鸡传染性囊病二价活疫苗攻击保护效果的观察

使用ＳＰＦ雏鸡进行了鸡传染性囊病二价活疫苗攻击保护效果的观察。１４日龄免疫２０００ＴＣＩＤ５０剂量的二阶苗或ＢＪ８３６苗价苗。免疫后１４ｄ（２８日龄）分别用不同剂量（１：１,１：１０,１：１００）的标准Ｉ型强毒株ＣＪ８０１株或标准变异株强毒１０８４Ａ株进行攻击,攻击后５ｄ剖杀观察。二价革免疫组能抵抗极高剂量（１：１）的ＣＪ８０１株及高剂量（１：１０）的１０８４Ａ株的攻击,但不能抵抗极高剂量（１：１     

传染性囊病变异株病毒BK912的培育及鉴定

用由国外引进的ＩＢＤ变异株鸡胚适应毒经ＣＥＦ传代适应后所获得的ＢＫ９１２Ｆ。毒液进行了病毒理化特性试验和形态学观察,并与标准Ｉ型毒ＣＪ８０１ＢＫＦ株进行了抗原相关性检测。实验证明,ＢＫ９１具有ＩＢＤＶ的基本特性且与标准１型毒ＣＪ８０１ＢＫＦ株处于不同血清亚型,以２０００ＴＣＩＤ５０／０．２ｍｌ的ＢＫ９１２冻干活疫苗免疫ＳＰＦ鸡后能完全抵抗美国标准弯异株强毒１０８４Ａ的攻击,一系列试验有ＢＫ９１２仍     

鸡传染性法氏囊病超强毒901株的分离和鉴定

从暴发鸡传染性法氏囊病死亡率６３．５１％的病死鸡中，分离出一株ＩＢＤ病毒９０１株，经检测，９０１株是一株ＩＢＤＶ超强毒株，可使３１日龄健康雏鸡７１．４％死亡，１０日龄ＳＰＦ鸡胚和３０日龄ＳＰＦ雏鸡１００％死亡。死亡鸡再现了自然暴发ＩＢＤ的典型病变。     

新城疫-传染性支气管炎-减蛋综合症三联油乳剂苗的研制

以ＮＤ Ｌa Sota株,呼吸道型,ＩＢ（ＲＩＢ）Ｈ１２０株或肾型ＩＢ（ＫＩＢ）ＳＮ９３０１株和ＥＤＳ ＸＮ９２０３株制苗毒株,分别经鸡胚和鸭胚增殖后甲醛灭活。灭活毒液依毒价按比例混合加入油佐剂中,乳化剂成“ＮＤ－ＲＩＢ－ＥＤＳ”和ＮＤ－ＫＩＢ－ＥＤＳ两种三联油乳剂苗。测试结果表明：三联疫苗安全性好,无毒副作用;乳化度、稳定性和通针性良好;免疫效果即,用三联苗免疫２０日龄鸡,免疫后１４、２８、５８d、ＮＤ、ＲＩＢ、ＫＩＢ、ＥＤＳ的ＨＩ抗体均可达７．０和９．２log2以上,于免疫后６０d用相应强毒攻击,８３．３％－１００％的鸡获有效保护。疫苗保护期长,常温避光１８０d和4℃左右３６０d,免疫效果与新制苗无明显差异。     

用平反式超滤机浓缩鸡新城疫病毒及法氏囊病毒试验效果观察

采用ＵＦ－１型工业平板式超滤机对鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）及法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）进行了初步的浓缩试验。该调和浓缩工艺简单、效率高，浓缩液ＨＡ液价与未浓缩液比较按浓缩比率相应上升。用浓缩液与未浓缩液制成灭活疫苗免疫鸡，均可获得１００％抵抗ＮＤ及ＩＢＤ的保护力，以浓缩苗免疫的ＤＮ ＨＩ抗体及ＩＢＤ中和抗体滴度明显高于未浓缩苗。试验表明，浓缩苗安全有效，并优于未浓缩苗。     

用平板式超滤机浓缩鸡新城疫病毒及法氏囊病毒试验效果观察

采用ＵＦ１型工业平板式超滤机对鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）及法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）进行了初步的浓缩试验。该设备浓缩工艺简单、效率高,浓缩液ＨＡ效价与未浓缩液比较按浓缩比率相应上升。用浓缩液与未浓缩液制成灭活疫苗免疫鸡,均可获得１００％抵抗ＮＤ及ＩＢＤ的保护力,以浓缩苗免疫的ＮＤＨＩ抗体及ＩＢＤ中和抗体滴度明显高于未浓缩苗。试验表明,浓缩苗安全有效,并优于未浓缩苗。     

