实验性免疫应激雏鸡免疫器官抗体生成细胞的动态变化研究

本试验用新城疫I系苗肌肉注射 2周龄健康雏鸡 ,剂量是 2头份 /只 ,复制免疫应激模型。通过对免疫应激后第 1、 3、 5、 1 0、 1 5、 2 0d的法氏囊、胸腺、脾脏和盲肠扁桃体各器官组织病理学、活性B淋巴细胞和IgG、IgM抗体生成细胞的动态变化研究 ,结果发现 :(a)与对照组相比 ,各器官中浆细胞、巨噬细胞 (MΦ)、淋巴细胞数量增多 ,而且脾脏、盲肠扁桃体中的淋巴小结数增多。 (b)各免疫器官中活性B淋巴细胞在第 5天开始显著增多 ,并且在第 1 0天达到高峰 (P <0 0 1 )。 (c)各免疫器官中IgG抗体生成细胞在应激第 1 5天达到高峰 ,呈持续增长趋势 ;IgM抗体生成细胞法氏囊在第 5天 ,脾脏和盲肠、扁桃体在第 1 0天达到高峰 ,以后缓慢下降 ,且仍显著高于对照组(P <0 0 1 )。这表明在本试验的免疫应激条件下体液免疫功能未被抑制。     

益生菌与ND疫苗协同对雏鸡局部黏膜组织抗体生成细胞数量的影响

为探明益生菌能否增强新城疫(newcastle disease,ND)疫苗局部黏膜组织的免疫效果,雏鸡分别于ND疫苗免疫后第0,7,14,21天及新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)攻击7d后或死亡前,采用免疫组织化学方法测定盲肠扁桃体、哈德氏腺和十二指肠派伊尔结的IgA,IgM,IgG抗体生成细胞数量的动态变化.结果发现:益生菌协同ND疫苗组雏鸡局部黏膜的IgA,IgM,IgG抗体生成细胞数量分别在免疫后7d明显高于ND疫苗单独免疫雏鸡(P<0.05);NDV攻击后,益生菌ND疫苗免疫雏鸡的局部黏膜组织抗体生成细胞数量无统计学差异(P>0.05),表明益生菌是疫苗的理想佐剂之一.     

黄连解毒汤对雏鸡免疫功能及免疫器官的影响

研究了黄连解毒汤对人工感染传染性法氏囊病毒雏鸡的免疫器官和免疫功能的影响。将21日龄的艾维茵雏鸡180只随机分成5组,前4组用传染性法氏囊病毒(IBDV)进行攻毒,攻毒后用黄连解毒汤分别以1.5、1.0、0.5mL/只的用量进行饮水治疗,连续7d,攻毒对照组和空白对照组不作处理。结果表明:法氏囊病毒主要侵害免疫器官胸腺、法氏囊和脾脏,其损伤主要体现为感染后7d时胸腺、法氏囊萎缩,脾脏肿大,与感染对照组相比,给药组患病鸡的胸腺、法氏囊、脾脏等器官的损伤程度显著降低,并且黄连解毒汤治疗Ⅰ组(1.5mL/只)外周血ANAE+T细胞数显著升高,抑制了雏鸡免疫功能的降低和红细胞免疫黏附功能的下降,表明黄连解毒汤对受法氏囊病毒感染的雏鸡的免疫器官和免疫功能具有较好的保护作用。     

黄芪多糖调节免疫应激雏鸡免疫功能研究

采用NDⅠ系疫苗大剂量肌肉注射雏鸡的方法建立实验性免疫应激模型,探讨应激状态下雏鸡免疫功能变化及黄芪多糖（APS）对免疫应激雏鸡的免疫功能的影响。将120只2周龄健康雏鸡随机分成正常对照组（C）、试验组（T1、T2）。分别胸肌注射0.5ml/只：生理盐水,10头份新城疫（ND）Ⅰ疫苗;10头份NDⅠ疫苗＋5mgAPS。于应激后1,3,5,10,15,21d采用血凝抑制试验（HI）β-微量法检测ND抗体消长变化,以及用免疫组化法检测雏鸡免疫器官中CD4＋、CD8＋T淋巴细胞数目。结果显示：免疫应激后雏鸡免疫功能明显紊乱,体液免疫和细胞免疫均受到抑制,而黄芪多糖体内应用可有效恢复其免疫功能。     

龙胆多糖对雏鸡免疫功能的影响

为研究龙胆多糖对禽类免疫机能的影响,将120只艾维菌肉鸡随机分成4个组,采用口服龙胆多糖的方法,在免疫的7、14、28、42天取胸腺和脾脏,计算脏器指数和制作组织切片.结果表明,50 mg/kg和100mg/kg龙胆多糖剂量组均能够不同程度的增强禽类的胸腺指数和脾脏指数,促进免疫器官的发育,研究证实龙胆多糖对禽类的免疫功能有一定的促进作用.     

