克雷伯菌病多价蜂胶三联灭活疫苗的研制

利用禽巴氏杆菌C48-1、C48-2强毒株、禽大肠杆菌O78和O1血清型强毒株及克雷伯菌临床分离株制苗,通过疫苗对鸡的免疫效力试验、疫苗最小免疫剂量试验、疫苗产生坚强免疫力时间的测定、疫苗免疫期的测定和疫苗保存期的测定等,研制出禽霍乱、大肠杆菌病和克雷伯菌病多价蜂胶三联灭活疫苗.结果该三联灭活疫苗安全可靠,免疫原性良好,最小免疫剂量为0.5 mL/只,免疫7 d后产生坚强保护力,疫苗对上述疾病的保护率为100%,免疫期为6个月,4 ℃条件下保存期为9个月.     

禽霍乱蜂胶灭活疫苗研究与应用总结

研制的禽霍乱蜂胶灭活疫苗，５天产生坚强免疫力，保护率高达９０－９６．５％，免疫期长达６个月以上。经全国２９个省、市、自治区的２亿羽从鸡、鸭、鹅等各种家禽现地应用表明，该苗具有安全可靠，易于注射、减少应激、不影响产蛋、无毒副作用等特点。获国家级新兽药证书和国家级新产品证书。     

禽霍乱、大肠杆菌病蜂胶二联灭活疫苗中大肠杆菌凝集抗体消长规律的研究

应用改良大肠杆菌凝集试验对禽霍乱、大肠杆菌病蜂胶二联灭活疫苗中大肠杆菌凝集抗体消长规律的监测表明：3 d的抗体效价为2-3 Log2,5 d达到6 Log2以上,30 d达到高峰8.5-9.5 Log2,6个月仍可达到6 Log2。3批成品监测结果基本一致,表明禽霍乱、大肠杆菌病蜂胶二联灭活疫苗生产工艺已相当成熟,完全适合工厂化大规模生产。     

肉鸡大肠杆菌多价灭活蜂胶苗的研制

从分离鉴定的49株大肠杆菌中筛选出5株致病力强、免疫原性好、具有优势血清型的大肠杆菌作为制苗菌株，经培养灭活后，以蜂胶为佐剂，研制出的肉鸡大肠杆菌多价灭活蜂胶疫苗，使用安全，免疫效果好。用该苗免疫后150d的保护率为100％，无不良反应。该苗4C下保存1年不失效。田间试验结果表明，该苗性能好，免疫后对肉仔鸡、肉种鸡的生产性能无不良影响，鸡群大肠杆菌病的死亡率明显下降。     

大肠杆菌热敏毒素研究概况

本文在分析大肠杆菌热敏毒素（LT）生物学特性及其分子学水平研究的基础上，从蛋白质和基因水平阐述了猪源LT与人源LT的亲缘关系，评述了LT在研制人畜大肠杆菌腹泻疫苗中的应用价值，也通过对与LT具有相似蛋白和基因结构的霍乱毒素CT的分析，表明二者具有相同的进化起源，认为通过定点诱变的LT能够取代CT用作幽门螺杆菌疫苗的粘膜免疫佐剂。     

大肠杆菌油佐剂灭活苗免疫雏鸡抗体消长规律的研究

本试验用鸡源致病性大肠埃希氏菌Ｏ２血清型制成的油佐剂灭活苗对１５日龄雏鸡进行免疫接种，以测定其抗体消长规律；对免疫后不同抗体滴度的雏鸡进行了攻毒试验．结果表明，免疫１周后可监出抗体，２～３周抗体达到高峰，抗体可持续１０周左右．抵抗同型大肠杆菌攻霉的最低抗体滴度为１：１６～１：３．免疫保护期可达２个目以上．     