感染ADV艾虎的几项血液生化指标测定

应用水貂阿留申病毒辽金ＡＤＶ８１－０２株系对对流免疫电泳阴性、临床表现健康的艾滤进行了感染实验。结果艾虎在接种ＡＤＶ后的第７ｄ开始出现血清ＣＩＥＰ沉淀抗体，第１５ｄＣＩＰ阳必率达到１００％。ＡＤＶ抗体到少可在艾虎体内保持３８２ｄ。     

鸡传染性鼻炎二价油乳剂灭活疫苗的近期免疫效力检验

应用３批鸡传染性鼻炎价油乳剂灭活疫苗进行了安全性和近期免疫效力检验,安全性试验采用１５只鸡进行,胸肌注射疫苗４￣５ｍＬ／只后,逐日观察,结果鸡只食欲、精神未见异常,２周后观察,注射部位未发现明显异常和病变。用该疫苗免疫（０．５ｍＬ／ｋｗ ）后的鸡只对Ａ型高致病力菌株的攻击保护率可达１００％,对Ｃ型高致病力菌株的攻击保护率为９３．３％。采用Ｂ－ＥＬＩＳＡ和ＳＰＺＡ对鸡群的抗体水平的评估表明该疫苗可激发产生较高的抗体水平。     

转Bt基因棉Bt毒蛋白的ELISA检测方法的研究(英文)

利用纯化的Ｂｔ毒素蛋白（６７ｋＤａ）作为标准蛋白和免疫抗原,建立了检测转基因抗虫棉植株内Ｂｔ毒蛋白含量的抗体夹心ＥＬＩＳＡ方法。检测极限１μｇ·Ｌ－ １,线性范围１－ １５μｇ·Ｌ－ １,板内误差Ｃ．Ｖ．＜ ５％ ,板间误差Ｃ．Ｖ．＜ ５％ ,平均样品回收率９４．９４％ 。经稀释度试验等质量控制试验,表明所建立的ＥＬＩＳＡ方法是可靠的,可用于转基因棉花植株中Ｂｔ毒素蛋白含量的测定。     

鸡肾型传支弱毒冻干苗的研制及应用

选择鸡肾型传支病毒国际标标准株Ｔ株和ＭＡ５株，研制成功鸡肾型传支弱毒冻干苗。据细菌学检验、安全性、免疫抗体水平的测定、攻毒保护率、保存期和区域扩大试验。证明该苗安全，可靠、免疫效果良好。     

3种免疫植物多糖对法氏囊活疫苗的免疫效果的影响

将60只1日龄北京白鸡,饲养至14日龄,随机分组进行传染性法氏囊中等毒力疫苗的免疫,各组分别添加黄芪、岩藻和油菜3种植物提取的多糖成分,添加剂量为10 mg/只。26日龄进行二免,首免及二免都采用滴鼻点眼方式进行。二免后定期采血检测法氏囊中和抗体效价和外周血淋巴细胞体外转化率。结果表明:二免后2周,除了油菜多糖以外,其他2种多糖添加组的中和抗体滴度与对照组相比无显著差异;各组的淋巴细胞体外转化率显著高于对照组,表明3种植物多糖成分能促进淋巴细胞增殖,有待于进一步开发为传染性法氏囊病的免疫增强剂。     

肉种鸡免疫两不同ND-IB-IBD-Reo四联灭活疫苗后的抗体水平比较

为了检测肉种鸡开产前免疫两不同的鸡新城疫-传染性支气管炎-传染性法氏囊病-病毒性关节炎四联灭活疫苗（ND-IB-IBD-Reo四联苗）后的抗体水平差异,在鸡群20周龄分别用A、B疫苗免疫,免疫后28 d和56 d 用HI检测ND抗体水平和ELISA检测IB、IBD和Reo的抗体水平。结果显示,免疫后28 d和56 d,B疫苗的IBD和REO抗体效价效价显著高于A疫苗（P﹤0.05）,ND和IB的抗体效价虽较A疫苗高但差异不显著（P﹥0.05）。结果表明,B疫苗的免疫抗体水平优于A疫苗,该研究为肉种鸡ND-IB-IBD-Reo四联灭活疫苗的筛选和合理免疫程序的制定提供依据。     