免疫增强剂对蛋用雏鸡免疫功能的影响

用维生素Ｅ－硒（ＶＥ－Ｓｅ）注射液、中草药１号、硫酸锌、牲血素、胸腺肽和左旋咪唑作免疫增强剂，采用β－微量鸡新城疫血凝抑制试验（ＮＤ－ＨＩ）、醋酸纤维薄膜电泳（测血清丙球蛋白γ－Ｉｇ）以及α－蔡酯酶法（ＡＮＡＥ），检测了参试雏鸡的３种免疫学指标。结果表明：ＶＥ－Ｓｃ注射液对蛋用雏鸡的ＮＤ－ＨＩ抗体、γ－Ｉｇ和ＡＮＡＥ＾＋淋巴细胞均比对照组明显提高，差异极显著（Ｐ＜０．０１）。中草药１号具有与ＶＥ－     

冷应激对家鸡雏鸡和贵妃雏鸡消化器官影响的观察

本实验采用10日龄家鸡雏鸡和贵妃雏鸡进行急性冷应激（12h、24h）、慢性冷应激（3d,7d）实验（比常温低10℃）,宰杀后比较两种雏鸡消化器官的变化。结果表明：急性冷应激期间,两种雏鸡消化器官都有不同程度的充血、出血及溃疡现象．冷应激3天到7天后,家鸡雏鸡消化器官出血、溃疡现象仍比较严重,而贵妃雏鸡消化器官充血、出血以及溃疡现象基本消失。结果提示贵妃雏鸡比家鸡雏鸡抗冷应激能力强。     

微生态制剂对雏鸡免疫功能的影响

将10 0只蛋公雏随机分为试验组和对照组,试验组用0 .2 5 %的微生态制剂拌料饲喂,对照组不加微生态制剂正常饲喂。结果表明:微生态制剂能提高法氏囊指数和IgA抗体浓度,具有增强机体免疫功能的作用。     

(冷应激对伊褐红公雏鸡外周血淋巴细胞数目变化的影响

本实验采用80只5日龄雄性伊褐红雏鸡进行急性(24 h以内)、慢性冷应激(3 d ,10 d)实验(比常温低8 ℃),通过脂酶染色法观察外周血T淋巴细胞数目的变化和甲苯胺蓝改良染色法观察法氏囊中肥大细胞数目的变化。结果表明:急性冷应激期间,T细胞数目明显减少(P<0.01),在应激12 h后,细胞数量最低(0.30±0.04 个/视野),应激24 h后,淋巴细胞又有所升高,但还是明显低于对照组。 淋巴细胞总数明显升高(P<0.01),在应激24 h后数值最高(1.29±0.08个/视野);冷应激3 d后,T细胞减少不明显,淋巴细胞总数明显增加。冷应激10 d后淋巴细胞数目极显著减少(1.12±0.12个/视野对1.65±0.09个/视野,P<0.001)、T淋巴细胞数目也极显著增加(0.65±0.08个/视野对0.44±0.02个/视野,P<0.001)。结果提示较正常饲养温度低8 ℃冷应激使雏鸡细胞免疫水平增加。     