鸡大肠杆菌多价灭活油乳疫苗的研制与应用

选择从山东不同地区分离的6个具有优势血清型的大肠杆菌菌株，经培养、混合、灭活后，用白油、吐温、司本，按一定比例混合，制备鸡大肠杆菌多价灭活油乳疫苗，安全性检验、效力检验、稳定性试验结果表明，该疫苗安全有效，接种后无不良反应，保护率达95%以上，4-8℃保存1年，20-25℃保存半年不失效。田间免疫试验和扩大区域试验结果表明，该疫苗性能良好、安全，对蛋鸡、肉鸡、雏鸡的生产性能无明显不良影响，经免疫后，因大肠杆菌的死亡率由对照组的7.5%、9.8%、4.6%降至2.1%、2.8%、1.8%。     

滨海地区鸡致病性大肠埃希菌的分离鉴定

为了控制滨海地区鸡大肠埃希菌病的发生,对大肠埃希菌污染严重的部分鸡场进行了病原分离培养、血清型鉴定以及田间试验.结果表明,14株分离菌中有11株属于大肠埃希菌;分离株血清型主要有O78、O24、O93和O11 4种;免疫保护试验使大肠埃希菌病死率降低了6％.     

鸭源巴氏杆菌-大肠埃希菌二联多价蜂胶灭活疫苗的制备与免疫效果试验

本研究选取鸭致病性大肠埃希菌（E．coli）常见血清型O1、O2、O18、O78和3株分离自发病鸭场、毒力强、免疫原性好的巴氏杆菌（Pasteurella multocida,P砌）D22、D23、D157作为制苗菌株,分别以鲜血琼脂和马丁琼脂进行固体表面培养制备的抗原与蜂胶佐剂高速乳化,制备鸭多杀性巴氏杆菌-大肠埃希菌二联多价蜂胶灭活疫苗。结果表明,疫苗安全可靠,雏鸭一免后第14天对同源E．coli、Pm攻击免疫保护率为100％和90％;雏鸭二次免疫后第14天的免疫保护率均为100％。用间接ELISA对免疫鸭进行抗体消长规律检测,7日龄商品麻鸭首免后20d抗体达到高峰,抗体维持时间在54d以上;首免7d后进行二免,可产生显著高于一免的抗体水平。疫苗免疫雏鸭能够显著（P〈0．05）或极显著（P〈0．01）地增强T细胞的免疫力,可维持3周左右。疫苗在4℃可保存12个月以上。     

Vaccination experiments on pregnant mice with E. coli vaccines prepared from septicaemic and enteropathogenic strains of E. coli

Experiments have been carried out with vaccination of pregnant mice against E. coli, followed by i.p. challenge of the offspring at one week of age.With a septicaemic strain the results were highly significant, and the method is therefore recommendable for testing of vaccines against such strains of E. coli.Results were less clear-cut with enteropathogenic strains of E. coli. However, with mortality rates of 40 to 45 % in baby mice born by non-vaccinated mothers and less than 15 % in baby mice born by vaccinated mothers, the difference in percentage mortality seems sufficient to warrant the use of the method also in the control of vaccines against enteropathogenic E. coli strains.     

河南省鸡源致病性大肠杆菌的分离鉴定

从河南省32个县市的典型大肠杆菌病病变的病、死鸡中,分离到致病性大肠杆菌93株,分别对各菌株进行致病性试验、生化鉴定和血清型鉴定。结果表明:本省致病性大肠杆菌的优势血清型为O78、O1、O2,分别占定型菌株的35.14%、18.92%、13.51%,菌株生化鉴定的结果与其致病力强弱和血清型无一定的相关性。     

鸡致病性大肠杆菌的分离鉴定

从来源于江苏省仪征、盐城、东台及海安等地病鸡的７６株大肠杆菌分离株中，选出１０株代表株，对其生化特性及血清型等进行详细研究。结果表明，上述地区分离株的血清型主要为Ｏ７８、Ｏ８、Ｏ３５、Ｏ１，不同血清型细菌之间及同一血清型不同株之间在生化特性上均存在差异。野毒株之间的药物敏感性差异很大，相同血清型的野毒株和标准株对比，药敏差异也很大。