IB(M41株)种毒代次和免疫原性的关系

评估不同代次IBV M41株种毒是否可以作为生产用种子。将M41株种毒用SPF胚连传8代,从中选出第3、第5、第7代,测定其EID50。并用此3代M41株鸡胚尿囊液制毒的油乳苗免疫易感鸡,以HI试验检测其抗体水平。3种疫苗免疫鸡均保护9/10以上,对照鸡全发病;对免疫后与免疫前HI抗体水平的比较表明,免疫后抗体平均滴度提高3倍以上。不同代次的M41毒株的免疫原性仍然保持良好,可以正常用来制造疫苗和建立种子批。     

三种鸭源细小病毒的抗原相关性研究

为了明确番鸭细小病毒(MPV F株)、番鸭源鹅细小病毒(MD-GPV PT株)和鸭短喙型鹅细小病毒(SBDS-GPV M15株)的抗原相关性,本研究应用微量中和试验(NT)和胶乳凝集抑制试验(LPAI)测定了三种病毒分别与同源和异源血清的中和抗体和LPAI抗体效价,分析三者之间的抗原相关性。结果显示：3种病毒与同源抗血清的中和效价和LPAI效价均明显高于异源血清;MPV与MD-GPV和SBDS-GPV之间的中和抗体效价R值分别为0.01和0.02,LPAI抗体效价R值分别为0.03和0.04;MD-GPV和SBDS-GPV的中和抗体和LPAI抗体效价R值均为0.35。表明MPV与GPV（包括MD-GPV和SBDS-GPV）之间的抗原相关性较低;MD-GPV与SBDS-GPV抗原相关性较高,为同一血清型的不同亚型。研究结果为有效防控不同鸭源细小病毒感染提供了理论依据。     

鸡传染性法氏囊病病毒J1C7株全基因组的克隆与分子系统进化树分析

为了获得鸡传染性法氏囊病病毒J1C7株的全基因组cDNA,确定其分子进化关系。以IBDV J1C7株细胞培养液为材料,用蛋白酶K消化、酚/氯仿抽提法提取IBDV基因组dsRNA,利用特异性引物将基因组A、B节段分两段进行RT-PCR并通过融合PCR方法将具有部分重叠序列的A、B节段的上、下游基因组进行拼接,从而构建出完整的A、B节段基因组,利用pMD-18T载体快速克隆PCR产物。结果表明：获得了3260 bp的A节段全长（Genbank登录号EF646854）和2827 bp的B节段全长（Genbank登录号EF646853）。氨基酸同源性比对结果表明：J1C7株与弱毒疫苗株CEF94（芬兰）、P2（德国）、JD1（中国）、HZ2（中国）的亲缘关系最近（蛋白同源性为VP5：99.3%;VP2：99.3%~100%;VP4：97.9%~99.2%;VP3：96.4%~98.1%;VP1：99.2%~99.9%）。BDV J1C7株属于弱毒疫苗株,且与欧洲和中国的弱毒疫苗株有密切的亲缘关系,在进化树上归为一簇。本研究为构建IBDV的感染性cDNA,了解IBDV基因组的结构与功能打下了基础。     

PRRSV强、弱毒株Nsp9基因对PRRSV复制的影响

为了探索猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)强、弱毒株的Nsp9基因对PRRSV复制的影响,构建含有PRRSV XH-GD强毒株、CH-1R弱毒株Nsp9全长基因的质粒p IRes2-EGFP-Nsp9-XH-GD、p IRes2-EGFP-Nsp9-CH-1R,并将重组质粒分别转染到Marc-145细胞中,以MOI=1的剂量接种PRRSV XH-GD毒株,通过TCID50试验测定病毒的滴度,采用荧光定量PCR和Western Blot方法来测定病毒的N蛋白表达情况。结果表明,转染弱毒株CH-1R Nsp9基因的Marc-145细胞中,PRRSV的N蛋白在mRNA水平、蛋白质水平上的表达量均高于转染强毒株XH-GD组,且病毒的滴度也显著高于转染强毒株XH-GD组。综上,在Marc-145细胞中,弱毒株CH-1R Nsp9基因对PRRSV复制的促进作用优于强毒株XH-GD。