虫草菌粉对雏鸡免疫功能的影响

为探讨虫草菌粉对雏鸡免疫功能的影响,以240羽健康余干乌鸡作为研究对象,鸡新城疫苗常规免疫,在饲粮中添加不同剂量虫草菌粉,同时设空白对照组。各组在饲喂虫草菌粉第10、20、30天时随机选择20羽,先采血检测免疫细胞活性、新城疫(NDV)抗体滴度;再处死称取法氏囊与脾脏的质量。通过研究法氏囊与脾脏质量变化、E-玫瑰花环率、淋巴细胞转化率、新城疫抗体滴度等指标来了解虫草菌粉对雏鸡免疫功能的影响。结果表明:虫草菌粉能够加快雏鸡免疫器官的发育,提高T淋巴细胞活性;在饲喂虫草菌粉20 d时中剂量组比对照组抗体水平提高1∶22.1,高剂量组比对照组提高1∶22.53,使特异性抗体提前达到高水平。说明虫草菌粉能够增强雏鸡免疫功能。     

急、慢性冷应激对雏鸡腓肠肌及血清抗氧化功能的影响

【目的】探讨自由基在冷应激对禽类机体损伤中所起的作用,为探索促进动物冷适应的方法,提高动物的抗寒能力提供一定的理论依据;【方法】应用化学比色法检测了急、慢性冷应激对腓肠肌和血清中总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量的影响;【结果】急性应激时,随应激时间的延长,腓肠肌T-AOC与SOD活性均逐渐降低,GSH-Px活性、CAT活性及MDA含量均逐渐升高,血清T-AOC逐渐降低,GSH-Px活性、CAT活性、SOD活性及MDA含量均逐渐升高;慢性应激时,随应激时间的延长,腓肠肌T-AOC、GSH-Px活性、CAT活性及SOD活性均逐渐升高,MDA含量逐渐降低,血清T-AOC、GSH-Px活性、CAT活性及MDA含量均逐渐升高,SOD活性逐渐降低;【结论】表明急、慢性冷应激均可使机体的抗氧化功能发生改变,诱发氧化胁迫,导致机体内自由基增多,对机体造成损伤。     

免疫应激对不同品种仔猪免疫功能的影响

[目的]探讨免疫应激对莱芜猪、鲁莱猪及大约克夏断奶仔猪免疫功能的影响。[方法]分别选用12头体重为（13．6±0．5）kg的莱芜猪、鲁莱猪和大约克夏猪,采用2x3因子设计：免疫应激（注射LPS或生理盐水）,品种类型（莱芜猪、鲁莱猪和大约克夏猪）。试验第1天,分别给每品种中的6头猪注射200μg／kg·BW的LPS,其余6头注射生理盐水作为对照,并进行猪瘟疫苗接种。注射LPS后的第2、7和14天,采血测定其淋巴细胞转化率;注射LPS前1天、注射LPS后第7天和第14天,测定其猪瘟抗体水平。【结果]猪在LPS刺激后的第2天．其淋巴细胞转化率显著高于生理盐水组（P〈0．01）,莱芜猪的淋巴细胞转化率显著高于大约克夏猪（P〈0．05）;免疫应激对不同品种仔猪的猪瘟抗体水平无差异性影响。[结论】LPS能够有效刺激不同品种猪的细胞免疫机能,并且不同品种仔猪免疫应签能力有差异,     

实验性鸡奇异变形杆菌病免疫活性细胞的变化

用从自然感染奇异变形杆菌病濒死雏鸡脑组织中分离出的奇异异变形杆菌８９０４０１菌株，对２０只健康雏鸡进行了接种感染，对比观察了外周备注和免疫器官的免疫活性细胞的变化。结果表明：实验性鸡奇异变形杆菌病，免疫器官中各类免疫活性细胞数和对照组比较均呈现不同程度的减少，其中胸腺以皮质区ＡＮＡＥ＋Ｔ淋巴细胞和髓质区ＡＮＡＥ＋巨噬细胞数、成熟型浆细胞数的减少量为明显；法氏囊以髓质中ＰＭＧ＋浆细胞总数的减少，特别     

鸡血清IgG纯化方法研究

[目的]为了获得高纯度鸡免疫球蛋白(Ig),并保持其生物学活性。[方法]比较几种纯化鸡血清免疫球蛋白(IgG)的方法。用饱和硫酸铵(NH4)2SO4沉淀法或乙醇沉淀法提取鸡血清IgG,经透析除盐,将初提物过sephadexG-200柱进一步分离IgG,经免疫电泳和SDS-PAGE电泳进行纯度鉴定。[结果]结果表明:在该试验条件下,(NH4)2SO4盐析和乙醇沉淀法获得的鸡IgG经sephadexG200柱分离获得高纯度的鸡IgG。[结论]该研究为找到较好的纯化鸡血清IgG方法提供了试验依据。     

马尾藻多糖对鸡脾脏淋巴细胞增殖及氧化应激影响的实验观察

马尾藻具有很高的食用和药用价值,分离提取马尾藻多糖(Sargassum polysaccharides,SP),对其理化性质进行分析;研究马尾藻多糖对氧化应激态鸡脾脏淋巴细胞内谷胱甘肽(GSH)和一氧化氮(NO)分泌水平及淋巴细胞体外增殖的影响.结果表明:马尾藻多糖提取率为152.8 g/L;马尾藻多糖浓度为100、200、400 mg/L时,能显著促进体外培养的鸡脾脏淋巴细胞增殖;H2O2浓度为50 μmol/L时,能诱导体外培养的鸡脾脏淋巴细胞处于氧化应激状态.马尾藻多糖浓度为400 mg/L,与细胞共孵育4h或12h,能显著增加氧化应激态细胞内GSH含量;共孵育培养8h,能显著降低氧化应激态细胞的NO水平.马尾藻多糖能促进鸡脾脏淋巴细胞增殖,并通过调节细胞内GSH和NO水平,提高免疫细胞的抗氧化能力,发挥免疫调节作用.     

热应激对鸡脾脏和法氏囊细胞凋亡的影响及其调节

 18只 AA肉鸡于22℃饲养。30日龄时，随机分成3组，分别进行0 、5和10h的41℃高温应激处理。用流式细胞仪检测应激后不同时间脾脏和法氏囊细胞 DNA含量、细胞凋亡率以及Caspase-3和Bcl-2的表达。结果表明，应激处理0、5和10 h时，脾脏DNA合成期（S期）细胞比例分别是4.67%、5.11%、4.78%，法氏囊S期细胞分别是30.52%、24.71%、24.04%；脾脏和法氏囊细胞凋亡率分别是0.22%、0.42%、0.32%和0.32%、0.62%、0.41%；脾脏和法氏囊 caspase-3表达阳性细胞率分别为5.49%、10.36%、9.80%和8.60%、10.51%、9.41%； Bcl-2表达阳性细胞率脾脏分别是31.32%、24.01%和29.26%，法氏囊则是30.24%、27.10%、31.54%；脾脏细胞凋亡率，应激后5 h 与 0 和10 h有显著差异（P＜0.05）；在高温应激过程中，脾脏和法氏囊的细胞凋亡率与Caspase-3表达阳性细胞率呈方向一致的变化关系，均是从0 h到5 h逐渐升高，以后又逐渐下降；而与Bcl-2表达阳性细胞率呈反向变化关系。据此说明高温应激能明显影响脾脏和法氏囊细胞凋亡，而这种细胞凋亡的变化受Caspase-3和Bcl-2表达的调节。     

断奶应激对仔猪免疫功能的影响

将24头21日龄仔猪分为对照组和试验组,对照组14头(28日龄不断奶),分别于21、27、30、33、36、42、49日龄屠宰,每次宰杀2头,公母各1;试验组10头(28日龄开始断奶),分别于30、33、36、42、49日龄屠宰,每次宰杀2头,公母各1.结果表明:试验组与对照组相比,①仔猪在断奶后第2、5、8天,外周血淋巴细胞百分数分别下降4.6%(P＞0.05)、27.0%(P＜0.05)和22.0%(P＜0.05);中性粒细胞百分数则分别上升10.3%(P＞0.05)、50.0%(P＜0.05)和28.9%(P＞0.05);N/L值分别升高23.4%(P＞0.05)、85.7%(P＜0.01)和58.1%(P＜0.05).②仔猪断奶后第2、5天,血清γ-球蛋白含量分别下降7.9%(P＞0.05)、4.8%(P＞0.05);在断奶后第8、14、21天分别增加2.9%(P＞0.05)、27.2%(P＜0.01)和18.2%(P＜0.05).③在免疫后第7天,仔猪血清SRBC抗体效价低1.61个滴度(P＜0.05);免疫后第14天,低0.5个滴度.④在断奶后第2、5、8、14、21天仔猪胸腺相对重量(脏器重/体重)分别下降54.6%(P＜0.05)、47.6%(P＜0.01)、48.3%(P＜0.05)、39.8%(P＞0.05)和38.8%(P＞0.05);脾脏相对重量分别下降20.4%(P＞0.05)、34.1%(P＜0.05)、34.4%(P＜0.05)、42.3%(P＜0.05)和32.1%(P＞0.05);肾上腺相对重量在断奶后第2、5、8天分别升高41.0%(P＜0.01)、28.2%(P＜0.05)和13.2%(P＞0.05).⑤组织学观察表明,试验组仔猪肾上腺皮质部肥大,整个皮质区有大量被染成空泡的脂肪微粒;同时大量红细胞散布于皮质区的束状带.     

清凉冲剂对蛋用雏鸡免疫功能的影响

本试验选择1日龄体重(55.5±5.2)g农大三号雏鸡60只,随机分为2组。试验从第7日龄起,至49日龄时止,周期共计42 d。其中试验组饲喂中药(浓度为1 000 mg/L),添加比例为1∶1 000;对照组不喂药,常规饲养。第7,21,35,49日龄时,两组分别取5只仔鸡,心脏采血,用血凝抑制法(HI)测定各组血清NDV抗体水平;采用腹腔巨噬细胞功能测定法,计算其吞噬百分率和吞噬指数。随后剖杀取胸腺、法氏囊、脾脏等免疫器官,称量并计算免疫器官指数;试验结果显示:与对照组相比,免疫器官指数、NDV抗体水平以及腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数试验组均明显高于对照组(P<0.05或P<0.01)。说明清凉冲剂可以有效增强鸡的免疫功能。     

鸡堆型艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库的免疫学筛选

[目的]寻找鸡球虫保护性抗原基因,为研究基因功能和研制抗鸡球虫疫苗奠定基础.[方法]将纯化的堆型艾美耳球虫孢子化卵囊于兔皮内多点注射,制备堆型艾美耳球虫抗血清,用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）检测其效价,进行免疫学筛选.利用PCR对获得的阳性克隆进行初步鉴定.[结果]间接酶联免疫吸附试验结果表明堆型艾美耳球虫抗血清检测结果呈阳性,初步筛选到的疑似阳性斑经3次复筛后获得6个阳性克隆,1～3号克隆约为1 000bp,4～6号克隆约为1 500 bp.[结论]对堆型艾美耳球虫孢子化卵囊cD-NA文库获得的阳性克隆成功进行了免疫学筛选.     

鹿茸口服液对小鼠免疫功能的影响

研究鹿茸口服液(Pilose Antler Oral Liquid,PAOL)对小鼠免疫功能的影响。用环磷酰胺复制免疫抑制小鼠模型,100只昆明种小白鼠随机分成10组,分别为生理盐水对照组、免疫抑制对照组、免疫抑制小鼠4个灌胃剂量组(0.4 mL/d、0.2 mL/d、0.1 mL/d、0.05 mL/d)以及正常小鼠4个灌胃剂量组(0.4 mL/d、0.2mL/d、0.1 mL/d、0.05 mL/d);测定脾脏重量和腹腔巨噬细胞吞噬功能,比色法测定血清溶血素(HC50),MTT法检测植物血凝素(PHA)和脂多糖(LPS)分别诱导的脾脏T、B淋巴细胞转化功能。结果表明,鹿茸口服液0.05 mL可显著增加正常小鼠溶血素水平,其溶血素值达256.067(P<0.01),其中鹿茸口服液0.4 mL、0.2 mL、0.1 mL三个剂量组能够显著提高免疫抑制小鼠溶血素抗体水平(P<0.01);鹿茸口服液0.4 mL、0.1 mL、0.05 mL三个剂量组对正常小鼠T淋巴细胞转化都有较强的促进作用(P<0.01),鹿茸口服液0.1mL剂量组能够显著提高免疫抑制小鼠T淋巴细胞转化功能(P<0.01),0.4 mL剂量鹿茸口服液在促进免疫抑制小鼠B淋巴细胞转化上也体现出明显的效果(P<0.05);其次灌服鹿茸口服液能够增加正常小鼠脾指数,但腹腔巨噬细胞对中性红的吞噬能力相对于对照组没有提高。试验证实,鹿茸口服液能够提高正常小鼠和免疫抑制小鼠机体的免疫功能。